專利名稱：吡啶和喹啉衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明主要涉及通過(guò)選擇性阻斷腫瘤細(xì)胞或受寄生蟲感染的細(xì)胞中的膽堿激酶來(lái)阻斷磷酸膽堿的生物合成，從而用于治療包括人類的動(dòng)物體內(nèi)的腫瘤和寄生蟲病或由病毒、細(xì)菌和真菌引起的疾病的化合物；以及也涉及本發(fā)明所述化合物和所述方法中某些中間體的制備方法。
背景技術(shù)：
膽堿激酶在肯尼迪或磷脂酰膽堿(PC)合成途徑中是第一酶，使用腺苷5’-三磷酸(ATP)為磷酸基供體，將膽堿磷酸化為磷酸膽堿(PCho)[Kent，C.Prog.Lipid Res.，29，87-105(1990)；Kennedy，E.P.Fed.Proc.，20，934-940(1961)]。RAS基因形成了稱為致癌基因的家族，因?yàn)橹掳┗蛟?5-30％的所有人類腫瘤中被活化，以及某些致癌基因在90％的所有人類腫瘤中被活化，所以其得到了廣泛的研究[Bos，JL.Cancer Res49，4682-4689(1989)；Kiaris，H.，Spandidos，D.A.Int.J.Oncol.，413-421(1995)]。由于其涉及調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖、終末分化和衰老，因此RAS蛋白在細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳遞中起著重要的作用[Abdellatif，M.，MacLellan，W.R.；Schneider，M.D.J.Biol.Chem.，269，15423-15426(1994)；Wiesmüller，L.，Wittinghofer，F(xiàn).Cell Signal.，6，247-267(1994)；Barbacid，M.Eur.J.Clin.Invest.，20，225-235(1990)；Hahn & Weinberg Nat.Rev.Cancer，2331(2002)；Wright & Shay Nat.Biotech，20682(2002)；Drayton &Peters Curr.Op.Gen.Dev，1298(2002)]。由各種致癌基因(其中ras致癌基因顯著突出)介導(dǎo)的轉(zhuǎn)化誘導(dǎo)了高水平的膽堿激酶活性，這導(dǎo)致其產(chǎn)物Pcho的細(xì)胞內(nèi)水平異常增加[Lacal等人，Nature 330，269-272(1987)；Lacal J.C.Mol.Cell.Biol.10，333-340(1990)；Teegarden，D.，Taparowsky，E.J.，Kent，C.J.Biol.Chem.265，6042-6047(1990)；Ratnam，S.；Kent，C.Arch.Biochem.Biophys.323，313-322(1995)；Ramírez de Molina，A.，Rodríguez-González，A.， V.，Lucas，L.，Lacal，J.C.Biochem.Biophys.Res.Commun.285，873-879(2001)；Ramírez de Molina，A.， V.；Lucas，L.，Lacal，J.C.Oncogene 21，937-946(2002)]。因?yàn)槭褂煤舜殴舱?NMR)技術(shù)的研究顯示相對(duì)于正常組織，在包括但不限于乳腺、結(jié)腸、肺和前列腺的人腫瘤組織中存在著高水平的Pcho，所以補(bǔ)充的事實(shí)支持了ChoK在人腫瘤產(chǎn)生中的作用[Ruiz-Cabello，J.，Cohen，J.S.NMR Biomed.5，226-233(1992)；deCertaines，J.D.，Larsen，V.A.，Podo，F(xiàn).，Carpinelli，G.，Briot，O.，Henriksen，O.NMR Biomed.6，345-365(1993)；Smith，T.A.D.，Bush，C.，Jameson，C.，Titley，J.C.，Leach，M.O.，Wilman，D.E.V.，McCready，V.R.NMR Biomed.6，318-323(1993)]。眾所周知ras是在人的致癌作用方面最深入研究的致癌基因之一，以及ChoK抑制作用顯示為在由致癌基因轉(zhuǎn)化的細(xì)胞中的新的有效抗腫瘤策略[Cuadrado，A.，Carnero，A.，Dolfi，F(xiàn).，Jiménez，B.，Lacal，J.C.Oncogene，8，2959-2968(1993)；Jiménez，B.，del Peso，L.，Montaner，S.，Esteve，P.Lacal，J.C.J.CellBiochem.，57，141-149(1995)；Hernández-Alcoceba，R.，Saniger，L.，Campos，J.， M.C.，Khaless，F(xiàn).，Gallo，M.A.，Espinosa，A.，Lacal，J.C.Oncogene，15，2289-2301(1997)]。這些起初的發(fā)現(xiàn)隨后外推到裸鼠體內(nèi)[Hernández-Alcoceba，R.，F(xiàn)ernández，F(xiàn).，Lacal，J.C.Cancer Res.59，3112-3118(1999)]。關(guān)于ChoK抑制劑的研究鑒別了密膽堿-3(HC-3)為相對(duì)強(qiáng)效的和選擇性的阻斷劑[Cuadrado A.，Carnero A.，Dolfi F.，Jiménez B.and Lacal J.C.Oncogene 8，2959-2968(1993)；Jiménez B.，delPeso L.，Montaner S.，Esteve P.and Lacal J.C.J.Cell Biochem.57，141-149(1995)；Hernández-Alcoceba，R.，Saniger，L，Campos，J.， M.C.，Khaless，F(xiàn).，Gallo，M.A.，Espinosa，A.，Lacal，J.C.Oncogene，15，2289-2301(1997)]。該具有聯(lián)苯結(jié)構(gòu)的膽堿同系物已用于設(shè)計(jì)新的抗腫瘤藥物。因?yàn)镠C-3是強(qiáng)效的呼吸作用麻痹劑，所以在臨床應(yīng)用中其不是良好的候選者。數(shù)個(gè)衍生物的合成是基于HC-3的結(jié)構(gòu)修飾，以改進(jìn)ChoK的抑制活性并抑制其毒性作用。由雙季銨化的(bisquaternized)對(duì)稱化合物產(chǎn)生的對(duì)增殖的抑制作用與誘導(dǎo)Pcho在整個(gè)細(xì)胞中產(chǎn)生的能力相互關(guān)聯(lián)[Hernández-Alcoceba，R.，Saniger，L.，Campos，J.， M.C.，Khaless，F(xiàn).，Gallo，M. Espinosa，A.，Lacal，J.C.Oncogene，15，2289-2301(1997)and ES 2 117 950]。當(dāng)1，2-亞乙基-對(duì)-(聯(lián)芐基二甲基-二基)殘基用作在4位取代的兩個(gè)陽(yáng)離子吡啶鎓頂部之間的間隔基時(shí)[Campos，J.， M.C.，Rodríguez，V.，Gallo，M. Espinosa，A.Bioorg.& Med.Chem.Lett.10，767-770(2000)]，該結(jié)構(gòu)通過(guò)其抑制分離的ChoK(在體外條件下)的能力來(lái)評(píng)價(jià)[Lacal J.C.IDrugs 4419-426(2001)]。