澳洲袋鼠爪花種苗的組培快繁方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種澳洲袋鼠爪花種苗的組培快繁方法，包括以下步驟：1)外植體取材與消毒；2)愈傷組織誘導(dǎo)；3)愈傷組織增殖和分化；4)誘導(dǎo)生根。本發(fā)明的澳洲袋鼠爪花種苗的組培快繁方法以組培快繁為方法對(duì)袋鼠爪花植物進(jìn)行擴(kuò)繁，在較短時(shí)間內(nèi)獲得大量性狀穩(wěn)定統(tǒng)一的優(yōu)質(zhì)種苗，可達(dá)到每年擴(kuò)繁速度為1000-10000倍，組培苗生長(zhǎng)健壯，根系發(fā)達(dá)，移栽成活率高，是一種理想的快繁技術(shù)，可滿足國(guó)內(nèi)袋鼠爪花規(guī)?；N種植的需要。
【專利說明】澳洲袋鼠爪花種苗的組培快繁方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于植物組培育苗【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種澳洲袋鼠爪花種苗的組培快繁方法。
【背景技術(shù)】
[0002]袋鼠爪花(Anigozanthus flavidus),又名袋鼠花,苦苣苔科袋鼠花屬多年生草本植物，是澳大利亞特產(chǎn)的珍貴花卉。因?yàn)橄翊蟮淖ψ佑忠驗(yàn)樯L(zhǎng)在澳大利亞而得名。在西澳洲分布廣泛，生長(zhǎng)于多種土壤與氣候條件下。屬多年生草本植物，共兩個(gè)屬，12個(gè)種，40多個(gè)園藝品種，為澳大利亞第二大出口花卉，被出口到全球的許多地方，同時(shí)在美國(guó)、以色列和日本等國(guó)進(jìn)行種植。袋鼠花因其特有的型態(tài)和花色使它成為澳大利亞最具代表性的庭院植物，既可以制作切花，也可以盆栽觀賞，同時(shí)也是制作干花的優(yōu)良材料。袋鼠爪花多以播種為繁育手段，周期長(zhǎng)效率低，且會(huì)產(chǎn)生性狀分離，不適合大規(guī)模生產(chǎn)的需要。雖然袋鼠爪花盆花觀賞價(jià)值較高，但由于進(jìn)口種子價(jià)格較高，且存在性狀不穩(wěn)定性，國(guó)內(nèi)尚未見有大規(guī)模種植。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供一種澳洲袋鼠爪花種苗的組培快繁方法，克服有性繁殖(播種)植株變異與整齊度差的缺點(diǎn)，實(shí)現(xiàn)快速獲得大量性狀穩(wěn)定的優(yōu)質(zhì)袋鼠爪花種苗。
[0004]本發(fā)明的澳洲袋鼠爪花種苗的組培快繁方法，包括以下步驟:
[0005].1)外植體取材與消毒:于每年3-5月份對(duì)處于生長(zhǎng)季節(jié)的盆栽袋鼠爪花取材，取材前I周用1500倍惡霉靈殺菌，并作控水處理；取材時(shí)，工具用75 %的酒精浸泡消毒I分鐘，剪取母株幼嫩莖段，約2-3cm，剝開外層，加適量的洗衣粉，流水沖洗15分鐘后用吸水紙吸干水分，最后將莖段小心放入消毒燒杯中備用；在超凈工作臺(tái)上，先用75%酒精對(duì)莖段進(jìn)行預(yù)消毒，時(shí)間15-30秒，倒出酒精后用5%次氯酸鈉溶液消毒5-8分鐘，倒出消毒液，無菌水清洗I次，再加入0.1 %升汞溶液，1-2滴表面活性劑，消毒8-10分鐘，無菌水沖洗材料5次以上；消毒過程中要注意輕輕搖勻，以提高消毒效果；
