一種以納米碳晶為載體的主動(dòng)靶向降血脂藥物及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于屯、血管藥物領(lǐng)域，具體設(shè)及一種W納米碳晶為載體的主動(dòng)祀向降血脂 藥物及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 現(xiàn)代社會(huì)中飲食種類豐富，各類油炸和高脂肪類食物充斥人們時(shí)常生活，導(dǎo)致人 體血脂平均含量高于過(guò)去水平，膽固醇、甘油Ξ醋、高密度脂蛋白和低密度脂蛋白等各項(xiàng)指 標(biāo)增高的現(xiàn)象尤為普遍，運(yùn)種現(xiàn)象從中老年人開(kāi)始向年輕人普及，在發(fā)達(dá)地區(qū)的少兒群體 中也越來(lái)越明顯，易引起冠屯、病、腦中風(fēng)、器官功能喪失等疾病，導(dǎo)致視力下降、腎功能衰 竭、肢體壞死和潰爛等。膽固醇必須與脂蛋白結(jié)合才能運(yùn)送到機(jī)體的各個(gè)器官組織中。低密 度脂蛋白是一種運(yùn)載膽固醇進(jìn)入外圍組織細(xì)胞的脂蛋白顆粒，能夠?qū)⒛懝檀紡母闻K運(yùn)送到 全身組織中。高密度脂蛋白主要是由肝臟合成，由載脂蛋白、憐脂、膽固醇和少量脂肪酸組 成。高密度脂蛋白顆粒小，可W自由進(jìn)出動(dòng)脈管壁，并被運(yùn)送到肝臟，轉(zhuǎn)化為膽汁酸或者通 過(guò)膽汁從腸道被直接排除體外。高密度脂蛋白可W攝取血管壁內(nèi)膜底層沉積下來(lái)的低密度 脂蛋白，將其送回肝臟代謝。在高血脂癥發(fā)病過(guò)程中，低密度脂蛋白水平顯著提高，尤其是 氧化修飾的低密度脂蛋白過(guò)量時(shí)，攜帶的膽固醇便會(huì)沉積附著在血管壁上，如果不及時(shí)清 除則容易引起動(dòng)脈粥樣硬化。動(dòng)脈造影證明高密度脂蛋白含量與動(dòng)脈血管管腔狹窄程度呈 現(xiàn)顯著的負(fù)相關(guān)，是一種對(duì)抗動(dòng)脈粥樣硬化的血漿脂蛋白，俗稱"血管清道夫"。
[0003] 目前臨床上用于降低血脂W及消除血脂在血管中寄存的藥物中使用最為廣泛的 是他汀類藥物。他汀類藥物作用機(jī)理是:通過(guò)抑制膽固醇生物合成早期階段的限速酶即3- 徑基-3-甲基戊二酸單酷輔酶A(HMG-CoA)的還原酶，減少干細(xì)胞內(nèi)膽固醇的合成，反饋上調(diào) 肝細(xì)胞表面低密度脂蛋白受體，加速對(duì)血清中低密度脂蛋白的清除，除此之外還會(huì)導(dǎo)致Ξ 酷甘油的降低。他汀類藥物在人體中的主要作用如下:第一，降低血脂:HMG-CoA還原酶是膽 固醇合成酶體系中的限速酶，他汀類藥物通過(guò)對(duì)該還原酶的抑制使得膽固醇合成減少，促 進(jìn)對(duì)濃度有極強(qiáng)依賴的低密度脂蛋白受體活性提高，加速了低密度脂蛋白的分解代謝，同 時(shí)減少極低密度脂蛋白生成和向低密度脂蛋白的轉(zhuǎn)換;第二，抗動(dòng)脈粥樣硬化:他汀類藥物 因能降低血脂、減少脂質(zhì)浸潤(rùn)和泡沫細(xì)胞形成，因此對(duì)延遲粥樣硬化有利;從內(nèi)皮損傷學(xué)說(shuō) 角度分析，他汀類藥物能夠降低高脂血癥患者血清內(nèi)皮黏附分子水平，因而降低白細(xì)胞黏 附分子的表達(dá)W及細(xì)胞因子的生成，長(zhǎng)期應(yīng)用可W使粥樣硬化消退;第Ξ，抗骨質(zhì)疏松:他 汀類藥物可W改善人體骨質(zhì)，高脂血癥患者的血液偏酸性，容易導(dǎo)致骨質(zhì)中巧的流失;他汀 類藥物不僅能夠抗骨質(zhì)疏松，甚至可W起到對(duì)抗高血脂的雙重作用。
