專利名稱：一種復合生物菌劑、制備方法及其在制備生物菌肥中的應用的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種可用于制備菌肥的生物菌劑及其制備方法，特別是涉及一種含有多種菌種且可用于制備生物菌肥的復合菌劑及其混合培養(yǎng)的制備方法。
國外在生物肥料的研制和應用方面起步較早，如美國的固氮菌、日本的BOM菌、韓國的樂土菌等在我國也有應用。但價格較高，功能單一，液態(tài)施用不方便，推廣受到限制。我國在這一方面應該說起步并不算晚。五六十年代就有大面積推廣應用，并起到了很好的增產效果。但由于許多地方不具備條件，科技落后，質量沒有保證。進入80年代末期，生物菌肥又在我國興起，據(jù)文獻報道(孫義，1990有機肥料在現(xiàn)代農業(yè)中的作用，自然科學年鑒2，31-39)主要有北京大學的增產菌、河北的鉀細菌、北京的肥力高、航天工業(yè)部的天神901等，但其中多數(shù)為單一菌種，功能單一，有的效果不顯著。
本發(fā)明的目的在于提供一種含多種菌種的可用于制備生物菌肥的復合菌劑及其制備方法。
本發(fā)明涉及的用于制備生物菌肥的復合菌劑中含有如下菌種(單位體積內菌數(shù)比)纖維素分解菌(10-30％)、淀粉分解菌(10-30％)、地衣芽孢桿菌(10-30％)、酵母菌(10-30％)、固氮菌(10-20％)、P細菌(10-30％)、K細菌(10-20％)、蘇云金桿菌(10-30％)。
菌種的培養(yǎng)1、斜面種子培養(yǎng)八種菌分別接斜面，培養(yǎng)24-36小時，然后各加入到無菌水中(試管)，振蕩30分鐘，待均勻后用血球計數(shù)板計數(shù)，使每只試管中各種菌的菌數(shù)均為108個/ml(如不足，則一方面可以加大接菌量，另一方面可以加長培養(yǎng)時間)，得菌懸液；2、一級種子培養(yǎng)八種菌各取1ml的菌懸液分別放入八只250ml三角瓶中，每只三角瓶內分別放入培養(yǎng)液，其中P細菌、K細菌、淀粉分解菌、蘇云金桿菌、地衣芽孢桿菌用2號培養(yǎng)基(用蒸餾水配成培養(yǎng)液，下同)，固氮菌用3號培養(yǎng)基，酵母菌用13號培養(yǎng)基，纖維素分解菌用36號培養(yǎng)基，搖床(180轉/分鐘)30℃培養(yǎng)36-72小時，用血球計數(shù)法計數(shù)，每種菌劑中菌數(shù)含量達108個/ml，按如上菌數(shù)比將八種菌劑混合；3、二級種子培養(yǎng)取混合后的菌劑放入500ml三角瓶中，接菌量為10％，培養(yǎng)基選用蛋白胨5-15克/100ml、NaCl 2-8克/100ml、牛肉膏1-5克
/100ml、MgSO4·7H2O 5-15克/100ml、FeSO4·7H2O 0.01-0.05克/100ml、K2HPO40.5-3克/100ml、Na2HPO40.1-1克/100ml、羧甲基纖維素鈉0.5-5克/100ml、CaCl20.05-0.5克/100ml、蔗糖2-8克/100ml、(NH4)2SO40.5-3克/100ml混合，其余為蒸餾水，搖床(轉數(shù)180轉/分鐘)30℃培養(yǎng)36-72小時，pH值為7.0-7.5，血球計數(shù)法計數(shù)，同時用平板計數(shù)法進行對照，使菌數(shù)達3-8×109個/ml，即得復合菌劑；本發(fā)明制備的復合生物菌劑加入輔料則可制成生物菌肥，以下進行詳細的敘述。
A、應用于土壤中有機質豐富的生物菌肥的制備將復合菌劑(5-10％)、膨潤土(20-36％)、沸石粉(20-40％)、蛭石粉(15-40％)混合，攪拌，抽樣檢測(平板計數(shù)法)使生物菌肥中含有效活菌數(shù)為2-3億個/克，包裝、封袋，即得生物菌肥。