[0006].2)愈傷組織誘導(dǎo):消毒處理完畢，在超凈工作臺(tái)上，將莖段外層剩余葉片剝除，只留頂芽，接種于 1/2MS+BA 1.0-2.0mg/L+NAA0.05-0.lmg/L+ 卡拉膠 7g/L+Ad 1%。+ 蔗糖20g/L，pH = 5.8的培養(yǎng)基上；前7-15天為暗室培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度25°C，后轉(zhuǎn)為見光培養(yǎng)，光照強(qiáng)度20001ux，光周期12h/天，培養(yǎng)溫度光培養(yǎng)時(shí)25-28°C，暗培養(yǎng)時(shí)19_22°C ；
[0007].3)愈傷組織增殖和分化:外植體接種至誘導(dǎo)培養(yǎng)基I個(gè)月后產(chǎn)生愈傷組織,并產(chǎn)生藍(lán)色分泌物，愈傷組織轉(zhuǎn)接至增殖培養(yǎng)基上，能夠?qū)崿F(xiàn)快速增殖，并同時(shí)分化出不定芽；之后每20天左右進(jìn)行一次繼代增殖，增殖系數(shù)> 5.0 ;培養(yǎng)條件為光照強(qiáng)度20001UX，光周期12h/天，培養(yǎng)溫度光培養(yǎng)時(shí)25-28°C，暗培養(yǎng)時(shí)19-22°C ；
[0008].4)誘導(dǎo)生根:切取愈傷組織上l_2cm的不定芽，將其接種到生根培養(yǎng)基上，培養(yǎng)條件為光照強(qiáng)度20001uX，光周期16h/天，培養(yǎng)溫度光培養(yǎng)時(shí)25-28°C，暗培養(yǎng)時(shí)19_22°C ；培養(yǎng)15天后，根系長(zhǎng)至2-3條，根長(zhǎng)0.5-1.0cm之間，可移植日光溫室煉苗I周，光照強(qiáng)度3000-40001ux ;煉苗后，出瓶種植于O-1Omm泥炭和珍珠巖比例為4: I的混合基質(zhì)中，成活率超過90%。
[0009]本發(fā)明的澳洲袋鼠爪花種苗的組培快繁方法，在步驟I)中:所述外植體取材的還通過以下步驟獲取:選取性狀穩(wěn)定(特別是花色)的母株種子，用孔徑較小的紗布包裹種子兩層，加適量的洗衣粉，自來水沖洗30分鐘，75%酒精消毒30秒，然后用0.1%升汞消毒12-15分鐘，最后用無菌水沖洗5次，接種于空白1/2MS培養(yǎng)基中，培養(yǎng)45-60天可獲得無菌實(shí)生苗，發(fā)芽率約30% ;培養(yǎng)條件為光照強(qiáng)度20001uX，光周期12h/天，培養(yǎng)溫度光培養(yǎng)時(shí)25-280C，暗培養(yǎng)時(shí) 19-22°C。
[0010]本發(fā)明的澳洲袋鼠爪花種苗的組培快繁方法，在步驟3)中:所述增殖培養(yǎng)基為1/2MS+BA 0.5-1.0mg/L+NAA 0.05-0.lmg/L+ 卡拉膠 7g/L+Ad 1%。+ 蔗糖 30g/L, pH = 5.8
的培養(yǎng)基。
[0011]本發(fā)明的澳洲袋鼠爪花種苗的組培快繁方法，在步驟4)中:所述生根培養(yǎng)基為1/2MS+NAA0.2-0.5mg/L+Ad 5%。+ 卡拉膠 7g/L+ 蔗糖 20g/L，pH = 5.8 的培養(yǎng)基。
[0012]與現(xiàn)有技術(shù)相比本發(fā)明的有益效果為:本發(fā)明的澳洲袋鼠爪花種苗的組培快繁方法以組培快繁為方法對(duì)袋鼠爪花植物進(jìn)行擴(kuò)繁，在較短時(shí)間內(nèi)獲得大量性狀穩(wěn)定統(tǒng)一的優(yōu)質(zhì)種苗，可達(dá)到每年擴(kuò)繁速度為1000-10000倍，組培苗生長(zhǎng)健壯，根系發(fā)達(dá)，移栽成活率高，是一種理想的快繁技術(shù)，可滿足國(guó)內(nèi)袋鼠爪花規(guī)?；N種植的需要。
