專利名稱：一種天麻仿野生有性繁殖育種技術的制作方法
技術領域：
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本發(fā)明涉及一種中藥植物的繁殖育種技術，特別涉及天麻有性繁殖育種技術。
背景技術：
天麻屬蘭科，多年生共生草本。成熟的植物體有塊莖及花莖，沒有根和葉。
塊莖肉質，淡黃色，長卵形或長圓形，長7 15厘米，有均勻的環(huán)節(jié)，節(jié)處有 膜質鱗葉?；ㄇo直立，高1 1.7米，總狀花序頂生，花淡橙紅色或黃綠色。蒴 果長圓形或倒卵形。花期6 7月，果期7 8月。生于海拔400 3200米的林 隙或林邊。主要分布于四川、云南、陜西、貴州、湖北、湖南、安徽、河南、 甘肅、吉林、臺灣及西藏。印度、不丹、尼泊爾、朝鮮、日本及蘇聯(lián)遠東地區(qū) 亦有分布。
天麻在中國已有兩千年的使用歷史，在歷代本草中列為上品，其記述最早 見于《神農本草經》。塊莖主要含天麻素等成分。性平、味甘，有息風、止痙的 功能。主治眩暈、頭痛、四肢拘攣、麻木、神經衰弱、失眠、風濕疼痛、小兒 驚風等。因藥源緊缺，近年來已采用人工培植的方法生產。天麻在自然條件下 完成一代生活史需歷時3年，其間須經過原生球莖、初生球莖與次生球著的發(fā) 育過程，才能開花結果。各類球莖在其生長過程中必須依靠消化浸染其皮層的 蜜環(huán)菌才能生存，其次是依靠表皮從周圍土壤吸收水分和無機鹽。蜜環(huán)菌屬擔
子菌綱、傘菌目、白蘑科，它是一種廣域分布的菌類，主要營腐生生活。幼小 的天麻原生球莖必須及時地與蜜環(huán)菌建立營養(yǎng)關系才能生育。栽培時如不及時 接菌，天麻的原生球莖將因細胞內貯存的多糖及蛋白質迅速耗盡而死亡。因此 及早接種是天麻豐產的關鍵。
在傳統(tǒng)的人工天麻栽培中，天麻的有性繁殖育種都采用在大田或大棚內集 中培育。傳統(tǒng)的育種方法不外乎有兩種方式固定菌床和移動菌床，但它們的 栽培過程基本相似，唯有不同的是前者是先開好穴，在穴內培養(yǎng)密環(huán)菌材，育 種時不移動穴內的菌材。后者是集中培養(yǎng)密環(huán)菌種材，開穴后將密環(huán)菌種材移 到穴內擺放，用木葉填實。雖然它們有不同之處，但是它們操作過程基本相同。
傳統(tǒng)育種方法存在許多不足之處1、適應性差，抵抗自然災害能力弱，如 干旱和水澇；2、易受雜菌感染和蟲害侵害，造成大量減產；3、由于天麻種子 細小無胚乳，生命力極弱，而固定菌床內天麻種子撒在上面后，天麻種子未萌 發(fā)成圓球莖，密環(huán)菌的菌索接觸到天麻種子的萌發(fā)菌葉后會消耗一定的養(yǎng)分， 抑制了天麻種子的萌發(fā)；4、移動菌床培養(yǎng)的密環(huán)菌長勢旺，但下種后蜜環(huán)菌受 到破壞的程度低，恢復很快，此階段蜜環(huán)菌在25天之內新的生長分化點多，25 天以后逐漸減弱。而天麻種子在萌發(fā)菌的作用下需要大約30-45天才能萌發(fā)成圓 球莖，此時的密環(huán)菌生長點已長成菌索，只有少部分生長點，大部分圓球莖接 不到密環(huán)菌的生長點而自生自滅。
在這個領域也有一些專利申請出現(xiàn)，申請?zhí)枮?9115930.6名稱為《一種天 麻有性繁殖育種的方法》該發(fā)明公開一種天麻有性繁殖育種的方法，它包括圓 球莖瓶內萌發(fā)和人工接菌兩個步驟，、A、瓶內萌發(fā)采用異株異花授粉的蒴果 得到天麻種子，選用菌枝萌發(fā)菌(或樹葉萌發(fā)菌)為菌種，將菌種播入消毒了 的容器中，將天麻種子播入萌發(fā)菌菌種中并與之均勻攪拌，使之成為拌有天麻
