專利名稱：一種蟹爪蘭種苗的快速繁殖方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種蟹爪蘭花卉種苗的快速繁殖方法，屬于生物技術領域。
背景技術：
蟹爪蘭為仙人掌科蟹爪蘭屬肉質(zhì)多漿植物，附生類型，原產(chǎn)于巴西東部熱帶雨林 中。嫩綠色，新出莖節(jié)帶紅色，主莖圓，易木質(zhì)化，植株分枝多并向四周擴展，外形酷似蟹爪， 葉狀莖扁平多節(jié)，肥厚，卵圓形，先端截形，邊緣具粗鋸齒?；ㄖ谇o的頂端，花被開張反 卷，花色有淡紫、黃、紅、純白、粉紅、橙和雙色等。常見栽培品種有大紅、粉紅、杏黃和純白 色。其花色鮮艷、花朵密集、花形優(yōu)美。蟹爪蘭開花正逢圣誕節(jié)、元旦節(jié)，株型垂掛，花色鮮 艷可愛，適合于窗臺、門庭入口處和展覽大廳裝飾，是一種深受人們喜愛的盆栽花卉。蟹爪蘭常通過扦插或嫁接繁殖。但扦插或嫁接繁殖速度較慢，對母本材料要求高， 用量大，還受到季節(jié)的限制，難以進行規(guī)?；藴驶a(chǎn)和優(yōu)良品種的大面積推廣。此外， 目前應用的繁殖方法生產(chǎn)成本較高、培養(yǎng)周期長，難于將篩選的優(yōu)良性狀固定下來。因此， 需要尋找一種新的成本低、時間短、成活率高，且能夠將優(yōu)良性狀固定下來的無性繁殖方法 來擴大蟹爪蘭繁殖量，進行蟹爪蘭種苗的工廠化生產(chǎn)，以滿足市場需求。

發(fā)明內(nèi)容
針對現(xiàn)有蟹爪蘭種苗繁殖技術存在的上述缺陷或不足，本發(fā)明的目的在于提供一 種蟹爪蘭種苗的快速繁殖方法，以提高增殖率和生根率，同時將優(yōu)良性狀的種苗固定下來， 滿足優(yōu)質(zhì)種苗的大規(guī)模生產(chǎn)需要。本發(fā)明提供的蟹爪蘭種苗的快速繁殖方法經(jīng)過下列步驟A、將選出并經(jīng)消毒滅菌處理的蟹爪蘭外植體接入下列培養(yǎng)基中MS基本培養(yǎng)液6-節(jié)胺基嘌呤 6-BA 1. 0 2. Omg/L萘乙酸NAA0. 05mg/L蔗糖30000mg/L瓊脂6500mg/LPH5. 8 6.0在光照強度為1500 20001x，溫度為25士2°C，光照時間為10 12h/d的條件下， 同步進行誘導和增殖培養(yǎng)12 15天，更新相同培養(yǎng)基，并在相同培養(yǎng)條件下繼續(xù)培養(yǎng)至外 植體萌發(fā)分化出0. 5 Icm的幼芽，切下幼芽；B、將A步驟切下的幼芽轉接到新的與A步驟相同的培養(yǎng)基中，并在與A步驟相同 的培養(yǎng)條件下進行繼代培養(yǎng)，每25 30d繼代轉接一次，如此繼代培養(yǎng)至增殖倍數(shù)為3 4，得增殖的植株；C、取B步驟繼代培養(yǎng)出的長度為2 3cm的健壯植株接種到下列培養(yǎng)基中1/2MS基本培養(yǎng)液
萘乙酸NAA吲哚乙酸IAA
0. lmg/L 30000mg/L 6500mg/L 5· 8 6· 0
0· 3 0· 5mg/L蔗糖瓊脂pH在光照強度為1500 20001x，溫度為25士2°C，光照時間為10 12h/d的條件下， 生根培養(yǎng)至植株基部長出3 5條細根；D、取C步驟的健壯生根植株于室外散射光下進行常規(guī)煉苗6 8d，取出煉苗，按常 規(guī)洗凈苗上的培養(yǎng)基，放入質(zhì)量濃度為0. 1 0. 2%的多菌靈溶液中消毒1 2min后，移 栽至裝有下列質(zhì)量比基質(zhì)的育苗袋中腐植土 紅土 珍珠巖=1.5 1 0. 5，在常規(guī)澆 水、施肥管理條件下，生長40d后，即得移栽苗。所述A步驟的外植體選擇是選擇生長旺盛的蟹爪蘭幼嫩葉狀莖段，切取頂部3 4cm長的初生莖段作為外植體。