專利名稱：木薯渣飼料資源化技術(shù)的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本技術(shù)適用于利用微生物發(fā)酵技術(shù)以木薯渣作為發(fā)酵基質(zhì)，在多種微生物的綜合 作用下改變木薯渣的物理，化學(xué)性質(zhì)，使其變?yōu)閯游锶菀孜蘸屠玫母叩鞍罪暳系墓I(yè) 化生產(chǎn)領(lǐng)域
背景技術(shù)：
木薯加工后的不可利用部分稱為木薯渣，其主要成分是纖維素。未經(jīng)處理的木薯 渣由于難以被畜禽直接利用而被廢棄。近年來隨著加工量的增加，木薯渣已成為污染環(huán)境 的源頭之一。環(huán)保政策已列入〃國家十一五規(guī)劃〃中。

發(fā)明內(nèi)容
利用從細(xì)菌和真菌中篩選出能利用降解木薯渣中纖維素的菌株；經(jīng)過物理和化學(xué) 等多種方式進(jìn)行誘變，篩選出纖維素酶和菌體蛋白產(chǎn)量高的菌株作為生產(chǎn)菌種。通過對液 體發(fā)酵培養(yǎng)基和種曲發(fā)酵培養(yǎng)基及固體發(fā)酵培養(yǎng)基的優(yōu)化和發(fā)酵條件的研究確定液體發(fā) 酵培養(yǎng)基中各成分的添加量、接種量、接種時(shí)間、發(fā)酵溫度、發(fā)酵時(shí)間、PH值、通氣量等最佳 發(fā)酵條件；確定種曲發(fā)酵培養(yǎng)基中除木薯渣外的其他添加成分和添加量；確定混合發(fā)酵接種種類、接種量、接種時(shí)間、發(fā)酵溫度、發(fā)酵時(shí)間、等最佳發(fā)酵條 件；
具體實(shí)施例方式本工藝流程包括凍存管制備、平板分離、F1斜面種子、種子瓶、發(fā)酵瓶、效價(jià)驗(yàn)證、 生產(chǎn)搖瓶、搖瓶種子、一級種子(液體種子)制備、固體罐種子制備、種曲制備、固體混菌發(fā)酵。凍存管制備也稱“甘油管法”，用于菌種的保存。平板分離本工藝所用菌種為分解纖維素細(xì)菌和真菌，由于微生物在儲存和發(fā)酵生產(chǎn)過程中 容易退化，因此必須對其進(jìn)行分離和鑒定，一般用CMC培養(yǎng)基進(jìn)行選擇鑒定；分離出纖維素 分解能力較大的菌株進(jìn)行純培養(yǎng)。F1斜面種子從平板分離出來的種子用“斜面試管法”進(jìn)行保存，稱為第一代種子也稱F1斜面種 子，一般用PDA斜面培養(yǎng)基培養(yǎng)。種子瓶也稱液體搖瓶種子，作活化、擴(kuò)大培養(yǎng)用，為第二代種子。培養(yǎng)基為PDA液體培養(yǎng)基。發(fā)酵瓶種子摸擬發(fā)酵擴(kuò)大生產(chǎn)，用于效價(jià)驗(yàn)證，培養(yǎng)基為PDA液體培養(yǎng)基。效價(jià)驗(yàn)證以FPA酶為衡量標(biāo)準(zhǔn)，挑選出產(chǎn)酶量高的F1斜面種子作為出發(fā)菌株，用于發(fā)酵生 產(chǎn)，培養(yǎng)基為PDA液體培養(yǎng)基。生產(chǎn)搖瓶、搖瓶種子1號種子將4°C凍存的菌種轉(zhuǎn)接于新鮮的PDA斜面培養(yǎng)基上，30°C恒溫培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng) 4-7d.取此斜面，加入無菌水，用接種環(huán)刮下孢子，經(jīng)4層紗布濾得菌液，再倒入裝有玻璃珠 和無菌水的已滅菌三角瓶中，于180r/min振蕩至鏡檢為分散孢子，即得到單孢子懸液。血 球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，用無菌水調(diào)節(jié)孢子懸液的孢子量IO7個(gè)/ml。取單孢子懸液加入到種子培 養(yǎng)基中(PDA液體培養(yǎng)基)，使種子培養(yǎng)基中孢子的量為IO6個(gè)/ml，于180r/min，3(TC恒溫 搖床中培養(yǎng)30h即得搖瓶種子。