種子的菌種；B、人工接菌取密環(huán)菌菌棒(或菌枝)，撬開菌棒的樹皮，在開 口處放入上述大口瓶內萌發(fā)的圓球莖，讓樹皮夾住圓球莖，或將圓球莖放置于 菌枝兩頭有菌絲或菌索的斜面上；把帶有圓球莖的菌棒放入設置天麻窩內，然 后在菌棒(或菌枝)上壓上覆蓋物。據介紹它有效地解決了傳統(tǒng)栽培天麻過程 中存在的有性種子萌發(fā)率低、圓球菌極難接菌、難以常年規(guī)?；a等問題， 圓球莖的成活率達到9 5%以上，使圓球菌與密環(huán)菌能夠有效的結合，所得到 的天麻一代種具有生命力強、抗逆性強、分生力強的特點，改良了世代無性繁 殖的退化了的天麻種，極大地提高了經濟效益。這種方法在實踐中，經研究， 實際效果不理想，同時，栽種得到的天麻的品質與野生天麻相比要差許多。

發(fā)明內容
本發(fā)明的目的是尋求一種天麻有性繁殖技術，滿足規(guī)?；纳a要求，同時 解決人工天麻的品質比野生天麻要差的問題，讓人工栽培的天麻在品質與野生 天麻一致，由于讓人工天麻種在林地野生自然狀態(tài)的生長，同時縮短生長時間， 申請人:通過反復實踐和研究，達到了這一目的。
本發(fā)明的天麻的仿野生有性繁殖育種技術是通過以下的技術方案完成的
一、 選種，選擇100克以上外觀形狀好，無病蟲害，無損傷，無腐爛班點， 無畸形的箭麻為種麻，在種植后經人工授粉培育出成熟的天麻種子。其次，選 用菌株生長較好、萌發(fā)率高的萌發(fā)菌，經培養(yǎng)選出的優(yōu)良菌株。再次，選用密 環(huán)菌子實體分離得到的成熟的三級密環(huán)菌為生產種。
二、 選址。在有野生天麻生長分布的自然環(huán)境下，林木遮陰度為80%以上， 坡度為65度以下的山坡林下開穴， 一般穴面積為0.5X20m，深為25-30cm，
隔2m左右開穴，根據地形，因地制宜。
三、 人工拌合萌發(fā)菌，將0.5kg萌發(fā)菌包撕散放到消毒過的大容器中，將人 工授粉得到的成熟天麻蒴果8個均勻灑在萌發(fā)菌葉上混合，然后裝入無菌塑料 袋內，存放在通風、干燥、無菌的暗室中，菌袋不重疊，室溫控制在20 25"C 萌發(fā)72小時，恢復萌發(fā)菌的長勢，待用。
四、 栽培過程。將開好的穴底泥土翻松，鋪上一層落葉腐質土，厚2 3cm。 選用直徑3 5cm、長約40cm的樹枝，砍兩排魚鱗口，間隔3 5cm，將木材平 整擺放在穴底，直到穴底鋪滿，木材空隙處用新鮮細腐質土填實到擺放木材的 二分之一處。用密環(huán)菌生產種打散均勻地放置在木材創(chuàng)口處，每個平方用密環(huán) 菌生產種1.5—2公斤。將拌合萌發(fā)菌的天麻種子均勻撒在上面，覆蓋10cm厚 的腐質土，最后蓋一層箭竹或雜草。
一種天麻的仿野生有性繁殖育種技術，天麻仿野生有性繁殖育種栽培的時 間選擇利用6月至8月之間地溫與外界溫濕度適宜密環(huán)菌的生長，蜜環(huán)菌生 長到旺盛期在40天左右，該時段內蜜環(huán)菌生長點多、長勢好，而天麻種子萌 發(fā)成圓球莖為30-45天左右，易與蜜環(huán)菌結合，將兩者繁殖育種栽培的時間經過 調整選擇在6月至8月之間。
