專利名稱：白菜類蔬菜轉(zhuǎn)育新型甘藍(lán)型油菜細(xì)胞質(zhì)雄性不育系材料及其獲得方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及白菜類蔬菜轉(zhuǎn)育新型甘藍(lán)型油菜細(xì)胞質(zhì)雄性不育系材料及其獲得方法。
背景技術(shù)：
白菜類蔬菜具有明顯的雜種優(yōu)勢(shì)。國(guó)內(nèi)已經(jīng)廣泛開展了大白菜的雜種一代利用工作，但普遍采用自交不親和系或自交親和系的方法進(jìn)行雜種一代生產(chǎn)，該方法存在著生產(chǎn)原種成本高、技術(shù)復(fù)雜、易發(fā)生雙親生活力衰退和容易出現(xiàn)假雜種，影響一代雜種質(zhì)量等問題。利用大白菜雄性不育系生產(chǎn)一代雜種，可以克服上述問題。特別是大白菜細(xì)胞質(zhì)雄性不育系材料的選育和利用是白菜育種及雜種優(yōu)勢(shì)利用的有效途徑之一。利用胞質(zhì)雄性不育系制種既可以獲得高質(zhì)量的雜種后代，又可以保護(hù)育種者的利益。為此，尋找優(yōu)良的細(xì)胞質(zhì)雄性不育系，克服利用自交不親和系育種和制種的缺陷，一直是育種者追求的重要目標(biāo)。
七十年代初，我國(guó)學(xué)者發(fā)現(xiàn)并首創(chuàng)了利用雄性不育二用系(核單隱性基因雄性不育)育成了品種，并在生產(chǎn)上推廣應(yīng)用(如大白菜156、沈陽(yáng)快菜等)，但由于制種時(shí)需多次拔除50％的可育株，費(fèi)時(shí)費(fèi)工，而且往往制種產(chǎn)量較低，從而限制了該不育系的應(yīng)用和發(fā)展。沈陽(yáng)市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所張書芳(1989)首次培育出核基因互作雄性不育系并育成了“快菜一號(hào)”等雜交種大面積推廣應(yīng)用。該雄性不育系不育度和不育株率均可達(dá)到100％，可以配制出高質(zhì)量雜交種，采種量也較高，其缺點(diǎn)是相當(dāng)于三交種，雜種純度受到一定影響；另外雄性不育系的轉(zhuǎn)育較困難。1968年蘿卜胞質(zhì)不育(Ogu CMS)被發(fā)現(xiàn)，并在世界范圍內(nèi)廣泛傳播，但低溫黃化及蜜腺退化是其致命弱點(diǎn)。李光池等(1995)回交轉(zhuǎn)育該不育系16代后，只獲得了黃化現(xiàn)象相對(duì)減弱的134大白菜胞質(zhì)不育系，卻又因植株生長(zhǎng)勢(shì)弱、配合力不強(qiáng)等原因而未能實(shí)用。近20年來，國(guó)內(nèi)外研究最多和利用最廣泛的是Ogu胞質(zhì)不育(蘿卜細(xì)胞質(zhì)雄性不育)和Pol胞質(zhì)不育(波里馬細(xì)胞質(zhì)雄性不育)。
八十年代初，我國(guó)對(duì)由美國(guó)引進(jìn)的Ogu蘿卜細(xì)胞質(zhì)雄性不育源做了大量的向白菜轉(zhuǎn)育的研究工作。但該不育源存在葉片黃化、生長(zhǎng)遲緩、蜜腺退化和配合力差等缺陷，所以至今未能在生產(chǎn)上得到利用。美國(guó)康奈爾大學(xué)用Ogu蘿卜細(xì)胞質(zhì)雄性不育花椰菜與白菜型油菜進(jìn)行細(xì)胞質(zhì)融合，獲得了合成的雄性不育甘藍(lán)型油菜體細(xì)胞雜種，表現(xiàn)出低溫不黃化的優(yōu)點(diǎn)，與白菜雜交、多代回交后獲得了白菜低溫不黃化的Ogu細(xì)胞質(zhì)雄性不育材料。1992年，北京蔬菜研究中心引進(jìn)了這種經(jīng)過改良的蘿卜胞質(zhì)大白菜雄性不育系95A12、95A13。在與白菜連續(xù)多代回交轉(zhuǎn)育后，發(fā)現(xiàn)該不育材料隨轉(zhuǎn)育代數(shù)的增加雖逐漸整齊，但材料退化較快，部分幼苗表現(xiàn)畸形，同時(shí)雜種優(yōu)勢(shì)弱、配合力差，應(yīng)用前景暗淡。中國(guó)農(nóng)科院蔬菜花卉所對(duì)所引進(jìn)的蘿卜胞質(zhì)雄性不育材料Nycms進(jìn)行了轉(zhuǎn)育和研究，得到了同樣的結(jié)論。
