專(zhuān)利名稱(chēng)：：治療胃腸功能紊亂的組合物、其制備方法及其在制備治療胃腸功能紊亂藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種治療胃腸功能紊亂的組合物(中藥復(fù)方提取物)、制備方法及其在制備治療胃腸功能紊亂或抗腸易激綜合癥(IBS)藥物中的應(yīng)用，該提取物可用于治療胃腸功能紊亂，特別是用于治療腸易激綜合癥。
背景技術(shù)：
：胃腸功能紊亂是臨床常見(jiàn)的功能性腸道疾病，約占胃腸道疾病的40-60%。其中腸易激綜合癥(IBS)在成人中的患病率為10%~22%,女性略多見(jiàn)。其主要臨床表現(xiàn)為無(wú)器質(zhì)性病變的腹痛、腹瀉、便秘等消化系統(tǒng)癥狀，其病因是胃腸道功能紊亂。隨著人們生活節(jié)奏的加快，IBS患病率呈上升的趨勢(shì)。由于現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對(duì)于其病理學(xué)以及發(fā)病機(jī)制仍未明確，發(fā)病機(jī)理比較復(fù)雜，誘發(fā)因素較多，化學(xué)藥物往往難以取得滿意療效，同時(shí)這些藥物存在抗IBS語(yǔ)窄、副作用大、易復(fù)發(fā)等缺陷。近年來(lái)，國(guó)內(nèi)外在抗IBS藥的研制與開(kāi)發(fā)方面越來(lái)越注重傳統(tǒng)藥物，使得傳統(tǒng)醫(yī)藥在本病的治療中占有很重要的地位。03112782.7號(hào)中國(guó)發(fā)明專(zhuān)利申請(qǐng)公開(kāi)了一種"治療腸功能紊亂疾病的中藥組合物及其制劑"，該方案以"整體觀念"和"辨證施治"的原則提供了如下配方柴胡615克，白芍520克，川彎310克，白術(shù)620克，茯茶6~12克，甘草520克。200410014337.4號(hào)中國(guó)發(fā)明專(zhuān)利申請(qǐng)公開(kāi)了一種"治療腸功能紊亂的中藥組合物及其制備方法"，該方案提供了由柴胡6~15克，白芍520克，太子參612克，甘草5-20克組成的配方和制劑方法。02153311.3號(hào)中國(guó)發(fā)明專(zhuān)利申請(qǐng)公開(kāi)了一種"四逆散及其活性部位的新用途"，該方案提供了有效成分群提取物理化性質(zhì)，化學(xué)成分組成特4正和制備方法。該專(zhuān)利方案是按6:6:6:9的比例稱(chēng)取柴胡、炙甘草、枳實(shí)、白芍，水煎煮；水煎液濃縮，通過(guò)大孔吸附樹(shù)脂進(jìn)行吸附，水沖洗至水洗液近無(wú)色止，然后用約乙醇對(duì)洗脫，乙醇洗脫液減壓回收溶劑至干，即得到的提取物。該活性部位具有良好的抗抑郁作用。02153313.X號(hào)中國(guó)發(fā)明專(zhuān)利申請(qǐng)公開(kāi)一種抗抑郁藥物組合物及其制備方法，該藥物組合物主要包括異甘草素、甘草素、甘草苦、新橙皮苦、橙皮香、異甘草苷等11個(gè)化合物。該藥物組合物首先是由四逆散水煎液通過(guò)大孔吸附樹(shù)脂純化分離制成抗抑郁有效成分群提取物。該藥物組合物具有良好的抗抑郁作用。孫元勤運(yùn)用以下復(fù)方治療腸易激綜合癥86例，基本方陳皮、白芍各15g，柴胡、厚樸、枳殼各12g，炒蒼術(shù)9g，炙甘草6g。隨證加減?？傆行?8.37%。雖然四逆散及其加減方已見(jiàn)臨床治療消化潰瘍、各種胃炎、功能性消化不良、腸易激綜合癥等疾病，但由于中藥復(fù)方有效物質(zhì)尚不完全明確，因此在實(shí)際應(yīng)用中存在著臨床療效不穩(wěn)定、藥品質(zhì)量控制困難及患者服用量大等問(wèn)題。這些嚴(yán)重制約了中醫(yī)藥的傳承發(fā)展以及中藥現(xiàn)代化。中藥有效成分群提取物或中藥有效部位是指從一味中藥或中藥復(fù)方中提取的一類(lèi)或幾類(lèi)有效化學(xué)成分的混合體，其含量達(dá)到總提取物的50%以上。研制開(kāi)發(fā)中藥有效成分群提取物可達(dá)到以下幾個(gè)目的一、能夠符合中醫(yī)基本理論，合理地保持中醫(yī)用藥規(guī)律，充分體現(xiàn)"整體觀念，，和"辯證施治，，原則，使祖國(guó)醫(yī)藥學(xué)的優(yōu)勢(shì)和特點(diǎn)利用現(xiàn)代高科技予以高效表達(dá)。二、有效部位群的提取純化，使化學(xué)成分更加清楚，較之復(fù)方制劑的粗提取物有質(zhì)的飛躍?？墒顾幤焚|(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制訂和生產(chǎn)質(zhì)量的控制更加具有針對(duì)性，藥品質(zhì)量更加穩(wěn)定可控。三、復(fù)方的精制純化，剔除了大量的不必要成分及干擾因素，方中化學(xué)組分基本清楚，可使作用更加具有專(zhuān)一性，主要藥效作用更加突出。五、科技含量大大提高，增加了藥品安全性、有效性和質(zhì)量的可控制性，使其更易于同國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)接軌，增強(qiáng)國(guó)際竟?fàn)幠芰?