專利名稱：植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑在增強(qiáng)藻類生長(zhǎng)中的應(yīng)用的制作方法
植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑在增強(qiáng)藻類生長(zhǎng)中的應(yīng)用相關(guān)申請(qǐng)的引用本申請(qǐng)根據(jù)35U. S. C. § 119(e)要求于2009年1月13日提交的美國(guó)臨時(shí)專利申請(qǐng)系列號(hào)61/204，920 (其完整內(nèi)容在此引作參考)的優(yōu)先權(quán)。
背景技術(shù)：
藻類是地球上最豐富的、分布最廣的物種之一。目前已知的藻類超過(guò)150，000種， 可能更多的種類還有待發(fā)現(xiàn)。對(duì)于大多數(shù)藻類的種，盡管已知其基本區(qū)別特征和品性，但關(guān)于如何在總體生命分類中分類所有不同的藻類種仍然存在一定的不確定性。藻類(包括許多不同大小和顏色的植物樣形式，硅藻類和藍(lán)藻菌)構(gòu)成地球上生命的最重要的類群之一，負(fù)責(zé)我們大部分的大氣，并構(gòu)成許多其他生物形式的食物鏈的基礎(chǔ)。圍繞藻類或與藻類共生地進(jìn)化的整個(gè)生態(tài)系統(tǒng)和藻類環(huán)境包括食物源、掠食者、病毒和許多其它我們一般與高等生命形式相關(guān)聯(lián)的環(huán)境因素。盡管藻類有著這樣的重要性和范圍外，但是人類的直接利用有限。特別在亞洲，作為食物栽培或收獲藻類，經(jīng)常為“海草”的形式。藻類也廣泛地用于生產(chǎn)諸如色素和食物添加劑的多種成分。藻類也被用于工業(yè)化處理，以濃縮和去除重金屬污染，被稱之為硅藻土的硅藻殘余物被用作過(guò)濾介質(zhì)以及用于其它用途。藻類也可以生產(chǎn)油料、淀粉和氣體，它們可以用于生產(chǎn)柴油燃料、醇(例如乙醇) 和氫氣或沼氣。雖然其它生物材料也可以生成這些燃料，但藻類的特點(diǎn)是高產(chǎn)率和理論上的低成本。藻類的生長(zhǎng)速度可比其它形式的植物快10到100倍。藻類也能在生產(chǎn)所期望的油和淀粉方面有高產(chǎn)率，在某些情況下，這些形式的產(chǎn)量可達(dá)它們本身重量的60%之多。除了高產(chǎn)量的好處以外，利用藻類生產(chǎn)生物產(chǎn)品不會(huì)和農(nóng)業(yè)競(jìng)爭(zhēng)耕地，它既不需要農(nóng)田也不需要淡水。而且因?yàn)樵孱愂枪庾责B(yǎng)生物，所以它們使用最基本的輸入就能夠達(dá)到所有這些，在大部分情況下只需要陽(yáng)光、水、空氣、二氧化碳和簡(jiǎn)單營(yíng)養(yǎng)物。盡管藻類作為燃料來(lái)源的潛在好處是不言而喻的，但實(shí)際上由于多種原因過(guò)去的嘗試遇到了挫折和困難。例如，藻類細(xì)胞的最佳增殖條件就沒(méi)有明確定義，通常不同于增值生物產(chǎn)品(例如，油/脂質(zhì)或者多糖)的最佳生產(chǎn)所需要的。發(fā)明概述本發(fā)明提供了使用某些植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑(例如，生長(zhǎng)激素)調(diào)節(jié)藻類生長(zhǎng)的系統(tǒng)和方法，例如，為了生產(chǎn)增值生物產(chǎn)品(例如，油或淀粉)的目的。因此本發(fā)明的一方面提供了增強(qiáng)藻類細(xì)胞增殖的方法，包括在植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑或其模擬物的存在下培養(yǎng)該藻類，以增加藻類細(xì)胞數(shù)。在特定的實(shí)施方式中，藻類的細(xì)胞數(shù)至少增加了大約5 %、10 %、20 %、50 %、75 %、 2-倍、5-倍、10-倍、20-倍、50-倍、100-倍、500-倍、1000-倍、IO4-倍(41ogs)、105-倍 (51ogs)、106-倍(61ogs)、107-倍(71ogs)、IO8-倍(81ogs)、IO9-倍(91ogs)或者更多。在特定的實(shí)施方式中，藻類細(xì)胞的分裂速率至少增加了大約S^UO^JO^、 50%,75%,100%,200%,500%U, 000%等等或者更多。
4