菌劑的質量(平板計數(shù)法)孔徑為2.5-4.5mm，每克含有效活(復合)菌數(shù)為2-3億個，雜菌數(shù)≤10％，含水量20-35％，pH值6.0-7.2，均符合中華人民共和國農業(yè)行業(yè)標準NY227-94。
復合生物菌肥的肥效實驗1、室內小麥栽種實驗
從表中可以看出，以菌劑做肥料的小麥長勢明顯好于素土的。隨著菌肥用量的增加，小麥的長勢情況變好。
2、大田種植實驗該復合生物菌肥在各地區(qū)進行了多品種的種植實驗，能明顯地促進農作物生長，增強農作物抗干旱、抗倒伏、抗病蟲害等能力，保證在農作物生長的各個時期肥力充足，改善作物品質，同時克服了單施化肥造成的土壤板結、地力下降、農作物體內殘留有害物增多等不利因素，從而達到增產增收目的。
經過大量的大田種植實驗表明本復合生物菌肥在玉米上應用，最高增產幅度達28.7％，投入產出比為1∶10-35，使玉米早出苗、撥節(jié)、抽穗期、成熟期提前，具有抗旱、抗倒伏等優(yōu)良效果；本生物菌肥可使水稻平均早出苗1-2天、分蘗數(shù)增加1-8.2個、每平方米有效穗數(shù)增加7.4-64.9個、株高、穗長有所增加，空秕率下降，返青期提早1-4天，齊穗期早3-7天，成熟期提前2-6天；增產幅度平均為9.96％，投入產出比為1∶10左右；在白城的低洼鹽堿地區(qū)防赤枯病的效果；冬小麥的種植實驗表明，可使苗齊、苗壯，增加分蘗數(shù)，提高抗寒能力，特別對預防全蝕病效果明顯，防效達95％以上，提高產量10-15％；黃瓜、薯類、芹菜、的種植實驗表明，均有增產效果，同時亦表現(xiàn)出抗倒伏、抗病、抗旱等效果。
綜上所述，可以看出，本生物菌肥具有增產增收、改良土壤、防病蟲害、抗倒伏等方面對農作物具有優(yōu)良的效果。
B但實驗也證明，上述生物菌肥只有在有機質豐富的土地上才有明顯的效果，其原因是只有在這種條件下，菌肥中的各種菌才有可能大量繁殖，產生大量的各種適應農作物生長的養(yǎng)分。為使本發(fā)明的復合生物菌劑制得的菌肥可更廣泛地應用于不同土質，適合大面積推廣應用的實際需要，一般在生物菌肥中還需增加有機質輔料，如人、家禽、牲畜糞便、桔桿稻草、經處理后含有機質豐富的垃圾土等輔料。
文獻表明(上海環(huán)境科學，城市生活垃圾堆肥動態(tài)工藝研究，陳世和等，11(5)，13-15，1992)，經垃圾處理廠采用堆肥技術處理的生活垃圾中含有大量的有機質，如生活垃圾中有豐富的氮、磷、鉀，所測定的最低值為含氮量2367mg/kg，速效氮369mg/kg，總磷1652mg/kg，總鉀24664mg/kg，速效鉀達9783mg/kg。說明生活垃圾中蘊藏著巨大的能量，有人稱生活垃圾為“可再生的第二礦藏”已得到證實。
將上述復合菌劑噴灑到處理好的垃圾上，使垃圾土中復合菌數(shù)達到2-3億個/g，則制成可用于不同土質的含多菌種的高效生物有機肥。
此種菌肥施用于室內的小麥種植實驗效果如表
從上可以看出，含多種菌種的生物有機肥應用于垃圾土比單一菌種效果好。單位質量內菌數(shù)對小麥的發(fā)芽率、小麥的長勢、小麥百粒重都有影響。實驗證明，當菌數(shù)2.0-3.0億/g時效果最好，此時，發(fā)芽率高、株高、葉寬、莖圍等最好，且抽穗整齊無拖后現(xiàn)象，百粒重也最大。
除種植小麥外，我們在實驗室內還種植了水蘿卜，效果也與小麥種植效果一致。復合生物有機肥不僅能促進作物生長，能增強作物抗病能力，另外，口感好也是使用生物有機肥后蔬菜等的一個特性。
復合生物有機肥的質量測定(如下表)
復合生物有機肥對土壤理化性質的影響實驗種植的莊稼及蔬菜收獲后，采集土樣測試其中的氮、磷、鉀、有機質等指標的含量，如下表