陜西省農(nóng)科院蔬菜花卉所利用甘藍(lán)型油菜Polima不育源為材料轉(zhuǎn)育成異源胞質(zhì)白菜不育系CMS3411-7(專利號(hào)為92104134.9)，其不育株率可達(dá)100％，不育度在95％以上，但致命的弱點(diǎn)是在不利的環(huán)境條件下會(huì)出現(xiàn)微量花粉和輕度蕾敗育現(xiàn)象。北京蔬菜研究中心用Polima不育源雜13、雜33與大白菜多代回交轉(zhuǎn)育的研究，發(fā)現(xiàn)其育性不穩(wěn)定，容易出現(xiàn)有粉株，影響整體純度，很難利用。溫度敏感一直是Pol CMS的一個(gè)難以徹底解決的重要問題，其存在的微量花粉現(xiàn)象(即不育性不穩(wěn)定)已成為育種者所關(guān)注的問題。因?yàn)樵陔s交制種中，如果遇到不育系開花過早(花期不遇)，且有微粉發(fā)生時(shí)，就可能出現(xiàn)自交苗從而降低制種雜交率(花期相遇時(shí)，由于白菜自交的遲配性，即使出現(xiàn)微粉也不影響雜交率)。Ogu-CMS存在多代轉(zhuǎn)育后植株長(zhǎng)勢(shì)退化、雜交優(yōu)勢(shì)差，Pol CMS存在育性受環(huán)境條件影響的缺陷等缺點(diǎn)。因此尋找能夠克服Ogu白菜胞質(zhì)不育系和Pol白菜胞質(zhì)不育系上述缺點(diǎn)的新型大白菜不育系材料是非常必要的。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種不育性穩(wěn)定、組合力強(qiáng)、轉(zhuǎn)育容易、生長(zhǎng)勢(shì)旺、抗病性強(qiáng)、增產(chǎn)明顯的白菜類蔬菜轉(zhuǎn)育新型甘藍(lán)型油菜細(xì)胞質(zhì)雄性不育系材料。
本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供這種白菜類蔬菜轉(zhuǎn)育新型甘藍(lán)型油菜細(xì)胞質(zhì)雄性不育系材料的獲得方法。
為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采取以下設(shè)計(jì)方案白菜類蔬菜轉(zhuǎn)育新型甘藍(lán)型油菜細(xì)胞質(zhì)雄性不育系材料的獲得方法，該方法包括以下步驟(1)將甘藍(lán)型油菜胞質(zhì)不育系與白菜類蔬菜進(jìn)行人工蕾期剝蕾或花期套袋雜交，露出柱頭后，將白菜的花粉涂于其上，柱頭正常膨大，獲得轉(zhuǎn)育一代種子；(2)將轉(zhuǎn)育一代種子采用加代處理的方法，結(jié)合田間觀察，選擇優(yōu)良不育系單株，并用白菜優(yōu)良株系進(jìn)行多代回交轉(zhuǎn)育；(3)回交五代后獲得穩(wěn)定遺傳的白菜細(xì)胞質(zhì)雄性不育系材料。
所述加代處理方法是指每年加代1～2代。具體做法為將剛收下的種子用清水浸20～40分鐘，再放到2～4％的雙氧水中浸2～4小時(shí)，在23～27℃下催芽，次日將萌動(dòng)的種子放到1～5℃冰箱春化處理20～30天。取出后播到20～21℃的溫室中，夜間采用光照強(qiáng)度為3000lux的光源進(jìn)行補(bǔ)充光照到16小時(shí)日長(zhǎng)。25～30天可以抽薹開花，然后進(jìn)行人工回交授粉。
