專利名稱：全人工培育斑節(jié)對蝦親體的方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種全人工培育斑節(jié)對蝦親體的方法，適用于從池塘養(yǎng)殖的斑節(jié)對蝦中挑選用于全人工育苗的親體。
背景技術：
蝦類養(yǎng)殖是我國乃至全世界水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的支柱產(chǎn)業(yè)。斑節(jié)對蝦(Penaeus monodon)是我國三大主要養(yǎng)殖對蝦種類之一。目前，斑節(jié)對蝦的苗種生產(chǎn)所需要的成熟親體主要依靠捕撈從天然群體中獲得。但是，由于野生斑節(jié)對蝦資源量的變化，人們無法依靠捕撈來保證斑節(jié)對蝦親體的穩(wěn)定供應和按時、按需供應；同時，由于白斑綜合癥病毒(White Spot SyndromeVirus，簡稱WSSV)的傳播，野生斑節(jié)對蝦及環(huán)境中的WSSV自然宿主中攜帶白斑綜合癥病毒的比例很高，難以保證野生斑節(jié)對蝦親體的質(zhì)量；另外，如果不能人工培育斑節(jié)對蝦親體，就無法開展斑節(jié)對蝦的良種培育。
我國在其它對蝦種類如中國對蝦(Penaeus orientalis Kishinoye)、近幾年引進的凡納濱對蝦(Litopenaeus vannamei Boone)早已突破全人工繁殖，并在家系建立和品種選育上取得一定進展，而國外通過選育獲得的凡納濱對蝦優(yōu)良品種早已經(jīng)進入商業(yè)推廣應用階段。我國及其它一些國家(如菲律賓、泰國、澳大利亞等)早在上世紀八十年代就開始進行斑節(jié)對蝦全人工繁殖及育苗的研究，雖然取得全人工繁殖的突破，但由于缺乏對斑節(jié)對蝦性成熟規(guī)律及其繁殖機理的深入研究，遠未能達到大規(guī)模生產(chǎn)應用，更談不上對其家系建立和品種選育。
斑節(jié)對蝦自然繁殖水域屬于溫暖海域，繁殖季節(jié)很長，雖然每年也有兩次相對集中的長達幾個月的繁殖期，但是幾乎全年均有斑節(jié)對蝦產(chǎn)卵，造成自然種群對蝦的月齡結構復雜，使整個種群具有產(chǎn)卵期不集中的特性。因此，人們至今未弄清斑節(jié)對蝦性腺成熟所需要的最小月齡和成熟應達到的最小規(guī)格(體重和體長)。采用人工養(yǎng)殖方法培育斑節(jié)對蝦親體時，由于不知道養(yǎng)殖出的斑節(jié)對蝦性腺成熟所需要的月齡和成熟應達到的規(guī)格(體重和體長)，因此，在挑選養(yǎng)殖的斑節(jié)對蝦作為親體用于人工催產(chǎn)時，具有盲目性，不能保證催產(chǎn)的成熟率。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種全人工池塘養(yǎng)殖斑節(jié)對蝦親體的培育方法，即從斑節(jié)對蝦生長的不同階段中，不斷挑選優(yōu)質(zhì)的個體繼續(xù)養(yǎng)殖，利用健康的養(yǎng)殖體系和養(yǎng)殖技術作為保障，最終獲得可供人工育苗的斑節(jié)對蝦親體的方法，以保證挑選出的親體的能達到較高的成熟率、懷卵量、受精率，從而保證人工培育的親體的質(zhì)量。
經(jīng)過調(diào)查研究，斑節(jié)對蝦的性腺發(fā)育表現(xiàn)出如下的規(guī)律(1)在池塘養(yǎng)殖條件下，雄性斑節(jié)對蝦精莢出現(xiàn)的最小生物學個體規(guī)格差異不大，生物學最小型為甲長3.1cm，體長11.1cm，體重20g左右。池塘養(yǎng)殖的雌性斑節(jié)對蝦的性成熟最小型應考慮以納精襄的發(fā)育完全(可與雄蝦交配)為標準，其最小性成熟個體規(guī)格為甲長4.5cm、體長15.5cm、體重59g左右，不同養(yǎng)殖環(huán)境條件下，其最小性成熟個體規(guī)格沒有差異。雖然通過營養(yǎng)強化培育，小個體的雌蝦(體重小于50g)可以觀察到卵巢的發(fā)育，但難以成熟、產(chǎn)卵。