該4-NR2基提供了相當(dāng)大的作用，以及認(rèn)為通過(guò)正電荷的離域作用，該基團(tuán)的作用是電性的[Campos，J.， M.C.，Rodríguez，V.，Gallo，M. Espinosa.A.Bioorg.& Med.Chem.Lett.10，767-770(2000)]。已公開(kāi)了在多種的人乳腺癌中ChoK活性增加[Ramírez de Molina，A.，Gutiérrez，R.，Ramos，M.A.，Silva，J.M.，Silva，J.，Sánchez，J.J.，Bonilla，F(xiàn).，Lacal，J.C.Oncogene 21，4317-4322(2002)]。據(jù)近期報(bào)導(dǎo)，在諸如肺腫瘤、結(jié)腸直腸腫瘤和前列腺腫瘤的一些人類的腫瘤中，ChoK的變化是頻繁事件[Ramírez de Molina，A.，Rodríguez-González，A.，Gutiérrez，R.， L，Sánchez，J.J.，Bonilla，F(xiàn).，Rosell，R.，Lacal，J.C.Biochem.Biophys.Res.Commun.296，580-583(2002)]。
但是，現(xiàn)有技術(shù)以及特別是在西班牙專利第2 117 950號(hào)中描述的雙季銨化的吡啶鎓衍生物顯示了高水平的毒性，這限制了其長(zhǎng)期的治療應(yīng)用。
因此，現(xiàn)有技術(shù)中，亟需開(kāi)發(fā)具有阻斷腫瘤細(xì)胞中的或由寄生蟲、病毒、細(xì)菌或真菌感染產(chǎn)生的過(guò)程中的磷酸膽堿生物合成的活性，以及同時(shí)，具有低水平的毒性的化合物。
本發(fā)明的創(chuàng)作者經(jīng)過(guò)勤勉的研究后，發(fā)現(xiàn)現(xiàn)有技術(shù)中及特別是在西班牙專利第2 117 950號(hào)中描述的所述化合物結(jié)構(gòu)中的某些修飾出乎意料地，因而令人驚訝地顯著降低了現(xiàn)有技術(shù)中所述化合物的毒性水平。
發(fā)明的簡(jiǎn)要說(shuō)明因此，本發(fā)明的第一個(gè)目的是提供了具有通式I結(jié)構(gòu)的化合物家族 該化合物結(jié)構(gòu)的特征在于具有兩個(gè)通過(guò)間隔基連接的N-芳基-氨基吡啶鎓基團(tuán)。除了通過(guò)選擇性地阻斷腫瘤細(xì)胞中的或潛在地阻斷由寄生蟲、病毒、細(xì)菌或真菌感染產(chǎn)生的過(guò)程中的膽堿激酶來(lái)用作磷酸膽堿生物合成的阻斷劑之外，該家族的化合物還具有低水平的毒性。
在第二個(gè)目的中，本發(fā)明提供了通式I的化合物在醫(yī)藥中的用途。
本發(fā)明的另一目的是提供包含至少一種通式I的化合物的藥物制劑。
在另一目的中，本發(fā)明提供了通式I的化合物的制備方法。
最后，本發(fā)明提供了作為起始化合物，參與通式I的化合物的制備方法的通式VII的化合物。
本發(fā)明的詳細(xì)說(shuō)明在其第一個(gè)目的中，本發(fā)明提供了對(duì)應(yīng)于通式I的化合物家族 其中
Q-表示藥物適合的有機(jī)酸或無(wú)機(jī)酸的共軛堿；R1和R’1互相獨(dú)立地表示選自H和C1-6烷基的基團(tuán)，該C1-6烷基任選地由三氟甲基、羥基或烷氧基取代；R2和R’2互相獨(dú)立地表示任選地由鹵素、三氟甲基、羥基、C1-6烷基、氨基或烷氧基取代的芳基；R3和R’3互相獨(dú)立地表示選自H、鹵素、三氟甲基、羥基、氨基、烷氧基和C1-6烷基的基團(tuán)，該C1-6烷基任選地由三氟甲基、羥基、氨基或烷氧基取代，或者R3和R’3分別與R4和R’4一起，且互相獨(dú)立地表示任選地由鹵素、三氟甲基、羥基、C1-6烷基、氨基或烷氧基取代的-CH＝CH-CH＝CH-基。
R4和R’4互相獨(dú)立地表示選自H和C1-6烷基的基團(tuán)，該C1-6烷基任選地由鹵素、三氟甲基、羥基、氨基或烷氧基取代，或者R4和R’4分別與R3和R’3一起，且互相獨(dú)立地表示任選地由鹵素、三氟甲基、羥基、C1-6烷基、氨基或烷氧基取代的-CH＝CH-CH＝CH-基；以及A表示間隔基。
除了通過(guò)選擇性地阻斷腫瘤細(xì)胞中的或受寄生蟲感染的細(xì)胞中的膽堿激酶來(lái)用作磷酸膽堿生物合成的阻斷劑之外，屬于此家族的所述化合物的特征還在于與現(xiàn)有技術(shù)中公知的那些結(jié)構(gòu)相似的化合物相比，其具有較低的毒性水平。本發(fā)明所述化合物的此特征顯示于下文提供的實(shí)施例。
至于本發(fā)明，間隔基“A”理解為任何二價(jià)的有機(jī)結(jié)構(gòu)，該二價(jià)的有機(jī)結(jié)構(gòu)用作存在于由通式I定義的結(jié)構(gòu)中的兩個(gè)吡啶鎓基團(tuán)之間的連接鏈。在本發(fā)明的特定實(shí)施方案中，該間隔基A具有通式II，III，IV，V和VI之一的結(jié)構(gòu)。這些通式表示基團(tuán)；其中，末端的線-表示鍵，而不是甲基。
其中，m、n和p表示為可具有以下值的整數(shù)m＝0，1；n＝0，1-10；p＝0，1；條件是m、n和p不能同時(shí)為零值。
根據(jù)本發(fā)明，所述基團(tuán)R1和R’1、R2和R’2，以及R3和R4、R’3和R’4可表示不同的基團(tuán)或相同的基團(tuán)，產(chǎn)生不對(duì)稱或?qū)ΨQ化合物。
在本發(fā)明特定實(shí)施方案中，所述基團(tuán)R2和R’2互相獨(dú)立地表示任選地由鹵素、三氟甲基、羥基、C1-6烷基、氨基和烷氧基取代的苯基。在本發(fā)明的另一特定實(shí)施方案中，所述基團(tuán)R1和R’1表示甲基、然而所述基團(tuán)R2和R’2互相獨(dú)立地表示任選地由一種或多種鹵素取代基取代的苯基。在第三個(gè)特定實(shí)施方案中，所述基團(tuán)R3和R4及基團(tuán)R’3和R’4，雖然互相獨(dú)立地，但均共同表示任選地由一種或多種鹵素取代基取代的-CH＝CH-CH＝CH-基。
本發(fā)明優(yōu)選的化合物顯示于表I中
表I *R3和R4可以或者每一個(gè)為氫或者二者形成單個(gè)的基團(tuán)。
最后，在本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案中，藥物適合的有機(jī)酸或無(wú)機(jī)酸的共軛堿Q表示為Br(溴)或F6P(六氟磷酸鹽)。
本發(fā)明所述化合物對(duì)轉(zhuǎn)化某些致癌基因所必需的信號(hào)途徑有選擇性作用，該化合物在相同的強(qiáng)度下不影響正常細(xì)胞，因此在抗腫瘤治療中為更大的效力留下了充足的空間。