在特定的實(shí)施方式中，在該培養(yǎng)條件下，藻類培養(yǎng)的群體倍增時(shí)間是大約0. 05-2天。在特定的實(shí)施方式中，植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑包括選自植物生長(zhǎng)素(Auxin)、細(xì)胞分裂素 (Cytokinin)、赤霉素(Gibberel 1 in)和/或其混合物的至少一種、兩種、三種、四種、五種或更多種生長(zhǎng)激素。優(yōu)選地，生長(zhǎng)激素包括選自植物生長(zhǎng)素、細(xì)胞分裂素或赤霉素的每種激素種類/類別的至少一種或兩種。例如，植物生長(zhǎng)素包括吲哚乙酸(IAA)和/或1-萘乙酸(NAA)。其它植物生長(zhǎng)素模擬物可以是2，4-0;2，4，5-1~;吲哚-3-丁酸(IBA) ；2-甲基-4-氯苯氧基乙酸 (MCPA) ；2-(2-甲基-4-氯苯氧基)丙酸(mecoprop，MCPP) ； (2，4- 二氯苯氧基)丙酸 (dichloroprop，2，4-DP)；或者(2，4-二氯苯氧基)丁酸(2，4-DB)。在特定的實(shí)施方式中，赤霉素包括GA3。在特定的實(shí)施方式中，細(xì)胞分裂素是腺嘌呤型細(xì)胞分裂素或苯脲型細(xì)胞分裂素。 例如，腺嘌呤型細(xì)胞分裂素或模擬物可以包括激動(dòng)素(kinetin)、玉米素(zeatin)和/或 6-芐氨基嘌呤，苯脲型細(xì)胞分裂素可以包括二苯脲和/或噻苯隆(TDZ)。在特定的實(shí)施方式中，植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑進(jìn)一步包括維生素Bl或其類似物/模擬物。在特定的實(shí)施方式中，僅有一種所述生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑(例如植物生長(zhǎng)素家族的生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑或細(xì)胞分裂素家族的生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑)用于藻類生長(zhǎng)。在特定的實(shí)施方式中，使用一種以上的所述生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑。在特定的實(shí)施方式中，至少使用一種植物生長(zhǎng)素家族的生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑和至少一種細(xì)胞分裂素家族的生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，該至少一種植物生長(zhǎng)素和該至少一種細(xì)胞分裂素的重量比大約為1 2到2 l(w/w)，優(yōu)選為約1 l(w/w)。在特定的實(shí)施方式中，植物生長(zhǎng)素和赤霉素的比例(w/w)大約為1 2到 2 1，優(yōu)選為約1 1。在特定的實(shí)施方式中，植物生長(zhǎng)素和維生素Bl的比例(w/w)大約為1 4到1 1，優(yōu)選為約1 2。在特定的實(shí)施方式中，所述模擬物是苯氧乙酸化合物。在特定的實(shí)施方式中，所述方法進(jìn)一步包括在含有最佳細(xì)胞增殖所需的無(wú)限制水平的營(yíng)養(yǎng)物和微量元素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)藻類。在特定的實(shí)施方式中，營(yíng)養(yǎng)物包括一種或者多種炭、氮、磷、硫和/或氧源。優(yōu)選地，營(yíng)養(yǎng)物的濃度對(duì)細(xì)胞的分裂和/或生長(zhǎng)是無(wú)毒的。在特定的實(shí)施方式中，培養(yǎng)基可以包括厭氧生物消化物(biodigestate)的液態(tài)分離物(separation)，需要時(shí)任選地補(bǔ)充額外的營(yíng)養(yǎng)物。厭氧生物消化物可以由動(dòng)物內(nèi)臟、 家畜糞便、食品加工廢物、市政廢水、酒糟水、酒糟(distiller's grains)、或者其它有機(jī)物的厭氧消化產(chǎn)生。在特定的實(shí)施方式中，營(yíng)養(yǎng)物的濃度對(duì)細(xì)胞的分裂和/或生長(zhǎng)是無(wú)毒的。在特定的實(shí)施方式中，藻類在細(xì)胞分裂的最適溫度下培養(yǎng)，對(duì)非嗜熱藻類來(lái)說(shuō)最適溫度在大約0-40°C之間，而對(duì)嗜熱藻類來(lái)說(shuō)則在大約40-95°C，或者大約60-80°C之間。在特定的實(shí)施方式中，藻類在生物反應(yīng)器中培養(yǎng)。優(yōu)選地，生物反應(yīng)器適應(yīng)于最佳的細(xì)胞增殖。優(yōu)選地，生物反應(yīng)器可以滅菌。在特定的實(shí)施方式中，藻類利用異養(yǎng)、光異養(yǎng)或者自養(yǎng)的生理機(jī)制代謝。
