專利名稱：：多功能林蛙蝌蚪專用飼料的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及飼料領(lǐng)域，尤其涉及具有蝌鈄性別誘導(dǎo)功能的飼料。
背景技術(shù)：
：中國林蛙俗稱"哈士蟆"，是一種重要的藥用兩棲類經(jīng)濟動物，廣泛分布于東北長白山脈及小興安嶺等地區(qū)，雌蛙的輸卵管干制品即是聞名遐邇的"哈士蟆油"，是名貴的食療性中藥，內(nèi)含多種飽和脂肪酸、氨基酸、維生素和微量元素，具有養(yǎng)陰潤肺，補腎益精，健腦抗疲勞等功效。隨著人們生活水平的日益提高，對林蛙的需求也越來越大，因此林蛙的人工飼養(yǎng)也發(fā)展很快，目前林蛙的養(yǎng)殖主要是半人工養(yǎng)殖，即主要對蝌蚪期進行管理。目前用于蝌蚪的飼料主要是養(yǎng)殖戶自己配制的玉米糊等簡單飼料，營養(yǎng)不全面，使得蝌蚪生長緩慢，容易患病，直接影響蝌蚪的變態(tài)，經(jīng)濟效益不高；其次，嗜水氣單胞菌為水產(chǎn)生物中廣泛存在的病原微生物，可以產(chǎn)生毒性很強的外毒素，如溶血素、組織毒素、壞死毒素、腸毒素和蛋白酶等，嗜水氣單胞菌侵入體內(nèi)后，先在腸道內(nèi)增殖，再經(jīng)門動脈循環(huán)進入肝臟、腎臟及其它組織，引起肝臟、腎臟等器官以及血液病變，繼而出現(xiàn)全身癥狀，可以引起林蛙及蝌蚪的紅腿病，出血病等疾病，死亡率極高，給養(yǎng)殖戶造成巨大的經(jīng)濟損失。再者，天然狀態(tài)下孵化出的林蛙雌雄比在3:7到4:6之間，即雌性偏少，而雌性的價格為雄性的10倍以上，因此限制了養(yǎng)殖戶的經(jīng)濟效益。另外，隨著林蛙價格的提高，養(yǎng)殖戶為了提高成活率，大量使用抗生素等藥物控制林蛙疾病，從而對環(huán)境和林蛙產(chǎn)品造成了一定的污染。
發(fā)明內(nèi)容為了解決上述問題，本發(fā)明提供一種具有林蛙蝌蚪性別誘導(dǎo)和疾病預(yù)防功能的多功能林蛙蝌鈄專用飼料。本發(fā)明的另一目的是提供一種多功能林蛙蝌鈄專用飼料的生產(chǎn)方法。為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是一種多功能林蛙蝌蚪專用飼料，其特征在于由主料和輔料組成，每噸主料的組成如下米糠200-400千克，玉米粉100-200千克，魚粉100-200千克，豆粕粉100-300千克，肉粉100-200千克，次粉50-100千克，麥麩20-70千克；其中，肉粉可以是豬肉粉、牛肉粉、雞肉粉或其它動物肉粉。每噸主料中添加如下重量的輔料微生物菌劑200-800克，水產(chǎn)用復(fù)合維生素200-500克，水產(chǎn)用復(fù)合礦物質(zhì)200-500克，抗氧化劑200-500克，滅活嗜水氣單胞菌疫苗20-100克，己烯雌酚20-50克。所述的微生物菌劑是枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌。所述的微生物菌劑指以芽孢計，200億活菌/克。所述的抗氧化劑是乙氧基喹啉。多功能林蛙蝌蚪專用飼料的制備方法先按主料配比配料，將主料進行粉碎，攪拌，再按配比向主料中加入輔料微生物菌劑、水產(chǎn)用復(fù)合維生素、水產(chǎn)用復(fù)合礦物質(zhì)、滅活嗜水氣單胞菌疫苗、抗氧化劑和己烯雌酚，攪拌均勻，蒸汽調(diào)質(zhì)，造粒，冷卻?？莶菅挎邨U菌和地衣芽孢桿菌具有很強的蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶等活性，能產(chǎn)生抗菌素，在動物腸道內(nèi)具有較強生物奪氧能力。這些特性對促進動物營養(yǎng)的消化吸收、提高動物的飼料轉(zhuǎn)化率和防病促進生長起到重要作用。而且芽孢具有很強的耐受能力，在10(TC以上也可以生存很長時間，因此可以用于制粒詞料。