[0004] 傳統(tǒng)的他汀類藥物雖能一定程度上治療高血脂疾病，但是也存在一些藥物副作 用：因?yàn)樗☆愃幬锸潜粍?dòng)祀向用藥，患者需要長(zhǎng)期或大劑量使用藥物，其結(jié)果是導(dǎo)致潛在 的肝酶異常及肌肉毒性；同時(shí)對(duì)高血脂的治療往往牽設(shè)到個(gè)人飲食習(xí)慣，而多數(shù)病人重視 不夠一一在服藥期間仍舊攝取高蛋白高熱量和高脂肪食物，使得藥效減弱，用藥周期增長(zhǎng)。 中藥配方W及組合物主要是從人體調(diào)理入手，雖然可W有效治療各類動(dòng)脈硬化，有一定的 阻止復(fù)發(fā)的功能，但是都是需要針對(duì)不同病因配制不同的藥劑配方，不具有普遍性和系統(tǒng) 性治療的作用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的在于提供一種W納米碳晶為載體的主動(dòng)祀向降血脂藥物，提供該主 動(dòng)祀向降血脂藥物的制備方法則是本發(fā)明的另一個(gè)目的。
[0006] 基于上述目的，本發(fā)明采用W下技術(shù)方案:一種W納米碳晶為載體的主動(dòng)祀向降 血脂藥物，W納米碳晶為載體，載體上負(fù)載有半乳糖胺(肝細(xì)胞主動(dòng)祀向因子)和他汀類藥 物。
[0007] 進(jìn)一步地，所述納米碳晶為類球形形貌，C含量為99~100%，良好的生物相容性，晶 格間距為〇.21nm;該納米碳晶表面的C原子與內(nèi)層金剛石相的C原子構(gòu)成C原子的二聚體結(jié) 構(gòu)，C原子的二聚體結(jié)構(gòu)中的兩個(gè)碳原子為非對(duì)稱分布;納米碳晶具有極細(xì)粒度平均粒徑為 0<R含20nm。傳統(tǒng)的納米藥物載體在人體中或通過(guò)生物降解來(lái)消除其殘留或通過(guò)細(xì)胞吞吐 作用排除體外，但是都會(huì)有一定的殘留且會(huì)對(duì)人體產(chǎn)生不可逆轉(zhuǎn)的損害。納米碳晶由于顆 粒很細(xì)且本身具有良好的生物相容性，決定了納米碳晶能夠完全的自由進(jìn)出細(xì)胞并被徹底 排出體外。
[0008] 同時(shí)，納米碳晶具有高表面活性和高比表面積，表面存在著大量的兩種不同形式 的C原子，且該碳原子都處在活性狀態(tài);運(yùn)些活性很高的位點(diǎn)極易對(duì)其進(jìn)行表面功能化處 理。經(jīng)過(guò)表面功能化處理之后的納米碳晶可W接入或者符合幾乎所有的藥物成分。同時(shí)極 高的比表面積使得其表面能夠接入更多的藥物成分和分子識(shí)別器，運(yùn)樣就會(huì)大大增加藥物 載體的祀向識(shí)別率，使得藥物被更加有效的運(yùn)送進(jìn)入病理區(qū)。
[0009] 進(jìn)一步地，所述納米碳晶采用強(qiáng)酸氧化法進(jìn)行表面功能化處理，過(guò)程簡(jiǎn)單，無(wú)需在 外層聚合其他具有表面活性功能膜體，只需要進(jìn)行表面功能化即可，處理過(guò)程為： ① 將納米碳晶置于質(zhì)量比為1: (2~4)的濃HN03/濃出S化的混合液中，88~92°C加熱回流 24~6化后離屯、沉淀;取沉淀物用去離子水洗涂至洗涂液pH為4.0~5.0; ② 用0.^0.4mol · [1化地水溶液洗涂沉淀物的同時(shí)乳化超聲分散^化； ③ 用0.1~0.4mol · L-iHCl洗涂沉淀物的同時(shí)超聲分散1~化，最后用去離子水洗涂后烘 干。