2號種子方法基本同上，將4°C凍存的菌種轉(zhuǎn)接于新鮮的PDA斜面培養(yǎng)基上，30°C恒溫培養(yǎng) 箱中靜置培養(yǎng)3d，菌絲灰白，菌落呈淡綠色即可。取培養(yǎng)好的斜面種子，加5ml無菌水，振 蕩，將孢子洗脫至無菌三角瓶中，稀釋至孢子濃度為104個(gè)/ml，于180r/min，30°C恒溫?fù)u床 中培養(yǎng)Mh即得搖瓶種子。3號種子無菌操作向60mlPDA液體培養(yǎng)基中接入一環(huán)斜面種子，于30°C，220r/min恒溫?fù)u 床中培養(yǎng)Mh即得搖瓶種子。4號種子無菌操作向60mlPDA液體培養(yǎng)基中接入一環(huán)斜面種子，于30°C，220r/min恒溫?fù)u 床中培養(yǎng)18h即得搖瓶種子。液體種子制備1 1號種子一級種子罐發(fā)酵工藝流程1. 1發(fā)酵罐罐體的清洗用自來水充分沖洗罐壁或往罐體內(nèi)注滿水，打開攪拌器，攪拌10-20分鐘。清洗干 凈后排空罐內(nèi)的水用75%的酒精擦洗罐和放料閥門，注意死角的清洗清洗完畢，安裝好罐體，檢查發(fā)酵罐的密封性能是否完好1. 2培養(yǎng)基的添加將配制好的培養(yǎng)基8-10L加入罐內(nèi)培養(yǎng)基配方大豆蛋白胨2g葡萄糖20g磷酸氫二鉀Ig硝酸銨Ig磷酸二氫鉀0. 46g硫酸鎂0. 5g水1000mlpH自然
1. 3 滅菌1. 3. 1管道滅菌1.3. 1. 1罐體管道滅菌打開管道蒸汽進(jìn)氣閥，關(guān)閉罐體管道進(jìn)氣閥，打開管道出氣閥，排空管道內(nèi)冷凝 水，待蒸汽均勻排出后調(diào)大進(jìn)氣閥，調(diào)小出氣閥，滅菌30min1.3.2夾套預(yù)熱打開夾套出水閥，打開夾套蒸汽閥，通入少量蒸汽，排空夾套內(nèi)的水關(guān)閉夾套出水閥，開大夾套蒸汽閥，預(yù)熱夾套至90 0C1.3.3培養(yǎng)基滅菌關(guān)閉夾套蒸汽閥，打開罐體蒸汽閥，通入蒸汽，待罐內(nèi)溫度升至121°C后，保持罐內(nèi) 溫度121°C，滅菌30分鐘1.4 接種滅菌30分鐘后，關(guān)閉罐體蒸汽閥，待罐體溫度冷卻至30°C左右，接入三角瓶種子1. 4. 1三角瓶種子的接入點(diǎn)燃酒精環(huán)，迅速擰開接種口，在酒精環(huán)的火焰下，打開三角瓶塞，接入三角瓶種 子(1%)1. 5發(fā)酵生產(chǎn)打開夾套排水閥和蒸汽閥，控制夾套內(nèi)蒸汽流量，使罐體溫度維持在30 0C左右打開攪拌槳，控制攪拌速度50轉(zhuǎn)/分打開壓縮空氣通人無菌空氣，空氣流量控制在1-1. 5VVm之間發(fā)酵生產(chǎn)30-—36小時(shí)2 2號種子一級種子罐發(fā)酵工藝流程2. 1發(fā)酵罐罐體的清洗用自來水充分沖洗罐壁或往罐體內(nèi)注滿水，打開攪拌器，攪拌10-20分鐘。清洗干 凈后排空罐內(nèi)的水用75%的酒精擦洗罐和放料閥門，注意死角的清洗清洗完畢，安裝好罐體，檢查發(fā)酵罐的密封性能是否完好2. 2培養(yǎng)基的添加將配制好的培養(yǎng)基8-10L加入罐內(nèi)培養(yǎng)基配方大豆蛋白胨2g葡萄糖20g磷酸氫二鉀Ig硝酸銨lg磷酸二氫鉀0. 46g 硫酸鎂0. 5g水1000ml pH自然2. 3 滅菌2. 3. 1管道滅菌2. 3. 1. 1罐體管道滅菌打開管道蒸汽進(jìn)氣閥，關(guān)閉罐體管道進(jìn)氣閥，打開管道出氣閥，排空管道內(nèi)冷凝 水，待蒸汽均勻排出后調(diào)大進(jìn)氣閥，調(diào)小出氣閥，滅菌30min