(2)精莢出現(xiàn)及精子成熟的時間與斑節(jié)對蝦生長發(fā)育快慢相關，也與雄蝦的日齡有關，池塘養(yǎng)殖的雄蝦精莢出現(xiàn)的最早時間為日齡150天左右，其群體大部分個體成熟的時間約為250天。個體大小和日齡(時間)是雌性斑節(jié)對蝦成熟的限制性因素。調(diào)查發(fā)現(xiàn)池塘養(yǎng)殖斑節(jié)對蝦雌蝦的性成熟日齡為300～360天，池塘養(yǎng)殖的雌性斑節(jié)對蝦的性成熟個體在甲長5.0cm、體長17.5cm、體重80g以上，同時達到以上要求的親蝦催產(chǎn)后成熟比例在50％-86％，效果很好。
通過對斑節(jié)對蝦整個生活史，特別是性成熟規(guī)律的生物學調(diào)查研究，本發(fā)明根據(jù)斑節(jié)對蝦性腺發(fā)育的規(guī)律特點設計了一套適用于從池塘養(yǎng)殖的斑節(jié)對蝦中選育全人工育苗的親體的方法，其步驟如下1)挑選高健康野生或池塘養(yǎng)殖斑節(jié)對蝦親蝦a)野生斑節(jié)對蝦親蝦雌蝦體長在20.5cm以上，體重120g以上，雄蝦14.5cm以上，體重50g以上；b)池塘養(yǎng)殖出的斑節(jié)對蝦親蝦雄蝦日齡250天以上；雌蝦日齡300天以上；雄蝦體長13.5cm以上、體重35g以上；雌蝦體長17.5cm以上、體重80g以上；c)外觀身體各器官完整、無傷口，鰓絲呈健康的灰白色，無紅鰓、黑鰓，蝦體體表完整、光潔，呈健康的、充滿光澤的青灰色；雌蝦已交配，雄蝦精莢飽滿；d)親蝦運回室內(nèi)親蝦池前，在室內(nèi)或室外水池隔離暫養(yǎng)3～5天；e)經(jīng)過PCR(聚合酶鏈反應)檢測，證明挑選出的斑節(jié)對蝦未攜帶白斑綜合癥病毒(WSSV)、斑節(jié)對蝦桿狀病毒(MBV)；2)應用促熟飼料添加劑進行親蝦室內(nèi)強化培育，所述的促熟飼料添加劑由以下以重量份數(shù)計的組份構成
高度不飽和脂肪酸5-25；純度1.5％以上的蝦青素5-10；膽固醇5-10； 維生素C4-10；維生素E1-3； 海帶粉50-80；所述的高度不飽和脂肪酸為液態(tài)，其中二十二碳六烯酸(DHA)加二十碳五烯酸(EPA)占重量的40.0～80.0％，且DHA/EPA在2.0～5.0之間；所述的其余組份都通過100目的標準篩；所得促熟飼料添加劑在親蝦鮮活餌料中拌入后投喂親蝦；在實施親蝦強化培育過程中，還要按照現(xiàn)有的常規(guī)方法控制溫度、鹽度、pH、光照、水質(zhì)及進行病害控制，按照常規(guī)方法摘除單側眼柄；實施過程中可參照本領域所熟知的《對蝦育苗操作規(guī)程》進行操作；3)親蝦所產(chǎn)受精卵和孵化的幼體進行受精卵和無節(jié)幼體孵化處理技術處理a)產(chǎn)卵前親蝦的浸泡消毒，100～300ml/m3福爾馬林浸泡1～3分鐘；b)受精卵→干凈海水沖洗2～5分鐘→100ml/m3福爾馬林浸泡1分鐘→0.1ml/m3聚維酮碘(碘液)浸泡1分鐘→干凈海水沖洗2～5分鐘；c)受精卵的孵化，無節(jié)幼體收集→干凈海水沖洗2～5分鐘→100ml/m3福爾馬林浸泡30秒～1分鐘→0.1ml/m3聚維酮碘液浸泡30秒～1分鐘→干凈海水沖洗2～5分鐘；4)受精卵和無節(jié)幼體處理后人工育苗培育30天以上，從中選擇健康苗種放入室外成蝦養(yǎng)殖池養(yǎng)殖；選擇標準a)蝦苗個體大小均勻，體長在1.1cm以上；b)育苗池隨機取樣50尾蝦苗，PCR檢測100％為陰性；c)蝦苗體表及附肢清潔，無污物及寄生物，體形正常，無畸形，附肢完整；d)蝦苗日齡30日以上，尾扇打開、體色自然、成活率高于30％的育苗池的蝦苗；攝食活動能力強，腸胃飽滿，游泳身體伸直，能從水面游入底部；e)應急反應測試蝦苗放入100ml/m3福爾馬林濃度的海水中浸泡15～30分鐘，成活率達95％以上；放入淡水15分鐘后仍正常、再放回到正常育苗水中15分鐘后仍正常的苗種；f)饑餓實驗挑選50～100尾苗，放入無餌料的干凈海水桶中，不充氣，一天后成活率100％的苗種；5)從室外成蝦養(yǎng)殖池，養(yǎng)殖90～120天的成蝦中挑選體長11.5cm以上、體重20g以上雄蝦，體長12.5cm、體重25g以上雌蝦作為種蝦；6)種蝦放入種蝦養(yǎng)殖池，養(yǎng)殖120～150天，在達到240～300日齡的大蝦中，挑選體長13.5cm以上、體重35g以上雄蝦，以及挑選體長17.5cm、體重80g以上雌蝦作為后備親蝦；7)后備親蝦放入后備親蝦養(yǎng)殖池，在養(yǎng)殖期間，日常餌料除了配合飼料外，還需要根據(jù)其攝食量，每周至少投喂2次冰鮮活餌料進行營養(yǎng)強化；養(yǎng)殖60～120天，從其中挑選外觀健康，器官完整、無傷口，鰓絲呈健康的灰白色，無紅鰓、黑鰓，體表完整、光潔，呈健康的、充滿光澤的青灰色，雌蝦已交配，雄蝦精莢飽滿的親體(日齡300天以上)；8)雌雄親體運回室內(nèi)池隔離暫養(yǎng)，經(jīng)過PCR檢測，挑選出的斑節(jié)對蝦未攜帶白斑綜合癥病毒(WSSV)、斑節(jié)對蝦桿狀病毒(MBV)的作為全人工育苗的親體。