在特定的實(shí)施方式中，藻類是雜色藻類(Chromophytes)、優(yōu)選綠藻類 (Chlorophytes)或者硅藻類(Bacillariophytes) 0在特定的實(shí)施方式中，藻類是小球藻(Chlorella sp.)(例如普通小球藻(Chlorella vulgaris))、Auxenochlorella sp. (Auxenochlorella protothecoides)、棚藻(Scenedesmus sp.)禾口 Ankistrodesmus sp，等等。在特定的實(shí)施方式中，藻類具有無(wú)藻殼(frustule)的形式。在特定的實(shí)施方式中，藻類不是褐藻(Phaeophyceae)或者紅藻。在特定的實(shí)施方式中，藻類不是破囊壺菌 (Thraustochytriales)0本發(fā)明的另一方面提供用于生產(chǎn)藻類產(chǎn)品的方法，包括在植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑或其模擬物的存在下培養(yǎng)藻類，以積累藻類產(chǎn)品。在特定的實(shí)施方式中，藻類細(xì)胞數(shù)增加不超過(guò)大約1,000^^300^^200^^100% 或者50%。在特定的實(shí)施方式中，藻類的生物質(zhì)顯著增加。例如，在特定的實(shí)施方式中，藻類的生物質(zhì)至少增加大約5%、10%、20%、40%、60%、80%、100%、150%、200%。在特定的實(shí)施方式中，由于所述的藻類產(chǎn)品積累，藻類的生物質(zhì)大量增加。在特定的實(shí)施方式中，藻類在氮限制的培養(yǎng)基或含有為藻類產(chǎn)品合成優(yōu)化的氮水平的培養(yǎng)基中培養(yǎng)。在特定的實(shí)施方式中，植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑包括一種油刺激因子。例如，油刺激因子可以包括腐殖酸鹽，例如黃腐酸(fuvic acid)或者腐殖酸。在特定的實(shí)施方式中，藻類在生物反應(yīng)器中培養(yǎng)。優(yōu)選地，生物反應(yīng)器適應(yīng)于藻類產(chǎn)品的最佳生產(chǎn)。在特定的實(shí)施方式中，藻類產(chǎn)品是油或者脂質(zhì)，如包含Omega-3、0mega-6和/或 0mega-9的藻類產(chǎn)品。在特定的實(shí)施方式中，藻類產(chǎn)品是淀粉(或者多糖)。當(dāng)期望的藻類產(chǎn)品是淀粉或者多糖時(shí)，藻類優(yōu)選地不經(jīng)受氮限制的生長(zhǎng)條件。本發(fā)明的另一方面提供適合本發(fā)明的藻類生長(zhǎng)過(guò)程的系統(tǒng)。優(yōu)選地，生物反應(yīng)器可以滅菌，以在異養(yǎng)和光異養(yǎng)的條件下促進(jìn)未污染的藻類生長(zhǎng)。可預(yù)期的是這里所描述的所有實(shí)施方式可以和其它實(shí)施方式的特征相組合，無(wú)論是否適合。附圖簡(jiǎn)述


圖1顯示在用0. 酵母提取物和0. 5%葡萄糖改良的布氏(Bristol，s)培養(yǎng)基中生長(zhǎng)7天的對(duì)照普通小球藻(Chlorella vulgaris)。圖2顯示在用0. 酵母提取物、0. 5%葡萄糖和黃腐酸改良的布氏培養(yǎng)基中生長(zhǎng) 7天的普通小球藻。圖3顯示原殼小球藻(Chlorella protothecoide)在存在或不存在植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑組合的條件下的示例生長(zhǎng)曲線。圖4顯示原殼小球藻在存在或不存在植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑組合的條件下的示例生長(zhǎng)曲線。圖5顯示原殼小球藻在存在或不存在植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑組合的條件下的示例生長(zhǎng)曲線。