白菜類蔬菜轉(zhuǎn)育新型甘藍(lán)型油菜細(xì)胞質(zhì)雄性不育系材料的獲得方法，該方法為將小白菜與穩(wěn)定的大白菜不育系材料進(jìn)行蕾期剝蕾和花期套袋雜交，獲得穩(wěn)定遺傳的小白菜細(xì)胞質(zhì)不育系材料。小白菜不育系材料也可使用前述方法獲得，但使用本方法比使用前述方法更省時(shí)、高效。
本發(fā)明的有益效果本發(fā)明提供的白菜類蔬菜不育系材料具有以下突出優(yōu)點(diǎn)(1)所獲得的不育系屬于細(xì)胞質(zhì)不育，其不育性穩(wěn)定，多代回交不退化，轉(zhuǎn)育容易，生長(zhǎng)勢(shì)旺，組合力強(qiáng)。
(2)轉(zhuǎn)育早代，不育系比保持系植株生長(zhǎng)勢(shì)強(qiáng)，具有種間雜交優(yōu)勢(shì)。
(3)轉(zhuǎn)育早代，不育系的晚抽薹性比保持系強(qiáng)。
(4)用不育系配制F1，種子產(chǎn)量高，制種成本低，省工。
(5)不育系抗病性強(qiáng)，增產(chǎn)明顯。
本發(fā)明提供的該材料的獲得方法簡(jiǎn)便，成本低廉，便于推廣，市場(chǎng)前景廣闊。
下面結(jié)合附圖對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說明。


圖1為本發(fā)明雄性不育系的花和花藥2為轉(zhuǎn)育早代不育系和相應(yīng)的保持系的抽薹性比較圖(左為不育系，處于現(xiàn)蕾期；右為保持系，處于抽薹期)圖3-1為轉(zhuǎn)育早代的不育系葉片(左)與保持系葉片(右)比較3-2為轉(zhuǎn)育早代的不育系的結(jié)球情況(半抱球)和外葉性狀(半裂葉)圖具體實(shí)施方式
實(shí)施例1、大白菜轉(zhuǎn)育新型甘藍(lán)型油菜細(xì)胞質(zhì)雄性不育系材料的獲得一、材料和方法1、材料甘藍(lán)型油菜細(xì)胞質(zhì)雄性不育系材料CMS96來源于法國(guó)，其蜜腺正常，葉片不黃化，花瓣大，花藥白色退化，柱頭正常，植株生長(zhǎng)旺盛。
用于轉(zhuǎn)育的白菜材料56份，其中26份大白菜材料，是一些普通類型的需要改良和提高抗病性的材料。余下的30份材料是純合的、各種類型的大白菜材料。所有材料都來源于北京市蔬菜研究中心。
2、方法(1)從1996年春季開始，采用人工蕾期剝蕾或花期套袋技術(shù)進(jìn)行甘藍(lán)型油菜細(xì)胞質(zhì)不育系與大白菜雜交和多代回交轉(zhuǎn)育其雄性不育性。方法為剝開甘藍(lán)型油菜細(xì)胞質(zhì)不育系CMS96的花蕾，露出柱頭后，將26份大白菜株系的花粉涂于其上，柱頭正常膨大，獲得轉(zhuǎn)育1代種子；(2)將轉(zhuǎn)育1代種子采用加代處理的方法，每年加代1～2次，同時(shí)結(jié)合秋天選留老株和春季小株授粉進(jìn)行多代回交轉(zhuǎn)育。對(duì)轉(zhuǎn)育的每一世代都調(diào)查植株的植物學(xué)性狀，淘汰葉柄有缺刻、偏向甘藍(lán)型油菜的裂葉型等中間材料，選留葉形與白菜相似的單株，并用白菜優(yōu)良株系進(jìn)行多代回交轉(zhuǎn)育。歷年春播或秋播不育系的代號(hào)為98-517，98-518，98-519，98-520；99-327，99-329，99-331，99-332；00.3-195，00.3-226，00.3-351；01.3-178，01.3-204，01.3-307；02.3-178，02.3-196，02.3-311。
加代的具體做法是將剛收下的種子用清水浸泡30分鐘，再放到3％的雙氧水中浸3小時(shí)，在25℃下催芽，次日將萌動(dòng)的種子放到3℃冰箱春化處理25天。取出后播到20℃～21℃的溫室中，夜間采用光照強(qiáng)度為3000lx的光源進(jìn)行補(bǔ)光。25天～30天可以抽薹開花，然后與大白菜進(jìn)行人工回交授粉。
