專利名稱：一種水培方式培育馬鈴薯脫毒試管苗的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于馬鈴薯原原種培育的領(lǐng)域，尤其涉及一種水培方式培育馬鈴薯脫毒試管苗的方法。
背景技術(shù)：
馬鈴薯原原種具有品種純度高、無(wú)病毒、儲(chǔ)運(yùn)性能好、增產(chǎn)效果明顯等優(yōu)點(diǎn)，所以脫毒小薯的生產(chǎn)已成為馬鈴薯種薯快繁的主要措施。馬鈴薯原原種生產(chǎn)可以通過(guò)脫毒苗剪尖扦插，提高繁殖系數(shù)，來(lái)加快快繁進(jìn)程，降低生產(chǎn)成本。目前關(guān)于馬鈴薯脫毒試管苗快繁與壯苗的技術(shù)主要有兩個(gè)，現(xiàn)將這兩個(gè)技術(shù)的主 要狀況介紹如下
I. 一種組培條件下的快繁和壯苗的方法，其步驟主要是(I)培養(yǎng)基配制在MS培養(yǎng)基中，蔗糖濃度為40g/L，除MS培養(yǎng)基中主要成分外再添加O. 5g/L活性炭，O. 8mg/L烯效唑；(2)組培苗快繁，將脫毒試管苗剪成帶芽小段，接種在配好的培養(yǎng)基上；(3)將接種好的組培苗置于溫度20-25°C，光照強(qiáng)度為2000-3000Ix的，光照時(shí)間為每天10小時(shí)的無(wú)菌組培室培養(yǎng)壯苗；(4) 50天左右苗培養(yǎng)成高度為12cm左右的健壯苗。2. 一種馬鈴薯基質(zhì)栽培扦插快繁及壯苗的方法，其主要步驟為(I)馬鈴薯脫毒試管苗煉苗；(2)脫毒試管苗清洗及生根處理,清洗后置于100mg/L的NAA溶液中侵泡15分鐘；(3)將浸泡好的脫毒苗栽培于消過(guò)毒的基質(zhì)中，溫度控制為20-25°C，濕度為95%以上；當(dāng)溫室溫度為于0-10°C時(shí)，需要經(jīng)過(guò)40-50天，苗長(zhǎng)至12cm左右，溫度高于30°C時(shí)，成活率低于50%。該兩種技術(shù)方法，一是在組培室內(nèi)，通過(guò)組培方式添加激素的方式快繁和壯苗。ニ是在溫室的基質(zhì)上進(jìn)行快繁和壯苗。在馬鈴薯原原種生產(chǎn)上采用這兩種方法都能在一定程度上達(dá)到快繁和壯苗的效果。上述技術(shù)缺點(diǎn)在于可控制性較差，風(fēng)險(xiǎn)較大。組培室快繁后，需要添加激素壯苗，這就會(huì)造成導(dǎo)致品種變異的風(fēng)險(xiǎn)。此外，組培壯苗添加的激素都屬于生長(zhǎng)延緩劑，植株生長(zhǎng)較慢，即使能達(dá)到壯苗的效果也需要較長(zhǎng)的時(shí)間，這樣就不能同時(shí)兼顧快繁與壯苗，而且組培壯苗的苗健壯度遠(yuǎn)遠(yuǎn)不如水培苗。脫毒苗的基質(zhì)栽培，首先基質(zhì)成本高，且重復(fù)使用很難徹底消毒，感染病蟲(chóng)害的可能性很大。 一般基質(zhì)栽培成活率要低于水培，且基質(zhì)栽培需要在大的防蟲(chóng)溫室進(jìn)行，往往不能很好的進(jìn)行人為控制溫、濕度及光照強(qiáng)度，溫度較低時(shí)栽培的基質(zhì)苗生長(zhǎng)及其緩慢，過(guò)高脫毒苗又不容易成活，所以基質(zhì)栽培也不能很好的進(jìn)行快繁和壯苗。

發(fā)明內(nèi)容