從上表可以看出，使用過高效復合生物有機肥的土壤中氮、磷、鉀、有機質等含量都有不同程度的提高，而且土壤無板結現(xiàn)象，這說明該高效生物有機肥能改善土壤的理化性質，提高土壤的肥力，改善土壤的結構，有利于農作物的生長。使用城市生活垃圾制成的高效生物有機肥能明顯提高作物的總生長量及植株生長量，能促進果實早熟，提高作物的抗病能力，具有很好的增產效果，使用高效生物有機肥后，土壤中氮、磷、鉀、有機質等各主要指標的含量均有不同程度的提高，說明該高效生物有機肥能改善土壤的理化性質，提高土壤肥力。
綜上所述，本發(fā)明所涉及的復合生物菌劑具有應用范圍廣、使農作物增產增收效果顯著、且可使垃圾廢物充分得到利用從而變廢為寶等優(yōu)良效果。
下面結合實施例來對本發(fā)明所涉及的復合生物菌劑進一步進行說明。
實施例11、斜面種子培養(yǎng)八種菌分別接斜面，培養(yǎng)30小時。然后各加入到6ml無菌水中，振蕩30分鐘，待均勻后用血球計數(shù)板計數(shù)，使每只試管中各種菌的菌數(shù)均為108個/ml，得菌懸液；
2、一級種子培養(yǎng)取八種菌的菌懸液各1ml分別放入八只250ml三角瓶中，每只三角瓶內分別放入100ml培養(yǎng)液，其中P細菌、K細菌、淀粉分解菌、蘇云金桿菌、地衣芽孢桿菌用2號培養(yǎng)基(用蒸餾水配成培養(yǎng)液，下同)，固氮菌用3號培養(yǎng)基，酵母菌用13號培養(yǎng)基，纖維素分解菌用36號培養(yǎng)基，搖床(180轉/分鐘)30℃培養(yǎng)，pH值7.2，各培養(yǎng)48小時后，用血球計數(shù)板法計數(shù)，按單位體積內菌數(shù)比各12.5％將八種菌劑混合；3、二級種子培養(yǎng)，取混合后的菌劑20ml放入500ml三角瓶中，培養(yǎng)基選用蛋白胨20克、NaCl 10克、牛肉膏6克、MgSO4·7H2O 20克1、FeSO4·7H2O 0.02克、K2HPO42克、Na2HPO41克、羧甲基纖維素鈉4克、CaCl20.2克、蔗糖10克、(NH4)2SO42克混合，用蒸餾水配成200ml培養(yǎng)液，搖床(轉數(shù)180轉/分鐘)30℃培養(yǎng)48小時，pH值為7.2，得5.5×109個/ml的復合菌劑；此復合菌劑與垃圾土混合，使垃圾土中菌數(shù)達2.67億/g，在多種土質中種植小麥、玉米、黃瓜的效果均明顯，增產達10-30％的效果，且農作物有明顯的抗病能力。
實施例21、斜面種子培養(yǎng)八種菌分別接斜面，培養(yǎng)30小時。然后各加入到6ml無菌水中，振蕩30分鐘，待均勻后用血球計數(shù)板計數(shù)，使每只試管中各種菌的菌數(shù)均為108個/ml，得菌懸液；2、一級種子培養(yǎng)取八種菌的菌懸液各1ml分別放入八只250ml三角瓶中，每只三角瓶內分別放入100ml培養(yǎng)液，其中P細菌、K細菌、淀粉分解菌、蘇云金桿菌、地衣芽孢桿菌用2號培養(yǎng)基(用蒸餾水配成培養(yǎng)液，下同)，固氮菌用3號培養(yǎng)基，酵母菌用13號培養(yǎng)基，纖維素分解菌用36號培養(yǎng)基，搖床(180轉/分鐘)30℃培養(yǎng)，pH值7.5，培養(yǎng)48小時，按單位體積內纖維素分解菌、淀粉分解菌、地衣芽孢桿菌、酵母菌、固氮菌、P細菌、K細菌、蘇云金桿菌菌數(shù)比分別為10％、15％、15％、10％、20％、10％、10％、10％的比例混合；3、二級種子培養(yǎng)，取混合后的菌劑20ml放入500ml三角瓶中，培養(yǎng)基選用蛋白胨30克、NaCl 8克、牛肉膏8克、MgSO4·7H2O 30克1、FeSO4·7H2O 0.05克、K2HPO44克、Na2HPO42克、羧甲基纖維素鈉4克、CaCl20.4克、蔗糖10克、(NH4)2SO44克混合，用蒸餾水配成200ml培養(yǎng)液，搖床(轉數(shù)180轉/分鐘)30℃培養(yǎng)66小時，pH值為7.5，得