疫苗是將病原微生物及其代謝產(chǎn)物，經(jīng)過人工減毒、滅活或利用基因工程等方法制成的用于預(yù)防傳染病的自動免疫制劑。疫苗保留了病原菌剌激動物體免疫系統(tǒng)的特性。當(dāng)動物體接觸到這種不具傷害力的病原菌后，免疫系統(tǒng)便會產(chǎn)生一定的保護物質(zhì)，如免疫激素、活性生理物質(zhì)、特殊抗體等；當(dāng)動物再次接觸到這種病原菌時，動物體的免疫系統(tǒng)便會依循其原有的記憶，制造更多的保護物質(zhì)來阻止病原菌的傷害。因此，將嗜水氣單胞菌滅活后制成疫苗添加到飼料中可以預(yù)防由其引發(fā)的疾病。在兩棲類動物中，每個胚胎同時具備發(fā)育成雌性和雄性的潛能。林蛙沒有異型的性染色體，動物的表型性別可以由改變個體發(fā)育的條件加以控制。因此，在林蛙個體發(fā)育前期，從尾芽期開始到鰓蓋完成期，可利用物理及化學(xué)的方法改變其個體發(fā)育環(huán)境，使大部分林蛙個體向雌性方面發(fā)育。而激素被證明是最行之有效的方案，當(dāng)濃度僅為50ppm的時候便可以使雌蛙比例達到80%以上。(一)多功能林蛙蝌蚪專用飼料的免疫性保護試驗將蝌鈄隨機分組，100尾每組，實驗組伺喂本發(fā)明20天，對照組飼喂普通的飼料，20天后將蝌蚪置于106個/ml嗜水氣單胞菌中浸泡10分鐘，然后觀察對照組和實驗組，記錄死亡數(shù)，按下列公式計算每組的免疫保護力，取三組平行試驗的平均值，結(jié)果見表l:免疫保護力％二(對照組死亡率-實驗組死亡率)/對照組死亡率X100%。表1多功能林蛙蝌鈄專用飼料的免疫性保護試驗<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>從上表可以看出，本發(fā)明飼料對林蛙蝌蚪具有很好的免疫保護力。(二)多功能林蛙蝌蚪專用飼料的性別誘導(dǎo)試驗將蝌蚪隨機分組，ioo尾每組，實驗組變態(tài)前全程詞喂本發(fā)明飼料，對照組詞喂普通飼料。變態(tài)為蝌酙后進行顯微解剖，判斷林蛙的性別。結(jié)果見表2。表2多功能林蛙蝌蚪專用飼料的性別誘導(dǎo)試驗<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>可以看出飼喂本發(fā)明飼料可以提高林蛙的雌性率一倍以上。本發(fā)明的有益效果是一是，能夠滿足蝌蚪生長過程中的營養(yǎng)需要，蝌鈄生長健康，為變態(tài)期提供充足的營養(yǎng)；二是，根據(jù)蝌蚪的生長特性，在飼料中添加了一些營養(yǎng)物質(zhì)和益生菌，提高蝌蚪的抗病能力及營養(yǎng)吸收能力，降低蝌蚪的死亡率；三是，添加了性別誘導(dǎo)劑，大大提高了雌性蝌蚪的孵化率；四是，添加了水產(chǎn)動物中容易感染的嗜水氣單胞菌疫苗，對嗜水氣單胞菌引起的紅腿病和出血病具有免疫作用。本發(fā)明是一種綠色無污染的安全飼料，通過生物方法一方面提高林蛙的免疫力，同時使用生物疫苗的方法來預(yù)防林蛙疾病，從而減少對環(huán)境和產(chǎn)品的危害。具體實施例方式原料水產(chǎn)用復(fù)合維生素產(chǎn)地遼寧泛興詞料工業(yè)新技術(shù)研究開發(fā)有限公司成分(含量/千克)維生素A550萬IU，維生素D3125萬IU，維生素E5萬IU，維生素K34ug，維生素B110ug，維生素B212ug,維生素B610pg，維生素C100yg，生物素250mg，葉酸3ug，煙酸50ug.水產(chǎn)用復(fù)合礦物質(zhì)產(chǎn)地遼寧泛興飼料工業(yè)新技術(shù)研究開發(fā)有限公司成分(含量/千克):硫酸亞鐵0.lg，硫酸錳O.05g，硫酸鋅0.05g，硫酸銅0.01g，氯化鈷0.05mg，碘化鉀O.lmg實施例1(一)滅活嗜水氣單胞菌疫苗的制備用接種針取保存于甘油凍存液中的嗜水氣單胞菌涂于LB平板上劃線復(fù)蘇，28"C過夜培養(yǎng)后挑取單菌落接種于1L液體LB種子培養(yǎng)基中28°C，200rpm搖床培養(yǎng)至0D600二3.O后接種于發(fā)酵罐中培養(yǎng)(28。