，推?dòng)中醫(yī)藥走向世界。因此，采用中藥有效成分群提取物制備的新藥由于既能體現(xiàn)中藥多成分、多耙點(diǎn)、多途徑發(fā)揮藥效的特點(diǎn)，又能使藥物有效成分更加富集，藥理作用和臨床療效增強(qiáng)，以及利于質(zhì)量控制水平提高等優(yōu)勢(shì)，近年來(lái)成為中藥、天然藥新藥開(kāi)發(fā)的重要方向之一。目前^^中藥復(fù)方中分離出具有治療胃腸功能紊亂或抗IBS活性的有效成分群提耳又物及有效成分的方法及相關(guān)制劑并不多見(jiàn)。未見(jiàn)從白芍，柴胡、枳殼、甘草四味藥物組成的復(fù)方中分離出具有治療胃腸功能紊亂或抗IBS活性的有效成分群提取物及活性成分的研究。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于提供一種本發(fā)明涉及一種治療胃腸功能紊亂的組合物(中藥復(fù)方提取物，或稱(chēng)為有效成分群)、其制備方法及其在制備治療胃腸功能紊亂或抗腸易激綜合癥(IBS)藥物中的應(yīng)用，本發(fā)明治療胃腸功能紊亂的組合物(中藥復(fù)方提取物，或稱(chēng)為有效成分群)、為黃褐色粉末，易溶于水、曱醇和乙醇，難溶于氯仿、石油醚等親脂性有機(jī)溶劑。三氯化鋁反應(yīng)陽(yáng)性，鹽酸一鎂粉反應(yīng)陽(yáng)性，醋酐一濃硫S吏反應(yīng)陽(yáng)性。主要含有黃酮類(lèi)和皂苷類(lèi)成分?？傸S酮類(lèi)成分的含量為24.5%46.5%，總皂苦類(lèi)成分的含量為10.5%~31.6%。本發(fā)明的技術(shù)方案是，一種治療胃腸功能紊亂的組合物(中藥復(fù)方提取物，或稱(chēng)為有效成分群)，該組合物的原料藥為柴胡、炙甘草、枳實(shí)和白芍，該組合物的重量百分比組成中含有總黃酮類(lèi)24.5%~46.5%;總急芬類(lèi)10.5%~31.6%,其特征在于，該組合物中還含有柚皮苦(Naringin)17.0%~35.4%;甘草酸(Glycyrrhizicacid,GA)1.1%~8.5%;芍藥苷(Paeoniflorin)3.2%~13.7%。該組合物(中藥復(fù)方提取物)中的其他組分還有新橙皮苦(Neohesperidin)、異4由皮苦(Isonafingin)，才登皮芬(Hesperidin),芍藥內(nèi)酉旨芬(Albiflorin)和甘草芬(Liquiritin)。更優(yōu)化和更具體的說(shuō)，以上組合物是指，按照以下方法制備得到的組合物按6:6:6:69的重量比例稱(chēng)取柴胡、甘草、枳實(shí)、白芍，混合后的水煎液，濃縮，通過(guò)大孔吸附樹(shù)脂進(jìn)行吸附，待水煎液全部通過(guò)樹(shù)脂柱后，用水繼續(xù)沖洗樹(shù)脂至水洗液近無(wú)色止，然后再用重量比50~85%的乙醇洗脫樹(shù)脂柱，收集乙醇洗脫液，減壓回收溶劑至干，即得到本組合物(提取物)。治療胃腸功能紊亂的組合物(中藥復(fù)方提取物，或稱(chēng)為有效成分群)的理化性質(zhì)為黃褐色粉末，易溶于水、曱醇和乙醇。完成本申請(qǐng)?bào)?個(gè)發(fā)明任務(wù)的方案是，一種治療胃腸功能紊亂的組合物(中藥復(fù)方提取物，或稱(chēng)為有效成分群)的制備方法，其特征在于，步驟如下(1)、按6:6:6:69的重量比例稱(chēng)取柴胡、甘草、枳實(shí)、白芍；(2)、原料藥混合后加水煎煮；(3)、合并水煎液，濃縮；(4)、通過(guò)大孔吸附樹(shù)脂進(jìn)行吸附；(5)、待水煎液全部通過(guò)樹(shù)脂柱后，用水繼續(xù)沖洗樹(shù)脂至水洗液近無(wú)色止；(6)、然后再用重量比50-85%乙醇溶液洗脫樹(shù)脂柱，收集乙醇洗脫液，減壓回收溶劑至干，即得到本組合物。以上方法中所述第(2)步驟的"加水煎煮"，是指每次加原料藥10倍重量的水，水煎煮2次，每次煎煮1.5小時(shí)；所述第(3)步驟水煎液的濃縮，是指濃縮至每毫升含0.2g生藥；第(4)步驟中所使用大孔樹(shù)脂可以是D101,也可以是其它非極性或弱極性的大孔樹(shù)脂，例如，HPDIOO，HP20、HP20，HPIO，HP40，XAD-1~XAD—5,H103，H107,X_5,AB-8,DS—401,HPD-450;所使用大孔樹(shù)脂也可以是中極性的大孔樹(shù)脂，例如，中極性LSA-40,LSA-21,LSA-10,LSA-33，XDA-1，XDA-8，LSA-7，LSA—5B，LSI—004，LSD001，LSA8,LSA8B，LSD~632,LSA—700，LSD-300，LSD-263,LSD-280，NKA~9，S~8等；所述第(6)步驟中所述的洗脫步驟為是先用較低濃度(50~60%)乙醇溶液進(jìn)行洗脫后，再采用60~85%乙醇溶液進(jìn)行洗脫。本發(fā)明人研究發(fā)現(xiàn)本發(fā)明所采用的分段洗脫所得到組合物中黃酮類(lèi)和皂苷類(lèi)成分的含量和種類(lèi)明顯增加、雜質(zhì)顯著減少，而且所得到組合物的藥理活性明顯優(yōu)于單一濃度乙醇洗脫產(chǎn)物。