【具體實(shí)施方式】
[0013]下面結(jié)合實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明的【具體實(shí)施方式】作進(jìn)一步詳細(xì)描述。以下實(shí)施例用于說明本發(fā)明，但不用來限制本發(fā)明的`范圍。
[0014]實(shí)施例1
[0015]一種本發(fā)明的澳洲袋鼠爪花種苗的組培快繁方法，包括以下步驟:
[0016]I)外植體取材與消毒:于每年3-5月份對(duì)處于生長(zhǎng)季節(jié)的盆栽袋鼠爪花取材，取材前I周用1500倍惡霉靈殺菌，并作控水處理；取材時(shí)，工具用75 %的酒精浸泡消毒I分鐘，剪取母株幼嫩莖段，約2-3cm，剝開外層，加適量的洗衣粉，流水沖洗15分鐘后用吸水紙吸干水分，最后將莖段小心放入消毒燒杯中備用；在超凈工作臺(tái)上，先用75%酒精對(duì)莖段進(jìn)行預(yù)消毒，時(shí)間15-30秒，倒出酒精后用5%次氯酸鈉溶液消毒5-8分鐘，倒出消毒液，無菌水清洗I次，再加入0.1 %升汞溶液，1-2滴表面活性劑，消毒8-10分鐘，無菌水沖洗材料5次以上；消毒過程中要注意輕輕搖勻，以提高消毒效果；
[0017]2)愈傷組織誘導(dǎo):消毒處理完畢，在超凈工作臺(tái)上，將莖段外層剩余葉片剝除，只留頂芽，接種于 1/2MS+BA 1.0-2.0mg/L+NAA0.05-0.lmg/L+ 卡拉膠 7g/L+Ad 1%。+ 蔗糖20g/L，pH = 5.8的培養(yǎng)基上；前7-15天為暗室培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度25°C，后轉(zhuǎn)為見光培養(yǎng)，光照強(qiáng)度20001ux，光周期12h/天，培養(yǎng)溫度光培養(yǎng)時(shí)25-28°C，暗培養(yǎng)時(shí)19_22°C ；
[0018]3)愈傷組織增殖和分化:外植體接種至誘導(dǎo)培養(yǎng)基I個(gè)月后產(chǎn)生愈傷組織,并產(chǎn)生藍(lán)色分泌物，愈傷組織轉(zhuǎn)接至增殖培養(yǎng)基上，能夠?qū)崿F(xiàn)快速增殖，并同時(shí)分化出不定芽；之后每20天左右進(jìn)行一次繼代增殖，增殖系數(shù)> 5.0 ;培養(yǎng)條件為光照強(qiáng)度20001UX，光周期12h/天，培養(yǎng)溫度光培養(yǎng)時(shí)25-28°C，暗培養(yǎng)時(shí)19-22°C ；
[0019]4)誘導(dǎo)生根:切取愈傷組織上l_2cm的不定芽，將其接種到生根培養(yǎng)基上，培養(yǎng)條件為光照強(qiáng)度20001uX，光周期16h/天，培養(yǎng)溫度光培養(yǎng)時(shí)25-28°C，暗培養(yǎng)時(shí)19_22°C ；培養(yǎng)15天后，根系長(zhǎng)至2-3條，根長(zhǎng)0.5-1.0cm之間，可移植日光溫室煉苗I周，光照強(qiáng)度3000-40001ux ;煉苗后，出瓶種植于O-1Omm泥炭和珍珠巖比例為4: I的混合基質(zhì)中，成活率超過90%。