在另一方面，因?yàn)橐阎獢?shù)種諸如惡性瘧原蟲(plasmodiumfalciparum)或克氏錐蟲(trypanosoma cruzi)的寄生蟲、數(shù)種諸如腺病毒(adenovirus)的病毒、諸如肺炎鏈球菌(Streptococcus pneumoniae)的細(xì)菌和諸如白色念珠菌(Candida albicans)的真菌為了完成其在人和動(dòng)物體內(nèi)的感染周期，需要通過(guò)膽堿激酶的磷脂酰膽堿合成的代謝途徑，所以本發(fā)明創(chuàng)作者實(shí)施的生物分析允許將這類活性擴(kuò)展至抗病毒、抗寄生蟲或抗真菌活性。在此意義上，文獻(xiàn)中的背景支持了ChoK在Hep-G2細(xì)胞中某些核苷的細(xì)胞內(nèi)代謝中的作用[參見(jiàn)Martin，L.T.；Faraj，A.；Schinazi，R.F.；Gosselin，G.；Mathe，C.；Imbach，J.-L.；Sommadossi，J.-P.Biochemical Pharmacology，53，75-87(1997)]，在寄生蟲疾病中ChoK作為酶標(biāo)記物的應(yīng)用[參見(jiàn)Wunderlich，F(xiàn).；Helwig，M.；Schillinger，G.；Vial，H.；Philippot，J.；Speth，V.Molecular and Biochemical Parasitology，23，103-115(1987)；Ancelin，M.L.；Vial，H.J.Biochimica et BiophysicaActa(BBA)-Lipids and Lipid Metabolism，875，52-58(1986)]，以及ChoK參與病毒中[Balakivera L.，Schoen G.，Thouvenin E.，Chroboczek J.J.Virol.774858-4866(2003)]、細(xì)菌中[Whiting GC，Gillespie SH.FEMSMicrobiol Lett.138141-145(1996)]以及真菌中[Mago N，Khuller GK.JMed Vet Mycol.28355-362(1990)；Mago N，Khuller GK.J Med VetMycol.28355-362(1990)]重要磷脂的生物合成。所有這些研究均支持ChoK抑制在上述疾病的治療中可能具有重要的治療效果。
因此，在第二個(gè)目的中，本發(fā)明提供了通式I的化合物在醫(yī)藥中的應(yīng)用。尤其是，要求了通式I的化合物在醫(yī)藥中的用途。在特別的實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了通式I的化合物用于癌癥，優(yōu)選為乳腺癌、肺癌、結(jié)腸直腸癌和胰腺癌的治療。在另一特別的實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了通式I的化合物用于病毒性疾病，優(yōu)選為那些由腺病毒引起的疾病的治療；以及還用于抗寄生蟲的，優(yōu)選為那些由瘧原蟲(Plasmodium)或錐蟲(Trypanosoma)引起的疾病的治療；抗菌治療，優(yōu)選為那些由鏈球菌(Streptococcus)引起的疾病的治療；以及抗真菌治療，優(yōu)選為那些念珠菌(Candida)引起的疾病的治療。
在另一方面，要求通式I的化合物在藥物制備中的用途。在特別的實(shí)施方案中，所述通式I的化合物用于制備治療癌癥，優(yōu)選為乳癌、肺癌、結(jié)腸直腸癌或胰腺癌的藥物。在另一特別的實(shí)施方案中，所述通式I的化合物用于制造治療病毒性疾病，優(yōu)選為那些由腺病毒引起的疾病的藥物；以及用于制造抗寄生蟲治療的，優(yōu)選為用于那些由瘧原蟲或錐蟲引起的疾病的藥物；用于制造治療細(xì)菌性疾病，優(yōu)選為那些由鏈球菌引起的疾病的藥物，以及用于制造治療真菌性疾病，優(yōu)選為那些由念珠菌引起的疾病的藥物。
在其第三個(gè)目的中，本發(fā)明提供了包含至少一個(gè)通式I的化合物作為活性成分的藥物制劑。所述藥物制劑可含有一種或多種賦形劑和/或載體物質(zhì)。此外，所述制劑可含有任何其它的抑制膽堿激酶功能的活性成分。
所述賦形劑、載體物質(zhì)和輔助物質(zhì)必須為藥劑學(xué)及藥理學(xué)上可耐受的，以便其可與所述制劑或配制品中的其它組分結(jié)合而在治療的有機(jī)體中無(wú)副作用。雖然最好的給藥途徑依賴于病人的情況，但是所述藥物組合物或制劑包括那些適用于口服或腸胃外給藥(包括皮下，皮內(nèi)，肌內(nèi)以及靜脈給藥)的藥物組合物或制劑。所述制劑可以是單次劑量的形式，可根據(jù)藥物學(xué)領(lǐng)域中公知的方法制備所述制劑。給藥的活性物質(zhì)的量可根據(jù)治療的特異性而變化。
本發(fā)明還提供了制備通式I的化合物的方法。根據(jù)通式I的化合物是否具有相同或不同的氨基吡啶鎓基團(tuán)，本發(fā)明的此目的有兩個(gè)不同的實(shí)施方案。
a)用于獲得具有相同的氨基吡啶鎓基團(tuán)的通式I化合物的方法所述方法包括在有機(jī)溶劑中，以2∶1摩爾量，將相應(yīng)的通式VII的雜環(huán)衍生物與雙鹵代衍生物AX2(其中X代表鹵素原子Cl，Br或I)反應(yīng)。所述反應(yīng)優(yōu)選地在丁酮中，在封閉的管中以及在90-110℃的溫度下發(fā)生。
b)用于獲得具有不同的氨基吡啶鎓基團(tuán)的通式I化合物的方法所述方法包括在有機(jī)溶劑中，以1∶1摩爾量，將相應(yīng)的通式VII的雜環(huán)衍生物與雙鹵代衍生物AX2(其中X代表鹵素原子；Cl，Br或I)反應(yīng)，以得到單季銨化的產(chǎn)物，使用另一種有機(jī)溶劑，以1∶1的摩爾比，將該單季銨化的產(chǎn)物再與另一種不同的雜環(huán)衍生物分子反應(yīng)，該另一種有機(jī)溶劑比第一種有機(jī)溶劑極性更大，使得先前形成的單季銨化的鹽可以溶解。該反應(yīng)的第一步優(yōu)選地在丁酮，在封閉的管中以及在90-110℃的溫度下發(fā)生；然而第二步優(yōu)選地在乙醇中，在封閉的管中以及在90-110℃的溫度下進(jìn)行。
最后，在其最后的目的中，本發(fā)明提供了所述通式VII的化合物，該通式VII的化合物作為起始化合物參與通式I的化合物的制備方法。
其中R1表示選自H和C1-6烷基的基團(tuán)，該C1-6烷基任選地由三氟甲基、羥基或烷氧基取代；R2表示任選地由鹵素、三氟甲基、羥基、C1-6烷基、氨基或烷氧基取代的芳基；R3表示選自H、鹵素、三氟甲基、羥基、氨基、烷氧基和C1-6烷基的基團(tuán)，該C1-6烷基任選地由三氟甲基、羥基、氨基或烷氧基取代，或者與R4一起表示任選地由鹵素、三氟甲基、羥基、C1-6烷基、氨基或烷氧基取代的-CH＝CH-CH＝CH-基；R4表示選自H和C1-6烷基的基團(tuán)，該C1-6烷基任選地由鹵素、三氟甲基、羥基、氨基或烷氧基取代，或者與R3一起表示任選地由鹵素、三氟甲基、羥基、C1-6烷基、氨基或烷氧基取代的-CH＝CH-CH＝CH-基。
在通式VII的化合物中，優(yōu)選為通式VIII的化合物
作為本發(fā)明的示例性描述，提供以下實(shí)施例。
實(shí)施例制備實(shí)施例化合物1(代碼ACG560B)1，1’-(苯-1，3-二基亞甲基)雙[4-(4-氯-N-甲基苯胺基)吡啶鎓]二溴化物將干燥的丁酮(40ml)中的4-(4-氯-N-甲基苯胺)吡啶(125mg，0.57毫摩爾)與1，3-雙(溴甲基)苯(75mg，0.28毫摩爾)的混合物于100℃在封閉的管中加熱144小時(shí)。過(guò)濾后，用丁酮、EtOAc和Et2O進(jìn)行嚴(yán)格的洗滌，獲得白色固體狀的純化合物1(125.2mg，62.7％)；m.p.197-198℃。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.48(d，4H，H-2，6pyr，J＝6.6)；7.64(d，4H，H-3，5anil，J＝8.6)；7.57(s，1H，H-2Ph)；7.45(d，5H，H-2，6aniland H-5Ph；J＝8.6)；7.37(d，2H，H-4，6Ph，J＝7.7)；6.95(bs，4H，H-3，5pyr)；5.49(s，4H，CH2N+)；3.46(s，6H，Me)。13C-NMR(100MHz，DMSO-d6)δ156.20(C-4pyr)；142.75(C-2，6pyr)；141.96(C-1anil)；136.18(C-1.3Ph)；132.78(C-4anil)；130.50(C-3，5anil)；129.73(C-5Ph)；128.37(C-2，6anil)；128.18(C-4，6Ph)；127.89(C-2Ph)；109.15(C-3，5pyr)；59.16(CH2N+)；41.42(Me)。