本發(fā)明實施中成蝦養(yǎng)殖技術按照常規(guī)對蝦養(yǎng)殖技術及操作規(guī)程，本領域技術人員可根據(jù)具體情況進行調(diào)整，但本發(fā)明在具體實施時，應該嚴格執(zhí)行以下半封閉式健康養(yǎng)殖體系和養(yǎng)殖管理技術斑節(jié)對蝦親蝦半封閉式健康養(yǎng)殖體系主要由貯水池、成蝦養(yǎng)殖池、大規(guī)格種蝦養(yǎng)殖池和后備親蝦養(yǎng)殖池四種功能不同的池塘組成，對池塘的大小、形狀雖沒有特殊要求，我們?nèi)酝扑]使用具有規(guī)則形狀(長方形、正方形或圓形)，養(yǎng)殖水深可達2m以上，面積在1000～6000m2的高位池塘組合。貯水池塘的面積和養(yǎng)殖池塘的總面積的比例要求在1∶3～10之間，每種不同功能的養(yǎng)殖池塘的個數(shù)最好是兩個以上。本領域的技術人員可以根據(jù)實際情況進行調(diào)整。
實施過程的健康養(yǎng)殖體系是一種半封閉式健康的養(yǎng)殖模式，養(yǎng)殖池塘不與海域海水直接接觸。四種不同功能池塘的作用不同，貯水池專門用于養(yǎng)殖用水的消毒處理和生物凈化處理，消毒劑為水產(chǎn)常用的含氯、溴、碘的化學制劑，生物凈化使用高活性芽孢桿菌制劑的“利生素”，還可促進貯水池單細胞藻類的生長，維持水環(huán)境的穩(wěn)定，并為養(yǎng)殖池塘提供優(yōu)質(zhì)水源。不同養(yǎng)殖池塘用于斑節(jié)對蝦不同生長規(guī)格的養(yǎng)殖。養(yǎng)殖整個過程使用高活性芽孢桿菌制劑的“利生素”來及時降解養(yǎng)殖過程產(chǎn)生的對蝦排泄物、殘存飼料、浮游生物殘體、有機碎屑等有機物，礦化成為單細胞藻類生長所需的營養(yǎng)鹽類，起到促進優(yōu)良單細胞藻類的繁殖生長和避免有機物在池塘中的沉積的作用，有效地減少養(yǎng)蝦池的有機耗氧，間接增加池中的溶氧，保證了有機物氧化-氨化-硝化-反硝化的正常循環(huán)，降低氨氮，亞硝酸鹽，硫化物等有害物質(zhì)，抑制有害病菌的生長繁殖，營造良好的生態(tài)環(huán)境，維持養(yǎng)殖池塘水環(huán)境穩(wěn)定。
本發(fā)明實施中所使用的斑節(jié)對蝦親蝦半封閉式健康養(yǎng)殖體系是養(yǎng)殖親體選育必不可少的保障體系，盡管不使用該體系也可能獲得養(yǎng)殖斑節(jié)對蝦親體，但其成功率將可能大大降低。
實施過程中的水質(zhì)管理技術定期進行NO2-N、NO3-N、NH4-N、PO4-P、COD(化學耗氧量)、DO(溶解氧)、DIN(溶解無機氮)和IP(無機磷)等化學因子的含量測定，用以計算水質(zhì)各營養(yǎng)評價指數(shù)值。采樣及樣品分析均按《海洋監(jiān)測規(guī)范》中規(guī)定的方法進行。對于養(yǎng)殖水質(zhì)營養(yǎng)水平的劃分，我國目前尚無統(tǒng)一的標準，實施中參照我國公布的《漁業(yè)水質(zhì)標準(GB-11607-89)》和《海水水質(zhì)標準(GB-3097-1997)》，表1所引用的養(yǎng)殖水質(zhì)標準(二類海水水質(zhì)標準)。當上述中的個別或一些水化因子超出限定范圍，通過貯水池處理過的海水對養(yǎng)殖池塘換水。
養(yǎng)殖水質(zhì)評價標準

表中DO、COD的單位為mg/L，DIN、IP的單位為μmol/L。