2. 3. 2夾套預(yù)熱打開夾套出水閥，打開夾套蒸汽閥，通入少量蒸汽，排空夾套內(nèi)的水關(guān)閉夾套出水閥，開大夾套蒸汽閥，預(yù)熱夾套至90 0C2.3.3培養(yǎng)基滅菌關(guān)閉夾套蒸汽閥，打開罐體蒸汽閥，通入蒸汽，待罐內(nèi)溫度升至121°C后，保持罐內(nèi) 溫度121°C，滅菌30分鐘2.4 接種滅菌30分鐘后，關(guān)閉罐體蒸汽閥，待罐體溫度冷卻至30°C左右，接入三角瓶種子2. 4. 1三角瓶種子的接入點(diǎn)燃酒精環(huán)，迅速擰開接種口，在酒精環(huán)的火焰下，打開三角瓶塞，接入三角瓶種 子(1%)2. 5發(fā)酵生產(chǎn)打開夾套排水閥和蒸汽閥，控制夾套內(nèi)蒸汽流量，使罐體溫度保持在30 0C左右打開攪拌槳，控制攪拌速度100轉(zhuǎn)/分打開壓縮空氣通人無菌空氣，空氣流量控制在1-1. 5VVm之間發(fā)酵生產(chǎn)M—30小時(shí)3 3號種子一級種子罐發(fā)酵工藝流程3. 1發(fā)酵罐罐體的清洗用自來水充分沖洗罐壁或往罐體內(nèi)注滿水，打開攪拌器，攪拌10-20分鐘。清洗干 凈后排空罐內(nèi)的水用75%的酒精擦洗罐和放料閥門，注意死角的清洗清洗完畢，安裝好罐體，檢查發(fā)酵罐的密封性能是否完好3. 2培養(yǎng)基的添加將配制好的培養(yǎng)基8-10L加入罐內(nèi)培養(yǎng)基配方大豆蛋白胨2g葡萄糖20g磷酸氫二鉀Ig硝酸銨lg磷酸二氫鉀0. 46g 硫酸鎂0. 5g水1000ml pH 自然3. 3 滅菌3.3.1管道滅菌3. 3. 1. 1罐體管道滅菌打開管道蒸汽進(jìn)氣閥，關(guān)閉罐體管道進(jìn)氣閥，打開管道出氣閥，排空管道內(nèi)冷凝 水，待蒸汽均勻排出后調(diào)大進(jìn)氣閥，調(diào)小出氣閥，滅菌30min3. 3. 2夾套預(yù)熱打開夾套出水閥，打開夾套蒸汽閥，通入少量蒸汽，排空夾套內(nèi)的水關(guān)閉夾套出水閥，開大夾套蒸汽閥，預(yù)熱夾套至90 0C3.3.3培養(yǎng)基滅菌關(guān)閉夾套蒸汽閥，打開罐體蒸汽閥，通入蒸汽，待罐內(nèi)溫度升至121°C后，保持罐內(nèi)溫度121°C，滅菌30分鐘3.4 接種滅菌30分鐘后，關(guān)閉罐體蒸汽閥，待罐體溫度冷卻至30°C左右，接入三角瓶種子3.4. 1三角瓶種子的接入點(diǎn)燃酒精環(huán)，迅速擰開接種口，在酒精環(huán)的火焰下，打開三角瓶塞，接入三角瓶種 子(1%)3. 5發(fā)酵生產(chǎn)打開夾套排水閥和蒸汽閥，控制夾套內(nèi)蒸汽流量，使罐體溫度保持在30 V左右打開攪拌槳，控制攪拌速度150轉(zhuǎn)/分打開壓縮空氣通人無菌空氣，空氣流量控制在1-1. 5VVm之間發(fā)酵生產(chǎn)20—M小時(shí)4 4號種子一級種子罐發(fā)酵工藝流程4. 1發(fā)酵罐罐體的清洗用自來水充分沖洗罐壁或往罐體內(nèi)注滿水，打開攪拌器，攪拌10-20分鐘；清洗干 凈后排空罐內(nèi)的水用75%的酒精擦洗罐和放料閥門，注意死角的清洗清洗完畢，安裝好罐體，檢查發(fā)酵罐的密封性能是否完好4. 2培養(yǎng)基的添加將配制好的培養(yǎng)基IOL加入罐內(nèi)培養(yǎng)基配方
0128]葡萄糖:10g酵母汁= IOg0129]磷酸氫二鉀:0. 5g氯化鈉0. 2g0130]碳酸鈣:2g硫酸鎂:0. 2g0131]水1000mlPH自然4. 3 滅菌4. 3.1管道滅菌4. 3. 1. 1罐體管道滅菌打開管道蒸汽進(jìn)氣閥，關(guān)閉罐體管道進(jìn)氣閥，打開管道出氣閥，排空管道內(nèi)冷凝 水，待蒸汽均勻排出后調(diào)大進(jìn)氣閥，調(diào)小出氣閥，滅菌30min4. 3. 2夾套預(yù)熱打開夾套出水閥，打開夾套蒸汽閥，通入少量蒸汽，排空夾套內(nèi)的水關(guān)閉夾套出水閥，開大夾套蒸汽閥，預(yù)熱夾套至90 0C4.3.3培養(yǎng)基滅菌關(guān)閉夾套蒸汽閥，打開罐體蒸汽閥，通入蒸汽，待罐內(nèi)溫度升至121°C后，保持罐內(nèi) 溫度121°C，滅菌30分鐘4.4 接種滅菌30分鐘后，關(guān)閉罐體蒸汽閥，待罐體溫度冷卻至30°C左右，接入三角瓶種子4.4. 