專利名稱：一種誘導(dǎo)奶牛定時排卵進(jìn)行人工授精的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種誘導(dǎo)奶牛定時排卵進(jìn)行人工授精的方法，屬于家畜繁殖技術(shù)領(lǐng)域。
(二)
背景技術(shù)：
人工授精技術(shù)(artificial insemination, AI)是目前我國奶牛改良和擴(kuò)繁的主
要方法。與自然交配相比，采用AI技術(shù)可減少性疾病傳播、降低繁殖成本，更為重要的是，
利用后裔測定的公牛精液進(jìn)行AI，加快了奶牛遺傳改良速度，增加了奶牛產(chǎn)奶量。但隨著產(chǎn)
奶量的日益提高，奶牛的繁殖性能呈現(xiàn)出下降趨勢，其原因主要是隨著奶牛產(chǎn)奶量的不斷
提高，其發(fā)情癥狀卻不顯著，易導(dǎo)致奶牛情期判斷和授精時間的失誤，從而降低AI母牛的
受胎率。同時由于奶牛卵泡發(fā)育和排卵的不同步性，導(dǎo)致同牧場不同奶牛的發(fā)情期比較分
散，不利于組織管理和推廣AI技術(shù)。上述這些因素嚴(yán)重影響了奶牛，特別是奶牛應(yīng)用AI技
術(shù)擴(kuò)繁的進(jìn)程，成為改善奶牛繁殖性能和提高奶業(yè)經(jīng)濟(jì)效益的限制因素。 目前，解決奶牛發(fā)情鑒定和排卵不同步性難題的一個有效措施是通過調(diào)控奶牛卵
泡發(fā)育，形成人工定時排卵技術(shù)。 傳統(tǒng)的定時排卵技術(shù)主要的處理程序是通過GnRH(gonadotropinreleasinghormone)處理誘導(dǎo)LH(luteinizing hormone)峰釋放，引起排卵或卵巢中優(yōu)勢卵泡的黃體化，定時卵泡發(fā)生波。隨后采用PGF2a (pr0StaglandinF2a)處理導(dǎo)致自然的或GnRH誘導(dǎo)的黃體退化，最終引起定時的優(yōu)勢卵泡成熟、排卵(引自l.Pursley JR， Mee M0，Wiltbank MC. Synchronization ofovulation in dairy cows using PGF2a，and GnRH.Theriogenology，1995,44 :915-923.2.Sterry RA， Jardon PW， Fricke PM. Effect oftiming ofCosynch on fertility of lactating Holstein cows after first postpartumandResynch timed-AI services.Theriogenology,2007，67 :1211-1216. 3. SzenciO，Takacs E， Sulon J， et al. Evaluation of GnRH treatment 12days after AI inthereproductive performance of dairy cows.Theriogenology,2006，66 :1811-1815.)。 該技術(shù)協(xié)調(diào)了卵泡循環(huán)、黃體退化和排卵的時間，可在GnRH處理后的固定時間人工授精。前期研究已證實，在卵泡發(fā)育調(diào)控技術(shù)中，第一次GnRH處理時奶牛所處發(fā)情周期的階段是影響定時排卵和受胎率的主要因素，發(fā)情周期的早黃體期(發(fā)情周期的第5 12天)是啟動定時排卵處理的最佳時期(引自Cartmill JA， El-Zarkouny SZ，Hensley BA，et al. Stageof cycle, incidence, and timing of ovulation, and pregnancy rates indairy cattleafter three timed breeding protocols. J Dairy Sci，2001，84 :1051-1059.)。
現(xiàn)有的定時排卵技術(shù)已在科學(xué)研究和生產(chǎn)實踐中得到了初步的應(yīng)用，但還存在一些缺陷。研究已證實，約20%卵泡發(fā)育調(diào)控處理后的奶牛在授精之前過早的表現(xiàn)出發(fā)情癥狀，影響了人工授精后的受胎率(引自Dejarnette JM， Salverson RR， Marshall,CE.Incidence of premature estrus inlactating dairy cows and conception ratesto standing estrus or fixed—timeinseminations after synchronization using GnRHand PGF(2alpha). AnimR印rod Sci， 2001， 67 :27-35.)。此外，該技術(shù)目前主要用于經(jīng)產(chǎn)奶牛，用于初產(chǎn)奶牛時，由于初產(chǎn)奶牛對GnRH處理的排卵回應(yīng)不敏感，以及初產(chǎn)奶牛與經(jīng)產(chǎn)奶牛卵泡發(fā)育動力學(xué)的不同，其受胎率較低。因此，還需要對現(xiàn)有的定時排卵技術(shù)進(jìn)一步創(chuàng)新優(yōu)化，以研發(fā)基于奶牛卵泡發(fā)育調(diào)控的人工定時排卵技術(shù)。
(三)

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的是克服利用現(xiàn)有定時排卵技術(shù)受胎率不高和不適用于初產(chǎn)奶牛等缺