(3)獲得穩(wěn)定遺傳的大白菜細(xì)胞質(zhì)不育系材料按上述方法經(jīng)過5代回交即可獲得性狀穩(wěn)定的大白菜CMS96胞質(zhì)不育系材料。目前已獲得了5份不育性穩(wěn)定、經(jīng)濟(jì)性狀優(yōu)良、生長(zhǎng)整齊一致的、純合的大白菜CMS96胞質(zhì)不育系材料，(02.3-168，02.3-178，02.3-196，02.3-307，02.3-311)。繼續(xù)用30份各種類型的、純合的大白菜與2份純合、穩(wěn)定的大白菜不育系進(jìn)行回交轉(zhuǎn)育，進(jìn)一步擴(kuò)大該不育系的利用范圍。同時(shí)利用穩(wěn)定的大白菜細(xì)胞質(zhì)不育系試配雜種一代。
二、結(jié)果與分析1、用26份大白菜材料與甘藍(lán)型細(xì)胞質(zhì)不育系CMS96進(jìn)行雜交試驗(yàn)，結(jié)果表明，雜交結(jié)實(shí)率極高，達(dá)到100％，其中最大莢結(jié)子數(shù)為21粒種子/莢，最小莢為5粒/莢，雜交后代100％不育。在顯微鏡下，觀察不到該不育系任何花粉。如圖1所示，雄性不育系的花，花瓣鮮艷、正常開放，可以充分吸引蜜蜂等昆蟲。雄性不育系的柱頭正常，很容易接受外來花粉，花藥白色、空癟退化，同時(shí)由于該不育系的蜜腺正常，可以觀察到蜜蜂訪花和在自然條件下結(jié)實(shí)良好的枝條。
目前已經(jīng)獲得5份穩(wěn)定遺傳的大白菜細(xì)胞質(zhì)雄性不育材料，這些不育系與保持系或父本雜交結(jié)實(shí)正常而且種子產(chǎn)量高。用30份普通大白菜與2份穩(wěn)定的大白菜不育系進(jìn)行回交轉(zhuǎn)育，已獲得了轉(zhuǎn)育2代的種子。
2、CMS96細(xì)胞質(zhì)不育系的特征(1)CMS96細(xì)胞質(zhì)不育系不育性穩(wěn)定，多代回交不退化，轉(zhuǎn)育容易，生長(zhǎng)勢(shì)旺，組合力強(qiáng)。
比較了利用CMS96不育系和相應(yīng)的保持系(該保持系與不育系只是在育性上有區(qū)別，其它性狀已經(jīng)完全一致)的植物學(xué)性狀和營(yíng)養(yǎng)成分含量，結(jié)果見表1、表2，表明多代回交獲得的純合CMS96不育系生長(zhǎng)勢(shì)不退化，其植株生長(zhǎng)旺盛，優(yōu)勢(shì)強(qiáng)。如表1所示，在主要植物學(xué)性狀上，不育系與保持系基本相同。不育系轉(zhuǎn)育早代比保持系植株生長(zhǎng)勢(shì)提高，表現(xiàn)出種間雜交優(yōu)勢(shì)的特點(diǎn)。另外，轉(zhuǎn)育早代不育系的晚抽薹性比保持系強(qiáng)。轉(zhuǎn)育早代不育系和相應(yīng)的保持系在經(jīng)過相同的低溫處理后(“破肚”的種子在4℃冰箱中處理半個(gè)月)，不育系比保持系晚抽薹。如圖2所示，不育系處在現(xiàn)蕾期，而保持系已抽出了很長(zhǎng)的花薹。轉(zhuǎn)育早期，不育系葉片形狀為甘藍(lán)型油菜和白菜的中間型(圖3-1，圖3-2)。由圖3-1可見轉(zhuǎn)育早代的不育系葉片(左)為甘藍(lán)型油菜與白菜的中間型，與保持系葉片(右)完全不同，保持系葉片邊緣沒有裂刻。圖3-2為轉(zhuǎn)育早代的不育系植株，表現(xiàn)為半抱球，外葉有又深且大的中度裂刻。經(jīng)過多代回交轉(zhuǎn)育和選擇，很容易淘汰不育系中間類型材料，最終獲得與大白菜葉片和抱球性狀完全一致的不育系材料。