所述A步驟的外植體消毒滅菌處理是將切下的外植體先用自來水沖洗lOmin，后 用常規(guī)洗衣粉水漂洗5min，在無菌超凈臺中將外植體放入質(zhì)量濃度為70 75%的乙醇溶 液中浸泡10s，用無菌水漂洗2次，再在質(zhì)量濃度為0. 的升汞中浸泡15min，在質(zhì)量濃度 為1. 5 2%的次氯酸鈉加適量吐溫的溶液中浸泡lOmin，最后用無菌水漂洗4 5次，得 消毒滅菌處理的外植體。本發(fā)明具有下列優(yōu)點和效果1、用組織培養(yǎng)技術在培養(yǎng)室內(nèi)即可實現(xiàn)周年生產(chǎn)，既節(jié)約了土地資源，又提高了 經(jīng)濟效益，克服了種苗無法周年進行生產(chǎn)的難點。2、繁殖速度快，25 30天為一個周期，繁殖倍數(shù)可達3 4。3、解決了常規(guī)繁育體系生產(chǎn)的種苗親本來源復雜，種苗質(zhì)量不穩(wěn)定的難題，通過 本發(fā)明，使種苗性狀穩(wěn)定，種苗來源單一，易于標準化、工廠化操作，有效地提高了種苗質(zhì) 量，可為市場提供統(tǒng)一標準的優(yōu)良種苗。4、本發(fā)明在外植體的選擇方面，選擇優(yōu)良株系，通過本發(fā)明中的快速繁殖方法將 蟹爪蘭品種的優(yōu)良種性快速地固定并保持下來，有效縮短了繁育周期。5、對整個蟹爪蘭種苗生產(chǎn)技術流程中的關鍵環(huán)節(jié)進行優(yōu)化整合，對誘導培養(yǎng)基進 行調(diào)配，同步進行芽誘導和增殖培養(yǎng)，簡化了組培技術的培養(yǎng)程序，只需兩種培養(yǎng)基配方， 不經(jīng)過愈傷組織的形成，直接長成新芽，減少不定芽發(fā)生變異的機率，可有效控制變異株的 產(chǎn)生，利于安排生產(chǎn)計劃。6、無菌生根苗直接移栽進入育苗袋中，省去了組培苗營養(yǎng)缽移栽的環(huán)節(jié)，移栽成 活的種苗便于運輸，摘去育苗袋后直接栽種。
具體實施例方式為了更好地說明本發(fā)明，下面給出本發(fā)明的實施例，但本發(fā)明的內(nèi)容并不僅限于 此。實施例11、外植體選擇開花時，選擇花多且株型優(yōu)美，枝條硬，無病蟲害，無畸型的植株做好標記，標記的植株作為備用的外植體植株；晴天上午，選擇生長旺盛的蟹爪蘭幼嫩葉狀莖 段，用手術刀切取頂部長約3 4cm的初生莖段；2、將1步驟的初生莖段先在自來水下沖洗lOmin，后用常規(guī)洗衣粉水漂洗5min，在 無菌超凈臺中將莖段放入質(zhì)量濃度為70 %的乙醇溶液中浸泡10s，用無菌水漂洗2遍，再在 質(zhì)量濃度為0. 的升汞中浸泡15min，又在質(zhì)量濃度為1. 5%的次氯酸鈉加適量吐溫的溶 液中浸泡lOmin，最后用無菌水漂洗4遍，在浸泡過程中充分搖動器皿；3、芽誘導和增殖同步培養(yǎng)將經(jīng)過2步驟消毒滅菌的莖段作為外植體，并切成 0. 5 Icm長，接入下列誘導和增殖培養(yǎng)基中MS基本培養(yǎng)液6-芐胺基嘌呤(6_BA) 2mg/L萘乙酸(NAA)0. 05mg/L蔗糖30000mg/L瓊脂6500mg/LPH5. 8在光照強度15001x，溫度為25士2°C，光照時間為12h/d條件下，同步進行芽誘導 和增殖培養(yǎng)12天，把無污染的外植體及時轉入更新的相同培養(yǎng)基中，以減少外植體的褐 化，并在相同培養(yǎng)條件下繼續(xù)培養(yǎng)25d，在外植體上萌發(fā)分化出0. 