HRMS(m/z)計(jì)算為C32H30N4Cl2Br(M-Br)+619.1031；實(shí)際為619.1031。分析為C32H30N4Cl2Br2·1H2O。計(jì)算為C 53.43；H 4.56；N7.63％。實(shí)際為C 53.14；H 4.48；N 7.79％。
化合物2(代碼ACG416B)1，1’-(聯(lián)苯-3，3’-二基亞甲基)雙[4-(N-甲基苯胺基)吡啶鎓]二溴化物將干燥的丁酮(40ml)中的4-(N-甲基苯胺)吡啶(216mg，1.17毫摩爾)與3，3’-雙(溴甲基)聯(lián)苯(200mg，0.58毫摩爾)的混合物于100℃在封閉的管中加熱24小時(shí)。過(guò)濾后，用丁酮進(jìn)行徹底的洗滌，通過(guò)從MeOH中重結(jié)晶來(lái)純化所述固體產(chǎn)品，殘留物用Et2O進(jìn)行研磨。獲得白色固體狀的化合物2(294mg，71.5％)；m.p.124-125℃。
1H-NMR(300MHz，CD3OD)δ8.35(bs，4H，H-2，6pyr)；7.84(s，2H，H-2Ph)；7.67(d，2H，H-6Ph，J＝7.7)；7.56(t，4H，H-3，5anil，J＝7.6)；7.50-7.44(m，4H，H-5Phand H-4anil)；7.39(d，2H，H-4Ph，J＝7.7)；7.33(d，4H，H-2，6anil，J＝7.5)；6.95(bs，4H，H-3，5pyr)；5.47(s，4H，CH2N+)；3.51(s，6H，Me)。13C-NMR(75MHz，CD3OD)δ158.48(C-4pyr)；144.82(C-1anil)；143.80(C-2.6pyr)；142.60(C-1Ph)；136.82(C-3Ph)；132.01(C-3，5anil)；131.14(C-5Ph)；130.12(C-4anil)；128.99(C-4Ph)；128.82(C-6Ph)；128.58(C-2Ph)；127.52(C-2，6anil)；110.29(C-3，5pyr)；61.97(CH2N+)；41.42(Me)。
HRMS(m/z)計(jì)算為C38H36N4Br(M-Br)+627.2123；實(shí)際為627.2122。分析為C38H36N4Br2·2.5H2O。計(jì)算為C 60.56；H 5.48；N7.43％。實(shí)際為C 60.70；H 5.83；N 7.20％。
化合物3(代碼ACG548B)1，1’-(聯(lián)苯-3，3’-二基亞甲基)雙[4-(4-氯-N-甲基苯胺基)吡啶鎓]二溴化物將干燥的丁酮(40ml)中的4-(4-氯-N-甲基苯胺)吡啶(235mg，1.07毫摩爾)與3，3’-雙(溴甲基)聯(lián)苯(183mg，0.53毫摩爾)的混合物于100℃在封閉的管中加熱24小時(shí)。過(guò)濾后，用CHCl3進(jìn)行徹底的洗滌，加入Et2O直到混濁后，通過(guò)從MeOH中重結(jié)晶來(lái)純化所述固體產(chǎn)品。獲得白色固體狀的化合物3(205mg，49.7％)；m.p.279-280℃。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ8.57(d，4H，H-2，6pyr，J＝6.5)；7.88(s，2H，H-2Ph)；7.67(d，2H，H-6Ph，J＝7.7)；7.61(d，4H，H-3，5anil，J＝8.6)；7.51(t，2H，H-5Ph，J＝7.7)；7.42(d，6H，H-4Phand H-2，6anil，J＝8.6)；6.99(bs，4H，H-3，5pyr)；5.51(s，4H，CH2N+)；3.43(s，6H，Me)。13C-NMR(75MHz，DMSO-d6)δ156.20(C-4pyr)；142.72(C-2，6pyr)；142.05(C-1anil)；140.01(C-1Ph)；136.20(C-3Ph)；132.79(C-4anil)；130.53(C-3，5anil)；129.73(C-5Ph)；128.47(C-2，6anil)；127.51(C-4Ph)；127.14(C-6Ph)；127.04(C-2Ph)；109.20(C-3，5pyr)；59.55(CH2N+)；40.73(Me)。
HRMS(m/z)計(jì)算為C38H34N4Cl2Br(M-Br)+695.1344；實(shí)際為695.1344。分析為C38H34N4Cl2Br2·1.2H2O。計(jì)算為C 57.12；H 4.59；N7.01％。實(shí)際為C 57.55；H 4.99；N 6.97％。
化合物4(代碼ACG604A)1，1’-(聯(lián)苯-3，3’-二基亞甲基)雙[4-(3，5-二氯-N-甲基苯胺基)吡啶鎓]二溴化物將干燥的丁酮(40ml)中的4-(3，5-二氯-N-甲基苯胺)吡啶(200mg，0.8毫摩爾)與3，3’-雙(溴甲基)聯(lián)苯(136mg，0.4毫摩爾)的混合物于100℃在封閉的管中加熱72小時(shí)。過(guò)濾后，用丁酮和Et2O進(jìn)行徹底地洗滌，獲得純的白色固體狀的化合物4(270mg，79.7％)；m.p.312-313℃。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ8.63(d，4H，H-2，6pyr，J＝7.1)；7.92(s，2H，H-2Ph)；7.75(s，2H，H-4anil)；7.70(d，2H，H-6Ph，J＝7.6)；7.62(d，4H，H-2，6anil，J＝1.8)；7.53(t，2H，H-5Ph，J＝7.6)；7.45(d，2H，H-4Ph，J＝7.6)；7.04(d，4H，H-3，5pyr，J＝7.1)；5.56(s，4H，CH2N+)；3.44(s，6H，Me)。13C-NMR(75MHz，DMSO-d6)δ156.20(C-4pyr)；145.27(C-1anil)；142.86(C-2，6pyr)；140.08(C-1Ph)；136.11(C-3Ph)；135.34(C-3，5anil)；129.70(C-5Ph)；128.33(C-4anil)；127.55(C-4Ph)；127.14(C-6Ph)；127.07(C-2Ph)；125.97(C-2，6anil)；109.53(C-3，5pyr)；59.65(CH2N+)；40.59(Me)。
HRMS(m/z)計(jì)算為C38H32N4Cl4Br(M-Br)+763.0564；實(shí)際為763.0563。分析為C38H32N4Cl4Br2·0.1H2O。計(jì)算為C 53.81；H 3.81；N6.60％。實(shí)際為C 53.41；H 4.19；N 6.25％。