表1 CMS96不育系與保持系和不育系F1、相應(yīng)保持系F1的比較研究項(xiàng)目 代號(hào) 株高 開展度 葉數(shù) 中心柱 球高球?qū)? 荒菜重 凈菜重名稱 2001-(cm)(cm)(片) 長(zhǎng)度 (cm)(cm) (kg)(kg)(cm)CMS96-1 3-17836.662.69.03.432.818.02.72.1保持系 3-17636.662.48.43.232.016.42.21.8CMS96-2 3-30453.681.212.0 5.937.621.05.53.6保持系 3-30343.473.210.0 3.737.018.43.52.3CMS96-3 3-30750.072.610.8 4.735.218.63.82.5保持系 3-30647.068.69.14.532.817.83.82.6CMS96-4 205 42.866.29.43.328.318.33.42.6保持系 194 39.859.810.4 3.025.013.32.72.1CMS96(F1) 3-37838.063.89.45.628.623.65.14.1保持系(F1) 2-19845.476.28.45.332.423.04.83.7CMS96(F1) 3-38341.669.47.85.129.620.24.23.2保持系(F1) 2-36637.465.88.25.527.421.24.13.2CMS96(F1) 3-39550.282.010.2 5.436.226.86.34.1保持系(F1) 2-31943.870.07.86.930.023.04.73.8CMS96(F1) 3-39853.283.611.2 6.139.818.25.54.1保持系(F1) 2-36154.074.87.05.341.619.05.13.7
表2 CMS96與保持系營(yíng)養(yǎng)成分平均值的比較研究項(xiàng)目 代號(hào) Vc β胡蘿卜 粗纖維Ca Fe硫氰酸根名稱 2001- (mg/100g)素 (％) (mg/kg) (mg/kg) (mg/kg)(mg/kg)CMS96-13-17820.0 -- 0.42 412 2.2913.52保持系 3-17625.4 -- 0.50 452 2.5111.86CMS96-33-30725.4 2.200.49 576 5.7112.15保持系 3-30622.5 1.900.48 434 3.1513.42CMS96-5C27 19.6 0.700.50 571 5.9217.44保持系 P1 16.8 0.300.46 626 4.8817.40(2)CMS96細(xì)胞質(zhì)不育系材料具有不育性穩(wěn)定、不育度和不育株率100％、蜜腺正常、花藥白色退化、轉(zhuǎn)育速度快、植株整齊一致的優(yōu)點(diǎn)。
大白菜不育系CMS96，為甘藍(lán)型油菜細(xì)胞質(zhì)不育，不育株率和不育度均為100％，且不育性穩(wěn)定。已獲得的5份純合的大白菜胞質(zhì)不育系CMS96也為不育性穩(wěn)定、不育株率和不育度均為100％、穩(wěn)定遺傳的細(xì)胞質(zhì)雄性不育系，其蜜腺和柱頭正常、花藥白色退化和具有轉(zhuǎn)育容易等突出優(yōu)點(diǎn)。其轉(zhuǎn)育速度快和不育性穩(wěn)定的優(yōu)點(diǎn)，是以往任何白菜不育系所不能比擬的。用普通大白菜與穩(wěn)定的大白菜胞質(zhì)不育系CMS96回交轉(zhuǎn)育5代即可獲得穩(wěn)定遺傳的所需類型的大白菜胞質(zhì)不育系。
(3)該不育系在抗病性上和保持系相一致，但增產(chǎn)明顯。
不育系和用不育系試配的F1對(duì)病毒病、霜霉病、黑斑和黑腐病等大白菜主要病害的抗病性與相應(yīng)保持系和用保持系試配的F1相當(dāng)或有所提高。在產(chǎn)量方面，由表1可見，不育系和其F1無論是荒菜和凈菜產(chǎn)量明顯高于保持系和其F1。不育系比保持系凈菜產(chǎn)量平均提高33％，最高達(dá)57％。用不育系試配的F1比保持系試配的F1凈菜產(chǎn)量平均提高10％。