為解決以上的技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明提供一種馬鈴薯脫毒試管苗通過(guò)水培方式低成本快繁和壯苗的方法，使馬鈴薯脫毒試管苗經(jīng)過(guò)一段時(shí)間的水培后，在無(wú)土栽培，特別是霧化栽培中縮短壯苗時(shí)間，提高馬鈴薯苗成活率。
本發(fā)明其特征在于包括以下步驟
(1)煉苗選取培養(yǎng)25天左右、5-8cm的馬鈴薯脫毒試管苗在溫度20_22°C、光照強(qiáng)度為2000-30001x的條件下放置3-5天，進(jìn)行煉苗處理，讓脫毒試管苗適應(yīng)水培生長(zhǎng)條件，提高成活率；
(2)將煉苗后的脫毒苗從組培瓶中取出，剪掉原有的根系，用清水洗浄殘留的培養(yǎng)基，再將根部浸泡在PH值為5. 8，濃度為100mg/L的萘こ酸溶液中15min，進(jìn)行生根處理；
(3)配制營(yíng)養(yǎng)液將濃度為40-100mg/L 的 NH4NO3、51· 25-122. 5mg/L 的 KH2PO4、407. 5- 895mg/L 的 KNO3>76. 25-172. 5mg/L 的 MgSO4 · 7Η20、84· 5-189 mg/L 的 Ca (NO3)2 ·4Η20、9-38 mg/L 的 NaCl，鐵鹽:37. 3mg/L Na2 .EDTA ·2Η20、27· 8 mg/L FeSO4 ·7Η20，微量元素lmg/L MnSO4 · 4Η20、1· 5 mg/L H3BO4,2. 3mg/L ZnSO4 · 7Η20、0· 75mg/L CuSO4 · 5H20、0. 025 mg/L Na2MoO4 · 2H20、0. 025 mg/L CoCl2 · 6H20 混合制成營(yíng)養(yǎng)液；
(4)將浸泡好的脫毒苗假植在清水里預(yù)培養(yǎng)，2-3天后栽入營(yíng)養(yǎng)液中，栽培密度1111-2500 苗 /m2，株距 2_3cm，行距 2_3cm ；
(5)在栽好的脫毒苗上方搭上透明的塑料薄膜，使其處于溫度20-22°C，濕度>95%，光照強(qiáng)度為2000-30001x的干凈、無(wú)蟲(chóng)的環(huán)境中2-3天，脫毒苗生根后，逐漸撤掉塑料薄膜。(6)移栽脫毒苗彡10 cm時(shí)移栽至蛭石或珍珠巖基質(zhì)中。馬鈴薯試管苗為費(fèi)烏瑞它或米拉品種。作為本發(fā)明的改進(jìn)，也可在步驟(3)中加O. 12 -0.25mg/L吲丁·萘こ酸溶液(2%可溶性粉劑，四川省蘭月科技開(kāi)發(fā)公司生產(chǎn))。本發(fā)明中優(yōu)化的營(yíng)養(yǎng)液為50mg/LNH4NO3^61. 25mg/L KH2PO4、447. 5mg/L KNO3,86. 25mg/L MgSO4 · 7Η20、94· 5 mg/L Ca(N O3)2 · 4H20、19mg/L NaCl,鐵鹽37. 3mg/LNa2 · EDTA · 2Η20、27· 8 mg/L FeSO4 · 7H20，微量元素lmg/L MnSO4 · 4Η20、1· 5 mg/L H3BO4'2. 3mg/L ZnSO4 · 7H20、0. 75mg/L CuSO4 · 5H20、0. 025 mg/L Na2MoO4 · 2H20、0. 025 mg/LCoCl2 · 6H20?；蛘邽?00mg/LΝΗ4Ν03、122. 5mg/L KH2PO4,895mg/L KN03、172. 5mg/LMgSO4 · 7H20、189 mg/L Ca (N O3) 2 · 4H20、38 mg/L NaCl，鐵鹽:37. 3mg/L Na2 · EDTA · 2H20、27. 