本發(fā)明的實施的有益效果，這種有性繁育技術就是利用密環(huán)菌生長旺盛期 與天麻種子萌發(fā)成圓球莖的生長周期大致相同，提高了天麻種子的接菌率、成 活率。這些都是通過多年的實踐中觀察、記錄、實驗、總結，探索出的行之有 效的方法，這種育種技術也適用于大田育種，它具有以下優(yōu)點1、提高了天麻 有性繁殖育種的抗劣性。2、利用天麻種子萌發(fā)成圓球莖的生長周期與密環(huán)菌生長旺盛期基本相符的時間段，提高圓球莖接菌率、成活率。3、就地取材，降低 成本，推動生態(tài)農業(yè)中林下無公害天麻種植業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。4、這種小穴育種 方法，增強了麻種抗雜菌傳染能力。
具體實施方式
實施例:1
一、箭麻的選擇、種麻栽培、人工授粉、種子采收與拌萌發(fā)菌、
1、 箭麻的選擇
在天麻采收期，選擇本地原種(包括烏桿天麻、綠桿天麻、紅桿天麻、黃桿 天麻)的箭麻作種麻，要求是個體發(fā)育完全、健壯、頂芽飽滿、無損傷病、單
個重量在100g以上的天麻。
2、 種麻栽培
方法一在大棚內起畦，畦寬50cm，底層鋪填厚約10cm新鮮泥土或細河沙， 整平，將收集的種麻栽培在畦里，鸚哥嘴向上向外放置，覆蓋新鮮泥土或細河 沙15cm，澆足水。
或采用方法二在大棚內放置直徑30cm的花盆，盆底鋪填厚約10cm新鮮 泥土或細河沙，將收集的種麻栽培在花盆中，種麻呈放射狀平置，鸚哥嘴向上 且距花盆邊l一2cm，覆蓋新鮮泥土或細河沙15cm，澆足水。
在花莖出土到孕蕾期間透光度控制在30%以內，棚內溫度15—20'C、濕度 60~70%， 土壤濕度70%左右；開花結果期透光度控制在60—70%，棚內溫度 20—25。C、濕度50—60%， 土壤濕度60%左右。
3、 人工授粉
天麻開花后，如果見花粉塊松軟膨脹，將藥帽蓋稍頂起，說明花粉塊已經成
熟。應該在這一天內的10:00—14:00之間進行受粉。授粉時用左手拇指和食指 輕捉花的基部，右手用小鑷子或細竹簽輕輕撥開藥帽，沾取花粉塊，移置于同 花或其他花的柱頭上，應盡量采用異株異花授粉。 4、種子采收與拌萌發(fā)菌
授粉20天左右后，果實未開裂前，如見棱線突起，用手輕捏感覺變軟，即 可采收，將成熟果實采下，其余的讓它繼續(xù)生長，分批采收方式，應成熟即采。
采收后立即拌和萌發(fā)菌。具體操作用果實8個，用鑷子剖開，將種子抖入 小燒杯中，用細紗布蒙住杯口；取0.5kg萌發(fā)菌三級種l包，放入消毒后的盆中 撕散；將小燒杯倒置，將其中的天麻種子均勻撒入萌發(fā)菌中，混勻后裝入塑料 袋，放入培養(yǎng)房中培養(yǎng)72小時，培養(yǎng)房溫度控制在20—25aC，濕度70—80°/。， 蔽光，保持通風、潔凈、待用。
二、栽培與采收
1、選址與栽培，選擇原來有野生天麻生長、林木遮陰度為80°/。以上的林地 作為栽培地。在栽培地依山就勢每隔約2米挖一個穴，穴大lX0.5m，深0.2m， 在底部平鋪一層約5cm厚的落葉，壓實；將直徑3 5cm、長約40cm的樹枝， 砍兩排魚鱗口，間隔3 5cm，將木材平整擺放在穴底，直到穴底鋪滿，木材空 隙處用新鮮細腐質土填實到擺放木材的二分之一處，將培養(yǎng)好的帶種萌發(fā)菌2 包打散均勻地放置在木材創(chuàng)口處，然后鋪一層5cm左右厚的落葉和細樹枝，填 實，不留空隙，上面再用腐質土覆蓋8cm至12cm，用水澆透，最后用箭竹或雜 草覆蓋。
栽培地的管理主要注意螻蛄、蠐螬、介殼蟲和雜菌侵染等病蟲害的防治，以 及較長期干旱時土壤水分的補充。
2、麻種采收