(4)CMS96細(xì)胞質(zhì)不育系雜種一代的種子產(chǎn)量高，結(jié)籽好。
對(duì)3份不育系和相應(yīng)保持系在室溫下催芽，待種子“破肚”后置于4℃冰箱中低溫春化25天后，播種在溫室中。同時(shí)在溫室中也有同期盛開的其它白菜的花?；ㄆ谧尷ハx自然輔助授粉，種子成熟后收獲并考種、稱重，結(jié)果如表3所示，表明不育系F1代種子產(chǎn)量高于保持系的F1種子產(chǎn)量。
表3 三種不育系和對(duì)應(yīng)的保持系結(jié)種產(chǎn)量比較代號(hào)特點(diǎn) 種子產(chǎn)量(克)/株差值01-411 保持系 0.2201-646 不育系 0.48 0.2601-604 保持系 0.1401-644 不育系 0.32 0.1801-462 保持系 0.8901-709 不育系 1.14 0.25(5)CMS96胞質(zhì)不育系是一種新型和優(yōu)良的大白菜細(xì)胞質(zhì)雄性不育材料，表現(xiàn)出了廣闊的應(yīng)用前景。
CMS96大白菜細(xì)胞質(zhì)雄性不育系克服了Pol-CMS存在育性受環(huán)境條件影響的缺陷和Ogu-CMS多代轉(zhuǎn)育后植株長(zhǎng)勢(shì)退化、雜交優(yōu)勢(shì)差等缺點(diǎn)。在對(duì)CMS96不育系與保持系、不育系F1和相應(yīng)保持系F1在植物學(xué)性狀和營(yíng)養(yǎng)成分進(jìn)行了綜合分析、比較后認(rèn)為該不育系獲得了保持系的性狀和營(yíng)養(yǎng)成分，且生活力不退化。用該不育系試配雜交組合，在白菜產(chǎn)量方面表現(xiàn)出較好的增產(chǎn)潛力，具有配合力高的特點(diǎn)；同時(shí)不育系F1代種子產(chǎn)量高，制種容易、成本低。綜上所述，CMS96大白菜細(xì)胞質(zhì)雄性不育系是一份很有利用價(jià)值、優(yōu)良的新型大白菜胞質(zhì)不育系，有很好的應(yīng)用前景。進(jìn)一步開展對(duì)該不育系的研究和利用將有利于白菜育種方法的改進(jìn)，在白菜育種途徑方面將有所突破和提高。
實(shí)施例2、小白菜轉(zhuǎn)育新型甘藍(lán)型油菜細(xì)胞質(zhì)雄性不育系材料的獲得從2000年開始用5份小白菜與1份穩(wěn)定的大白菜CMS96不育系進(jìn)行蕾期剝蕾和花期套袋雜交，從雜交后代中選取葉柄無葉翼、葉形偏向小白菜的株系，并用這5份優(yōu)良的小白菜繼續(xù)與不育系進(jìn)行回交轉(zhuǎn)育，已獲得了轉(zhuǎn)育2代的種子(2003年代號(hào)分別為03.N-3，03.N-81，03.N-118，03.N-147，03.N-168)。結(jié)果表明二者雜交容易，可以獲得不育度和不育株率為100％的小白菜不育系。該小白菜不育系生長(zhǎng)勢(shì)強(qiáng)，結(jié)籽好。目前雖還沒有獲得穩(wěn)定遺傳的小白菜不育系，但轉(zhuǎn)育2代后該不育系表現(xiàn)出的穩(wěn)定的不育性和旺盛的生長(zhǎng)勢(shì)等優(yōu)點(diǎn)已展現(xiàn)出了其在小白菜育種中的應(yīng)用前景。
權(quán)利要求