經(jīng)優(yōu)化設(shè)計(jì)后，本發(fā)明洗脫工藝所用的乙醇溶液總量為樹(shù)脂體積的6~8倍。表1不同洗脫方法所得到的產(chǎn)物組成及其活性比較<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>經(jīng)本發(fā)明工藝制備后，該有效成分群提取物的收率為原藥材原料重量的4.0%~12.0%。所使用的原料藥物可以是采用相應(yīng)植物(植物種以中國(guó)藥典規(guī)定的植物種為準(zhǔn))為原料制備的各種炮制加工品。由于所用的原料藥材原料產(chǎn)地、收獲季節(jié)等因素，提取物中化學(xué)成分含量或提取物收率可以產(chǎn)生如本專(zhuān)利所述的在一定程度范圍內(nèi)的變化。所以為了保證該組合物的重量百分比組成，所使用的原料藥有可能超出6:6:6:6~9的重量比例。所述的提取物中總黃酮的含量測(cè)定，采用紫外可見(jiàn)分光光度法。主要條件是以柚皮苷、甘草苷、,丁等為對(duì)照品，加入氬氧化鉀等試劑，進(jìn)行測(cè)定總黃酮含量。所述的提取物中總皂苦的含量測(cè)定，采用紫外可見(jiàn)分光光度法。其方法是以甘草酸、柴胡皂苷等為對(duì)照品，以香草醛冰醋酸、高氯酸等試劑作為顯色劑，測(cè)定樣品中總皂苷含量。所述的提取物中芍藥苷的含量測(cè)定采用高效液相色譜法，主要條件是采用十八烷基硅烷鍵合相硅膠為填充劑，甲醇-水-冰醋酸(35:65:0.1)為流動(dòng)相，；險(xiǎn)測(cè)波長(zhǎng)230nm。所述的提取物中柚皮苷的含量測(cè)定采用高效液相色譜法，主要條件是采用十八烷基硅烷鍵合相硅膠為填充劑，乙腈-0.5%乙酸(18:82)為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)283nm。所述的提取物中甘草酸的含量測(cè)定采用高效液相色譜法，主要條件是采用十八烷基硅烷鍵合相硅膠為填充劑，曱醇-0.2mol/L乙酸銨-乙酸(67:33:1)為流動(dòng)相，4企測(cè)波長(zhǎng)250nm。按藥劑學(xué)方法，可以將本發(fā)明的活性成分群提取物加入常規(guī)的藥物賦形劑如溶劑、崩解劑、矯味劑、防腐劑、著色劑等，制備成各種臨床藥物劑型，包括口服制劑或非腸道給藥的劑型，如片劑、膠嚢劑、顆粒劑、混懸劑、滴丸、微丸、口服液、乳劑、凝膠劑、微球、納米球等。所說(shuō)的非腸道給藥劑型選自于注射劑、氣霧劑、栓劑或皮膚粘膜給藥劑型等。完成本申請(qǐng)第3個(gè)發(fā)明任務(wù)的方案是，上述治療胃腸功能紊亂的組合物(中藥復(fù)方提取物，或稱(chēng)為有效成分群)在制備治療胃腸功能紊亂或抗腸易激綜合癥(IBS)藥物中的應(yīng)用。該有效成分群提取物經(jīng)動(dòng)物試驗(yàn)和臨床研究證明具有良好的治療胃腸功能紊亂或抗腸易激綜合癥(IBS)的作用，可用于胃腸功能紊亂和抗腸易激綜合癥(IBS)藥物的制備。以下實(shí)驗(yàn)例考察了本發(fā)明纟是取物的藥理作用。實(shí)驗(yàn)材料藥材均從南京市藥材公司購(gòu)買(mǎi)。實(shí)驗(yàn)所用藥品西沙比利片，5mg/片，馬來(lái)酸曲美布汀，規(guī)格lOOmg，硫酸阿托品注射液，新斯的明注射液均從南京市醫(yī)藥/>司購(gòu)買(mǎi)。動(dòng)物昆明種小鼠、SD大鼠、豚鼠，由南京中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。樣品制備方法和給藥劑量本發(fā)明提取物按6:6:6:6的重量比例稱(chēng)取柴胡、甘草、枳實(shí)、白芍，混合后水煎煮2次，每次10倍量，煎煮1.5小時(shí)；合并水煎液，濃縮至每毫升含0.2g生藥，通過(guò)DIOI大孔吸附樹(shù)脂進(jìn)行吸附，待水煎液全部通過(guò)樹(shù)脂柱后，用水繼續(xù)沖洗樹(shù)脂至水洗液近無(wú)色止，然后再用約68倍樹(shù)脂體積的50-80°/。乙醇對(duì)洗脫樹(shù)脂柱，收集乙醇洗脫液，減壓回收溶劑至干，即得到本提取物。有效成分群提取物低劑量組灌服有效成分群提取物，相當(dāng)于1.5g生藥/kg;有效成分群提取物高劑量組灌服有效成分群提取物,相當(dāng)于6.0g生藥/kg。復(fù)方湯劑按6:6:6:6的重量比例稱(chēng)取柴胡、甘草、枳實(shí)、白芍，混合后水煎煮2次，每次10倍量，煎煮1.5小時(shí)；合并水煎液，以上兩濾過(guò)液合并濃縮，濃縮至相對(duì)密度為1.10,6000轉(zhuǎn)/分鐘離心，除雜后得到含生藥lg/ml的復(fù)方湯劑藥液。復(fù)方湯劑組灌服復(fù)方湯劑，相當(dāng)于6.0g生藥/kg。實(shí)驗(yàn)例一、藥物對(duì)脾虛小鼠的影響1.動(dòng)物及分組雄性昆明種小鼠70只，體重1822g，隨機(jī)分為7組，每組10只祠養(yǎng)。2.給藥及實(shí)驗(yàn)方法除正常對(duì)照組外，其余各組均灌胃給予200%的大黃水煎液，0.25mH0g1，連續(xù)10d,復(fù)制小鼠脾虛模型。