[0010] 通過(guò)表面功能化處理可W激活更多的活性位點(diǎn)，同時(shí)使納米碳晶單個(gè)顆粒在后續(xù) 的膠體溶液中具有良好分散性而不團(tuán)聚；同時(shí)經(jīng)過(guò)表面功能化處理之后的納米碳晶可W接 入或者負(fù)載大部分藥物成分;經(jīng)過(guò)表面功能化處理的納米碳晶具有主動(dòng)祀向識(shí)別的作用， 可W克服細(xì)胞膜內(nèi)外濃度差而可W被細(xì)胞主動(dòng)吸收"逆向"進(jìn)入目標(biāo)細(xì)胞;極高的比表面積 使得其表面能夠接入更多的藥物成分和祀向因子，大大增加藥物載體的祀向識(shí)別率，使得 藥物被更加有效的運(yùn)送進(jìn)入病理區(qū)。
[0011 ]進(jìn)一步地，納米碳晶表面功能化處理過(guò)程中，步驟②重復(fù)立次，步驟③中HC1洗涂 沉淀物過(guò)程重復(fù)Ξ次。
[0012] 優(yōu)選地，所述他汀類藥物為羅蘇伐他汀，具有良好的安全性。
[0013] 所述的W納米碳晶為載體的主動(dòng)祀向降血脂藥物的制備方法，包括將半乳糖胺 (肝細(xì)胞主動(dòng)祀向因子)負(fù)載在納米碳晶上、在負(fù)載有半乳糖胺的納米碳晶上負(fù)載他汀類藥 物(抗局脂血藥物）的步驟。
[0014] 進(jìn)一步地，將半乳糖胺負(fù)載在納米碳晶上的過(guò)程為:①將納米碳晶與半乳糖胺水 溶液混合，并超聲乳化5~20min得到乳化液，超聲功率為30~150W; ② 用去離子水通過(guò)稀釋作用洗涂乳化液至pH為7~7.5、離屯、； ③ 取沉淀物在5~10°C下低溫離屯、干燥得負(fù)載有半乳糖胺的納米碳晶。
[0015] 進(jìn)一步地，在負(fù)載有半乳糖胺的納米碳晶上負(fù)載他汀類藥物的過(guò)程為： ① 將負(fù)載有半乳糖胺的納米碳晶與他汀類藥物水溶液混合，并超聲乳化10~25min得到 乳化液，超聲功率為50~150W; ② 用去離子水通過(guò)稀釋作用洗涂乳化液至pH為7~7.5、離屯、沉淀； ③ 將沉淀物在5~10°C下低溫離屯、干燥即得產(chǎn)品。
[0016] 優(yōu)選地，納米碳晶與半乳糖胺水溶液的質(zhì)量比為(0.01~0.05):1;負(fù)載有半乳糖胺 的納米碳晶與他汀類藥物水溶液的質(zhì)量比為(0.03~0.1) : 1。
[0017] 綜上所述，本發(fā)明提供的W納米碳晶為載體的主動(dòng)祀向降血脂藥物采用納米碳晶 為載體，能夠攜帶一種他汀類藥物，并在肝細(xì)胞主動(dòng)祀向因子半乳糖胺的作用下能夠主動(dòng) 祀向到達(dá)病灶并最終達(dá)到降血脂消除動(dòng)脈硬化的作用;ASGPR受體是目前被研究的最為透 徹的肝主動(dòng)祀向受體，本發(fā)明中使用的半乳糖胺是能與肝細(xì)胞識(shí)別因子唾液酸糖蛋白受體 (ASGPR受體)相互識(shí)別的配基，具有良好的祀向性。
【附圖說(shuō)明】
[0018] 圖1是本發(fā)明制備的W納米碳晶為載體的主動(dòng)祀向降血脂藥物的結(jié)構(gòu)示意圖； 圖2是祀向性對(duì)比試驗(yàn)中納米碳晶平均殘留量。
【具體實(shí)施方式】