1三角瓶種子的接入點(diǎn)燃酒精環(huán)，迅速擰開接種口，在酒精環(huán)的火焰下，打開三角瓶塞，接入三角瓶種子(1%)4. 5發(fā)酵生產(chǎn)打開夾套排水閥和蒸汽閥，控制夾套內(nèi)蒸汽流量，使罐體溫度保持在30 V左右打開攪拌槳，控制攪拌速度150轉(zhuǎn)/分打開壓縮空氣通人無菌空氣，空氣流量控制在1-1. 5VVm之間發(fā)酵生產(chǎn)18—20小時(shí)5 4號種子二級種子罐發(fā)酵工藝流程5. 1發(fā)酵罐罐體的清洗用自來水充分沖洗罐壁或往罐體內(nèi)注滿水，打開攪拌器，攪拌10-20分鐘；清洗干 凈后排空罐內(nèi)的水用75%的酒精擦洗罐和放料閥門，注意死角的清洗清洗完畢，安裝好罐體，檢查發(fā)酵罐的密封性能是否完好5. 2培養(yǎng)基的添加將配制好的培養(yǎng)基50-60L加入罐內(nèi)培養(yǎng)基配方
0158]葡萄糖:10g酵母汁= IOg0159]磷酸氫二鉀:0. 5g氯化鈉0. 2g0160]碳酸鈣:2g硫酸鎂:0. 2g0161]水1000mlPH自然5. 3 滅菌5.3.1管道滅菌5. 3. 1. 1罐體管道滅菌打開管道蒸汽進(jìn)氣閥，關(guān)閉罐體管道進(jìn)氣閥，打開管道出氣閥，排空管道內(nèi)冷凝 水，待蒸汽均勻排出后調(diào)大進(jìn)氣閥，調(diào)小出氣閥，滅菌30min5. 3. 1.2移種管滅菌打開管道蒸汽進(jìn)氣閥，在保證蒸汽不進(jìn)入一級種子罐的前提下調(diào)節(jié)一級種子罐罐 底三通閥門，打開移種管出氣閥，排空管道內(nèi)冷凝水，待蒸汽均勻排出后調(diào)大進(jìn)氣閥，調(diào)小 出氣閥，滅菌30min5. 3. 2夾套預(yù)熱打開夾套出水閥，打開夾套蒸汽閥，通入少量蒸汽，排空夾套內(nèi)的水關(guān)閉夾套出水閥，開大夾套蒸汽閥，預(yù)熱夾套至90 0C5.3.3培養(yǎng)基滅菌關(guān)閉移種管出氣閥，關(guān)閉夾套蒸汽閥，打開罐體蒸汽閥，通入蒸汽，待罐內(nèi)溫度升 至121°C后，保持罐內(nèi)溫度121°C，滅菌30min，5.4 移種滅菌30分鐘后，關(guān)閉罐體蒸汽閥，打開循環(huán)水，待罐體溫度冷卻至30°C左右，打開 壓縮空氣，調(diào)節(jié)罐壓，使罐壓小于一級種子罐壓力，打開一級種子罐出料閥門，打開二級種 子罐進(jìn)料閥門，利用壓力差將種子移入，接種量5. 5發(fā)酵生產(chǎn)
打開夾套排水閥和蒸汽閥，控制夾套內(nèi)蒸汽流量，使罐體溫度保持在30 V左右打開攪拌槳，控制攪拌速度200轉(zhuǎn)/分打開壓縮空氣通人無菌空氣，空氣流最控制在1-1. 5VVm之間發(fā)酵生產(chǎn)20-24小時(shí)左右固體種子制備1 1號種子固體罐發(fā)酵工藝流程1. 1發(fā)酵罐罐體的清洗用自來水充分沖洗罐壁或往罐體內(nèi)注滿水，打開攪拌槳，直到清洗干凈為止。清洗 干凈后排空罐內(nèi)的水1.2固體物料的添加將粉碎好的固體物料和水按如下比例加入罐內(nèi)麩皮80%木薯豆粕10%料水 1 0. 81.3物料處理方法將豆粕和水加入罐內(nèi)，浸泡30分鐘-1小時(shí)，攪拌要均勻一致，然后加入麩皮和木 薯渣攪拌均勻，一般攪拌時(shí)間為40分鐘，攪拌均勻后關(guān)閉進(jìn)料口1.4物料蒸煮1.4. 1夾套預(yù)熱打開夾套出水閥，打開夾套蒸汽閥，通入少量蒸汽，排空夾套內(nèi)的水關(guān)閉夾套出水閥，開大夾套蒸汽閥，預(yù)熱夾套至90 0C1.4. 2物料蒸煮和滅菌關(guān)閉夾套蒸汽閥，打開罐體蒸汽閥，通入蒸汽加壓蒸煮，一般待壓力為0. 