C，700rpm，溶氧60%)，待0D60O3.0時收獲細(xì)菌，8000轉(zhuǎn)離心10分鐘，用1%甲醛調(diào)整菌體濃度100克/升進行48小時滅活。做無菌檢驗證實無活菌存在后，添加海藻酸鈉并攪拌對菌體進行包被，制成嗜水氣單胞菌滅活微膠囊疫苗，備用。(二)多功能林蛙蝌蚪專用詞料，由主料和輔料組成，每噸主料的組成如下米糠300千克，玉米粉150千克，魚粉150千克，豆粕粉200千克，豬肉粉100千克，次粉70千克，麥麩30千克；每噸主料中添加如下重量的輔料枯草芽孢桿菌(以芽孢計，200億活菌/克)300克，地衣芽孢桿菌(以芽孢計，200億活菌/克)200克，水產(chǎn)用復(fù)合維生素300克，水產(chǎn)用復(fù)合礦物質(zhì)300克，乙氧基喹啉300克，滅活嗜水氣單胞菌疫苗50克，己烯雌酚30克。(三)多功能林蛙蝌蚪專用飼料的制備方法根據(jù)上述的配比配制飼料。先將主料米糠、玉米粉、魚粉、豆粕粉、豬肉粉、次粉和麥麩等按配比配料后，進行粉碎，攪拌均勻，然后向上述主料中，按配比加入輔料枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌、水產(chǎn)用復(fù)合維生素、水產(chǎn)用復(fù)合礦物質(zhì)、滅活嗜水氣單胞菌疫苗、乙氧基喹啉和己烯雌酚，攪拌均勻，蒸汽調(diào)質(zhì)，造粒，冷卻，最后灌包。實施例2(一)滅活嗜水氣單胞菌疫苗的制備用接種針取保存于甘油凍存液中的嗜水氣單胞菌涂于LB平板上劃線復(fù)蘇，28'C過夜培養(yǎng)后挑取單菌落接種于1L液體LB種子培養(yǎng)基中28°C，200rpm搖床培養(yǎng)至0D600二3.0后接種于發(fā)酵罐中培養(yǎng)(28。C，700rpm，溶氧60%)，待0D600=3.0時收獲細(xì)菌，8000轉(zhuǎn)離心10分鐘，用1%甲醛調(diào)整菌體濃度100克/升進行48小時滅活。做無菌檢驗證實無活菌存在后，添加海藻酸鈉并攪拌對菌體進行包被，制成嗜水氣單胞菌滅活微膠囊疫牛肉粉玉米粉130千克，豆粕粉100千克，次粉50千克，苗，備用。(二)多功能林蛙蝌蚪專用詞料，由主料和輔料組成，每噸主料的組成如下米糠400千克，魚粉100千克，200千克，20千克；每噸主料中添加如下重量的輔料枯草芽孢桿菌(以芽孢計，200億活菌/克)地衣芽孢桿菌(以芽孢計，200億活菌/克)水產(chǎn)用復(fù)合維生素水產(chǎn)用復(fù)合礦物質(zhì)乙氧基喹啉滅活嗜水氣單胞菌疫苗己烯雌酚(三)多功能林蛙蝌蚪專用飼料的制備方法根據(jù)上述的配比配制飼料。先將主料米糠、玉米粉、魚粉、豆粕粉、牛肉粉、次粉和麥麩等按配比配料后，進行粉碎，攪拌均勻，然后向上述主料中，按配比加入輔料枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌、水產(chǎn)用復(fù)合維生素、水產(chǎn)用復(fù)合礦物質(zhì)、滅活嗜水氣單胞菌疫苗、乙氧基喹啉和己烯雌酚，攪拌均勻，蒸汽調(diào)質(zhì)，造粒，冷卻，最后灌包。實施例3(一)滅活嗜水氣單胞菌疫苗的制備用接種針取保存于甘油凍存液中的嗜水氣單胞菌涂于LB平板上劃線復(fù)蘇，28"C過夜培養(yǎng)后挑取單菌落接種于1L液體LB種子培養(yǎng)基中28°C,200rpm搖床培100克，100克，200克，200克，200克，20克，20克。養(yǎng)至00600=3.0后接種于發(fā)酵罐中培養(yǎng)(28°C，700rpm，溶氧60%)，待0D600=3.0時收獲細(xì)菌，8000轉(zhuǎn)離心10分鐘，用1%甲醛調(diào)整菌體濃度100克/升進行48小時滅活。