自給大黃水煎液第5天起，各組連續(xù)灌胃給藥6d。小鼠于實(shí)驗(yàn)前禁食18h,末次給藥30min后小鼠灌胃5%的伊文氏藍(lán)溶液，處死小鼠后取出胃腸段，記錄伊文氏藍(lán)前沿至幽門(mén)的距離，計(jì)算其占小腸全長(zhǎng)的百分比。并立即取出各小鼠胸腺、脾臟，稱(chēng)重。結(jié)果見(jiàn)表2~3。3.結(jié)果模型組小鼠連續(xù)給予大黃水煎液后，即出現(xiàn)瞇眼、懶動(dòng)、扎堆、稀便、體重明顯減輕等現(xiàn)象，與正常對(duì)照組比較差異顯著(P0.05)。第6天，模型組在原有癥狀的基礎(chǔ)上出現(xiàn)雙耳后背、<更溏、毛枯、沾有排泄物現(xiàn)象。有效成分群提取物高低劑量組與模型組及湯劑組比較，能明顯改善上述脾虛體征，顯著增加脾虛小鼠的體重、增加脾虛小鼠脾指數(shù)、胸腺指數(shù)，調(diào)節(jié)脾虛小鼠的胃腸功能(P0.05，PO.Ol)。表2對(duì)脾虛小鼠胸腺指數(shù)、脾指數(shù)的影響(ZiS)組別動(dòng)物數(shù)(只)胸腺指數(shù)(g'100g-脾指數(shù)(g-100g1)正常對(duì)照組100.2105±0.03610.5327±0.2151模型組100.1121±0.0251A0.1411±0.0335A復(fù)方湯劑組100.1322±0.0329*0.2744±0.0628*本發(fā)明提取物低劑量組100.1861±0.0317*v0.4403±0.0251*本發(fā)明提取物高劑量組100.2092±0.0272*70.5252±0.0572*與對(duì)照組比較AP<0.05。與模型組比較*P<0.05。與湯劑組比較》<0.05。12表3對(duì)脾虛小鼠小腸推進(jìn)率的影響(X±S)_§^_動(dòng)物數(shù)(只)_小腸推進(jìn)百分率(％)_正常對(duì)照組1058.15±16.17投型組1073.26±17.34AA復(fù)方湯劑組1069.14±7.43本發(fā)明提取物低劑量組1059.37±8.71*v本發(fā)明提取物高劑量組_^_57.61±7.39*7_與對(duì)照組比較AAP<0.01;與模型組比較*P<0.05。與湯劑組比較》<0.05。實(shí)驗(yàn)例二、藥物對(duì)利血平所致的大鼠胃腸道功能紊亂的調(diào)節(jié)作用1.動(dòng)物及分組健康成年雄性SD大鼠60只，隨機(jī)分為6組，每組IO只飼養(yǎng)。2.給藥及實(shí)驗(yàn)方法(1)正常對(duì)照組腹腔注射生理鹽水，同時(shí)灌力艮蒸餾水；(2)胃腸道功能紊亂模型組腹腔注射利血平0.5mg.kg1,同時(shí)灌服蒸餾水；(3)陽(yáng)性組腹腔注射利血平，同時(shí)灌服舒麗啟能；(4)有效成分群提取物組腹腔注射利血平0.5mg.kg1，同時(shí)灌服有效成分群提取物高、低劑量。各組連續(xù)給藥14天。隨時(shí)觀察大鼠的糞便及體征變化，并每日稱(chēng)量大鼠的體重、攝食量。大鼠于實(shí)驗(yàn)前12h禁食，按MTL放射免疫試劑盒收集下列標(biāo)本血漿、空腸組織儲(chǔ)存?zhèn)錅y(cè)。結(jié)果見(jiàn)表4。3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果模型組大鼠在注射利血平后24小時(shí)內(nèi)出現(xiàn)糞便不成形，并陸續(xù)出現(xiàn)不同程度的腹瀉、肛周污穢，隨之出現(xiàn)食欲下降，第6天時(shí)便溏尤甚，第9天時(shí)便溏逐漸停止，糞便粘滯不爽，甚至出現(xiàn)便秘、厭食，消瘦曰見(jiàn)加重(P0.05,P<0.01)。有效成分群提取物組大鼠上述癥狀的表現(xiàn)程度較模型組大鼠輕，體重、攝食量、胸腺指數(shù)、脾指數(shù)、血漿MTL、空腸勻漿MTL下降狀態(tài)與模型組比較，均得到顯著改善(P0.05,PO.Ol)。表4對(duì)胃腸道功能紊亂大鼠MTL的影響(f±S)組別動(dòng)物數(shù)(只)血漿MTL空腸勻漿MTL正常對(duì)照組10254.16±31.31732.18±72.29投型組1062.28士37.44厶a293.52±49.29AA陽(yáng)性組10189.72±29.38**52U6土182.17"復(fù)方湯劑組10121.9±27.59366.29±58.40本發(fā)明提取物低劑量組10221.63±28.40**v542.329±59.91**7本發(fā)明提取物高劑量組10245.97±34.91**。653.28±62.95**v與對(duì)照組比較AAP<0.01。與模型組比較**P<0.01。與湯劑組比較》<0.05。實(shí)驗(yàn)例三對(duì)腸道菌群紊亂的調(diào)節(jié)作用1.動(dòng)物及分組昆明種小鼠50只，體重18-22g,隨機(jī)分為5組，每組10只飼養(yǎng)。2.