7.9×109個/ml的復合菌劑；此復合菌劑與垃圾土混合，使垃圾土中菌數(shù)達2.84億/g，在多種土質中種植大豆的效果明顯，增產達20-35％。
權利要求
1.一種復合生物菌劑，其組成菌種及單位體積內菌數(shù)比如下纖維素分解菌10-30％、淀粉分解菌10-30％、地衣芽孢桿菌10-30％、酵母菌10-30％、固氮菌10-20％、P細菌10-30％、K細菌10-20％、蘇云金桿菌10-30％。
2.一種如權利要求1所述的復合生物菌劑的培養(yǎng)方法，其步驟如下①斜面種子培養(yǎng)八種菌分別接斜面，培養(yǎng)24-36小時，然后各加入到無菌水中，振蕩30分鐘，待均勻后用血球計數(shù)板計數(shù)，使每只試管中各種菌的菌數(shù)均為108個/ml，得菌懸液；②一級種子培養(yǎng)八種菌的菌懸液各1ml分別放入八只250ml三角瓶中，每只三角瓶內分別放入100ml培養(yǎng)液，其中P細菌、K細菌、淀粉分解菌、蘇云金桿菌、地衣芽孢桿菌用2號培養(yǎng)基，固氮菌用3號培養(yǎng)基，酵母菌用13號培養(yǎng)基，纖維素分解菌用36號培養(yǎng)基，180轉/分鐘搖床于30℃培養(yǎng)36-72小時，pH值為7.0-7.5，使每只三角瓶中菌數(shù)含量達108個/ml，按權利要求1中所述的單位體積內菌數(shù)比將八種菌劑混合；③二級種子培養(yǎng)取混合后的菌劑放入500ml三角瓶中，接菌量為10％，培養(yǎng)基選用蛋白胨5-15克/100ml、NaCl 2-8克/100ml、牛肉膏1-5克/100ml、MgSO4·7H2O 5-15克/100ml、FeSO4·7H2O 0.01-0.05克/100ml、K2HPO40.5-3克/100ml、Na2HPO40.1-1克/100ml、羧甲基纖維素鈉0.5-5克/100ml、CaCl20.05-0.5克/100ml、蔗糖2-8克/100ml、(NH4)2SO40.5-3克/100ml混合，其余為蒸餾水，180轉/分鐘搖床于30℃培養(yǎng)36-72小時，pH值為7.0-7.5，使菌數(shù)達3-8×109個/ml，即得復合菌劑。
3.一種如權利要求1所述的復合生物菌劑在制備生物菌肥方面的應用。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種可用于制備生物菌肥的含有多種菌的復合菌劑及其制備方法。該復合菌劑包括如下菌種:纖維素分解菌(10—30%)、淀粉分解菌(10—30%)、地衣芽孢桿菌(10—30%)、酵母菌(10—30%)、固氮菌(10—20%)、P細菌(10—30%)、K細菌(10—20%)、蘇云金桿菌(10—30%)。八種菌先各經斜面培養(yǎng)、一級培養(yǎng)、混合后進行二級培養(yǎng)即得復合菌劑。該菌劑制備工藝簡單,且可廣泛地應用于生物菌肥的制備,制得的生物菌肥具有應用土質廣泛、增產增收效果顯著及優(yōu)異的抗病毒及病蟲害效果。
文檔編號C05F11/08GK1274702SQ0010637
公開日2000年11月29日 申請日期2000年6月14日 優(yōu)先權日2000年6月14日
發(fā)明者趙長富, 張?zhí)m英, 安勝姬, 趙艷玲 申請人:吉林大學