8 mg/L FeSO4 · 7H20，微量元素lmg/L MnSO4 · 4H20、I. 5 mg/L H3BO4,2. 3mg/LZnSO4 ·7Η20、0· 75mg/L CuSO4 · 5H20、0. 025 mg/L Na2MoO4 ·2Η20、0· 025 mg/L CoCl2 ·6Η20。還有可選的營(yíng)養(yǎng)液為80mg/L NH4NO3> 112mg/L KH2PO4、825mg/L KN03、150mg/L MgSO4 ·7Η20、167 mg/L Ca(N 03)2 ·4Η20、35 mg/L NaCl,鐵鹽37. 3mg/L Na2 ·EDTA ·2H20、27. 8 mg/L FeSO4 · 7H20，微量元素lmg/L MnSO4 · 4H20、I. 5 mg/L H3BO4,2. 3mg/LZnSO4 · 7H20、0. 75mg/L CuSO4 · 5H20、0. 025 mg/L Na2MoO4 · 2H20、0. 025 mg/L CoCl2 · 6H20本發(fā)明中步驟(4)的水培裝置可用盆底長(zhǎng)X寬=44X32，盆高=14cm的塑料盆作為栽培盆，再將O. 5cm厚的料泡沫板裁成與栽培盆底同等大小的定植板，在定植板上打孔，孔間距分別為2cm或3cm，每盆放2L營(yíng)養(yǎng)液,使其栽培板漂浮在營(yíng)養(yǎng)液上?；蛩嘌b置可使用水培架進(jìn)行栽培，架長(zhǎng)X寬=5X0. 9m，每個(gè)水培架放90-100L的營(yíng)養(yǎng)液，水培裝置可自行配置，只需要計(jì)算好容積加入適量的營(yíng)養(yǎng)液即可。本發(fā)明的目的在于對(duì)馬鈴薯脫毒試管苗進(jìn)行快繁和壯苗，包括脫毒試管苗的煉苗、脫毒試管苗的水培，水培苗期的管理幾個(gè)方面。實(shí)施期間，不受外界氣候影響，達(dá)到馬鈴薯脫毒試管苗的快繁及壯苗的作用。本發(fā)明的技術(shù)方案包括4個(gè)因素即品種、栽培密度、營(yíng)養(yǎng)液濃度、生根劑濃度，從増加繁殖系數(shù)和壯苗量?jī)蓚€(gè)環(huán)節(jié)入手，在各環(huán)節(jié)都有相應(yīng)的措施給予應(yīng)對(duì)。通過(guò)將脫毒試管苗水培，剪尖扦插；定期調(diào)節(jié)水培的營(yíng)養(yǎng)液；嚴(yán)格控制水培室的環(huán)境條件，如溫度，濕度和光照強(qiáng)度以及防蟲(chóng)，防病，防菌等。通過(guò)水培提高脫毒苗的繁殖系數(shù)，獲得健康和健壯的脫毒苗，滿足霧培及基質(zhì)等無(wú)土栽培方式需要，從而達(dá)到健康和高效的馬鈴薯原種生產(chǎn)。采用水培的方法繁殖脫毒馬鈴薯苗，既保持了組培苗原有的無(wú)病毒、無(wú)菌和無(wú)蟲(chóng)的特點(diǎn)，又具有技術(shù)簡(jiǎn)單，成本低，種苗健壯等特點(diǎn)，并且水培后的馬鈴薯苗移栽至基質(zhì)或其他無(wú)土栽培(如霧培)成活率極高，有的可達(dá)到99%。 水培條件容易滿足和控制，可以人為的掌握水培時(shí)間，滿足任何時(shí)候各種無(wú)土栽培所需要的健壯脫毒苗，從而可以有效的把握好季節(jié)，提高馬鈴薯原原種生產(chǎn)效率。
具體實(shí)施例現(xiàn)結(jié)合具體實(shí)施方式
和具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)ー步的描述。