15MP、溫度為121°C左右，開始計(jì)時(shí)蒸煮30分鐘1.5管道滅菌包括接種管道和營養(yǎng)液添加管道滅菌打開管道蒸汽進(jìn)氣閥，關(guān)閉罐體管道進(jìn)氣閥，打開管道出氣閥，排空管道內(nèi)冷凝 水，待蒸汽均勻排出后調(diào)大進(jìn)氣閥，調(diào)小出氣閥，滅菌30min1.6 接種物料蒸煮好后，打開壓縮空氣，打開夾套循環(huán)水，迅速冷卻至室溫打開液體罐出料閥，利用壓力差將液體種子吸入固體罐，接種量為4%1. 7營養(yǎng)液添加1. 7. 1營養(yǎng)液配制按如下配方配制營養(yǎng)液硫酸銨3g磷酸二氫鉀3g七水硫酸鎂3g 氯化鈣1. 5g硫酸銅0. 5g氯化鈉0. 5g葡萄糖20g維生素0. 5g1.7.2營養(yǎng)液滅菌
將上述營養(yǎng)液按固體干物料配置好，裝入補(bǔ)水罐115°C滅菌10-15分鐘待其冷卻后，打開補(bǔ)水罐出料閥，利用壓力差將營養(yǎng)液吸入固體罐1.8發(fā)酵生產(chǎn)打開夾套排水閥和蒸汽閥，控制夾套內(nèi)蒸汽流量，使罐體溫度保持在30 0C左右打開攪拌槳，控制攪拌速度20轉(zhuǎn)/分(間歇攪拌)打開壓縮空氣通人無菌空氣，空氣流量控制在10-15m3/h發(fā)酵生產(chǎn)30小時(shí)左右2 2號種子固體罐發(fā)酵工藝流程2. 1發(fā)酵罐罐體的清洗用自來水充分沖洗罐壁或往罐體內(nèi)注滿水，打開攪拌槳，攪拌10-20分鐘。清洗干 凈后排空罐內(nèi)的水2.2固體物料的添加將粉碎好的固體物料和水按如下比例加入罐內(nèi)麩皮80% 木薯渣10%豆粕10%料水 1 0. 92. 3物料處理方法將豆粕和水加入罐內(nèi)，浸泡30分鐘-1小時(shí)，攪拌要均勻一致，然后加入麩皮和木 薯渣攪拌均勻，一般攪拌時(shí)間為40分鐘，攪拌均勻后關(guān)閉進(jìn)料口2. 4物料蒸煮2. 4. 1夾套預(yù)熱打開夾套出水閥，打開夾套蒸汽閥，通入少量蒸汽，排空夾套內(nèi)的水
關(guān)閉夾套出水閥，開大夾套蒸汽閥，預(yù)熱夾套至90 0C2. 4. 2物料蒸煮和滅菌關(guān)閉夾套蒸汽閥，打開罐體蒸汽閥，通入蒸汽加壓蒸煮，一般待壓力為0. 15MP、溫度為121°C左右，開始計(jì)時(shí)蒸煮30分鐘2. 5管道滅菌包括接種管道和營養(yǎng)液添加管道滅菌打開管道蒸汽進(jìn)氣閥，關(guān)閉罐體管道進(jìn)氣閥，打開管道出氣閥，排空管道內(nèi)冷凝 水，待蒸汽均勻排出后調(diào)大進(jìn)氣閥，調(diào)小出氣閥，滅菌30min2.6 接種物料蒸煮好后，打開壓縮空氣，打開夾套循環(huán)水，迅速冷卻至室溫打開液體罐出料閥，利用壓力差將液體種子吸入固體罐，接種量為3%2. 7營養(yǎng)液添加2. 7. 1營養(yǎng)液配制按如下配方配制營養(yǎng)液硫酸銨3g磷酸二氫鉀3g七水硫酸鎂3g 氯化鈣1. 5g硫酸銅0. 5g 氯化鈉0. 5g葡萄糖20g 維生素0. 5g
2. 7. 2營養(yǎng)液滅菌將上述營養(yǎng)液按固體物料配置好，裝入補(bǔ)水罐115°C滅菌10-15分鐘待其冷卻后，打開補(bǔ)水罐出料閥，利用壓力差將營養(yǎng)液吸入固體罐2.8發(fā)酵生產(chǎn)打開夾套排水閥和蒸汽閥，控制夾套內(nèi)蒸汽流量，使罐體溫度保持在30 0C左右打開攪拌槳，控制攪拌速度20轉(zhuǎn)/分(間歇攪拌)打開壓縮空氣通人無菌空氣，空氣流量控制在10-15m3/h發(fā)酵生產(chǎn)30小時(shí)左右3 3號種子固體罐發(fā)酵工藝流程3. 1發(fā)酵罐罐體的清洗用自來水充分沖洗罐壁或往罐體內(nèi)注滿水，打開攪拌槳，直到清洗干凈為止。清洗 干凈后排空罐內(nèi)的水3.2固體物料的添加將粉碎好的固體物料和水按如下比例加入罐內(nèi)麩皮80% 木薯渣10%豆粕10%料水 1 0. 83. 