給藥及實(shí)驗(yàn)方法(1)正常對(duì)照組灌胃等容量蒸餾水；(2)模型組每曰灌胃大黃藥液lg/只；(3)復(fù)方湯劑組每日灌胃大黃藥液lg/只腹腔，同時(shí)灌服復(fù)方湯劑；(4)有效成分群提取物組每日灌胃大黃藥液lg/只，同時(shí)灌服有效成分群提取物高、低劑量。連續(xù)5d后，無(wú)菌條件下剖開(kāi)腹腔,采集腸道內(nèi)成型糞便。用雙歧桿菌和乳酸桿菌液體培養(yǎng)基分別將糞便稀釋成107濃度，各取O.lml分別接種于雙歧桿菌和乳酸桿菌固體培養(yǎng)基上，厭氧條件下37。C培養(yǎng)72h，記數(shù)雙歧桿菌和乳酸桿菌菌落數(shù)。結(jié)果見(jiàn)表5。_____表5對(duì)腸道菌群紊亂的影響(I土S)_組另寸_動(dòng)物數(shù)(只)雙歧桿茵(xl07/g)乳酸桿菌(x]07/g)正常對(duì)照組1017.82±2,2728.92±3.95模型組105.07土1.94A厶7.49土2.16厶厶復(fù)方湯劑組109.57±2.7115.34±4.42**本發(fā)明提取物〖綠l」ia1013.49±38.51**19.36±26.75**V本發(fā)明提取物敲'j影且_10_16.42土26.72"_27.53士32.26"V與對(duì)照組比較厶AP〈0.01。與模型組比較-**P<0.01。與湯劑組比較VP<0.05。實(shí)-險(xiǎn)例四、小鼠胃排空實(shí)馬全1.動(dòng)物及分組昆明種小鼠50只，體重1822g，隨機(jī)分為5組，每組IO只飼養(yǎng)。2.給藥及實(shí)驗(yàn)方法隨機(jī)分為有效成分群提取物組灌服有效成分群提取物高、低劑量。對(duì)照組灌服等容量蒸餾水。動(dòng)物每日灌胃給藥1次，連續(xù)7d。末次給藥后40min，每只小鼠灌胃給予0.1%曱基橙溶液0.2ml，20min后處死動(dòng)物，10ml生理鹽水沖洗胃腔并收洗液，調(diào)洗液pH至6.0~6.5，離心后取上清液于分光光度計(jì)420nm處測(cè)定吸收度，算出甲基橙胃殘留率。結(jié)果有效成分群高劑量和低劑量組(曱基橙胃殘留率為37±16.4%)明顯抑制小鼠胃排空，與對(duì)照組(甲基橙胃殘留率為15±4.3°/。)比較，P<0.01;與復(fù)方湯劑組(甲基橙胃殘留率為22±5.2%)比較，P<0.01。實(shí)驗(yàn)例五、豚鼠離體腸肌實(shí)驗(yàn)豚鼠4只，處死后取出結(jié)腸，放入充氧的臺(tái)氏液中沖凈，剪成1.5~2.0cm的腸段，將腸段兩端穿線結(jié)扎,一端系于通氣鉤上，放入恒溫麥?zhǔn)显〔壑?，另一?5系于拉力換能器上,連接幾3型生理記錄儀。記錄四君子湯對(duì)離體腸肌的影響。結(jié)果四君子湯0.05g/次、0.2g/次對(duì)豚鼠離體腸肌具有明顯的松弛作用。結(jié)果有效成分群高劑量和低劑量組對(duì)"豕鼠離體腸^l具有明顯的4^弛作用(與對(duì)照組比較，P〈0.01;與復(fù)方湯劑組比較，PO.Ol。)臨床使用觀察1腸易激綜合征(IBS)是常見(jiàn)消化道非器質(zhì)性疾病，臨床癥狀以無(wú)規(guī)律的腹痛、腹脹、腹瀉，大便性狀改變及排便次數(shù)增多為主要表現(xiàn)。在中醫(yī)理論和藥理實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，我們?cè)谂R床應(yīng)用中將本發(fā)明藥物組合物與其它藥物進(jìn)行了對(duì)比觀察，結(jié)果表明本發(fā)明提取物用于IBS及其它腸胃功能紊亂疾病的治療，效果較好。研究結(jié)果如下診斷及入選標(biāo)準(zhǔn):參照羅馬n標(biāo)準(zhǔn)，腹痛或腹部不適有12周以上，發(fā)作期至少在25%的時(shí)間內(nèi)出現(xiàn)兩種以下癥狀，或有腹痛伴以下項(xiàng)目中至少2項(xiàng)者①腹痛伴排便異常，包括稀便、干硬便、排便困難或頻率異常(23次/曰或〈3次/周；②排便后腹痛緩解；③腹脹；④粘液便；⑤便急或排不盡感。經(jīng)臨床觀察、電子結(jié)腸鏡及鋇劑灌腸檢查排除胃腸道器質(zhì)性病變，排除有腹部手術(shù)史、精神病史、重度神經(jīng)官能癥史及伴其他疾病不能停藥者。一般資料門(mén)診患者釆用抽簽法隨機(jī)分為三個(gè)治療組和對(duì)照組各100例。各組一般資料比較無(wú)顯著差異(P0.05),具有可比性。治療藥品本發(fā)明提取物顆粒劑按6:6:6:6的重量的比例稱(chēng)取柴胡、甘草、枳實(shí)、白芍，混合后水煎煮2次，每次10倍量，煎煮1.5小時(shí)；合并水煎液，濃縮至每毫升含0.2g生藥，通過(guò)D101大孔吸附樹(shù)脂進(jìn)行吸附，待水煎液全部通過(guò)樹(shù)脂柱后，用水繼續(xù)沖洗樹(shù)脂至水洗液近無(wú)色止，然后再用約68倍樹(shù)脂體積的50~80%乙醇對(duì)洗脫樹(shù)脂柱，收集乙醇洗脫液，減壓回收溶劑至干，加入適量藥用輔料，制備本提取物顆粒劑。每日l(shuí)劑(相當(dāng)于生藥30g)。