具體實(shí)施方式
包括以下步驟
(I)組培苗于組培室培養(yǎng)25d左右，5-7厘米時(shí)，然后在溫度20-22で、光照強(qiáng)度為2000-30001x的條件下放置3-5天，進(jìn)行煉苗處理，讓脫毒試管苗適應(yīng)水培生長(zhǎng)條件，提高成活率；
用日光燈和空調(diào)來(lái)調(diào)節(jié)溫室的溫度與光照，或者在光照充足的情況下用水簾和蒸汽來(lái)調(diào)節(jié)溫度。(2)將煉苗后的脫毒苗從組培瓶取出，剪掉原有的根系，用清水洗浄殘留的培養(yǎng)基，再將根部浸泡在PH值為5-6，濃度為90-110mg/L的萘こ酸溶液中15_20min，進(jìn)行生根處理；
(3)配制營(yíng)養(yǎng)液將濃度為 40-100mg/L 的 NH4NO3，51. 25-122. 5mg/L 的 KH2PO4 ,407. 5-895mg/L 的 KNO3, 76. 25-172. 5mg/L MgSO4 · 7H207，84. 5-189 mg/L 的 Ca (N 03)2 · 4H20，9-38 mg/L NaCl，鐵鹽:37. 3mg/L Na2 .EDTA ·2Η20、27· 8 mg/L FeSO4 ·7Η20，微量元素lmg/L MnSO4 · 4Η20、1· 5 mg/L H3BO4,2. 3mg/L ZnSO4 · 7Η20、0· 75mg/L CuSO4 · 5Η20、0· 025 mg/LNa2MoO4 · 2Η20、0· 025 mg/L CoCl2 · 6H2O0(4)將浸泡好的脫毒苗假植在清水里預(yù)培養(yǎng)，2-3天后定植在不同處理營(yíng)養(yǎng)液的栽培盆內(nèi)，栽培密度1111-2500苗/m2，株距2_3cm，行距2_3cm ；
(5)在栽好的脫毒苗上方搭上透明的塑料薄膜，使其處于溫度20-23°C，濕度>95%，光照強(qiáng)度為2000-30001x的干凈、無(wú)蟲(chóng)的環(huán)境中2-3天，脫毒苗生根后，逐漸撤掉塑料薄膜，防止失水影響成活。經(jīng)常觀察培養(yǎng)室溫濕度，光照強(qiáng)度及營(yíng)養(yǎng)液深度，定期補(bǔ)給營(yíng)養(yǎng)。(6)移栽脫毒苗> 10 cm時(shí)移載到蛭石或珍珠巖基質(zhì)中。馬鈴薯試管苗為費(fèi)烏瑞它或米拉品種。也可在步驟(3)中加O. 12 -O. 25mg/L吲丁 ·萘こ酸溶液(2%可溶性粉劑，四川省蘭月科技開(kāi)發(fā)公司生產(chǎn))。O. 12 -O. 25mg / L吲丁 萘こ酸溶液的配制分別在濃度為100mg/L的吲丁 ？？萘こ酸溶液里取所需要量如5ml或IOml加入營(yíng)養(yǎng)液里面即可。
其中，步驟(5)中水培裝備的制備水培裝置用規(guī)格統(tǒng)一的塑料盆(盆底長(zhǎng)44 cm,盆底寬32 cm，盆高14 cm)作為栽培盆，將O. 5cm厚的料泡沫板裁成與栽培盆底同等大小的定植板，在定植板上打孔，孔間距分別為2cm與3cm，做成兩種不同栽培密度的栽培板。每盆放2L不同處理的營(yíng)養(yǎng)液，栽培板漂浮其上?；蛘呤褂盟嗉苓M(jìn)行栽培，架長(zhǎng)5m、寬O. 9m,每個(gè)水培架放9(Tl00L不同處理的營(yíng)養(yǎng)液。實(shí)施例1
馬鈴薯脫毒苗品種為費(fèi)烏瑞它的實(shí)施例，共有8個(gè)處理，處理8為對(duì)照組 表權(quán)利要求