1.白菜類蔬菜轉(zhuǎn)育新型甘藍(lán)型油菜細(xì)胞質(zhì)雄性不育系材料的獲得方法，其特征在于該方法包括以下步驟(1)將甘藍(lán)型油菜細(xì)胞質(zhì)不育系與白菜類蔬菜進(jìn)行人工蕾期剝蕾或花期套袋雜交，露出柱頭后，將白菜的花粉涂于其上，柱頭正常膨大，獲得轉(zhuǎn)育一代種子；(2)將轉(zhuǎn)育一代種子采用加代處理的方法，通過田間觀察，結(jié)合秋天選留老株和春季小株獲得優(yōu)良不育系單株，并用白菜優(yōu)良株系授粉進(jìn)行多代回交轉(zhuǎn)育；(3)回交五代后獲得穩(wěn)定遺傳的白菜細(xì)胞質(zhì)不育系材料。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述加代處理是指每年加代1次～2次，具體做法為將剛收下的種子用清水浸20～40分鐘，再放到2％～4％的雙氧水中浸2小時(shí)～4小時(shí)，在23℃～27℃下催芽，次日將萌動(dòng)的種子放到3℃冰箱春化處理20天～30天；取出后播到20℃～21℃的溫室中，夜間采用光照強(qiáng)度為3000lux的光源進(jìn)行補(bǔ)充光照；25天～30天可以抽薹開花，然后與保持系進(jìn)行蕾期或花期人工回交授粉。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于所述的白菜類蔬菜為大白菜。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于所述的白菜類蔬菜為小白菜。
5.白菜類蔬菜轉(zhuǎn)育新型甘藍(lán)型油菜細(xì)胞質(zhì)雄性不育系材料的獲得方法，其特征在于該方法為將小白菜與穩(wěn)定的大白菜不育系材料進(jìn)行蕾期剝蕾和花期套袋雜交，獲得穩(wěn)定遺傳的小白菜細(xì)胞質(zhì)不育系材料。
6.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法獲得的白菜類蔬菜轉(zhuǎn)育新型甘藍(lán)型油菜細(xì)胞質(zhì)雄性不育系材料。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的不育系，其特征在于所述的白菜類蔬菜為大白菜。
8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的不育系，其特征在于所述的白菜類蔬菜為小白菜。
9.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法獲得的白菜類蔬菜轉(zhuǎn)育新型甘藍(lán)型油菜細(xì)胞質(zhì)雄性不育系材料。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種白菜類蔬菜轉(zhuǎn)育新型甘藍(lán)型油菜細(xì)胞質(zhì)雄性不育系材料的獲得方法及通過該方法獲得的白菜類蔬菜的雄性不育系。該方法包括以下步驟(1)將甘藍(lán)型油菜胞質(zhì)不育系與白菜類蔬菜進(jìn)行人工蕾期剝蕾或花期套袋雜交，露出柱頭后，將白菜的花粉涂于其上，柱頭正常膨大，獲得轉(zhuǎn)育一代種子；(2)將轉(zhuǎn)育一代種子采用加代處理的方法，結(jié)合田間觀察，選擇優(yōu)良不育系單株，并用白菜優(yōu)良株系進(jìn)行多代回交轉(zhuǎn)育；(3)回交5代后可以獲得穩(wěn)定遺傳的白菜細(xì)胞質(zhì)不育系材料。采用本方法獲得的不育系材料的不育性穩(wěn)定、轉(zhuǎn)育容易、生長(zhǎng)勢(shì)旺、組合力強(qiáng)、抗病性強(qiáng)、增產(chǎn)明顯、雜種后代種子產(chǎn)量高。該方法簡(jiǎn)便，成本低廉，便于推廣，市場(chǎng)前景廣闊。
文檔編號(hào)A01H1/02GK1531843SQ0312098
公開日2004年9月29日 申請(qǐng)日期2003年3月26日 優(yōu)先權(quán)日2003年3月26日
發(fā)明者張德雙, 張鳳蘭, 徐家炳, 曹鳴慶, 余陽(yáng)俊, 趙岫云, 陳廣, 孫繼志, 盧桂香 申請(qǐng)人:北京市農(nóng)林科學(xué)院