化合物5(代碼RSM964A)1，1’-(聯(lián)苯-3，3’-二基亞甲基)雙[4-(4-氯-N-甲基苯胺基)喹啉鎓]二溴化物將干燥的丁酮(40ml)中的4-(4-氯-N-甲基苯胺基)喹啉(212mg，0.78毫摩爾)與3，3’-雙(溴甲基)苯(134mg，0.39毫摩爾)的混合物于100℃在封閉的管中加熱72小時(shí)。過(guò)濾后，用丁酮、EtOAc和Et2O進(jìn)行徹底地洗滌，獲得純的淺黃色固體狀的化合物5(134mg，40％)；m.p.217-218℃。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ9.24(d，J＝7.4，2H，H-2quin)；8.18(d，J＝8.9，2H，H-8quin)；7.84(s，2H，H-2Ph)；7.63(d，J＝7.5，2H，H-5quin)；7.56-7.43(m，18H，H-5，6Ph，H-2，3，5，6anil，H-3，6，7quin)；7.23(d，J＝7.4，2H，H-4Ph)；6.08(s，4H，N+-CH2)；3.74(s，6H，Me)。13C-NMR(100MHz，DMSO-d6)δ157.87(C-4quin)；147.46(C-2quin)；146.42(C-1anil)；140.03(C-1Ph)；138.83(C-8aquin)；135.61(C-3Ph)；133.50(C-7quin)；131.69(C-4anil)；130.27(C-3，5anil)；129.62(C-5Ph)；127.35(C-6Ph)；127.18(C-2，6anil)；126.73(C-6quin)；126.09(C-4Ph)；125.87(C-5quin)；125.67(C-2Ph)；119.65(C-4aquin)；119.14(C-8quin)；107.10(C-3quin)；57.28(N+-CH2)；44.94(Me)。
HRMS(m/z)計(jì)算為C46H38N4Cl2Br2[(M-Br)]+795.1657；實(shí)際為795.1656。分析為C46H38N4Cl2Br2·3H2O。計(jì)算為C 59.31；H 4.76；N6.01％。實(shí)際為C 59.24；H 4.70；N 5.65％。
化合物6(代碼RSM820C)1，1’-(聯(lián)苯-3，3’-二基亞甲基)雙[4-(4-氯-N-甲基苯胺基)-7-氯喹啉鎓]二溴化物將干燥的丁酮(40ml)中的7-氯-4-(4-氯-N-甲基苯胺基)喹啉(300mg，0.98毫摩爾)與3，3’-雙(溴甲基)聯(lián)苯(168mg，0.49毫摩爾)的混合物于100℃在封閉的管中加熱72小時(shí)。過(guò)濾后，用丁酮和CHCl3徹底地洗滌，加入Et2O直到混濁后，從EtOH或EtOH/MeOH中重結(jié)晶來(lái)純化所述固體產(chǎn)品，獲得淺黃色固體狀的化合物6(154mg，45％)；m.p.220-221℃。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ9.19(d，J＝7.5，2H，H-2quin)；8.29(d，J＝1.7，2H，H-8quin)；7.85(s，2H，H-2Ph)；7.64(d，J＝7.2，2H，H-5quin)；7.57-7.45(m，16H，H-5，6Ph，H-2，3，5，6anil，H-3，6quin)；7.25(d，J＝7.7，2H，H-4Ph)；6.08(s，4H，N+-CH2)；3.73(s，6H，Me)。13C-NMR(75MHz，DMSO-d6)δ157.68(C-4quin)；148.01(C-2quin)；146.14(C-1anil)；140.14(C-1Ph)；139.85(C-8aquin)；138.48(C-7quin)；135.51(C-3Ph)；132.11(C-4anil)；130.50(C-3，5anil)；129.80(C-5Ph)；129.45(C-6Ph)；127.32(C-2，6anil)；126.89(C-6quin)；126.12(C-4Ph)；125.91(C-5quin)；125.82(C-2Ph)；118.48(C-8quin)；118.35(C-4aquin)；107.38(C-3quin)；57.14(N+-CH2)；45.18(Me)。
HRMS(m/z)計(jì)算為C46H36N4Cl4Br2[(M-HBr-Br)]+783.1616；實(shí)際為783.1616。分析為C46H36N4Cl4Br2·1.5H2O。計(jì)算為C 56.76；H 4.04；N 5.76％。實(shí)際為C 56.72；H 4.18；N 5.71％。
化合物7(代碼RSM932A)1，1’-(聯(lián)苯-4，4’-二基亞甲基)雙[4-(4-氯-N-甲基苯胺基)喹啉鎓]二溴化物將干燥的丁酮(40ml)中的4-(4-氯-N-甲基苯胺基)喹啉(240mg，0.89毫摩爾)與4，4’-雙(溴甲基)聯(lián)苯(152mg，0.44毫摩爾)的混合物于100℃在封閉的管中加熱72小時(shí)。過(guò)濾后，用丁酮徹底地洗滌，獲得純的淺黃色固體狀的化合物7(121mg，30％)；m.p.255-257℃。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ9.19(d，J＝7.4，2H，H-2quin)；8.12(d，J＝8.9，2H，H-8quin)；7.83(pst，J＝7.5，2H，H-7quin)；7.66(d，J＝8.2，2H，H-5quin)；7.55(d，J＝8.8，4H，H-3，5anil)；7.44(d，J＝8.9，4H，H-2，6anil)；7.56-7.39(m，12H，H-2，3，5，6Ph，H-3quin，H-6quin)；6.05(s，4H，N+-CH2)；3.73(s，6H，Me)。13C-NMR(75MHz，DMSO-d6)δ157.86(C-4quin)；147.41(C-2quin)；146.40(C-1anil)；139.11(C-1Ph)；138.78(C-8aquin)；134.30(C-4Ph)；133.47(C-7quin)；131.69(C-4anil)；130.26(C-3，5anil)；127.34(C-3，5Ph)；127.18(C-2，6anil)，(C-2，6Ph)；127.08(C-6quin)；126.08(C-5quin)；119.65(C-4aquin)；119.12(C-8quin)；107.06(C-3quin)；56.94(N+-CH2)；44.94(Me)。
HRMS(m/z)計(jì)算為C46H38N4Cl2Br2[(M-Br)]+795.1657；實(shí)際為795.1658。分析為C46H38N4Cl2Br2·2H2O。計(jì)算為C 60.48；H 4.63；N6.13％。實(shí)際為C 60.06；H 4.48；N 5.87％。
化合物8(代碼RSM824B)1，1’-(聯(lián)苯-4，4’-二基亞甲基)雙[4-(4-氯-N-甲基苯胺基)-7-氯喹啉鎓]二溴化物將干燥的丁酮(100ml)中的7-氯-4-(4-氯-N-甲基苯胺基)喹啉(300mg，0.98毫摩爾)與4，4’-雙(溴甲基)聯(lián)苯(168mg，0.49毫摩爾)的混合物于100℃在封閉的管中加熱72小時(shí)。過(guò)濾后，用丁酮徹底地洗滌，獲得純的淺黃色固體狀的化合物8(195mg，48％)；m.p.276-277℃。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.14(d，J＝7.4，2H，H-2quin)；8.23(d，J＝1.6，2H，H-8quin)；7.73(d，J＝8.3，2H，H-5quin)；7.69(d，J＝8.4，4H，H-2，6Ph)；7.56(d，J＝8.8，4H，H-3，5anil)；7.46(d，J＝8.9，4H，H-2，6anil)；7.50-7.46(m，6H，H-6quin，H-3quin)；7.41(d，J＝8.4，4H，H-3，5Ph)；6.04(s，4H，N+-CH2)；3.73(s，6H，Me)。13C-NMR(100MHz，DMSO-d6)δ157.69(C-4quin)；147.98(C-2quin)；146.13(C-1anil)；139.82(C-8aquin)；139.21(C-1Ph)；138.51(C-7quin)；134.22(C-4Ph)；132.14(C-4anil)；130.50(C-3，5anil)；129.45(C-2，6anil)；127.54(C-3，5Ph)；127.33(C-6quin)；127.23(C-2，6Ph)；126.52(C-5quin)；118.47(C-8quin)；118.35(C-4aquin)；107.33(C-3quin)；56.83(N+-CH2)；45.19(Me)。