3物料處理方法將豆粕和水加入罐內(nèi)，浸泡30分鐘-1小時(shí)，攪拌要均勻一致，然后加入麩皮和木 薯渣攪拌均勻，一般攪拌時(shí)間為40分鐘，攪拌均勻后關(guān)閉進(jìn)料口3. 4物料蒸煮3. 4. 1夾套預(yù)熱打開夾套出水閥，打開夾套蒸汽閥，通入少量蒸汽，排空夾套內(nèi)的水關(guān)閉夾套出水閥，開大夾套蒸汽閥，預(yù)熱夾套至90 0C3. 4. 2物料蒸煮和滅菌關(guān)閉夾套蒸汽閥，打開罐體蒸汽閥，通入蒸汽加壓蒸煮，一般待壓力為0. 15MP、溫度為121°C左右，開始計(jì)時(shí)蒸煮30分鐘3. 5管道滅菌包括接種管道和營養(yǎng)液添加管道滅菌打開管道蒸汽進(jìn)氣閥，關(guān)閉罐體管道進(jìn)氣閥，打開管道出氣閥，排空管道內(nèi)冷凝 水，待蒸汽均勻排出后調(diào)大進(jìn)氣閥，調(diào)小出氣閥，滅菌30min3. 6 接種物料蒸煮好后，打開壓縮空氣，打開夾套循環(huán)水，迅速冷卻至室溫打開液體罐出料閥，利用壓力差將液體種子吸入固體罐，接種量為3%3. 7營養(yǎng)液添加3. 7. 1營養(yǎng)液配制按如下配方配制營養(yǎng)液硫酸銨3g磷酸二氫鉀3g七水硫酸鎂3g 氯化鈣1. 5g硫酸銅0. 5g 氯化鈉0. 5g
葡萄糖20g維生素0. 5g3. 7. 2營養(yǎng)液滅菌將上述營養(yǎng)液按固體干物料2%配置好，裝入補(bǔ)水罐115°C滅菌10—15分鐘待其冷卻后，打開補(bǔ)水罐出料閥，利用壓力差將營養(yǎng)液吸入固體罐3. 8發(fā)酵生產(chǎn)打開夾套排水閥和蒸汽閥，控制夾套內(nèi)蒸汽流量，使罐體溫度保持在30 0C左右打開攪拌槳，控制攪拌速度20轉(zhuǎn)/分(間歇攪拌)打開壓縮空氣通人無菌空氣，空氣流量控制在10-15m3/h發(fā)酵生產(chǎn)30小時(shí)左右種曲制備1 1號種子種曲生長工藝流程1. 1堆積培養(yǎng)將曲料以丘形堆積于規(guī)定的區(qū)域，此時(shí)品溫應(yīng)為30-31°C，保持室溫四_311每隔 2h記錄一次溫度，經(jīng)過18h左右品溫達(dá)35-36 °C1.2攤平，蓋濕草席每隔Ih記一次溫度繼續(xù)保溫培養(yǎng)約12h，品溫又達(dá)36°C左右。待曲料表面呈微白，并開始結(jié)塊時(shí)攤平曲料，使其松散。攤平厚度為50_80mm然后 每堆蓋滅菌草席，保濕(濕度為100% )1.3第二次翻曲攤曲后繼續(xù)保溫培養(yǎng)Mh，曲溫又升至36°C，曲料長滿白色菌絲，結(jié)塊良好，即可 進(jìn)行第二次翻曲，或根據(jù)情況進(jìn)行劃曲，用竹條將曲料劃成5cm碎塊翻曲后仍蓋好濕草席，每Ih記錄一次溫度；溫度過高應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況加大翻曲次 數(shù)降低室溫為25- °C1. 4灑水、保溫、保濕劃曲后，地面應(yīng)經(jīng)常灑冷水保持室內(nèi)濕度為100%，降低室溫使品溫保持在 34-36 0C，溫度過高應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況翻曲1. 5去草席自蓋草席后3 左右將草席去掉，曲溫上升緩和，停止向地面灑水，開排風(fēng)扇排 濕，保持室溫30°C左右，品溫35-36°C至種曲成熟自固體罐發(fā)酵30小時(shí)種曲入室至種曲成熟，整個(gè)培養(yǎng)時(shí)間共計(jì)60h。種曲制備過 程中應(yīng)每隔1- 記錄一次品溫、室溫及操作情況2 2號種子種曲生長工藝流程2.1堆積培養(yǎng)將曲料以丘形堆積于規(guī)定的區(qū)域，此時(shí)品溫應(yīng)為30-31°C，保持室溫四_311每隔 2h記錄一次溫度，經(jīng)過8h左右品溫達(dá)35-36 °C2. 2攤平，蓋濕草席每隔Ih記一次溫度