復(fù)方湯劑按6:6:6:6的重量比例稱(chēng)取柴胡、甘草、枳實(shí)、白芍，混合后水煎煮2次，每次10倍量，煎煮1.5小時(shí)；合并水煎液，以上兩濾過(guò)液合并濃縮，濃縮至相對(duì)密度為1.10,離心除雜后得到含生藥lg/ml的復(fù)方湯劑藥液，加入適量藥用輔^K制備湯劑顆粒劑。每日l(shuí)劑(相當(dāng)于生藥30g)。西藥組予相關(guān)的西藥對(duì)癥治療,如奧替溴銨(斯巴敏)、匹維溴4會(huì)(得舒特)，易蒙停、思密達(dá)，馬來(lái)酸曲美布汀(舒麗啟能)多潘立酮等。8d為1個(gè)療程，服藥最長(zhǎng)時(shí)間不超過(guò)2個(gè)療程。3療效觀察療效標(biāo)準(zhǔn)研究療效觀測(cè)指標(biāo)為腹痛、腹脹、大便頻率、大便形狀、排便異常等癥狀的改善。顯效:大便每日1次,為成形便，腹痛、腹脹及黏液便消失;有效:大便次數(shù)減少1/2以上，腹痛、腹脹基本消失；無(wú)效:未達(dá)到有效標(biāo)準(zhǔn)者。統(tǒng)計(jì)學(xué)處理數(shù)據(jù)以均數(shù)士標(biāo)準(zhǔn)差表示。采用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件，組間差異比較采用t檢驗(yàn)，P<0'01為差異有顯著性.治療結(jié)果見(jiàn)表6。表6治療后療效比較組別病例痊愈顯效有效無(wú)效總有效率％中藥湯劑組1301120702977.7西藥組1222120404166.517本發(fā)明提取物組12046323012卯.4發(fā)明提取物總有效率顯著高于湯劑和西藥。本發(fā)明藥物治療最快起效為5天。3周療效穩(wěn)定，腹痛和不適癥狀顯著減少，腸道功能改善(包括大便次數(shù)和迫切感減少，大便性狀改善)，癥狀改善出現(xiàn)在用藥的前四周內(nèi)同時(shí)在整個(gè)用藥期間得到保持。無(wú)效病例延長(zhǎng)療程亦不能提高療效，用藥均未見(jiàn)明顯不良反應(yīng),治療后血常規(guī)、肝功能均無(wú)變化。特別是本發(fā)明提取物與湯劑相比，臨床顯效率和總有效率均出現(xiàn)了顯著的差別。臨床使用觀察2胃腸道功能紊亂又稱(chēng)功能性胃腸病，是一組胃腸綜合征的總稱(chēng)，多半有精神因素的背景，以胃腸道運(yùn)動(dòng)功能紊亂為主，而在生物化學(xué)和病理解剖學(xué)方面無(wú)器質(zhì)病的改變。本癥不包括其他系統(tǒng)疾病引起的胃腸道功能紊亂。臨床表現(xiàn)主要是胃腸道的有關(guān)癥狀，常伴有失眠、焦慮、注意力渙散、健忘、神經(jīng)過(guò)敏、頭痛等。其癥狀為明顯的食^l減退,食量減少4成以上(主癥)，大便失調(diào)，或干或爛,上腹部脹悶、隱痛，口干苦，惡心，呃逆，共收集該類(lèi)病人360例。治療藥品本發(fā)明提取物顆粒劑按6:6:6:6的重量比例稱(chēng)取柴胡、甘草、枳實(shí)、白芍，混合后水煎煮2次，每次10倍量，煎煮1.5小時(shí)；合并水煎液，濃縮至每毫升含0.2g生藥，通過(guò)DIOI大孔吸附樹(shù)脂進(jìn)行吸附，待水煎液全部通過(guò)樹(shù)脂柱后，用水繼續(xù)沖洗樹(shù)脂至水洗液近無(wú)色止，然后再用約6~8倍樹(shù)脂體積的50~80°/。乙醇對(duì)洗脫樹(shù)脂柱，收集乙醇洗脫液，減壓回收溶劑至干，加入適量藥用輔料，制備本提取物顆粒劑。每日l(shuí)劑(相當(dāng)于生藥30g)。復(fù)方湯劑按6:6:6:6的重量比例稱(chēng)取柴胡、甘草、枳實(shí)、白芍，混合后水煎煮2次，每次10倍量，煎煮1.5小時(shí)；合并水煎液，以上兩濾過(guò)液合并濃縮，濃縮至相對(duì)密度為1.10，離心除雜后得到含生藥lg/ml的復(fù)方湯劑藥液，加入適量藥用輔料，制備湯劑顆粒劑。每日l(shuí)劑(相當(dāng)于生藥30g)。西藥組予相關(guān)的西藥對(duì)癥治療，如嗎叮啉、普瑞博思、胃復(fù)安、酚酞、胃蛋白酶合劑、腸活菌制劑等。8d為l個(gè)療程，服藥最長(zhǎng)時(shí)間不超過(guò)2個(gè)療程。療效標(biāo)準(zhǔn)以《中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則》為綱，結(jié)合本病證特點(diǎn),制定以下標(biāo)準(zhǔn)。痊愈食量恢復(fù)到正常水平，癥狀全部消失。顯效食量基本恢復(fù)到正常水平(正常的90%以上),癥狀亦基本消失。好轉(zhuǎn)食量在原有基礎(chǔ)上明顯增加(正常的30%以上)，癥狀亦有明顯改善。無(wú)效食量無(wú)增加，其它癥狀無(wú)明顯改善。從表7中結(jié)果可知，以本發(fā)明有效部位提取物施治最佳，其療效明顯優(yōu)于西藥或復(fù)方湯劑治療，差別有非常顯著的意義。而藥物治療又優(yōu)于自然恢復(fù),差別也有非常顯著的意義。表7治療后療效比較組別病例痊愈顯效有效無(wú)效總有效率％西藥組1281222415358.3中藥湯劑組1101621423171.5本發(fā)明提取物組124324835993.1下列實(shí)施例均能實(shí)現(xiàn)上述實(shí)驗(yàn)例的效果。