HRMS(m/z)計(jì)算為C46H36N4Cl4Br2[(M-HBr-Br)]+783.1616；實(shí)際為783.1614。分析為C46H36N4Cl4Br2。計(jì)算為C 58.38；H 3.83；N5.92％。實(shí)際為C 58.73；H 3.96；N 5.74％。
化合物9(代碼RSM936A)1，1’-[亞乙基-雙(苯-1，4-二基亞甲基)]雙[4-(4-氯-N-甲基苯胺基)喹啉鎓]二溴化物將干燥的丁酮(40ml)中的4-(4-氯-N-甲基苯胺基)喹啉(204mg，0.76毫摩爾)與4，4’-雙(溴甲基)聯(lián)芐(140mg，0.37毫摩爾)的混合物于100℃在封閉的管中加熱72小時(shí)。過(guò)濾后，用丁酮和CHCl3徹底地洗滌，獲得純的淺黃色固體狀的化合物9(70mg，20％)；m.p.212-214℃。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ9.19(d，J＝7.4，2H，H-2quin)；8.10(d，J＝8.9，2H，H-8quin)；7.82(pst，J＝7，5，2H，H-7quin)；7.54(d，J＝8.8，4H，H-3，5anil)；7.44(d，J＝8.9，4H，H-2，6anil)；7.52-7.39(m，6H，H-3quin，H-5quin，H-6quin)；7.24(s，8H，H-2，3，5，6Ph)；5.98(s，4H，N+-CH2)；3.73(s，6H，Me)；2.80(s，4H，CH2-Ph)。13C-NMR(100MHz，DMSO-d6)δ157.80(C-4quin)；147.34(C-2quin)；146.44(C-1anil)；141.55(C-1Ph)；138.74(C-8aquin)；133.36(C-7quin)；132.32(C-4Ph)；131.63(C-4anil)；130.25(C-3，5anil)；128.79(C-3，5Ph)；127.26(C-6quin)；127.17(C-2，6anil)；126.74(C-2，6Ph)；126.04(C-5quin)；119.66(C-4aquin)；119.19(C-8quin)；107.06(C-3quin)；57.10(N+-CH2)；44.93(Me)；36.22(CH2-Ph)。
HRMS(m/z)計(jì)算為C48H42N4Cl2Br2[(M-Br)]+823.1970；實(shí)際為823.1970。分析C48H42N4Cl2Br2·1H2O。計(jì)算為C 62.42；H 4.80；N6.07％。實(shí)際為C 62.29；H 4.59；N 6.09％。
化合物10(代碼RSM828B)1，1’-[亞乙基-雙(苯-1，4-二基亞甲基)]雙[4-(4-氯-N-甲基苯胺基)-7-氯喹啉鎓]二溴化物將干燥的丁酮(40ml)中的7-氯-4-(4-氯-N-甲基苯胺基)喹啉(300mg，0.98毫摩爾)與4，4’-雙(溴甲基)聯(lián)芐(182mg，0.49毫摩爾)的混合物于100℃在封閉的管中加熱72小時(shí)。過(guò)濾后，用丁酮徹底地洗滌，獲得純的淺黃色固體狀的化合物10(229mg，48％)；m.p.256-257℃。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.11(d，J＝7.4，2H，H-2quin)；8.18(d，J＝1.5，2H，H-8quin)；7.55(d，J＝8.8，4H，H-3，5anil)；7.46(d，J＝8.8，4H，H-2，6anil)；7.56-7.44(m，6H，H-3quin，H-5quin，H-6quin)；7.24(s，8H，H-2，3，5，6Ph)；5.97(s，4H，N+-CH2)；3.72(s，6H，Me)；2.82(s，4H，CH2-Ph)。13C-NMR(100MHz，DMSO-d6)δ157.63(C-4quin)；147.91(C-2quin)；146.16(C-1anil)；141.74，139.75and 138.88(C-7quin，C-8aquinandC-4ph)；132.20(C-4anil)；132.08(C-1Ph)；130.50(C-3，5anil)；129.39(C-6quin)；128.99(C-3，5Ph)；127.32(C-2，6anil)；126.90(C-2，6Ph)；126.48(C-5quin)；118.55(C-8quin)；118.35(C-4aquin)；107.32(C-3quin)；57.02(N+-CH2)；45.17(Me)；36.33(CH2-Ph)。
HRMS(m/z)計(jì)算為C48H40N4Cl4Br2[(M-HBr-Br)]+811.1927；實(shí)際為811.1926。分析C48H40N4Cl4Br2·2H2O。計(jì)算為C 57.05；H 4.39；N5.54％。實(shí)際為C 57.14；H 4.07；N 5.46％。
制備試劑化合物α，α’-二溴-間-二甲苯是由Sigma-Aldrich Química S.A.提供的商品化產(chǎn)品，該公司地址為Avenida Valdelaparra No.51-53，28100Alcobendas(馬德里)。

α，α’-二溴-間-二甲苯利用各自參考文獻(xiàn)所描述的方法制備以下起始原料1.-3，3’-雙(溴甲基)聯(lián)苯 Werner，W.J.Org.Chem.17，523-528(1952)。
2.-4，4’-雙(溴甲基)聯(lián)苯 Szendey，G.L.，Munnes，S.Chem.Ber.94，38-42(1961)；Staab，H.A.，Haenel，M.Chem.Ber.106，2190-2202(1973)。
3.-雙-對(duì)-(溴甲基)聯(lián)芐 Cram，D.J.，Steinberg，J.J.Am.Chem.Soc.73，5691-5704(1951)。
4.-4-(N-甲基苯胺基)吡啶 Campos，J.， M.C.，Sánchez，R.，Gómez-Vidal，J.A.，Rodríguez-Gonzá1ez，A.， M.，Gallo，M. Lacal，J.C.，Espinosa，A.Bioorg.& Med.Chem.10，2215-2231(2002)。
5.-4-(4-氯-N-甲基苯胺基)吡啶 Conejo-García，A.，Campos，J.，Sánchez，R.，Rodríguez-González，A.，Lacal，J.C.，Gallo，M. Espinosa，A.Eur.J.Med.Chem.38，109-116(2003)。
6.-4-(3，5-二氯-N-甲基苯胺基)吡啶 根據(jù)先前描述的方法，從鹽酸4-氯吡啶和4-(3，5-二氯-N-甲基苯胺基)吡啶中制備此化合物Conejo-García，A.，Campos，J.，Sánchez，R.，Rodríguez-González，A.，Lacal，J.C.，Gallo，M. Espinosa，A.Eur.J.Med.Chem.38，109-116(2003)。另一方面，通過(guò)以下研究中描述的方法獲得3，5-二氯-N-甲基苯胺Leeson，P.D.，Baker，R.，Carling，R.W.，Curtis，N.R.，Moore，K.W.，Williams，B.J.，F(xiàn)oster，A.C.，Donald，A.E.，Kemp，J.A.，Marshall，G.R.J.Med.Chem.34，1243-1252(1991)。
7.-4，4’-雙(氯甲基)-[2，2’]聯(lián)噻唑.