斑節(jié)對蝦成蝦養(yǎng)殖放苗密度為1～20尾/m2，優(yōu)選放苗密度為5～20尾/m2，特別優(yōu)選放苗密度為10～15尾/m2；種蝦養(yǎng)殖密度為1～10尾/m2，優(yōu)選放養(yǎng)密度為3～10尾/m2，特別優(yōu)選放養(yǎng)密度為5～8尾/m2；后備親蝦養(yǎng)殖密度為1～5尾/m2，特別優(yōu)選放養(yǎng)密度為3～4尾/m2。
盡管下列術語在本領域中廣為人知，但為了便于理解，我們?nèi)詫@些術語進行一些簡要的解釋。
本文中，“日齡”是指以親蝦產(chǎn)卵之日為計算初始日；“親體”是指在自然條件下或人工培育條件下，生長達到一定年齡和個體規(guī)格，可達到性成熟并能繁衍后代的對蝦個體?！靶猿墒臁笔侵复菩杂H蝦的卵巢發(fā)育至IV期以上，外觀上明顯觀察到卵巢的飽滿的形狀；雄性親蝦的精囊發(fā)育到外觀明顯可見白色的精囊形狀。
以下是在實施過程中參照實施的一些國家或地方規(guī)范或標準DB 44/136 斑節(jié)對蝦養(yǎng)殖技術規(guī)范 親蝦DB 44/T137斑節(jié)對蝦養(yǎng)殖技術規(guī)范 人工繁殖技術DB 44/T138斑節(jié)對蝦養(yǎng)殖技術規(guī)范 幼體培育技術DB 44/T139斑節(jié)對蝦養(yǎng)殖技術規(guī)范 食用蝦飼養(yǎng)技術GB 11607 漁業(yè)水質(zhì)標準NY/T394 綠色食品肥料使用準則NY 5051 無公害食品 淡水養(yǎng)殖用水水質(zhì)NY 5052 無公害食品 海水養(yǎng)殖用水水質(zhì)NY/T5059-2001 無公害食品 對蝦養(yǎng)殖技術規(guī)范
NY 5071無公害食品 漁用藥物使用規(guī)則NY 5072無公害食品 漁用配合飼料安全限量。
本發(fā)明的有益效果本發(fā)明從斑節(jié)對蝦生長的不同階段中，不斷挑選優(yōu)質(zhì)的個體繼續(xù)養(yǎng)殖，利用健康的養(yǎng)殖體系和養(yǎng)殖技術作為保障，最終獲得可供人工育苗的斑節(jié)對蝦親體，保證了挑選出的池塘人工養(yǎng)殖的親體的催產(chǎn)效果與野生來源的親蝦催產(chǎn)效果相同或者接近，避免了在挑選人工養(yǎng)殖的斑節(jié)對蝦親蝦時，挑選的盲目性以及催產(chǎn)效果的不確定性，按本發(fā)明從池塘養(yǎng)殖斑節(jié)對蝦中選育出的用于人工育苗的親體催產(chǎn)后成熟比例在50％-86％，效果很好。


圖1為全人工培育斑節(jié)對蝦親蝦技術路線的方框流程圖。
圖2為斑節(jié)對蝦親蝦健康養(yǎng)殖體系一半封閉式健康養(yǎng)殖體系圖。
具體實施例方式
下面結合附圖及實施例對本發(fā)明做進一步的詳細說明。
實施例11)選高健康野生斑節(jié)對蝦親蝦a)從捕獲的海南三亞海域野生斑節(jié)對蝦中選擇親蝦，要求雌蝦體長在20.5cm、體重120g以上，雄蝦14.5cm以上，體重50g以上；b)外觀身體各器官完整、無傷口，鰓絲呈健康的灰白色，無紅鰓、黑鰓等不正常的病變，蝦體體表完整、光潔，呈健康的、充滿光澤的青灰色；雌蝦已交配，雄蝦精莢飽滿；c)親蝦運回室內(nèi)親蝦池前，在室內(nèi)或室外水池隔離暫養(yǎng)3～5天；d)經(jīng)過PCR檢測，挑選出的斑節(jié)對蝦未攜帶白斑綜合癥病毒(WSSV)、斑節(jié)對蝦桿狀病毒(MBV)；2)健康親蝦經(jīng)過100ml/m3濃度的福爾馬林消毒3分鐘，移入親蝦室內(nèi)培育室進行親蝦室內(nèi)強化培育，并在親蝦鮮活餌料中拌入促熟飼料添加劑后投喂親蝦，促熟飼料添加劑由以下以重量份數(shù)計的組份構成高度不飽和脂肪酸5-25；純度1.5％以上的蝦青素5-10；膽固醇5-10； 維生素C4-10；維生素E1-3； 海帶粉50-80；