繼續(xù)保溫培養(yǎng)約6h，品溫又達(dá)36°C左右。待曲料表面呈微白，并開始結(jié)塊時(shí)攤平曲料，使其松散。攤平厚度為50_80mm然后 每堆蓋滅菌草席，保濕(濕度為100% )2. 3第二次翻曲攤曲后繼續(xù)保溫培10h，曲溫又升至36°C，曲料長滿白色菌絲，結(jié)塊良好，即可進(jìn) 行第二次翻曲，或根據(jù)情況進(jìn)行劃曲，用竹條將曲料劃成5cm碎塊翻曲后仍蓋好濕草席，每Ih記錄一次溫度；溫度過高應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況加大翻曲次 數(shù)降低室溫為25-28 °C2.4灑水、保溫、保濕劃曲后，地面應(yīng)經(jīng)常灑冷水保持室內(nèi)濕度，降低室溫使品溫保持在34-36°C，溫度 過高應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況翻曲，保證濕度為100%2. 5去草席自蓋草席后16h左右將草席去掉，曲溫上升緩和，停止向地面灑水，開排風(fēng)扇排 濕，保持室溫30°C左右，品溫35-36°C至種曲成熟自固體罐發(fā)酵30小時(shí)種曲入室至種曲成熟，整個(gè)培養(yǎng)時(shí)間共計(jì)30h。種曲制備過 程中應(yīng)每隔1-2h記錄一次品溫、室溫及操作情況3 3號種子種曲生長工藝流程3. 1堆積培養(yǎng)將曲料以丘形堆積于規(guī)定的區(qū)域，此時(shí)品溫應(yīng)為30-31°C，保持室溫四_311每隔 2h記錄一次溫度，經(jīng)過8h左右品溫達(dá)30-32 °C3. 2攤平，蓋濕草席每隔Ih記一次溫度 繼續(xù)保溫培養(yǎng)約12h，品溫又達(dá)32°C左右待曲料表面呈微白，并開始結(jié)塊時(shí)攤平曲料，使其松散。攤平厚度為50_80mm然后 每堆蓋滅菌草席，保濕(濕度為100% )3. 3第二次翻曲攤曲后繼續(xù)保溫培養(yǎng)16h，曲溫又升至32°C，曲料長滿白色菌絲，結(jié)塊良好，即可 進(jìn)行第二次翻曲，或根據(jù)情況進(jìn)行劃曲，用竹條將曲料劃成5cm碎塊翻曲后仍蓋好濕草席，每1h記錄一次溫度；溫度過高應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況加大翻曲次 數(shù)降低室溫為25-28 °C3. 4灑水、保溫、保濕劃曲后，地面應(yīng)經(jīng)常灑冷水保持室內(nèi)濕度，降低室溫使品溫保持在30-32°C，溫度 過高應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況翻曲，濕度為100%3. 5去草席自蓋草席后2 左右將草席去掉，曲溫上升緩和，停止向地面灑水，開排風(fēng)扇排 濕，保持室溫30°C左右，品溫30—32°C至種曲成熟自固體罐發(fā)酵30小時(shí)種曲入室至種曲成熟，整個(gè)培養(yǎng)時(shí)間共計(jì)42h。種曲制備過程中應(yīng)每隔1- 記錄一次品溫、室溫及操作情況種曲生長過程中的注意事項(xiàng)1.發(fā)酵房滅菌每批生產(chǎn)前應(yīng)打開紫外燈滅菌10-20分鐘，并定期對房間進(jìn)行熏蒸2.草席的滅菌將草席放糊化鍋內(nèi)充分水煮，達(dá)到滅菌的目的3.物料進(jìn)入裝物料的器具應(yīng)保證無菌，每次送入前應(yīng)用75%的酒精充分清洗；運(yùn)料的過程中 應(yīng)在物料車上方加蓋一層薄膜，防止空氣中的雜菌帶入4.翻拋器具翻拋器具應(yīng)保證專房專用，防止交叉感染；并定期進(jìn)行消毒5.