參考Chi，AND.F.；Chu，T.I.Record(Peking)，1，45(1957)；Chem.Abstract，52，6321 a，b(1957)。
8.-4，4’-雙(溴甲基)-[2，2’]聯(lián)噻唑基-5，5’-二羧酸二乙酯 參考Lehn，J.-M.；Regnouf de Vains，J.-B.Tetrahedron Lett.，30，2209-2212(1989)。
9.-6，6’-雙(溴甲基)-[2，2’]聯(lián)吡啶
參考Rodríguez-Ubis，J.-C.；Alpha，B.；Plancherel，D.；Lehn，J.-M.Helv.Chim.Acta，67，2264(1984)。
10.-6，6’-雙(溴甲基)-4，4’-二甲基-[2，2’]聯(lián)嘧啶 參考Lehn，J.-M.；Regnouf de Vains，J.-B.Tetrahedron Lett.，30，2209-2212(1989)。
新起始原料的制備通式VII的化合物 可通過(guò)在回流狀態(tài)下，4-苯胺或喹啉衍生物與相應(yīng)的4-氯-苯胺在冰醋酸中反應(yīng)來(lái)制備。冷卻后，用氫氧化鈉溶液堿化所述溶液，隨后將所得混懸液進(jìn)行濃縮，并通過(guò)快速色譜法純化。
獲得通式VIII的化合物的實(shí)施例提供如下
化合物VIII A4-(4-氯-N-甲基苯胺基)喹啉將冰醋酸(15ml)中的4-氯喹啉(5毫摩爾)和4-氯-N-甲基苯胺(10毫摩爾)的溶液在氬氣流中，加熱回流3小時(shí)。冷卻后，用10％NaOH溶液堿化所述溶液直到pH＝10，并將所得混懸液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中進(jìn)行濃縮，且利用快速色譜法純化(9∶1，CH2Cl2∶MeOH)，得到淺黃色糖漿狀的目標(biāo)分子(97％)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.10(d，J＝8.5，1H，H-2quin)；7.70(d，J＝8.5，1H，H-5quin)；7.65(t，J＝7.9，1H，H-7quin)；7.38(t，J＝8.5，1H，H-6quin)；7.35(d，J＝7.9，1H，H-8quin)；7.17(d，J＝8.9，2H，H-3，5anil)；7.14(d，J＝8.5，1H，H-3quin)；6.76(d，J＝8.9，2H，H-2，6anil)；3.45(s，6H，Me)。13C-NMR(100MHz，CDCl3)δ153.37(C-4quin)；151.16(C-2quin)；150.01(C-1anil)；148.17(C-8aquin)；135.02(C-4anil)；130.07(C-7quin)；129.52(C-6quin)；129.29(C-3，5anil)；126.26(C-4aquin)；126.07(C-5quin)；124.40(C-8quin)；119.79(C-2，6anil)；115.08(C-3quin)；41.75(Me)。
HRMS(m/z)計(jì)算為C16H13N2Cl[(M+H)]+269.0845；實(shí)際為269.084。分析C16H13N2Cl。計(jì)算為C 71.51；H 4.88；N 10.42％。實(shí)際為C 71.60；H 4.71；N 10.33％。
化合物VIII B7-氯-4-(4-氯-V-甲基苯胺基)喹啉將冰醋酸(15ml)中的4，7-二氯喹啉(5毫摩爾)和4-氯-N-甲基苯胺(10毫摩爾)的溶液在氬氣流中，加熱回流3小時(shí)。冷卻后，用10％NaOH溶液堿化所述溶液直到pH＝10，并將所得混懸液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中進(jìn)行濃縮，且利用快速色譜法純化(9∶1，CH2Cl2∶MeOH)，得到淺黃色糖漿狀的所述中間體II(59％)。
1H-NMR(300MHz，CH3OD)δ8.66(d，J＝7.1，1H，H-2quin)；7.94(d，J＝2.0，1H，H-8quin)；7.53(d，J＝8.8，2H，H-3，5anil)；7.41-7.37(m，2H，H-5，6quin)；7.47(d，J＝8.8，2H，H-2，6anil)；7.32(d，J＝7.1，2H，H-3quin)；3.76(s，3H，Me)。13C-NMR(75MHz，CH3OD)δ159.86(C-4quin)；147.63(C-7quin)；143.86(C-2quin)；141.46(C-1anil)；140.56(C-8aquin)；135.02(C-4anil)；132.01(C-3，5anil)；129.92(C-6quin)；128.58(C-2，6anil)；127.98(C-5quin)；120.56(C-8quin)；118.71(C-4aquin)；107.38(C-3quin)；45.74(Me)。
HRMS(m/z)計(jì)算為C16H12N2Cl2[(M+H)]+303.0456；實(shí)際為303.0456。分析C16H12N2Cl2。計(jì)算為C 63.38；H 3.99；N 9.24％。實(shí)際為C 63.46；H 3.71；N 9.17％。
人CHOK活性的體外分析分析緩沖液(100mM Tris-HCl pH 8.0、100mM MgCl2、10mM ATP和200μM膽堿，存在有甲基[14C]-氯化膽堿(50-60μCi/mmol))中的E.coli中表達(dá)的重組膽堿激酶用于所述體外分析中。在37℃下，所述反應(yīng)進(jìn)行30分鐘，并用冰冷卻的三氯乙酸停止反應(yīng)，直到終濃度為16％。用水飽和的乙醚洗滌樣品并凍干。根據(jù)已描述的方法在薄層色譜板中解析親水的膽堿衍生物[Ramírez，A.，Penalva，V.，Lucas，L.，Lacal，J.C.Oncogene 21，937-946(2002)]。
用本發(fā)明所述的化合物1-10，以及現(xiàn)有技術(shù)公知的化合物，尤其是專利ES 2 117 950中的化合物EC1-EC6進(jìn)行這些分析。所述結(jié)果總結(jié)于表II中。
細(xì)胞增殖分析將HT-29細(xì)胞接種在24孔板中(35×103細(xì)胞/孔)并孵育24小時(shí)。然后在普通的培養(yǎng)基中用不同濃度的ChoK抑制劑處理該細(xì)胞。三天后，抽吸所述的孔并加入新鮮的培養(yǎng)基和更多量的藥物，將所述細(xì)胞再維持三天。利用具有一些改進(jìn)的[參見(jiàn)Hernández-Alcoceba，R.，Saniger，L.，Campos，J.， M.C.，Khaless，F(xiàn).，Gallo，M. Espinosa，A.，Lacal，J.C.Oncogene，15，2289-2301(1997)]結(jié)晶紫方法[參見(jiàn)Gillies，R.J.，Didier，N.，Denton，M.Anal.Biochem.159，109-113(1986)]來(lái)量化每孔中剩余的細(xì)胞。簡(jiǎn)而言之，所述細(xì)胞用TD緩沖液洗滌，并用1％戊二醛固定15分鐘。再用TD洗滌后，用0.1％結(jié)晶紫將所述細(xì)胞核至少染色30分鐘，并用蒸餾水洗滌三次。將所吸附的色彩再混懸在10％醋酸中，并在分光計(jì)中測(cè)定595nm處的吸光度。所得結(jié)果以IC50值的形式概述，即產(chǎn)生50％抑制作用所需要的化合物濃度。通過(guò)反復(fù)的曲線調(diào)整來(lái)確定該值。對(duì)該曲線中的每個(gè)點(diǎn)要測(cè)定兩個(gè)值，所述試驗(yàn)重復(fù)兩或三次，并評(píng)估平均值。在少數(shù)情況中，所述兩個(gè)值差異超過(guò)50％，進(jìn)行第三次試驗(yàn)以確定真實(shí)值。作為效價(jià)測(cè)量的IC50值用于將所述化合物的生物活性與其化學(xué)結(jié)構(gòu)相關(guān)聯(lián)。