[0020]本發(fā)明的澳洲袋鼠爪花種苗的組培快繁方法，在步驟3)中:所述增殖培養(yǎng)基為1/2MS+BA 0.5-1.0mg/L+NAA 0.05-0.lmg/L+ 卡拉膠 7g/L+Ad 1%。+ 蔗糖 30g/L, pH = 5.8
的培養(yǎng)基。
[0021]本發(fā)明的澳洲袋鼠爪花種苗的組培快繁方法，在步驟4)中:所述生根培養(yǎng)基為1/2MS+NAA0.2-0.5mg/L+Ad 5%。+ 卡拉膠 7g/L+ 蔗糖 20g/L，pH = 5.8 的培養(yǎng)基。
[0022]實(shí)施例2
[0023]與實(shí)施例1不同之處在于:本發(fā)明的澳洲袋鼠爪花種苗的組培快繁方法，所述外植體取材的還可通過以下步驟獲取:選取性狀穩(wěn)定(特別是花色)的母株種子，用孔徑較小的紗布包裹種子兩層，加適量的洗衣粉，自來水沖洗30分鐘，75%酒精消毒30秒，然后用0.1 %升汞消毒12-15分鐘，最后用無菌水沖洗5次，接種于空白1/2MS培養(yǎng)基中，培養(yǎng)45-60天可獲得無菌實(shí)生苗，發(fā)芽率約30%;培養(yǎng)條件為光照強(qiáng)度20001uX，光周期12h/天，培養(yǎng)溫度光培養(yǎng)時(shí)25-28°C，暗培養(yǎng)時(shí)19-22°C。
[0024]本發(fā)明的澳洲袋鼠爪花種苗的組培快繁方法以組培快繁為方法對(duì)袋鼠爪花植物進(jìn)行擴(kuò)繁，在較短時(shí)間內(nèi)獲得大量性狀穩(wěn)定統(tǒng)一的優(yōu)質(zhì)種苗，可達(dá)到每年擴(kuò)繁速度為1000-10000倍，組培苗生長(zhǎng)健壯，根系發(fā)達(dá)，移栽成活率高，是一種理想的快繁技術(shù)，可滿足國(guó)內(nèi)袋鼠爪花規(guī)?；N種植的需要。
[0025]以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式，應(yīng)當(dāng)指出，對(duì)于本【技術(shù)領(lǐng)域】的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明技術(shù)原理的前提下，還可以做出若干改進(jìn)和變型，這些改進(jìn)和變型也應(yīng)視為本發(fā)明的保護(hù)范圍。
【權(quán)利要求】
1.一種澳洲袋鼠爪花種苗的組培快繁方法，其特征在于，包括以下步驟: 1)外植體取材與消毒:于每年3-5月份對(duì)處于生長(zhǎng)季節(jié)的盆栽袋鼠爪花取材，取材前I周用1500倍惡霉靈殺菌，并作控水處理；取材時(shí)，工具用75%的酒精浸泡消毒I分鐘，剪取母株幼嫩莖段，約2-3cm，剝開外層，加適量的洗衣粉，流水沖洗15分鐘后用吸水紙吸干水分，最后將莖段小心放入消毒燒杯中備用；在超凈工作臺(tái)上，先用75%酒精對(duì)莖段進(jìn)行預(yù)消毒，時(shí)間15-30秒，倒出酒精后用5%次氯酸鈉溶液消毒5-8分鐘，倒出消毒液，無菌水清洗I次，再加入0.1 %升汞溶液，1-2滴表面活性劑，消毒8-10分鐘，無菌水沖洗材料5次以上；消毒過程中要注意輕輕搖勻，以提高消毒效果； 2)愈傷組織誘導(dǎo):消毒處理完畢，在超凈工作臺(tái)上，將莖段外層剩余葉片剝除，只留頂芽，接種于 1/2MS+BA 1.0-2.0mg/L+NAA0.05-0.lmg/L+ 卡拉膠 7g/L+Ad 1%。