做無菌檢驗證實無活菌存在后，添加海藻酸鈉并攪拌對菌體進行包被，制成嗜水氣單胞菌滅活微膠囊疫(二)多功能林蛙蝌蚪專用詞料，由主料和輔料組成，每噸主料的組成如下米糠魚粉雞肉粉玉米粉120千克，豆粕粉210千克，次粉80千克，200千克，170千克，100千克，70千克；每噸主料中添加如下重量的輔料枯草芽孢桿菌(以芽孢計，200億活菌/克)地衣芽孢桿菌(以芽孢計，200億活菌/克)水產(chǎn)用復(fù)合維生素水產(chǎn)用復(fù)合礦物質(zhì)乙氧基喹啉滅活嗜水氣單胞菌疫苗己烯雌酚(三)多功能林蛙蝌鈄專用伺料的制備方法根據(jù)上述的配比配制飼料。先將主料米糠、玉米粉、魚粉、豆粕粉、雞肉粉、次粉和麥麩等按配比配料后，迸行粉碎，攪拌均勻，然后向上述主料中，按配比加入輔料枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌、水產(chǎn)用復(fù)合維生素、水產(chǎn)用復(fù)合礦物質(zhì)、滅活嗜水氣單胞菌疫苗、乙氧基喹啉和己烯雌酚，攪拌均勻，蒸汽調(diào)質(zhì)，造粒，冷卻，最后灌包。400克，400克，500克，500克，500克，100克，50克。權(quán)利要求1、一種多功能林蛙蝌蚪專用飼料，其特征在于由主料和輔料組成，每噸主料的組成如下米糠200-400千克，玉米粉100-200千克，魚粉100-200千克，豆粕粉100-300千克，肉粉100-200千克，次粉50-100千克，麥麩20-70千克；每噸主料中添加如下重量的輔料微生物菌劑200-800克，水產(chǎn)用復(fù)合維生素200-500克，水產(chǎn)用復(fù)合礦物質(zhì)200-500克，抗氧化劑200-500克，滅活嗜水氣單胞菌疫苗20-100克，己烯雌酚20-50克。2、按照權(quán)利要求1所述的多功能林蛙蝌蚪專用飼料，其特征在于所述的微生物菌劑是枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌。3、按照權(quán)利要求1或2所述的多功能林蛙蝌蚪專用飼料，其特征在于所述的微生物菌劑指以芽孢計，200億活菌/克。4、按照權(quán)利要求1所述的多功能林蛙蝌蚪專用飼料，其特征在于所述的抗氧化劑是乙氧基喹啉。5、一種權(quán)利要求1所述的多功能林蛙蝌蚪專用詞料的制備方法，其特征在于步驟如下先按主料配比配料，將主料進行粉碎，攪拌，再按配比向主料中加入輔料微生物菌劑、水產(chǎn)用復(fù)合維生素、水產(chǎn)用復(fù)合礦物質(zhì)、滅活嗜水氣單胞菌疫苗、抗氧化劑和己烯雌酚，攪拌均勻，蒸汽調(diào)質(zhì)，造粒，冷卻。全文摘要本發(fā)明涉及多功能林蛙蝌蚪專用飼料。采用的技術(shù)方案是由主料和輔料組成，每噸主料的組成為米糠200-400千克，玉米粉100-200千克，魚粉100-200千克，豆粕粉100-300千克，肉粉100-200千克，次粉50-100千克，麥麩20-70千克；每噸主料中添加如下重量的輔料微生物菌劑200-800克，水產(chǎn)用復(fù)合維生素200-500克，水產(chǎn)用復(fù)合礦物質(zhì)200-500克，抗氧化劑200-500克，滅活嗜水氣單胞菌疫苗20-100克，己烯雌酚20-50克。其制備方法先將主料進行粉碎，攪拌，再向主料中加入輔料，攪拌均勻，蒸汽調(diào)質(zhì)，造粒，冷卻。本發(fā)明具有林蛙蝌蚪性別誘導(dǎo)和疾病預(yù)防功能。文檔編號A23K1/18GK101331918SQ20081001253公開日2008年12月31日申請日期2008年7月29日優(yōu)先權(quán)日2008年7月29日發(fā)明者宋樹森,強李,王秋雨,金莉莉申請人:遼寧大學(xué)