本發(fā)明涉及一種繼代培養(yǎng)基及其制備方法。
背景技術(shù)：
鐵皮石斛是一種十分珍惜的藥用植物，具有獨(dú)特的藥用價(jià)值。由于鐵皮石斛種子發(fā)芽率低，分株繁殖速度慢，影響了規(guī)模化生產(chǎn)的過程，加之試管苗的移栽成活率低，造成了石斛藥源供需之間的緊張狀態(tài)。近年來,鐵皮石斛的組織培養(yǎng)技術(shù)成為研究的熱點(diǎn)。目前市場(chǎng)上關(guān)于鐵皮石斛組培的培養(yǎng)基有很多種，其中成分含量也不盡相同，但是鐵皮石斛出芽的速度不理想，芽球不夠飽滿，根系不夠多等，制約著鐵皮石斛的組培技術(shù)的發(fā)展及鐵皮石斛的市場(chǎng)銷售。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中存在的上述缺陷和不足，本發(fā)明提供了一種繼代培養(yǎng)基及其制備方法。
本發(fā)明是通過如下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)的：一種繼代培養(yǎng)基,每升培養(yǎng)基由以下組分制成：
花寶一號(hào) 5-15g；
牛骨蛋白胨 0.8-1.2g；
活性炭 1-3g；
馬鈴薯 40-60g；
香蕉 20-30g；
蔗糖 3-6g；
甘氨酸 80-120g；
煙酸 2-3μg；
VB1 0.3-0.6vg。
作為優(yōu)選，每升培養(yǎng)基由以下組分制成：
花寶一號(hào) 10.0g；
牛骨蛋白胨 1.0g；
活性炭 2.0g；
馬鈴薯 50.0g；
香蕉 25.0g；
蔗糖 5.0g；
甘氨酸 100.0g
煙酸 2.5μg；
VB1 0.5vg。
其還包括以下制備方法：
1）按配置10L所述繼代培養(yǎng)基城區(qū)各組分；
2）將馬鈴薯、香蕉分別攪拌成泥，活性炭用100ml蒸餾水溶解備用；
3）鍋內(nèi)加蒸餾水5L，燒開后放入瓊脂5.5g/L，加溫至瓊脂溶解，然后放入馬鈴薯泥及香蕉泥，繼續(xù)加溫，放入牛骨蛋白胨；
4）起鍋后放入黃籽5g/L、甘氨酸、煙酸、VB1、活性炭，然后定溶至10L；
5）調(diào)節(jié)PH值至5.6；
6）分裝到組培瓶中，每瓶100ml，將組培瓶放入高壓滅菌鍋中；
7）將高壓滅菌后的組培瓶進(jìn)行紫外線滅菌20分鐘后即得。
作為優(yōu)選，所述的制備方法中步驟6）中高壓滅菌鍋的溫度為210-220℃。
本發(fā)明提供的繼代培養(yǎng)基組分營(yíng)養(yǎng)全面，培養(yǎng)的鐵皮石斛出芽速度快，芽球飽滿，有效提高出芽的質(zhì)量。同時(shí)，各組分簡(jiǎn)單，來源廣發(fā)，易于獲得，價(jià)格低廉，尤其適合大規(guī)模組織培養(yǎng)。
具體實(shí)施方式
下面通過非限定性的實(shí)施例對(duì)發(fā)明進(jìn)一步的說明：
實(shí)施例1
一種繼代培養(yǎng)基,每升培養(yǎng)基由以下組分制成：
花寶一號(hào) 10.0g；
牛骨蛋白胨 1.0g；
活性炭 2.0g；
馬鈴薯 50.0g；
香蕉 25.0g；
蔗糖 5.0g；
甘氨酸 100.0g
煙酸 2.5μg；
VB1 0.5vg。
實(shí)施例2
一種繼代培養(yǎng)基,每升培養(yǎng)基由以下組分制成：
花寶一號(hào) 5g；
牛骨蛋白胨 0.8g；
活性炭 1g；
馬鈴薯 40g；
香蕉 20g；
蔗糖 3g；
甘氨酸 80g；
煙酸 2μg；
VB1 0.3vg。
實(shí)施例3
一種繼代培養(yǎng)基,每升培養(yǎng)基由以下組分制成：
花寶一號(hào) 15g；
牛骨蛋白胨 1.2g；
活性炭 3g；
馬鈴薯 60g；
香蕉 30g；
蔗糖 6g；
甘氨酸 120g；
煙酸 3μg；
VB1 0.6vg。
其還包括以下制備方法：
1）按配置10L所述繼代培養(yǎng)基城區(qū)各組分；
2）將馬鈴薯、香蕉分別攪拌成泥，活性炭用100ml蒸餾水溶解備用；
3）鍋內(nèi)加蒸餾水5L，燒開后放入瓊脂5.5g/L，加溫至瓊脂溶解，然后放入馬鈴薯泥及香蕉泥，繼續(xù)加溫，放入牛骨蛋白胨；
4）起鍋后放入黃籽5g/L、甘氨酸、煙酸、VB1、活性炭，然后定溶至10L；
5）調(diào)節(jié)PH值至5.6；
6）分裝到組培瓶中，每瓶100ml，將組培瓶放入高壓滅菌鍋中；
7）將高壓滅菌后的組培瓶進(jìn)行紫外線滅菌20分鐘后即得。
作為優(yōu)選，所述的制備方法中步驟6）中高壓滅菌鍋的溫度為210-220℃。
以上所述，僅為本發(fā)明的幾個(gè)實(shí)施例而已，不能依此限定本發(fā)明的保護(hù)范圍，任何依靠本發(fā)明所作出的等效變換與修飾，都屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)。