專利名稱：豬精液的低溫保護劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及低溫環(huán)境下保護動物精液技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及ー種豬精液的低溫(彡4°C)保護劑。
背景技術(shù)：
家畜精液保存技術(shù)是二十世紀隨著人工授精技術(shù)廣泛應(yīng)用而產(chǎn)生的，原理是通過降低或抑制精子新陳代謝程度達到延長精子在體外壽命的目的。為此，研究者試驗將精液放在低溫狀態(tài)(非結(jié)冰，如O 10°C )或冷凍(結(jié)冰)狀態(tài)下保存。精液低溫保存通常是在O 5°C范圍施行，這是在冷凍保存以前常用的方法。據(jù)報道，在脫脂乳中加甘油10% 13%用于稀釋牛精液，在低溫下可保存14天仍具有很高的受精能力；在含有咖啡因6 IOmg的脫離子緩沖溶液中保存牛精子，在6 7°C時，最長能維持生存時間達519小吋。但是，豬精液低溫保存的局限性仍很大，主要是因為豬精液對低溫環(huán)境非常敏感，溫度降到 IO0C以下，就發(fā)生“冷聚”現(xiàn)象，精子成團成片的死亡，且保存時間很短，24以后，精子活力僅能達到O. 2-0. 3，已不適宜配種。而當豬精液冷凍保存技術(shù)(但是冷凍保存需要設(shè)備性能高(始終處于結(jié)冰狀態(tài))，耗能高，需要的成本高)成熟以后，冷藏保溫技術(shù)更已少有人研究了，因此，至今仍沒有成熟穩(wěn)定的在低溫環(huán)境下成功保存豬精液的報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明針對現(xiàn)有技術(shù)的上述不足，提供ー種在低溫環(huán)境下，仍然能夠有效保證豬 精液活率、延長儲存時間的豬精液的低溫保護劑。為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用的技術(shù)方案為ー種豬精液的低溫保護劑，該保護劑組分配比為D-葡萄糖8 12g/L，檸檬酸三鈉8 12g/L，EDTA鈉鹽I. 5 3g/L，碳酸氫鈉I 2g/L，氯化鉀O. 5 lg/L，青霉素鈉O. 2 O. 9g/L，硫酸鏈霉素O. 2 lg/L，聚こ烯醇O. 5 2. 5g/L，三羥甲基氨基甲烷4飛g/L，檸檬酸3 4. 5g/L，半胱氨酸O. 05、· 08g/L,海藻糖O. 5^1. 5g/L，林肯霉素 O. 5 I. 5g/L，こニ醇 O. 5 I. 5g/L。作為優(yōu)選，上述的豬精液的低溫保護劑，該保護劑組分配比為D_葡萄糖^llg/L,檸檬酸三鈉8 11. 5g/L，EDTA鈉鹽I. 5 2g/L，碳酸氫鈉I. 2 I. 5g/L，氯化鉀O. 6 O. 7g/ し青霉素鈉O. 4^0. 7g/L，硫酸鏈霉素O. 2 O. 4g/L，聚こ烯醇I. 5g/L，三羥甲基氨基甲烷4 5g/L,朽1檬酸3 4g/L,半胱氨酸O. 05 O. 06g/L,海藻糖O. 5 O. 8g/L,林肯霉素O. 5 O. 8g/L,こニ醇 O. 5 I. Og/Lo本發(fā)明上述的豬精液的低溫保護劑采用蒸餾水配置，使得其中的各組分滿足上述配方濃度要求。本發(fā)明的優(yōu)點和有益效果I.本發(fā)明采用加入こニ醇作為精液低溫保護劑與其他組分的協(xié)同作用，然后通過精子降溫-冷藏-復(fù)蘇三個重要步驟，觀察保護劑對精子活率的影響。結(jié)果表明在(T4°C下，第7天豬精液的活率仍能達到O. 6以上，具有低溫環(huán)境下存活率高、保持時間長的優(yōu)點。2.本發(fā)明成功實現(xiàn)低溫保存豬精液的目的，低溫下精子代謝活動水平更低，保存時間比常溫下長的多。同時可應(yīng)用普通冰箱保存，生產(chǎn)運輸成本和操作技術(shù)與常溫精液基本相同，對于多數(shù)人工授精站無需增加設(shè)備及專業(yè)人員，則可較大副度地提升優(yōu)良種畜利用度，擴展供精范圍，具有很廣的應(yīng)用前景。