1.一種水培方式培育馬鈴薯脫毒試管苗的方法，包括以下步驟 (1)煉苗篩選5-8cm的馬鈴薯脫毒試管苗在溫度20-22°C、光照強(qiáng)度為2000_30001x的溫室條件下放置3-5天； (2)生根處理將煉苗后的脫毒苗從組培瓶中取出，剪掉原有的根系，用清水洗浄殘留的培養(yǎng)基，再將根部浸泡在PH值為5. 8，濃度為100mg/L的萘こ酸溶液中10-20分鐘； (3)配制營(yíng)養(yǎng)液將濃度為40-100mg/L 的 NH4NO3、51· 25-122. 5mg/L 的 KH2PO4、407.5- 895mg/L 的 ΚΝ03、76· 25-172. 5mg/L 的 MgSO4 · 7H20 ,84. 5-189 mg/L 的Ca(NO3)2 · 4H20、9-38 mg/L 的 NaCl，鐵鹽37. 3mg/L Na2 · EDTA · 2Η20、27· 8 mg/LFeSO4 · 7Η20，微量元素lmg/L MnSO4 · 4Η20、1· 5 mg/L H3BO4,2. 3mg/L ZnSO4 · 7Η20、0· 75mg/L CuSO4 · 5Η20、0· 025 mg/L Na2MoO4 · 2Η20、0· 025 mg/L CoCl2 · 6H20 混合制成營(yíng)養(yǎng)液； (4)定植將浸泡好的脫毒苗假植在清水里預(yù)培養(yǎng)，2-3天后栽入有支撐的盛裝營(yíng)養(yǎng)液的水培器皿中，栽培密度1111-2500苗/m2，株距2_3cm，行距2_3cm ； (5)培育將栽好的脫毒苗上方搭上透明的塑料薄膜，使其處于溫度20-22°C，濕度^ 90%，光照強(qiáng)度為2000-30001x的干凈、無(wú)蟲(chóng)的室內(nèi)環(huán)境中2_3天，脫毒苗生根后，逐漸撤掉塑料薄膜； (6)移栽當(dāng)脫毒苗長(zhǎng)到>10 cm時(shí)候?qū)⑵湟圃缘津问蛘渲閹r基質(zhì)中。
2.根據(jù)權(quán)利要求I中所述的ー種水培方式培育馬鈴薯脫毒試管苗的方法，其特征在于馬鈴薯試管苗選為費(fèi)烏瑞它或米拉品種。
3.根據(jù)權(quán)利要求I中所述的ー種水培方式培育馬鈴薯脫毒試管苗的方法，其特征在于:在步驟(3)中加入O. 12 -O. 25mg/L吲丁 ·萘こ酸溶液。
4.根據(jù)權(quán)利要求I或3中任一所述的ー種水培方式培育馬鈴薯脫毒試管苗的方法，其特征在于步驟(三)中的ー種可選營(yíng)養(yǎng)液是50mg/L NH4NO3^61. 25mg/L KH2PO4,447. 5mg/L ΚΝ03、86· 25mg/L MgSO4 · 7Η20、94· 5 mg/L Ca (N O3) 2 · 4H20、19mg/L NaCl，鐵鹽:37. 3mg/LNa2 · EDTA · 2Η20、27· 8 mg/L FeSO4 · 7Η20，微量元素lmg/L MnSO4 · 4Η20、1· 5 mg/L H3BO4'2. 3mg/L ZnSO4 · 7Η20、0· 75mg/L CuSO4 · 5Η20、0· 025 mg/L Na2MoO4 · 2Η20、0· 025 mg/LCoCl2 · 6H20。