5cm的幼芽，切下幼芽；4、繼代培養(yǎng)將3步驟切下的幼芽轉入新的與3步驟相同的誘導和增殖培養(yǎng)基中， 并在與3步驟相同的培養(yǎng)條件下進行繼代培養(yǎng)，且每25d繼代轉接一次，如此培養(yǎng)至增殖倍 數(shù)為4，使之達到生產(chǎn)所需的植株種源基數(shù)；5、生根培養(yǎng)取4步驟繼代培養(yǎng)得到的長度為2 3cm的健壯植株，接種到下列生 根培養(yǎng)基中1/2MS基本培養(yǎng)液萘乙酸(NAA)0. 3mg/L吲哚乙酸(IAA)0. lmg/L蔗糖30000mg/L瓊脂6500mg/LpH5. 8在光照強度為15001x，溫度為25士2°C，光照時間為12h/d條件下，進行生根培養(yǎng) 25d后，在植株基部長出3 5條細根，得生根苗，其生根率在95%以上；6、煉苗和移栽將5步驟的健壯生根苗放在室外散射光下鍛煉6d后，將練苗從瓶 內(nèi)取出，用清水洗凈苗上培養(yǎng)基，放入質(zhì)量濃度為0. 1 %的多菌靈溶液中消毒2min后，移栽 至裝有下列質(zhì)量比基質(zhì)的育苗袋中腐質(zhì)土 紅土 珍珠巖=1.5 1 0.5，育苗袋為直 徑5cm、高IOcm的透明塑料薄膜袋，按常規(guī)澆水、施肥管理，前期注意保濕和遮陰，以后逐漸 減少遮陰并適當控水，成活率可達90%以上，40d后，得移栽苗，即可移栽到花盆中。實施例21、外植體選擇開花時，選擇花多且株型優(yōu)美，枝條硬，無病蟲害，無畸型的植株做 好標記，標記的植株作為備用的外植體植株；晴天上午，選擇生長旺盛的蟹爪蘭幼嫩葉狀莖 段，用手術刀切取頂部長約3 4cm的初生莖段；
2、將1步驟的初生莖段先在自來水下沖洗lOmin，后用常規(guī)洗衣粉水漂洗5min，在 無菌超凈臺中將莖段放入質(zhì)量濃度為75 %的乙醇溶液中浸泡10s，用無菌水漂洗2遍，再在 質(zhì)量濃度為0. 的升汞中浸泡15min，又在質(zhì)量濃度為2%的次氯酸鈉加適量吐溫的溶液 中浸泡lOmin，最后用無菌水漂洗5遍，在浸泡過程中充分搖動器皿；3、芽誘導和增殖同步培養(yǎng)將經(jīng)過2步驟消毒滅菌的莖段作為外植體，并切成 0. 5 Icm長，接入下列誘導和增殖培養(yǎng)基中MS基本培養(yǎng)液6-芐胺基嘌呤(6-BA) lmg/L萘乙酸(NAA)0. 05mg/L蔗糖30000mg/L瓊脂6500mg/LPH6. O在光照強度20001x，溫度為25士2°C，光照時間為10h/d條件下，同步進行芽誘導 和增殖培養(yǎng)15天，把無污染的外植體及時轉入更新的相同培養(yǎng)基中，以減少外植體的褐 化，并在相同培養(yǎng)條件下繼續(xù)培養(yǎng)25d，在外植體上萌發(fā)分化出Icm的幼芽，切下幼芽；4、繼代培養(yǎng)將3步驟切下的幼芽轉入新的與3步驟相同的誘導和增殖培養(yǎng)基中， 并在與3步驟相同的培養(yǎng)條件下進行繼代培養(yǎng)，且每30d繼代轉接一次，如此培養(yǎng)至增殖倍 數(shù)為3，使之達到生產(chǎn)所需的植株種源基數(shù)；5、生根培養(yǎng)取4步驟繼代培養(yǎng)得到的長度為2 3cm的健壯植株，接種到下列生 根培養(yǎng)基中1/2MS基本培養(yǎng)液萘乙酸(NAA)0. 5mg/L吲哚乙酸(IAA)0. lmg/L蔗糖30000mg/L瓊脂6500mg/LpH6. O在光照強度為20001x，溫度為25士2°C，光照時間為10h/d條件下，進行生根培養(yǎng) 25d后，在植株基部長出3 5條細根，得生根苗，其生根率在90%以上；6、煉苗和移栽將5步驟的健壯生根苗放在室外散射光下鍛煉8d后，將練苗從瓶 內(nèi)取出，用清水洗凈苗上培養(yǎng)基，放入質(zhì)量濃度為0. 2%的多菌靈溶液中消毒Imin后，移栽 至裝有下列質(zhì)量比基質(zhì)的育苗袋中腐質(zhì)土 紅土 珍珠巖=1.5 1 0.5，育苗袋為直 徑7cm、高6cm的透明塑料薄膜袋，按常規(guī)澆水、施肥管理，前期注意保濕和遮陰，以后逐漸 減少遮陰并適當控水，成活率可達80%以上，40d后，得移栽苗，即可移栽到花盆中。