所述的高度不飽和脂肪酸為液態(tài)，其中二十二碳六烯酸(DHA)加二十碳五烯酸(EPA)占重量的40.0～80.0％，且DHA/EPA在2.0～5.0之間；所述的其余組份都通過100目的標準篩；3)在實施親蝦強化培育過程中，還要按照現(xiàn)有的常規(guī)方法控制溫度、鹽度、pH、光照、水質(zhì)及進行病害控制，按照常規(guī)方法摘除單側眼柄；實施過程中可參照本領域所熟知的《對蝦育苗操作規(guī)程》進行操作，但本發(fā)明在以下幾個環(huán)節(jié)應嚴格控制蝦所產(chǎn)受精卵和孵化的幼體進行受精卵和無節(jié)幼體孵化處理技術處理a)產(chǎn)卵前親蝦的浸泡消毒，100ml/m3福爾馬林浸泡2分鐘；b)受精卵→干凈海水沖洗3分鐘→100ml/m3福爾馬林浸泡1分鐘→0.1ml/m3聚維酮碘(碘液)浸泡1分鐘→干凈海水沖洗3分鐘；c)受精卵的孵化，無節(jié)幼體收集→干凈海水沖洗3分鐘→100ml/m3福爾馬林浸泡30秒→0.1ml/m3聚維酮碘(碘液)浸泡30秒→干凈海水沖洗3分鐘；4)受精卵和無節(jié)幼體處理后經(jīng)人工育苗培育32天(日齡)后，從中選擇健康苗種放入半封閉式健康養(yǎng)殖系統(tǒng)的養(yǎng)成池養(yǎng)殖，健康苗種的選擇參照以下幾個原則a)蝦苗個體大小均勻，體長在1.1cm以上；b)育苗池隨機取樣50尾蝦苗，PCR檢測100％為陰性；c)選擇蝦苗體表及附肢清潔，無污物及寄生物，體形正常，無畸形，附肢完整；d)30日齡以上，尾扇打開、體色自然、成活率高于30％的育苗池的蝦苗；攝食活動能力強，腸胃飽滿，游泳身體伸直，能從水面游入底部；e)應急反應測試蝦苗放入100ml/m3福爾馬林濃度的海水中浸泡20分鐘，成活率達95％以上；放入淡水15分鐘后正常、再放回到正常育苗水中15分鐘后仍正常的苗種；f)饑餓實驗挑選50～100尾苗，放入無餌料的干凈海水桶中，不充氣，一天后成活率100％的苗種；5)室外養(yǎng)成池為水深2m以上，面積5000m2的高位池塘，放苗密度為10～15尾/m2；從在室外養(yǎng)成池中，養(yǎng)殖90～120天的成蝦中挑選體長11.5cm以上、體重20g以上雄蝦，體長12.5cm、體重25g以上雌蝦作為種蝦；6)挑選出的種蝦放入種蝦養(yǎng)殖池，其為水深2m，面積4000m2的高位池塘，放苗密度為5～8尾/m2；養(yǎng)殖120～150天，在達到240～300日齡的大蝦中，挑選體長13.5cm以上、體重35g以上雄蝦，以及挑選體長17.5cm、體重80g以上雌蝦作為后備親蝦；
7)后備親蝦放入后備親蝦養(yǎng)殖池，其水深2m以上，面積2000m2的高位池塘，放苗密度為3～4尾/m2。后備親蝦的日常餌料除了配合飼料外，還需要根據(jù)其攝食量，每周投喂至少2次(餐)以上冰鮮活餌料(冰鮮小雜魚等)進行營養(yǎng)強化。養(yǎng)殖60～120天，用捕蝦籠誘捕從其中挑選親蝦，共150尾(雌92，雄58)要求外觀健康，身體各器官完整、無傷口、日齡313天、雌蝦已交配、雄蝦精莢飽滿，鰓絲呈健康的灰白色，無紅鰓，黑鰓等不正常的病變，蝦體體表完整、光潔，呈健康的、充滿光澤的青灰色；鰓絲呈健康的灰白色，無紅鰓、黑鰓，體表完整、光潔，呈健康的、充滿光澤的青灰色，雄蝦個體體長14.5cm以上、體重45g以上；雌蝦的性成熟個體體長17.5cm以上、體重80g以上；8)所選親蝦運回室內(nèi)池隔離暫養(yǎng)，用專用的親蝦運輸袋，裝貯水池干凈海水至1/3袋，親蝦額角套上塑料小管，視親蝦的大小，每袋放入4～10尾，充入純氧，近距離運輸不需降溫，避免親蝦對溫度升降的不適；如果是遠距離運輸，最好將親蝦運輸袋放入專用泡沫塑料箱，可適當將運輸水溫降低2～3℃，并在泡沫塑料箱內(nèi)放一小袋冰以防水溫急升。這樣運輸?shù)男Ч芎茫苫盥蕩缀踹_100％；本例所選親蝦經(jīng)1小時運輸，運回室內(nèi)后，成活率100％，用100～300ml/m3福爾馬林浸泡3分鐘后放入事先準備好的水泥池隔離暫養(yǎng)；暫養(yǎng)3天后，逐尾取少許鰓樣品，進行PCR檢測，PCR檢測為WSSV、MBV陰性的親蝦用于強化培育及催產(chǎn)，檢測后最終獲得不攜帶WSSV、MBV病毒的健康雌蝦63尾，雄蝦31尾，獲得的健康親蝦暫養(yǎng)2天后，按照常規(guī)方法鑷燙單側眼柄后作為全人工育苗的親體放入親體培育池進行強化培育，其結果見下表實施例1親體選育及促熟產(chǎn)卵情況

實施例2也是從捕獲的海南三亞海域野生斑節(jié)對蝦中選擇親蝦，各步驟同實施例1，在后備親蝦池共挑選親蝦150尾(雌87，雄63)，最終獲得不攜帶WSSV、MBV病毒的健康親體雌蝦57尾，雄蝦37尾作為全人工育苗的親體放入親體培育池進行強化培育，其結果見下表
實施例2親體選育及促熟產(chǎn)卵情況