人員進(jìn)出生產(chǎn)人員進(jìn)出發(fā)酵房應(yīng)穿工作服、工作鞋每次進(jìn)出前應(yīng)在噴灑消毒液的草垛上跺腳數(shù)次，并用洗手液洗手；確保無交叉感 染混菌發(fā)酵1固體混菌發(fā)酵工藝流程1. 1物料領(lǐng)取按如下配方領(lǐng)取固體發(fā)酵原料木薯渣(濕)250kg豆粕5. Okg氯化銨1.5kg 尿素2. Okg磷酸二氫鉀1.2kg1.2物料處理木薯渣水分保證在50-60%之間，待實(shí)驗(yàn)室給定數(shù)據(jù)后決定添加水分量生產(chǎn)前一天，對已準(zhǔn)備好的水分在50-60%之間的濕木薯渣滅菌將豆粕、氯化銨、尿素、磷酸二氫鉀，按配方領(lǐng)取后加少量的水溶解后均勻的拌入 木薯渣1.3種曲的添加先添加1號、3號種曲，均勻拌入曲料，攤平堆積高度為50-80cm待其生長2天后加入2號種曲，拌勻后攤平堆積高度同上自添加1號、3號種曲約3天后添加4號種子，拌勻后堆積生長自種子添加完畢后約2天完成發(fā)酵發(fā)酵完成后，將成品呈丘形堆積M小時(shí)即可移交給下一工序2發(fā)酵過程中注意事項(xiàng)2. 1發(fā)酵過程中溫度升高較快，應(yīng)每隔Ih記錄一次溫度，保持溫度在35-45°C之 間2.2翻料次數(shù)不易過多，待其結(jié)塊良好即可適量加大翻料次數(shù)2. 3因拌曲的不均勻?qū)е戮植繙囟冗^高，應(yīng)視情況翻料，并做好相關(guān)記錄2. 4根據(jù)種曲生長情況做好發(fā)酵顏色變化記錄
2.5翻曲工具應(yīng)定期消毒、滅菌2. 6生產(chǎn)人員應(yīng)著工作服、工作鞋


附圖是本發(fā)明專利的工藝流程圖。
權(quán)利要求
1.木薯渣飼料資源化技術(shù)，利用從細(xì)菌和真菌中篩選出能利用降解木薯渣中纖維素的 菌株；經(jīng)過物理和化學(xué)等多種方式進(jìn)行誘變，篩選出纖維素酶和菌體蛋白產(chǎn)量高的菌株作 為生產(chǎn)菌種.通過對各個(gè)菌種發(fā)酵培養(yǎng)基和發(fā)酵條件的優(yōu)化和研究解決木薯渣的污染問 題，使其發(fā)酵生產(chǎn)為動物容易吸收的高蛋白飼料。1.1號、2號、3號、4號菌種培育及保藏方法。
2.1號、2號、3號、4號菌種液體發(fā)酵培養(yǎng)基配方、接種量、接種時(shí)間、發(fā)酵溫度、發(fā)酵時(shí) 間、PH值、通氣量等發(fā)酵條件。
3.1號、2號、3號、4號菌種種曲發(fā)酵培養(yǎng)基中各培養(yǎng)基成分添加量、接種量、營養(yǎng)液成 分及添加量、及與之相關(guān)的發(fā)酵條件。
4.混菌發(fā)酵過程中物料配方、種曲添加量及添加順序等相關(guān)生產(chǎn)技術(shù)。
全文摘要
木薯渣飼料資源化技術(shù)，利用從細(xì)菌和真菌中篩選出能利用降解木薯渣中纖維素的菌株；經(jīng)過物理和化學(xué)等多種方式進(jìn)行誘變，篩選出纖維素酶和菌體蛋白產(chǎn)量高的菌株作為生產(chǎn)菌種.通過對各個(gè)菌種發(fā)酵培養(yǎng)基和發(fā)酵條件的優(yōu)化和研究，確定液體發(fā)酵培養(yǎng)基中各成分的添加量、接種量、接種時(shí)間、發(fā)酵溫度、發(fā)酵時(shí)間、pH值、通氣量等最佳發(fā)酵條件；確定種曲發(fā)酵培養(yǎng)基中除木薯渣外的其他添加成分和添加量；確定混合發(fā)酵接種種類、接種量、接種時(shí)間、發(fā)酵溫度、發(fā)酵時(shí)間、等最佳發(fā)酵條件；解決木薯渣的污染問題，使其發(fā)酵生產(chǎn)為動物容易吸收的高蛋白飼料。
文檔編號A23K1/14GK102144713SQ20101010750
公開日2011年8月10日 申請日期2010年2月9日 優(yōu)先權(quán)日2010年2月9日
發(fā)明者劉平 申請人:劉平, 宋應(yīng)民, 廣西九通王環(huán)保生物工程有限公司