陷，提供一種新的誘導(dǎo)奶牛定時排卵進(jìn)行人工授精的方法。 本發(fā)明采用的技術(shù)方案是 —種誘導(dǎo)奶牛定時排卵進(jìn)行人工授精的方法，所述方法如下將奶牛發(fā)情周期中的任意一天記為第1天，在第1天進(jìn)行第一次肌肉注射PGF^ 、劑量為0. 4 0. 6mg，第13 16天進(jìn)行第二次肌肉注射PGF2a 、劑量為0. 4 0. 6mg，第28 30天進(jìn)行第一次肌肉注射GnRH、劑量為100 y g，第35 37天再進(jìn)行第三次肌肉注射PGF2a 、劑量為0. 4 0. 6mg，第38 40天進(jìn)行第二次肌肉注射GnRH、劑量為100 y g，第二次注射GnRH后16 18小時對奶牛進(jìn)行人工授精。母牛出現(xiàn)第一次發(fā)情后，其生殖器官及整個機(jī)體的生理狀態(tài)發(fā)生一系列的周期性變化，周而復(fù)始(妊娠期除外)， 一直到停止繁殖年齡為止，這種周期性的性活動稱為發(fā)情周期或性周期。其計算一般從這一次開始發(fā)情到下一次開始發(fā)情為一個發(fā)情周期，平均一般為21天(1S 25天)。 優(yōu)選的，第一次肌肉注射PGF2a和第二次肌肉注射PGF2a處理的間隔時間為14 16天，第二次肌肉注射PGF2a和第一次肌肉注射GnRH處理的間隔時間為13 15天。
本發(fā)明在現(xiàn)有的GnRH-PGF2。-GnRH奶牛定時排卵處理程序之前，采用兩次肌肉注射PGF^的方法對奶牛進(jìn)行預(yù)處理，以誘導(dǎo)奶牛進(jìn)入發(fā)情周期的早黃體期(發(fā)情周期的第5 12天)。 本發(fā)明的有益效果主要體現(xiàn)在本發(fā)明方法可調(diào)控奶牛卵巢中卵泡發(fā)生波和排卵時間，并不需要發(fā)情鑒定直接進(jìn)行人工授精，從而克服了奶牛不易觀察發(fā)情的缺陷，有利于提高奶牛發(fā)情率和受胎率，縮短奶牛產(chǎn)犢到再次懷孕的間隔期，便于奶牛場生產(chǎn)管理。
(四)
具體實施例方式
下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步描述，但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不僅限于此 實施例1 : (1)選擇經(jīng)產(chǎn)奶牛50頭(試驗組)，在奶牛發(fā)情周期的第8天(記錄為第1天)肌肉注射O. 4mg的PGF2。； (2)第15天再次肌肉注射0. 4mg的PGF2a ;
(3)第29天肌肉注射100 ii g的GnRH ;
(4)第36天肌肉注射0. 4mg的PGF2a ; (5)第38天肌肉注射100 ii g的GnRH，注射GnRH后16 18小時對奶牛進(jìn)行人工授精。對照組奶牛(21頭)不采用定時排卵處理，僅在觀察到發(fā)情癥狀后人工授精。
(6)奶牛人工授精后20 22天，觀察其發(fā)情情況，對出現(xiàn)發(fā)情癥狀的返情奶牛于
4人工授精后的35 40天采用直腸檢查法再次判斷是否妊娠，統(tǒng)計受胎率。[ooao] (7)檢測結(jié)果 按照上述定時排卵程序處理后，試驗組50頭奶牛受孕34頭，妊娠率為68%，而對照組奶牛妊娠率為57. 1%，試驗組奶牛的妊娠率比對照組奶牛高10.9%，結(jié)果表明采用定時排卵方法處理奶?？娠@著提高人工授精后的妊娠率。
權(quán)利要求
一種誘導(dǎo)奶牛定時排卵進(jìn)行人工授精的方法，所述方法如下將奶牛發(fā)情周期中的任意一天記為第1天，在第1天進(jìn)行第一次肌肉注射PGF2α、劑量為0.4～0.6mg，第13～16天進(jìn)行第二次肌肉注射PGF2α、劑量為0.4～0.6mg，第28～30天進(jìn)行第一次肌肉注射GnRH、劑量為100μg，第35～37天再進(jìn)行第三次肌肉注射PGF2α、劑量為0.4～0.6mg，第38～40天進(jìn)行第二次肌肉注射GnRH、劑量為100μg，第二次注射GnRH后16～18小時對奶牛進(jìn)行人工授精。
2. 如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于第一次肌肉注射PGF^和第二次肌肉注射 PGF2a處理的間隔時間為14 16天，第二次肌肉注射PGF^和第一次肌肉注射GnRH處理 的間隔時間為13 15天。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種誘導(dǎo)奶牛定時排卵進(jìn)行人工授精的方法。所述方法如下在奶牛發(fā)情周期中的任意一天(第1天)肌肉注射0.4～0.6mg的PGF2α，第13～16天再次肌肉注射0.4～0.6mg的PGF2α，第28～30天肌肉注射100μg的GnRH，第35～37天再肌肉注射0.4～0.6mg的PGF2α，第38～40天肌肉注射100μg的GnRH，注射GnRH后16～18小時對奶牛進(jìn)行人工授精。本發(fā)明方法可調(diào)控奶牛卵巢中卵泡發(fā)生波和排卵時間，并不需要發(fā)情鑒定直接進(jìn)行人工授精，從而克服了奶牛不易觀察發(fā)情的缺陷，有利于提高奶牛發(fā)情率和受胎率，縮短奶牛產(chǎn)犢到再次懷孕的間隔期，便于奶牛場生產(chǎn)管理。
文檔編號A61D19/02GK101692985SQ20091015361
公開日2010年4月14日 申請日期2009年9月29日 優(yōu)先權(quán)日2009年9月29日
發(fā)明者俞頌東, 傅春泉, 李忠, 李鳴, 王爭光 申請人:浙江大學(xué);