實施例32003年2～5月從捕獲的海南三亞海域野生斑節(jié)對蝦中選擇親蝦，各步驟同實施例1，共挑選親蝦1350尾(雌792，雄558)，所選親蝦經(jīng)3小時運輸，運回室內(nèi)后，成活率98.3％，最終獲得不攜帶WSSV、MBV病毒的健康雌蝦543尾，雄蝦331尾暫養(yǎng)2天后，按照常規(guī)方法鑷燙單側眼柄后作為全人工育苗的親體放入親體培育池進行強化培育，其結果見下表實施例3的親體挑選情況

在上述健康親蝦中，根據(jù)個體大小分為體長16.0～18.0cm和體長18.0cm以上兩種規(guī)格親體分別進行強化促熟實驗，見比較例A和B。
比較例A挑選規(guī)格雌蝦體長16.0～18.0cm，體重60.0～85.0g，雄蝦體長13.5～15.0cm，體重35.0～50.0g，進行分組實驗。分組前，對每尾實驗雌蝦進行切除單側眼柄。實驗組包括40尾雌蝦和20尾雄蝦(雌雄比為2∶1)，實驗設三個平行實驗組，投喂添加親蝦促熟飼料添加劑的鮮活餌料。對照組包括40尾雌蝦和20尾雄蝦(雌雄比為2∶1)，同樣設三個平行組，直接投喂備用的鮮活餌料。實驗組和對照組培育條件完全相同。經(jīng)過35天繁殖試驗，實驗組斑節(jié)對蝦雌蝦性腺發(fā)育比率為64.5±6.4％，成熟率57.5±4.4％，產(chǎn)卵總量3422.4萬，總產(chǎn)卵蝦138尾次，平均每尾每次產(chǎn)卵248，000粒，總無節(jié)幼體數(shù)2056.9萬，平均孵化率60.1±5.1％；雄蝦成熟率76.5±6.8％。對照組斑節(jié)對蝦雌蝦性腺發(fā)育比率為14.7±2.4％，成熟率9.0±2.5％，產(chǎn)卵總量192.5萬，總產(chǎn)卵蝦11尾次，平均每尾每次產(chǎn)卵175,000粒，總無節(jié)幼體數(shù)96.3萬，平均孵化率50.1±4.0％；雄蝦成熟率60.5±4.3％。
比較例B挑選規(guī)格達到雌蝦體長18.0cm，體重80.0g以上，雄蝦體長14.5～15.8cm，體重45.0～60.0g左右，進行分組實驗。分組前，對每尾實驗雌蝦進行切除單側眼柄。實驗組包括30尾雌蝦和15尾雄蝦(雌雄比為2∶1)，實驗設三個平行實驗組，投喂添加親蝦促熟飼料添加劑的鮮活餌料。對照組包括30尾雌蝦和15尾雄蝦(雌雄比為2∶1)，同樣設三個平行組，直接投喂備用的鮮活餌料。實驗組和對照組培育條件完全相同。經(jīng)過35天繁殖試驗，實驗組斑節(jié)對蝦雌蝦性腺發(fā)育比率為89.6±4.1％，成熟率86.0±4.4％，產(chǎn)卵總量4705.8萬，總產(chǎn)卵蝦138尾次，平均每尾每次產(chǎn)卵341,000粒，總無節(jié)幼體數(shù)2978.8萬，平均孵化率68.3±5.1％；雄蝦成熟率77.5±5.7％。對照組斑節(jié)對蝦雌蝦性腺發(fā)育比率為26.7±2.4％，成熟率18.0±3.5％，產(chǎn)卵總量470.0萬，總產(chǎn)卵蝦20尾次，平均每尾每次產(chǎn)卵235,000粒，總無節(jié)幼體數(shù)235.2萬，平均孵化率50.1±4.3％；雄蝦成熟率60.5±4.2％。
實施例42004年5月，用實例3中野生斑節(jié)對蝦親蝦的后代經(jīng)池塘養(yǎng)殖培育出的子一代親蝦，在人工強化培育下，性成熟后繁殖的后代經(jīng)過人工培育獲得的子二代種苗，并經(jīng)過PCR檢測確定為健康的種苗。投放到海南紅沙池塘養(yǎng)殖，2005年3月起，從池塘養(yǎng)殖出的子二代親體(已知303日齡)，完全滿足性成熟的需要雄蝦日齡應在250天以上；雌蝦日齡達到300天以上。用捕蝦籠誘捕親蝦，初步挑選親蝦的標準是雄性斑節(jié)對蝦個體在雌性斑節(jié)對蝦的性成熟個體體長14.5cm以上、體重45g以上；雌性斑節(jié)對蝦的性成熟個體體長17.5cm以上、體重80g以上。共挑選親蝦197尾(雌128，雄69)，所選親蝦經(jīng)1小時運輸，運回室內(nèi)后，成活率100％，用100～300ml/m3福爾馬林浸泡3分鐘后放入事先準備好的水泥池隔離暫養(yǎng)。暫養(yǎng)3天后，逐尾取少許鰓樣品，進行PCR檢測，PCR檢測為WSSV、MBV陰性的親蝦用于強化培育及催產(chǎn)。檢測后獲得不攜帶WSSV、MBV病毒的健康雌蝦85尾，雄蝦36尾。獲得的健康蝦暫養(yǎng)2天后，按照常規(guī)方法鑷燙單側眼柄后，放入親體培育池進行強化培育，其結果見下表實施例4親體選育及促熟產(chǎn)卵情況