+ 蔗糖 20g/L,pH = 5.8的培養(yǎng)基上；前7-15天為暗室培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度25°C，后轉(zhuǎn)為見光培養(yǎng)，光照強(qiáng)度20001ux，光周期12h/天，培養(yǎng)溫度光培養(yǎng)時(shí)25-28°C，暗培養(yǎng)時(shí)19_22°C ； 3)愈傷組織增殖和分化:外植體接種至誘導(dǎo)培養(yǎng)基I個(gè)月后產(chǎn)生愈傷組織，并產(chǎn)生藍(lán)色分泌物，愈傷組織轉(zhuǎn)接至增殖培養(yǎng)基上，能夠?qū)崿F(xiàn)快速增殖，并同時(shí)分化出不定芽；之后每20天左右進(jìn)行一次繼代增殖，增殖系數(shù)> 5.0 ;培養(yǎng)條件為光照強(qiáng)度20001UX，光周期12h/天，培養(yǎng)溫度光培養(yǎng)時(shí)25-28°C，暗培養(yǎng)時(shí)19-22°C ； 4)誘導(dǎo)生根:切取愈傷組織上l_2cm的不定芽，將其接種到生根培養(yǎng)基上，培養(yǎng)條件為光照強(qiáng)度20001ux，光周期16h/天，培養(yǎng)溫度光培養(yǎng)時(shí)25-28°C，暗培養(yǎng)時(shí)19_22°C ;培養(yǎng)15天后，根系長(zhǎng)至2-3條，根長(zhǎng)0.5-1.0cm之間，可移植日光溫室煉苗I周，光照強(qiáng)度3000-40001ux ;煉苗后，出瓶種植于O-1Omm泥炭和珍珠巖比例為4: I的混合基質(zhì)中，成活率超過90%。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所`述的澳洲袋鼠爪花種苗的組培快繁方法，其特征在于，在步驟I)中:所述外植體取材的還通過以下步驟獲取:選取性狀穩(wěn)定(特別是花色)的母株種子，用孔徑較小的紗布包裹種子兩層，加適量的洗衣粉，自來水沖洗30分鐘，75 %酒精消毒30秒，然后用0.1 %升汞消毒12-15分鐘，最后用無菌水沖洗5次，接種于空白1/2MS培養(yǎng)基中，培養(yǎng)45-60天可獲得無菌實(shí)生苗，發(fā)芽率約30% ;培養(yǎng)條件為光照強(qiáng)度20001uX，光周期12h/天，培養(yǎng)溫度光培養(yǎng)時(shí)25-28°C，暗培養(yǎng)時(shí)19-22°C。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的澳洲袋鼠爪花種苗的組培快繁方法，其特征在于，在步驟3)中:所述增殖培養(yǎng)基為 1/2MS+BA 0.5-1.0mg/L+NAA 0.05-0.lmg/L+ 卡拉膠 7g/L+Ad 1%0 +蔗糖30g/L，pH = 5.8的培養(yǎng)基。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的澳洲袋鼠爪花種苗的組培快繁方法，其特征在于，在步驟4)中:所述生根培養(yǎng)基為1/2MS+NAA0.2-0.5mg/L+Ad 5%。+卡拉膠7g/L+蔗糖20g/L，pH =`5.8的培養(yǎng)基。
【文檔編號(hào)】A01H4/00GK103503772SQ201210212829
【公開日】2014年1月15日 申請(qǐng)日期:2012年6月26日 優(yōu)先權(quán)日:2012年6月26日
【發(fā)明者】周國(guó)權(quán), 陳樟爍, 邱欣敏, 張林杰, 黃鎮(zhèn)茂 申請(qǐng)人:佛山市粵山生物科技有限公司