5.根據(jù)權(quán)利要求I或3中任一所述的ー種水培方式培育馬鈴薯脫毒試管苗的方法，其特征在于步驟(三)中的另ー種可選營(yíng)養(yǎng)液是100mg/L NH4N03、122. 5mg/L KH2PO4,895mg/L ΚΝ03、172· 5mg/L MgSO4 · 7H20、189 mg/L Ca(N O3)2 · 4H20、38 mg/L NaCl,鐵鹽:37. 3mg/LNa2 · EDTA · 2H20、27. 8 mg/L FeSO4 · 7H20，微量元素lmg/L MnSO4 · 4H20、1. 5 mg/L H3BO4'2. 3mg/L ZnSO4 · 7H20、0. 75mg/L CuSO4 · 5H20、0. 025 mg/L Na2MoO4 · 2H20、0. 025 mg/LCoCl2 · 6H20。
6.根據(jù)權(quán)利要求I或3中任一所述的ー種水培方式培育馬鈴薯脫毒試管苗的方法，其特征在于步驟(三)中的還有ー種可選營(yíng)養(yǎng)液配方是80mg/L NH4NO3^ 112mg/L KH2PO4,825mg/L KN03、150mg/L MgSO4 ·7Η20、167 mg/L Ca (N 03)2 .4H20、35mg/L NaCl，鐵鹽37. 3mg/L Na2 *EDTA ·2Η20、27. 8 mg/L FeSO4 ·7Η20，微量元素lmg/L MnSO4 ·4Η20、1· 5 mg/L H3BO4'2. 3mg/L ZnSO4 · 7H20、0. 75mg/L CuSO4 · 5H20、0. 025 mg/L Na2MoO4 · 2H20、0. 025 mg/LCoCl2 · 6H20。
7.根據(jù)權(quán)利要求I中所述的ー種水培方式培育馬鈴薯脫毒試管苗的方法，其特征在于步驟(4)中水培器皿可用盆底長(zhǎng)X寬=44X32，盆高=14cm的塑料盆作為栽培盆，每盆放2L營(yíng)養(yǎng)液，并有定植孔間距為2cm-3cm的栽培板漂浮在營(yíng)養(yǎng)液上。
8.根據(jù)權(quán)利要求5中所述的ー種水培方式培育馬鈴薯脫毒試管苗的方法，其特征在于可使用水培架進(jìn)行栽培，架長(zhǎng)X寬=5X0. 9m，每個(gè)水培架放9(Tl00L的營(yíng)養(yǎng)液。
全文摘要
本發(fā)明屬于馬鈴薯原原種培育的領(lǐng)域，尤其涉及一種水培方式培育馬鈴薯脫毒試管苗的方法，包括煉苗、生根處理、配制營(yíng)養(yǎng)液、定植、培育以及移載步驟，從品種、栽培密度、營(yíng)養(yǎng)液濃度、生根劑濃度方面，增加繁殖系數(shù)和壯苗量，在各環(huán)節(jié)都有相應(yīng)的措施給予應(yīng)對(duì)，提高脫毒苗的繁殖系數(shù)，獲得健康和健壯的脫毒苗，滿足霧培及基質(zhì)等無(wú)土栽培方式需要，從而達(dá)到健康和高效的馬鈴薯原原種生產(chǎn)。本發(fā)明保持了組培苗原有的無(wú)病毒、無(wú)菌和無(wú)蟲(chóng)的特點(diǎn)，又具有技術(shù)簡(jiǎn)單，成本低，種苗健壯等特點(diǎn)，并且水培后的馬鈴薯苗移栽至基質(zhì)或其他無(wú)土栽培(如霧培)成活率極高，有的可達(dá)到99%，提高馬鈴薯原原種生產(chǎn)效率。
文檔編號(hào)A01H4/00GK102657081SQ201210130410
公開(kāi)日2012年9月12日 申請(qǐng)日期2012年4月28日 優(yōu)先權(quán)日2012年4月28日
發(fā)明者何衛(wèi), 劉冬, 盧學(xué)蘭, 唐銘霞, 王余明, 王克秀, 胡建軍, 謝開(kāi)云, 陳萍萍 申請(qǐng)人:四川省農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物研究所