實(shí)施例1按比例稱(chēng)取柴胡2kg、甘草2kg、枳實(shí)2kg、白芍2kg,加水煎煮2次，每次加水80L、煎煮1.5小時(shí)，合并2次水煎液，濃縮至40L;通過(guò)弱極性的D101大孔吸附樹(shù)脂，樹(shù)脂用量為25kg，進(jìn)行吸附，吸附流速為0.1L/h;待水煎液全部通過(guò)樹(shù)脂柱后，用約60L水繼續(xù)沖洗樹(shù)脂柱，然后再用約120L的50~80%乙醇對(duì)樹(shù)脂柱上吸附的物質(zhì)進(jìn)4亍洗脫，洗脫i^速為0.1L/h;收集乙醇洗脫液，減壓回收溶劑至干，即得到本發(fā)明提取物653.5g。其中總黃酮類(lèi)成分的含量為35.9%，總皂苷類(lèi)成分的含量為28.6%,柚皮苷含量為25.3%,甘草酸含量3.5%，芍藥苷的含量為7.7%。實(shí)施例2按比例稱(chēng)取柴胡2kg、甘草2kg、枳實(shí)2kg、白芍3kg加水煎煮2次，每次加水90L、煎煮1.5小時(shí)，合并2次水煎液，濃縮至45L;通過(guò)弱極性的D101大孔吸附樹(shù)脂進(jìn)行吸附，吸附流速為0.1L/h;待水煎液全部通過(guò)樹(shù)脂柱后，用水沖洗樹(shù)脂柱后再用約120L的50~70%乙醇對(duì)樹(shù)脂柱上吸附的物質(zhì)進(jìn)行洗脫，洗脫流速為0.1L/h;收集乙醇洗脫液，減壓回收溶劑至千，即得到本發(fā)明提取物742.9g。其中總黃酮類(lèi)成分的含量為39.1%，總皂苷類(lèi)成分的含量為35.7%，柚皮苦含量為28.2%,甘草酸含量2.8%，芍藥苷的含量為9.3%。實(shí)施例3.與實(shí)施例1基本相同，但有效成分群提取物中總黃酮類(lèi)成20分的含量為37.6%，總皂苷類(lèi)成分的含量為11.6%，柚皮苷含量為19.3%,甘草酸含量2.1%,芍藥苷的含量為4.2%。其余同實(shí)施例1。實(shí)施例4.與實(shí)施例1基本相同，但總黃酮類(lèi)成分的含量為24.5%，總皂苷類(lèi)成分的含量為31.6%，柚皮苷含量為17.0%,甘草酸含量1.1%，芍藥苷的含量為13.7%。其余同實(shí)施例1。實(shí)施例5.與實(shí)施例1基本相同，但總黃酮類(lèi)成分的含量為24.5%，總皂苷類(lèi)成分的含量為31.6%,柚皮苷含量為18.6%，甘草酸含量2.3°/。，芍藥苷的含量為11.4%。其余同實(shí)施例1。實(shí)施例6.與實(shí)施例1基本相同，但總黃酮類(lèi)成分的含量為26.8%,總皂苷類(lèi)成分的含量為29.6%,柚皮苷含量為20.7%，甘草酸含量3.4。/。，芍藥苷的含量為9.2%。其余同實(shí)施例1。實(shí)施例7.與實(shí)施例1基本相同，但總黃酮類(lèi)成分的含量為27.1%，總皂苷類(lèi)成分的含量為25.3%，柚皮苷含量為23.7%,甘草酸含量3.9°/。，芍藥苷的含量為8.7%。其余同實(shí)施例1。實(shí)施例8.與實(shí)施例1基本相同，但總黃酮類(lèi)成分的含量為29.9%,總皂苷類(lèi)成分的含量為23.2%，柚皮苷含量為24.2%，甘草酸含量4.P/。，芍藥苷的含量為7.5%。其余同實(shí)施例1。實(shí)施例9，與實(shí)施例1基本相同，但總黃酮類(lèi)成分的含量為32.3%，總皂苷類(lèi)成分的含量為20.5%，柚皮苷含量為25.8%,甘草酸含量4.9%，芍藥苷的含量為7.2%。其余同實(shí)施例1。實(shí)施例10.與實(shí)施例1基本相同，但總黃酮類(lèi)成分的含量為35.7%，總皂苷類(lèi)成分的含量為17.1%，柚皮苷含量為26.6%,甘草酸含量5.5。/。，芍藥苷的含量為6.5%。其余同實(shí)施例1。實(shí)施例11.與實(shí)施例1基本相同，但總黃酮類(lèi)成分的含量為37.5%,總皂苷類(lèi)成分的含量為15.7%,柚皮苷含量為28.2%,甘草酸含量6.4%,芍藥苷的含量為6.3%。其余同實(shí)施例1。實(shí)施例12.與實(shí)施例1基本相同，但總黃酮類(lèi)成分的含量為38.1%,總皂苷類(lèi)成分的含量為15.5%，柚皮苷含量為29.7%,甘草酸含量7.1%,芍藥苷的含量為5.8%。其余同實(shí)施例1。實(shí)施例13.與實(shí)施例1基本相同，但總黃酮類(lèi)成分的含量為40.8%,總皂苷類(lèi)成分的含量為14.8%,柚皮苷含量為31.1%，甘草酸含量8.3V。，芍藥苷的含量為4.5%。其余同實(shí)施例1。實(shí)施例14.與實(shí)施例1基本相同，但總黃酮類(lèi)成分的含量為42.2°/。，總皂苷類(lèi)成分的含量為12.4%，柚皮苷含量為33.4%，甘草酸含量8.5%，芍藥苷的含量為3.2%。其余同實(shí)施例1。實(shí)施例15.與實(shí)施例1基本相同，但總黃酮類(lèi)成分的含量為44.2%,總皂苷類(lèi)成分的含量為11.6%,柚皮苷含量為35.4%,甘草酸含量7.1°/。，芍藥苷的含量為7.9%。此外還含有新橙皮苷，異柚皮苷，橙皮苷，芍藥內(nèi)酯苷和甘草苷。