用本發(fā)明所述的化合物1-10，以及現(xiàn)有技術(shù)中公知的化合物，尤其是專利ES 2 117 950中的化合物EC1-EC6實(shí)施這些分析。所述結(jié)果總結(jié)于表II中。
毒性分析在試驗(yàn)開(kāi)始時(shí)，用1月齡的體重約25-30克的Balb C小鼠進(jìn)行毒性分析。用每日劑量為0.1mg/kg直至為25mg/kg不同量的的每種化合物向所述小鼠連續(xù)接種五天。五天劑量后，使該小鼠休息9天，并分析存活率和一般狀況，特別關(guān)注對(duì)小鼠的皮毛、行為、攝食習(xí)性和體重的作用。將引起50％死亡率的劑量記錄為相應(yīng)的毒性IC50。用所述新化合物獲得的結(jié)果顯示經(jīng)其相應(yīng)的IC50測(cè)定，所述活性有明顯的改善，同時(shí)其毒性減少。
用本發(fā)明所述的化合物1-10，以及現(xiàn)有技術(shù)中公知的化合物，尤其是專利ES 2 117 950中的化合物EC1-EC6實(shí)施這些分析。所述結(jié)果總結(jié)于表II中。
以下表II中總結(jié)了上述進(jìn)行的分析中獲得的結(jié)果。
表II
*R3和R4可以或者每一個(gè)為氫或者兩者形成單個(gè)的基團(tuán)。
從表II的數(shù)據(jù)中可以觀察到與專利ES 2 117 950中所述的化合物相比，本發(fā)明所述的化合物具有大大降低的毒性，然而其對(duì)腫瘤培養(yǎng)物來(lái)源的細(xì)胞具有相似的或更大的抗增殖活性價(jià)值，以及對(duì)接種在免疫抑制小鼠中的人腫瘤具有相似的或更大的體內(nèi)抗腫瘤活性。
權(quán)利要求
1.具有通式I的化合物 其中Q-表示藥物適合的有機(jī)酸或無(wú)機(jī)酸的共軛堿；R1和R’1互相獨(dú)立地表示選自H和C1-6烷基的基團(tuán)，所述C1-6烷基任選地由三氟甲基、羥基或烷氧基取代；R2和R’2互相獨(dú)立地表示任選地由鹵素、三氟甲基、羥基、C1-6烷基、氨基或烷氧基取代的芳基；R3和R’3互相獨(dú)立地表示選自H、鹵素、三氟甲基、羥基、氨基、烷氧基和C1-6烷基的基團(tuán)，所述C1-6烷基任選地由三氟甲基、羥基、氨基或烷氧基取代，或者R3和R’3分別與R4和R’4一起，且互相獨(dú)立地表示任選地由鹵素、三氟甲基、羥基、C1-6烷基、氨基或烷氧基取代的-CH＝CH-CH＝CH-基；R4和R’4互相獨(dú)立地表示選自H和C1-6烷基的基團(tuán)，所述C1-6烷基任選地由鹵素、三氟甲基、羥基、氨基或烷氧基取代，或者R4和R’4分別與R3和R’3一起，且互相獨(dú)立地表示為任選地由鹵素、三氟甲基、羥基、C1-6烷基、氨基或烷氧基取代的-CH＝CH-CH＝CH-基；以及A表示間隔基。
2.如權(quán)利要求1所述的化合物，其特征在于間隔基A具有選自 其中，m、n和p表示能具有以下值的整數(shù)m＝0，1；n＝0，1-10；p＝0，1；其中m、n和p不能同時(shí)為零值； 的通式。
3.如前述權(quán)利要求所述的化合物，其特征在于R2和R’2互相獨(dú)立地表示任選地由鹵素、三氟甲基、羥基、C1-6烷基、氨基和烷氧基取代的苯基。
4.如權(quán)利要求3所述的化合物，其特征在于R1和R’1表示甲基，以及R2和R’2互相獨(dú)立地表示任選地由一種或多種鹵素取代基取代的苯基。
5.如前述權(quán)利要求所述的化合物，其特征在于雖然相互獨(dú)立地，但是R3和R4與R’3和R’4一起表示任選地由一種或多種鹵素取代基取代的-CH＝CH-CH＝CH-基。
6.如權(quán)利要求1所述的化合物，其特征在于其具有以下取代基 *R3和R4或者每一個(gè)為氫或者兩者形成單個(gè)的基團(tuán)。
7.如權(quán)利要求6所述的化合物，其特征在于Q表示為Br(溴)或F6P(六氟磷酸鹽)。
8.包含至少一種如權(quán)利要求1至7定義的化合物作為活性成分的藥物制劑。
9.如權(quán)利要求1至7所述的化合物在醫(yī)藥中的用途，特別是其在癌癥治療、抗病毒、抗寄生蟲和抗真菌治療中的用途。
10.如權(quán)利要求1至7所述的化合物在乳腺癌、肺癌、結(jié)腸直腸癌及胰腺癌的治療中的用途。
11.如權(quán)利要求1至7所述的化合物在藥物制備，特別是在用于癌癥治療、抗病毒、抗寄生蟲和抗真菌治療的藥物制備中的用途。
12.如權(quán)利要求1至7所述的化合物在用于乳腺癌、肺癌、結(jié)腸直腸癌及胰腺癌治療的藥物制備中的用途。
13.制備如權(quán)利要求1所述化合物的方法，其包括a)在有機(jī)溶劑中，以2∶1摩爾量，使相應(yīng)的通式VII的雜環(huán)衍生物與雙鹵代衍生物AX2反應(yīng)，其中X代表鹵素原子Cl、Br或I，或者b)在有機(jī)溶劑中，以1∶1摩爾比，將相應(yīng)的所述通式VII的雜環(huán)衍生物與所述雙鹵代衍生物AX2反應(yīng)，其中X代表鹵素原子Cl、Br或I，以得到單季銨化的產(chǎn)物，使用比第一種有機(jī)溶劑極性更大的有機(jī)溶劑，以1∶1的摩爾比，將所得到的單季銨化產(chǎn)物再與另一種不同的雜環(huán)衍生物分子反應(yīng)。
14.具有通式VII的化合物 其中R1表示選自H和C1-6烷基的基團(tuán)，該C1-6烷基任選地由三氟甲基、羥基或烷氧基取代；R2表示任選地由鹵素、三氟甲基、羥基、C1-6烷基、氨基或烷氧基取代的芳基；R3表示選自H、鹵素、三氟甲基、羥基、氨基、烷氧基和C1-6烷基的基團(tuán)，該C1-6烷基任選地由三氟甲基、羥基、氨基或烷氧基取代，或者與R4一起表示為任選地由鹵素、三氟甲基、羥基、C1-6烷基、氨基或烷氧基取代的-CH＝CH-CH＝CH-基；R4表示選自H和C1-6烷基的基團(tuán)，該C1-6烷基任選地由鹵素、三氟甲基、羥基、氨基或烷氧基取代，或者與R3一起表示為任選地由鹵素、三氟甲基、羥基、C1-6烷基、氨基或烷氧基取代的-CH＝CH-CH＝CH-基。
15.如權(quán)利要求14所述的具有式4-(4-氯-N-甲基苯胺基)喹啉 和7-氯-4-(4-氯-N-甲基苯胺基)喹啉的化合物
全文摘要
本發(fā)明提供了通式I的化合物，該通式I化合物通過(guò)選擇性阻斷在腫瘤細(xì)胞或受寄生蟲感染侵襲的細(xì)胞中的膽堿激酶來(lái)阻斷磷酸膽堿的生物合成，從而用于治療包括人類的動(dòng)物體內(nèi)的腫瘤和寄生蟲病或由病毒、細(xì)菌和真菌引起的疾病。本發(fā)明還涉及制備上述化合物的方法和所述方法中的某些中間體。
文檔編號(hào)A61P35/00GK1910153SQ200580002428
公開(kāi)日2007年2月7日 申請(qǐng)日期2005年1月11日 優(yōu)先權(quán)日2004年1月14日
發(fā)明者胡安卡洛斯·勞科爾圣胡安, 華金·坎波斯羅薩, 米格爾安赫爾·加略梅薩, 安東尼奧·埃斯皮諾薩烏韋達(dá) 申請(qǐng)人:康斯喬最高科學(xué)研究公司, 西班牙格拉納達(dá)大學(xué)