權利要求
一種蟹爪蘭種苗的快速繁殖方法，其特征在于經(jīng)過下列步驟A、將選出并經(jīng)消毒滅菌處理的蟹爪蘭外植體接入下列培養(yǎng)基中MS基本培養(yǎng)液6 芐胺基嘌呤6 BA1.0～2.0mg/L萘乙酸NAA 0.05mg/L蔗糖30000mg/L瓊脂6500mg/LPH 5.8～6.0在光照強度為1500～2000lx，溫度為25±2℃，光照時間為10～12h/d的條件下，同步進行誘導和增殖培養(yǎng)12～15天，更新相同培養(yǎng)基，并在相同培養(yǎng)條件下繼續(xù)培養(yǎng)至外植體萌發(fā)分化出0.5～1cm的幼芽，切下幼芽；B、將A步驟切下的幼芽轉接到新的與A步驟相同的培養(yǎng)基中，并在與A步驟相同的培養(yǎng)條件下進行繼代培養(yǎng)，每25～30d繼代轉接一次，如此繼代培養(yǎng)至增殖倍數(shù)為3～4，得增殖的植株；C、取B步驟繼代培養(yǎng)出的長度為2～3cm的健壯植株接種到下列培養(yǎng)基中1/2MS基本培養(yǎng)液萘乙酸NAA 0.3～0.5mg/L吲哚乙酸IAA 0.1mg/L蔗糖30000mg/L瓊脂6500mg/LpH 5.8～6.0在光照強度為1500～2000lx，溫度為25±2℃，光照時間為10～12h/d的條件下，生根培養(yǎng)至植株基部長出3 5條細根；D、取C步驟的健壯生根植株于室外散射光下進行常規(guī)煉苗6～8d，取出煉苗，按常規(guī)洗凈苗上的培養(yǎng)基，放入質(zhì)量濃度為0.1～0.2％的多菌靈溶液中消毒1～2min后，移栽至裝有下列質(zhì)量比基質(zhì)的育苗袋中腐植土∶紅土∶珍珠巖＝1.5∶1∶0.5，在常規(guī)澆水、施肥管理條件下，生長40d后，即得移栽苗。
全文摘要
本發(fā)明提供一種蟹爪蘭種苗的快速繁殖方法。它將選出并經(jīng)消毒滅菌處理的蟹爪蘭外植體接入誘導和增殖培養(yǎng)基中，同步進行誘導和增殖培養(yǎng)至外植體萌發(fā)分化出幼芽，再繼代培養(yǎng)至增殖倍數(shù)為3～4，轉接到生根培養(yǎng)基中，生根培養(yǎng)至植株基部長出3～5條細根，按常規(guī)進行煉苗后，移栽至腐植土、紅土和珍珠巖的混合基質(zhì)中，按常規(guī)澆水、施肥后，生長得蟹爪蘭種苗。本發(fā)明對整個蟹爪蘭種苗生產(chǎn)技術流程中的關鍵環(huán)節(jié)進行優(yōu)化整合，對誘導培養(yǎng)基進行調(diào)配，同步進行芽誘導和增殖培養(yǎng)，簡化了組培程序，縮短了繁育周期，只用兩種培養(yǎng)基，不經(jīng)過愈傷組織的形成，就直接長成新芽，減少不定芽發(fā)生變異的機率，有效控制變異株的產(chǎn)生，并能將蟹爪蘭品種的優(yōu)良種性快速地固定并保持下來，提高了種苗質(zhì)量，解決了常規(guī)繁育體系生產(chǎn)的種苗親本來源復雜，種苗質(zhì)量不穩(wěn)定的難題。
文檔編號A01H4/00GK101940160SQ201010269109
公開日2011年1月12日 申請日期2010年9月1日 優(yōu)先權日2010年9月1日
發(fā)明者單芹麗, 李金澤, 楊春梅, 汪國鮮, 趙培飛, 龍江 申請人:云南省農(nóng)業(yè)科學院花卉研究所