圖6顯示原殼小球藻在存在或不存在植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑組合的條件下的示例生長(zhǎng)曲線。發(fā)明詳述本發(fā)明的一個(gè)方面部分地基于發(fā)現(xiàn)藻類生長(zhǎng)(例如，在指數(shù)生長(zhǎng)期或指數(shù)生長(zhǎng)后期的細(xì)胞增殖)可以被特定的植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑或其模擬物所刺激。所以本發(fā)明的一個(gè)方面提供一種增強(qiáng)藻類細(xì)胞增殖的方法，包括在植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑或其模擬物的存在下培養(yǎng)藻類，以增加藻類細(xì)胞數(shù)。植物激素或調(diào)節(jié)劑影響植物中的基因表達(dá)和轉(zhuǎn)錄水平、細(xì)胞分裂和生長(zhǎng)。人類合成了大量的相關(guān)化合物，并用于調(diào)節(jié)栽培的植物、雜草、體外生長(zhǎng)的植物和植物細(xì)胞的生長(zhǎng)。這些人造化合物有時(shí)叫作植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，或簡(jiǎn)稱為PRG。這些合成的調(diào)節(jié)劑可以和自然存在的調(diào)節(jié)劑相同，或者可以包含在自然界中未曾發(fā)現(xiàn)的化學(xué)修飾。這里所使用的“生長(zhǎng)激素(或其模擬物)，，包括天然的植物激素和人造/合成的調(diào)節(jié)劑、其模擬物或者衍生物。 優(yōu)選地，生長(zhǎng)激素/調(diào)節(jié)劑、或其模擬物至少在一種濃度下刺激藻類生長(zhǎng)，優(yōu)選地在與下列實(shí)施例(例如，實(shí)施例3到7)所使用的類似或者相同的條件下。術(shù)語(yǔ)“生長(zhǎng)激素”和“生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑”在這里可以交換使用。大體上，植物激素和調(diào)節(jié)劑分為5大類，其中一些由許多不同的化學(xué)物質(zhì)構(gòu)成，這些化學(xué)物質(zhì)在植物與植物之間在結(jié)構(gòu)上可能不同?；谒鼈兊慕Y(jié)構(gòu)相似性和它們對(duì)植物生理學(xué)的效應(yīng)，這些化學(xué)物質(zhì)各自被一起歸入這些類別之一。另外的植物激素和生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑不容易歸入這些類別。恰恰相反，它們天然存在或由人類或其它生物體所合成，包括抑制植物生長(zhǎng)或者中斷植物體內(nèi)的生理過(guò)程的化學(xué)物質(zhì)。這五種主要的類別是脫落酸(也被稱為ABA)；植物生長(zhǎng)素；細(xì)胞分裂素；乙烯； 和赤霉素。其它已鑒定的植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑包括油菜素內(nèi)酯類(Brassinolides)(與動(dòng)物甾醇激素在化學(xué)結(jié)構(gòu)上類似的植物留醇。它們促進(jìn)細(xì)胞伸長(zhǎng)和細(xì)胞分裂、木質(zhì)部組織分化和抑制葉片脫落)；水楊酸(在某些植物中激活基因，產(chǎn)生幫助抵御病原性侵入物的化合物)； 茉莉酸類(Jasmonates)(由脂肪酸生成并似乎促進(jìn)生成用于抵御入侵生物體的防御蛋白質(zhì)。據(jù)信它們也在種子萌發(fā)中有作用，并且影響種子中蛋白質(zhì)的儲(chǔ)存，還似乎影響根的生長(zhǎng))；植物肽激素類(包括所有的參與細(xì)胞與細(xì)胞之間信號(hào)傳導(dǎo)的分泌小肽。這些小肽激素在植物生長(zhǎng)和發(fā)育中起重要作用，包括防御機(jī)制、控制細(xì)胞分裂和膨脹以及花粉自交不親合性)；聚胺類(迄今在所有已研究的生物中均發(fā)現(xiàn)的低分子量強(qiáng)堿性分子。它們?cè)谥参锷L(zhǎng)和發(fā)育方面有重要作用，并影響有絲分裂和減數(shù)分裂的過(guò)程)；一氧化氮(NO)(在激素和防御應(yīng)答中作為信號(hào))；獨(dú)腳金萌發(fā)素內(nèi)酯(Strigolactones)(與抑制芽分枝有關(guān))。