[0019] 下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明。
[0020] 實(shí)施例1納米碳晶的制備 本發(fā)明中的納米碳晶采用W下方法制備，步驟為： (1)初步破碎:首先將金剛石原料送入機(jī)械破碎機(jī)的破碎腔內(nèi)，經(jīng)過(guò)破碎機(jī)內(nèi)部高速回 轉(zhuǎn)的鍵頭作用而破碎，破碎后的料經(jīng)過(guò)不同目數(shù)的篩網(wǎng)，大于篩網(wǎng)直徑的料留在破碎機(jī)內(nèi) 部重新破碎，經(jīng)破碎機(jī)下層最細(xì)的篩網(wǎng)過(guò)濾的顆粒料經(jīng)篩板收集（篩網(wǎng)目數(shù)不低于32目）， 而經(jīng)其它目數(shù)篩網(wǎng)過(guò)濾的料可做粗料出售或用于制備其它粒度的料;32目W上的顆粒利用 多層振篩機(jī)進(jìn)行粒度初分，振篩時(shí)間一般控制在30min~化，篩網(wǎng)目數(shù)依次從40目到500目排 布，40目篩網(wǎng)分選出的粗料返回機(jī)械破碎機(jī)進(jìn)行重新破碎，40目至500目的篩網(wǎng)收集的料用 于制備其它粒度的料，過(guò)500目篩網(wǎng)后收集的細(xì)料用于制備納米碳晶，為保證分選粒度的準(zhǔn) 確性，對(duì)收集到的細(xì)料重復(fù)篩分選一次W上。
[0021 ] (2)再次破碎:將步驟（1)篩分出的細(xì)料送入氣流破碎機(jī)破碎腔內(nèi)，利用高壓氣流 對(duì)細(xì)料進(jìn)行破碎，在氣流破碎機(jī)收料口收集經(jīng)篩網(wǎng)篩分后的料，篩網(wǎng)目數(shù)從1000目到10000 目從高到低依次排布，收集10000目篩網(wǎng)篩選的細(xì)粉用于制備納米碳晶，其它目數(shù)篩網(wǎng)收集 的料用于制備其它料或仍返回氣流破碎機(jī)進(jìn)行重新破碎，1000目篩網(wǎng)收集的粗料自動(dòng)返回 氣流破碎機(jī)進(jìn)行重新破碎。
[0022] (3)酸洗:將收集的氣流破碎后10000目的細(xì)粉置于濃硫酸與濃硝酸混合液中酸洗 1~5h、過(guò)濾、清洗，所述濃硫酸與濃硝酸混合液由質(zhì)量分?jǐn)?shù)為98%濃硫酸和質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%濃 硝酸按照質(zhì)量比為7:1.2混合而成;然后將細(xì)粉置于120°C~180°C質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%~10%的稀鹽 酸中4~1比、過(guò)濾;再將該細(xì)粉置于氨氣酸中5~20 h，去除料中的金屬雜質(zhì)W及在機(jī)械破碎、 氣流破碎過(guò)程中附著在料上的雜質(zhì)，然后使用去離子水清洗至清洗液pH接近于7。
[0023] (4)分選:將清洗后的物料進(jìn)行離屯、分離，離屯、時(shí)間為30min~化，轉(zhuǎn)速為8000巧m~ 2000化pm，經(jīng)離屯、分選后分離屯、管上部混合液和離屯、管底部沉積料兩種;取上層混合液進(jìn) 行4~7天沉淀分選，沉淀時(shí)間越長(zhǎng)，分選到料的粒徑就越細(xì)，沉淀分選后去除上層清液，下層 沉淀物經(jīng)粒度檢測(cè)合格后烘干后即可得到成品