播種翌年11月，開始收獲，采收時地溫不能低于0'C，氣溫在3—15。C之間。 用鋤除去麻穴表層枯枝雜物及泥土，用手采收麻種。采收的麻種用竹筐分別收 集，竹筐底層鋪2cm厚細土或腐質土，裝入15cm左右麻種后又撒上約2cm細 土或腐質土保護白麻和米麻不受損傷。
權利要求
1、一種天麻的仿野生有性繁殖育種技術，其特征是通過以下的步驟完成的一、選種，選擇100克以上外觀形狀好，無病蟲害，無損傷，無腐爛班點，無畸形的箭麻為種麻，在種植后經人工授粉培育出成熟的天麻種子；其次，選用菌株生長好、萌發(fā)率高的萌發(fā)菌，經培養(yǎng)選出的優(yōu)良菌株。再次，選用密環(huán)菌子實體分離得到的成熟的三級密環(huán)菌為生產種；二、選址，選擇有野生天麻生長分布的自然環(huán)境下，林木遮陰度為80％以上，坡度為65度以下的山坡林下開穴，一般穴面積為0.5×20m，深為25-30cm，每隔2m左右開穴；三、人工拌合萌發(fā)菌，將0.5kg萌發(fā)菌包撕散，放到消毒過的大容器中，將人工授粉得到的成熟天麻蒴果8個均勻灑在萌發(fā)菌葉上混合，然后裝入無菌塑料袋內，存放在通風、干燥、無菌的暗室中，菌袋不重疊，室溫控制在20～25℃萌發(fā)72小時，恢復萌發(fā)菌的長勢，待用；四、栽培過程，將開挖好的穴底泥土翻松，鋪上一層落葉腐質土，厚2～3cm，選用直徑3～5cm、長40cm左右的樹枝，砍兩排魚鱗口，間隔3～5cm，將木材平整擺放在穴底，直到穴底鋪滿，木材空隙處用新鮮細腐質土填實到擺放木材的二分之一處。用密環(huán)菌生產種打散均勻地放置在木材創(chuàng)口處，每個平方米用密環(huán)菌生產種1.5～2公斤，將拌合萌發(fā)菌的天麻種子均勻撒在上面，覆蓋10cm厚的腐質土，最后蓋一層箭竹或雜草。
2、 根據權利要求1所述的一種天麻的仿野生有性繁殖育種技術，其特 征是天麻仿野生有性繁殖育種栽培的時間選擇利用6月至8月之間地溫與外 界溫濕度適宜密環(huán)菌的生長，蜜環(huán)菌生長到旺盛期在40天左右，該時段內蜜環(huán)菌生長點多、長勢好，而天麻種子萌發(fā)成圓球莖為30-45天左右，易與蜜 環(huán)菌結合，將兩者繁殖育種栽培的時間經過調整選擇在6月至8月之間。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種天麻仿野生有性繁殖育種技術，主要步驟有選育得到成熟的天麻種子，優(yōu)良萌發(fā)菌菌株，成熟的三級密環(huán)菌為生產種，選擇林木遮陰度為80％以上有野生天麻生長分布的自然環(huán)境的山坡林下開栽培穴，用人工拌合萌發(fā)菌，控制室溫制作帶種萌發(fā)菌，有性繁殖育種栽培的時間選擇在6月至8月之間；這種育種技術也適用于大田育種，它具有以下優(yōu)點1、提高了天麻有性繁殖育種的抗劣性。2、利用天麻種子萌發(fā)成圓球莖的生長周期與密環(huán)菌生長旺盛期基本相符的時間段，提高圓球莖接菌率、成活率。3、就地取材，降低成本，推動生態(tài)農業(yè)林下無公害天麻種植業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。4、這種小穴育種方法，增強了麻種抗雜菌傳染能力。
文檔編號A01G1/00GK101185396SQ200710078049
公開日2008年5月28日 申請日期2007年12月12日 優(yōu)先權日2007年12月12日
發(fā)明者平 文 申請人:大方縣九龍?zhí)炻殚_發(fā)有限公司