實施例5用實例3中培育出的子二代健康苗種，投放到海南紅沙池塘養(yǎng)殖。各步驟同實施例1。2005年5月，從海南紅沙池塘養(yǎng)殖出的子二代親體(年齡已知360日齡)，完全滿足性成熟的需要雄蝦日齡應在250天以上；雌蝦日齡達到300天以上。用捕蝦籠誘捕親蝦。初步挑選親蝦的標準是雄性斑節(jié)對蝦個體在雌性斑節(jié)對蝦的性成熟個體體長14.5cm以上、體重45g以上；雌性斑節(jié)對蝦的性成熟個體體長18.5cm以上、體重90g以上。共挑選親蝦173尾(雌107，雄66)，所選親蝦經(jīng)1小時運輸，運回室內(nèi)后，死亡5尾(3雌2雄)，成活率97％，用100～300ml/m3福爾馬林浸泡3分鐘后放入事先準備好的池隔離暫養(yǎng)。暫養(yǎng)3天后，逐尾取少許鰓樣品，進行PCR檢測，PCR檢測為WSSV、MBV陰性者用于強化培育及催產(chǎn)。檢測后獲得不攜帶WSSV、MBV病毒的健康親體雌蝦83尾，雄蝦41尾。獲得的健康蝦暫養(yǎng)2天后，按照常規(guī)方法鑷燙單側眼柄后，放入親體培育池進行強化培育，其結果見下表實施例5親體選育及促熟產(chǎn)卵情況

上述結果表明，本發(fā)明所提供的一種從池塘養(yǎng)殖的斑節(jié)對蝦群體中挑選可供催產(chǎn)的親體的方法，可以有效保證挑選出的親體的能達到較高的成熟率、懷卵量、受精率，從而保證人工培育的斑節(jié)對蝦的質(zhì)量。
本發(fā)明并不局限于上述特定的實施方案的范圍內(nèi)，上述實施方案僅僅是為了能夠對本發(fā)明的挑選養(yǎng)殖斑節(jié)對蝦親蝦方法及過程進行詳細地說明，而且有相同功能的挑選方法也屬于本發(fā)明內(nèi)容的一部分。事實上，本領域技術人員根據(jù)前文的描述，就能夠根據(jù)各自需要在不同的養(yǎng)殖環(huán)境條件下(池塘、魚塭)，從符合上述條件的養(yǎng)殖斑節(jié)對蝦中挑選斑節(jié)對蝦親體，這些調(diào)整都應在本文所所附的權利要求書的范圍內(nèi)。
權利要求
1.一種全人工培育斑節(jié)對蝦親體的方法，其特征是包括以下步驟1)挑選高健康野生或池塘養(yǎng)殖斑節(jié)對蝦親蝦A、野生斑節(jié)對蝦親蝦雌蝦體長在20.5cm以上，體重120g以上，雄蝦14.5cm以上，體重50g以上；B、池塘養(yǎng)殖出的斑節(jié)對蝦親蝦雄蝦日齡250天以上；雌蝦日齡300天以上；雄蝦體長13.5cm以上、體重35g以上；雌蝦體長17.5cm以上、體重80g以上；C、外觀器官完整、無傷口，鰓絲呈健康的灰白色，無紅鰓、黑鰓，體表光潔，呈健康的、充滿光澤的青灰色；雌蝦已交配，雄蝦精莢飽滿；D、親蝦運回室內(nèi)親蝦池前，在室內(nèi)或室外水池隔離暫養(yǎng)3～5天；E、經(jīng)過聚合酶鏈反應檢測，證明挑選出的斑節(jié)對蝦未攜帶白斑綜合癥病毒、斑節(jié)對蝦桿狀病毒；2)應用促熟飼料添加劑進行親蝦室內(nèi)強化培育，所述的促熟飼料添加劑由以下以重量份數(shù)計的組份構成高度不飽和脂肪酸5-25； 純度1.5％以上的蝦青素5-10；膽固醇5-10； 維生素C4-10；維生素E1-3； 海帶粉50-80；所述的高度不飽和脂肪酸為液態(tài)，其中二十二碳六烯酸(DHA)加二十碳五烯酸(EPA)占重量的40.0～80.0％，且DHA/EPA在2.0～5.0之間；所述的其余組份都通過100目的標準篩；所得促熟飼料添加劑在親蝦鮮活餌料中拌勻后投喂親蝦；3)親蝦所產(chǎn)受精卵和孵化的幼體進行受精卵和無節(jié)幼體孵化處理技術處理A、產(chǎn)卵前親蝦的浸泡消毒，100～300ml/m3福爾馬林浸泡1～3分鐘；B、受精卵→干凈海水沖洗2～5分鐘→100ml/m3福爾馬林浸泡1分鐘→0.1ml/m3聚維酮碘液浸泡1分鐘→干凈海水沖洗2～5分鐘；C、受精卵的孵化，無節(jié)幼體收集→干凈海水沖洗2～5分鐘→100ml/m3福爾馬林浸泡30秒～1分鐘→0.1ml/m3聚維酮碘液浸泡30秒～1分鐘→干凈海水沖洗2～5分鐘；4)處理后的受精卵經(jīng)人工育苗培育30天以上，從中選擇健康苗種放入室外養(yǎng)成池塘養(yǎng)殖；苗種選擇標準A、蝦苗個體大小均勻，體長在1.1cm以上；B、育苗池隨機取樣50尾蝦苗，PCR檢測100％為陰性。