PRG的脫落酸類別包括通常在植物葉子中生成的一種化合物，該化合物來(lái)源于葉綠體，特別是在植物處于應(yīng)激時(shí)。一般而言，他作為一種抑制性的化合物影響芽生長(zhǎng)、種子和芽休眠。植物生長(zhǎng)素是能正面影響細(xì)胞擴(kuò)大、芽形成和發(fā)根的化合物。它們也促進(jìn)其它激素的生成，并且與細(xì)胞分裂素聯(lián)合，它們控制莖、根和果實(shí)的生長(zhǎng)，并把莖轉(zhuǎn)化為花。植物生長(zhǎng)素通過(guò)改變細(xì)胞壁的塑性來(lái)影響細(xì)胞的伸長(zhǎng)。植物生長(zhǎng)素水平在光照下下降，在黑暗中上升。在高濃度下，植物生長(zhǎng)素對(duì)植物具有毒性；它們對(duì)雙子葉植物毒性最大，但對(duì)單子葉植物毒性小些。由于此特性，已經(jīng)開(kāi)發(fā)了包括2，4-D和2，4，5-T在內(nèi)的合成植物生長(zhǎng)素除草劑并用于雜草控制。植物生長(zhǎng)素，特別是1-萘乙酸(NAA)和吲哚-3-丁酸(IBA)，通常也應(yīng)用于在植物扦插時(shí)刺激根的生長(zhǎng)。在植物中最常見(jiàn)的植物生長(zhǎng)素是吲哚乙酸或IAA。植物生長(zhǎng)素家族中最重要的一個(gè)成員是吲哚-3-乙酸(IAA)。在整株植物中，它產(chǎn)生植物生長(zhǎng)素效應(yīng)的主要部分，并是一種最有效的天然植物生長(zhǎng)素。然而，IAA分子在水溶液中化學(xué)不穩(wěn)定。其它自然存在的植物生長(zhǎng)素包括4-氯吲哚乙酸、苯乙酸(PAA)和吲哚-3- 丁酸(IBA)。常見(jiàn)的合成植物生長(zhǎng)素類似物包括1-萘乙酸(NAA) ,2,4- 二氯苯氧乙酸Q，4-D)等等。下面示出了幾種可在本發(fā)明中應(yīng)用的示例性的(非限制性的)自然和合成的植物生長(zhǎng)素。
權(quán)利要求
1.一種增強(qiáng)藻類細(xì)胞增殖的方法，包括在一種或多種植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑、其模擬物、或其混合物的存在下培養(yǎng)所述藻類，以增加藻類細(xì)胞數(shù)。
2.權(quán)利要求1的方法，其中藻類細(xì)胞數(shù)至少增加約5%UO^dOW.50^^75%、2倍、5 倍、10 倍、20 倍、50 倍、100 倍、500 倍、1000 倍、IO4 倍、IO5 倍、IO6 倍、IO7 倍、IO8 倍、IO9 倍或以上。
3.權(quán)利要求1的方法，其中藻類細(xì)胞分裂的速度至少增加約5^UOW .20^^50%、 75%、100%、200%、500%、1000% 或更多。
4.權(quán)利要求1的方法，其中藻類培養(yǎng)的群體倍增時(shí)間是大約0.05-2天。
5.權(quán)利要求1的方法，其中所述植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑包括至少一種、兩種、三種、四種、五種或更多種選自植物生長(zhǎng)素、細(xì)胞分裂素、赤霉素和/或其混合物的生長(zhǎng)激素。
6.權(quán)利要求5的方法，其中所述植物生長(zhǎng)素包括吲哚乙酸(IAA)和/或1-萘乙酸 (NAA)。
7.權(quán)利要求5的方法，其中所述赤霉素包括GA3。
8.權(quán)利要求5的方法，其中所述細(xì)胞分裂素是腺嘌呤型細(xì)胞分裂素或苯脲型細(xì)胞分裂ο
9.權(quán)利要求8的方法，其中所述腺嘌呤型細(xì)胞分裂素包括激動(dòng)素、玉米素和/或6-芐氨基嘌呤，所述苯脲型細(xì)胞分裂素包括二苯脲和/或噻苯隆(TDZ)。
10.權(quán)利要求1的方法，其中所述植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑還包括維生素Bl或其類似物/模擬物。
11.權(quán)利要求5的方法，其中所述植物生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素的比例(w/w)約為1 2至 2 1 (w/w)，或約 1 1 (w/w)。
12.權(quán)利要求5的方法，其中所述植物生長(zhǎng)素與赤霉素的比例(w/w)約為1 2至 2 1 (w/w)，或約 1 1 (w/w)。
13.權(quán)利要求1的方法，其中所述模擬物是苯氧乙酸化合物。