具體實施例方式下面通過實施例，進ー步詳細描述本發(fā)明，但本發(fā)明不僅僅局限于以下實施例。實施例I配置如下配方比例的豬精液保護劑D_葡萄糖llg/L，檸檬酸三鈉12g/L，EDTA鈉鹽2. 4g/L，碳酸氫鈉I. 7g/L，氯化鉀O. 8g/L，青霉素鈉O. 55g/L，硫酸鏈霉素O. 5g/L，聚こ烯醇I. lg/L,三輕甲基氨基甲燒5. 4g/L,朽1檬酸4. Og/L,半胱氨酸O. 06g/L,海藻糖I. Og/L,林 肯霉素I. Og/L,こニ醇O. 9g/L。具體配置方法即稱取上述各組分，溶于蒸餾水中，得到上述濃度的豬精液低溫保護劑。實施例2配置如下配方比例的豬精液保護劑D_葡萄糖10g/L，檸檬酸三鈉10g/L，EDTA鈉鹽I. 6g/L，碳酸氫鈉I. 2g/L，氯化鉀0. 7g/L，青霉素鈉0. 6g/L，硫酸鏈霉素0. 35g/L，聚こ烯醇I. 2g/L，三羥甲基氨基甲烷4. 5g/L，檸檬酸3. 2g/L，半胱氨酸0. 055g/L，海藻糖0. 6g/L，林肯霉素0. 7g/L,こニ醇L 0g/L。上述豬精液低溫保護劑樣品的試用材料及方法I.精液采集采集ー頭20月齡的寧波福寧種豬有限公司的杜洛克種公豬精液。使用手握采精法收集富含精子的部分(共采集到200ml)，濾紙過濾，并收集到消毒后的保溫瓶中，立即拿進室溫為25 °C的室內(nèi)。2.精液稀釋液配制使用GBT-25172-2010推薦的第三種精液稀釋劑作為基礎(chǔ)稀釋劑，新鮮精液按照I I比例稀釋，低溫保護劑按照表I所列進行配比稀釋并裝瓶。試驗共設(shè)4個實驗組，I個對照組，每組三個重復(fù)。表I各組低溫保護劑添加量及濃度
權(quán)利要求
1.一種豬精液的低溫保護劑，其特征在于該保護劑組分配比為D-葡萄糖8 12g/L，檸檬酸三鈉8 12g/L，EDTA鈉鹽I. 5 3g/L，碳酸氫鈉I 2g/L，氯化鉀O. 5 lg/L，青霉素鈉O.2 O. 9g/L，硫酸鏈霉素O. 2 lg/L，聚乙烯醇O. 5 2. 5g/L，三羥甲基氨基甲烷4 6g/L，檸檬酸3 4. 5g/L,半胱氨酸O. 05 O. 08g/L,海藻糖O. 5 I. 5g/L,林肯霉素O. 5 I. 5g/L,乙二醇 O. 5 I. 5g/L。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的豬精液的低溫保護劑，其特征在于該保護劑組分配比為D-葡萄糖8 llg/L，檸檬酸三鈉8 11. 5g/L，EDTA鈉鹽I. 5 2g/L，碳酸氫鈉I. 2 I. 5g/L，氯化鉀O. 6 O. 7g/L，青霉素鈉O. 4^0. 7g/L，硫酸鏈霉素O. 2 O. 4g/L，聚乙烯醇1 1. 5g/L，三羥甲基氨基甲烷4 5g/L，檸檬酸3 4g/L，半胱氨酸O. 05、. 06g/L,海藻糖O. 5^0. 8g/L，林肯霉素 O. 5 O. 8g/L,乙二醇 O. 5 I. Og/Lo
全文摘要
本發(fā)明公開一種豬精液的低溫保護劑，其特征在于該保護劑組分配比為D-葡萄糖8~12g/L,檸檬酸三鈉8~12g/L，EDTA鈉鹽1.5~3g/L，碳酸氫鈉1~2g/L，氯化鉀0.5~1g/L，青霉素鈉0.2~0.9g/L，硫酸鏈霉素0.2~1g/L，聚乙烯醇0.5~2.5g/L，三羥甲基氨基甲烷4~6g/L，檸檬酸3~4.5g/L，半胱氨酸0.05~0.08g/L，海藻糖0.5~1.5g/L，林肯霉素0.5~1.5g/L，乙二醇0.5~1.5g/L。本發(fā)明具有在低溫環(huán)境下，仍然能夠有效保證豬精液活率、延長儲存時間的優(yōu)點。
文檔編號A01N1/02GK102726367SQ20121019673
公開日2012年10月17日 申請日期2012年6月12日 優(yōu)先權(quán)日2012年6月12日
發(fā)明者嚴競天, 俞頌東, 孫時軍, 林杰, 羅松 申請人:寧波市畜牧工程技術(shù)研究服務(wù)中心, 寧波愛卡畜牧科技有限公司