C、蝦苗體表及附肢清潔，無污物及寄生物，體形正常，無畸形，附肢完整；D、蝦苗日齡30日以上，尾扇打開、體色自然、成活率高于30％的育苗池的蝦苗；攝食活動能力強，腸胃飽滿，游泳身體伸直，能從水面游入底部；E、應急反應測試蝦苗放入100ml/m3福爾馬林濃度的海水中浸泡15～30分鐘，成活率達95％以上；放入淡水15分鐘后仍正常、再放回到正常育苗水中15分鐘后仍正常的苗種；F、饑餓實驗挑選50～100尾苗，放入無餌料的干凈海水桶中，不充氣，一天后成活率100％的苗種；5)從在室外養(yǎng)成池中，養(yǎng)殖90～120天的成蝦中挑選體長11.5cm以上、體重20g以上雄蝦，體長12.5cm、體重25g以上雌蝦作為種蝦；6)種蝦放入種蝦養(yǎng)殖池，養(yǎng)殖120～150天，在達到240～300日齡的大蝦中，挑選體長13.5cm以上、體重35g以上雄蝦，以及挑選體長17.5cm、體重80g以上雌蝦作為后備親蝦；7)后備親蝦放入后備親蝦養(yǎng)殖池，養(yǎng)殖60～120天，從其中挑選外觀健康，器官完整、無傷口，鰓絲呈健康的灰白色，無紅鰓、黑鰓，體表完整、光潔，呈健康的、充滿光澤的青灰色，雌蝦已交配，雄蝦精莢飽滿的親體；8)雌雄親體運回室內(nèi)池隔離暫養(yǎng)，經(jīng)過PCR檢測，挑選出的斑節(jié)對蝦未攜帶白斑綜合癥病毒、斑節(jié)對蝦桿狀病毒的作為全人工育苗的親體。
2.根據(jù)權利要求1所述的全人工培育斑節(jié)對蝦親體的方法，其特征在于所述的親體選育全過程的各養(yǎng)殖池處于半封閉式養(yǎng)殖體系中，由貯水池、成蝦養(yǎng)殖池、種蝦養(yǎng)殖池、后備親蝦養(yǎng)殖池組成，貯水池和其它三種池的面積比是1∶3～10；各養(yǎng)殖池相互獨立，養(yǎng)殖用水先經(jīng)過貯水池，消毒處理和生物凈化后再進入其它養(yǎng)殖池。
3.根據(jù)權利要求1所述的全人工培育斑節(jié)對蝦親體的方法，其特征在于所述的斑節(jié)對蝦成蝦養(yǎng)殖放苗密度為1～20尾/m2，優(yōu)選放苗密度為5～20尾/m2，特別優(yōu)選放苗密度為10～15尾/m2；種蝦養(yǎng)殖密度為1～10尾/m2，優(yōu)選放養(yǎng)密度為3～10尾/m2，特別優(yōu)選放養(yǎng)密度為5～8尾/m2；后備親蝦養(yǎng)殖密度為1～5尾/m2，特別優(yōu)選放養(yǎng)密度為3～4尾/m2。
4.根據(jù)權利要求1所述的全人工培育斑節(jié)對蝦親體的方法，其特征在于在后備親蝦養(yǎng)殖期間，后備親蝦的日常餌料除了配合飼料外，還需要根據(jù)其攝食量，每周至少投喂2次冰鮮活餌料進行營養(yǎng)強化。
全文摘要
一種全人工培育斑節(jié)對蝦親體的方法挑選的親蝦經(jīng)促熟飼料添加劑強化培育，所產(chǎn)受精卵經(jīng)人工培育成苗種；選健康苗種在養(yǎng)成池養(yǎng)殖90～120天，選體長11.5cm以上、體重20g以上雄蝦，體長12.5cm、體重25g以上雌蝦作為種蝦；放入種蝦養(yǎng)殖池養(yǎng)殖120～150天，在達到240～300日齡的大蝦中，挑選體長13.5cm以上、體重35g以上雄蝦，及體長17.5cm、體重80g以上雌蝦作為后備親蝦；放入后備親蝦養(yǎng)殖池，養(yǎng)殖60～120天，在日齡300天以上者中選外觀健康，器官完整、無傷口，雌蝦已交配，雄蝦精莢飽滿的親體；用PCR檢測技術，挑選出未攜帶WSSV和MBV病毒的斑節(jié)對蝦作為全人工育苗的親體。本發(fā)明培育出的斑節(jié)對蝦親體催產(chǎn)后成熟比例達50％－86％。
文檔編號A01K61/00GK1745725SQ20051003711
公開日2006年3月15日 申請日期2005年9月13日 優(yōu)先權日2005年9月13日
發(fā)明者江世貴, 周發(fā)林, 黃建華, 馬之明, 葉樂 申請人:中國水產(chǎn)科學研究院南海水產(chǎn)研究所