14.權(quán)利要求1的方法，還包括在含有非限制水平的營(yíng)養(yǎng)物和最佳細(xì)胞增殖所需的微量元素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)所述藻類。
15.權(quán)利要求14的方法，其中所述營(yíng)養(yǎng)物包括一種或多種C、N、P、S和/或0源。
16.權(quán)利要求14的方法，其中所述營(yíng)養(yǎng)物的濃度對(duì)于細(xì)胞分裂和/或生長(zhǎng)是無(wú)毒的。
17.權(quán)利要求1的方法，其中所述藻類在細(xì)胞分裂的最適溫度下培養(yǎng)，所述最適溫度的范圍對(duì)于非嗜熱藻類為約0-40°C，對(duì)于嗜熱藻類為約40-95°C，或約60-80°C。
18.權(quán)利要求1的方法，其中所述藻類在生物反應(yīng)器中培養(yǎng)。
19.權(quán)利要求18的方法，其中所述生物反應(yīng)器適合滅菌。
20.權(quán)利要求18的方法，其中所述生物反應(yīng)器適應(yīng)于最佳的細(xì)胞增殖。
21.權(quán)利要求1的方法，其中所述藻類利用異養(yǎng)、光異養(yǎng)或自養(yǎng)的生理機(jī)制代謝。
22.權(quán)利要求1的方法，其中所述藻類是雜色藻類。
23.權(quán)利要求1的方法，其中所述藻類是綠藻類或硅藻類。
24.權(quán)利要求1的方法，其中所述藻類具有無(wú)藻殼的形式。
25.權(quán)利要求1的方法，其中所述藻類不是褐藻(褐藻科)或紅藻。
26.權(quán)利要求1的方法，其中所述藻類不是破囊壺菌。
27.—種生產(chǎn)藻類產(chǎn)物的方法，包括在植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑或其模擬物的存在下培養(yǎng)藻類， 以積累藻類產(chǎn)物。
28.權(quán)利要求27的方法，其中藻類細(xì)胞數(shù)增加不超過(guò)一個(gè)log(1000%) ,300% ,200%, 100%或 50%。
29.權(quán)利要求27的方法，其中藻類生物質(zhì)顯著增加。
30.權(quán)利要求四的方法，其中藻類生物質(zhì)增加至少約20%、40%、60%、80%、100%、 150%、200%。
31.權(quán)利要求四的方法，其中由于所述藻類產(chǎn)物的積累，藻類生物質(zhì)大大增加。
32.權(quán)利要求27的方法，其中所述藻類在氮限制培養(yǎng)基(例如，約1.5-15mgN/L)或含有為藻類產(chǎn)物合成優(yōu)化的氮水平的培養(yǎng)基中培養(yǎng)。
33.權(quán)利要求27的方法，其中所述植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑包括油刺激因子。
34.權(quán)利要求33的方法，其中所述油刺激因子包括腐殖酸鹽，如黃腐酸或腐殖酸。
35.權(quán)利要求27的方法，其中所述藻類在生物反應(yīng)器中培養(yǎng)。
36.權(quán)利要求35的方法，其中所述生物反應(yīng)器適合滅菌。
37.權(quán)利要求35的方法，其中所述生物反應(yīng)器適應(yīng)于藻類產(chǎn)品的最佳生產(chǎn)。
38.權(quán)利要求27的方法，其中所述藻類產(chǎn)品是油或脂質(zhì)。
39.權(quán)利要求38的方法，其中所述藻類產(chǎn)品包括0mega-3、0mega-6和/或Omega-9。
全文摘要
本發(fā)明提供了通過(guò)使用植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑(如生長(zhǎng)激素、吲哚乙酸等等)和激素模擬物(苯氧乙酸化合物等等)提高自養(yǎng)、異養(yǎng)或光異養(yǎng)地生長(zhǎng)的藻類產(chǎn)生生物質(zhì)的方法。植物調(diào)節(jié)劑或其模擬物可進(jìn)一步提高藻類培養(yǎng)物或收獲的生物質(zhì)中所期望的增值產(chǎn)品(諸如，生物柴油或淀粉)的比例。
文檔編號(hào)A01H13/00GK102281756SQ201080004502
公開(kāi)日2011年12月14日 申請(qǐng)日期2010年1月8日 優(yōu)先權(quán)日2009年1月13日
發(fā)明者B·柯特克, M·S·布里爾, R·E·布里爾, W·麥卡費(fèi) 申請(qǐng)人:α-J研究有限合伙公司