實(shí)施例16，與實(shí)施例2基本相同，但總黃酮類(lèi)成分的含量為46.5%,總皂苷類(lèi)成分的含量為10.5%,柚皮苷含量為27.4%,甘草酸含量3.3%，芍藥苷的含量為8.5%。此外還含有新橙皮苷，異柚皮苷，橙皮苷，芍藥內(nèi)酯苷和甘草苷。實(shí)施例17，膠嚢劑的制備本發(fā)明提取物10009，藥用淀粉10009,混合均勻，裝入l號(hào)膠囊，每粒0.29克，每次口月l2~3粒，每日2次。實(shí)施例18,片劑的制備本發(fā)明提取物1000g，藥用淀粉400g，糊精100g,混合均勻，用適量乙醇制粒，經(jīng)整粒機(jī)整粒，壓片，每片0.25g。實(shí)施例19,顆粒劑的制備本發(fā)明提取物100g,淀粉100g，糖粉1000g，混合均勻，用適量乙醇制粒，千燥、整粒、分裝即得。實(shí)施例20，注射劑的制備本發(fā)明提取物10g，丙二醇20ml，聚乙二醇一40050ml，注射用水300ml,混合，水浴加式A30分鐘，加苯甲醇50ml，再用注射用水加至1000ml,在超聲波中處玉里10分鐘，再水浴上加熱30分鐘，調(diào)PH值6.5~7.0，2ml，肌肉注射。實(shí)施例21，與實(shí)施例1基本相同甘草2kg、枳實(shí)2kg、白芍3kg。實(shí)施例22，與實(shí)施例1基本相同甘草2kg、枳實(shí)2kg、白芍2.1kg。實(shí)施例23，與實(shí)施例1基本相同甘草2kg、枳實(shí)2kg、白芍2.2kg。實(shí)施例24,與實(shí)施例1基本相同甘草2kg、枳實(shí)2kg、白芍2.32kg。實(shí)施例25，與實(shí)施例1基本相同甘草2kg、枳實(shí)2kg、白芍2.44kg。實(shí)施例26,與實(shí)施例l基本相同，但所述的原料藥t匕例為柴胡2kg、甘草2kg、枳實(shí)2kg、白芍2.59kg。23過(guò)濾澄明，灌l(xiāng)于，滅菌即得。每支，但所述的原料藥比例為柴胡2kg、,但所述的原料藥比例為柴胡2kg、，但所述的原料藥比例為柴胡2kg、,但所述的原料藥比例為柴胡2kg、，但所述的原料藥比例為柴胡2kg實(shí)施例27，與實(shí)施例l基本相同，但所述的原料藥比例為柴胡2kg、甘草2kg、枳實(shí)2kg、白芍2.7kg。實(shí)施例28，與實(shí)施例l基本相同，但所述的原料藥比例為柴胡2kg、甘草2kg、枳實(shí)2kg、白芍2.82kg。實(shí)施例29,與實(shí)施例l基本相同，但所述的原料藥比例為柴胡2kg、甘草2kg、枳實(shí)2kg、白芍2.95kg。實(shí)施例30，與實(shí)施例l基本相同，但所述的原料藥比例為柴胡2kg、甘草2kg、枳實(shí)2kg、白芍2.98kg。權(quán)利要求1、一種治療胃腸功能紊亂的組合物，該組合物的原料藥為柴胡、炙甘草、枳實(shí)和白芍，其特征在于，該組合物中的重量百分比組成中含有總黃酮類(lèi)24.5％～46.5％總皂苷類(lèi)10.5％～31.6％；該組合物中還含有柚皮苷17.0％～35.4％；甘草酸1.1％～8.5％；芍藥苷3.2％～13.7％。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的治療胃腸功能紊亂的組合物，該組合物的原料藥柴胡、炙甘草、枳實(shí)和白芍重量比例為6:6:6:6~9。3、根據(jù)權(quán)利要求1所述的治療胃腸功能紊亂的組合物，其特征在于，該組合物中還含有新橙皮苷、異柚皮苷，橙皮苷，芍藥內(nèi)酯苷和甘草苷。4、根據(jù)權(quán)利要求1或2或3所述的治療胃腸功能紊亂的組合物，其特征在于，所述的組合物是按照以下方法制備得到的組合物按6:6:6:69的重量比例稱(chēng)取柴胡、甘草、枳實(shí)、白芍，混合后的水煎液，濃縮，通過(guò)大孔吸附樹(shù)脂進(jìn)行吸附，待水煎液全部通過(guò)樹(shù)脂柱后，用水繼續(xù)沖洗樹(shù)脂至水洗液近無(wú)色止，然后再用重量比50~85%的乙醇洗脫，收集洗脫液，減壓回收乙醇至干，得到本組合物。5、根據(jù)權(quán)利要求4所述的治療胃腸功能紊亂的組合物，其特征在于，所述的組合物中還加有溶劑、崩解劑、矯味劑、防腐劑，和/或著色劑。6、一種權(quán)利要求1所述的治療胃腸功能紊亂的組合物的制備方法，其特征在于，步驟如下(1)、按6:6:6:69的重量比例稱(chēng)取柴胡、甘草、枳實(shí)、白芍；(2)、原料藥混合后加水煎煮；(3)、合并水煎液，濃縮；(4)、通過(guò)大孔吸附樹(shù)脂進(jìn)行吸附；(5)、待水煎液全部通過(guò)樹(shù)脂柱后，用水繼續(xù)沖洗樹(shù)脂至水洗液近無(wú)色止；(6)、然后再用重量比50~85%乙醇洗脫樹(shù)脂柱，收集乙醇洗脫液，減壓回收溶劑至干，即得到本組合物。7、根據(jù)權(quán)利要求6所述的治療胃腸功能紊亂的組合物的制備方法，其特征在于，所述第(2)步驟的"加水煎煮"，是指每次加原料藥IO倍重量的水，水煎煮2次，每次煎煮1.5小時(shí)；所述第(3)步驟水煎液的濃縮是指濃縮至每毫升含0.2g生藥；第(4)步驟中所使用大孔吸附樹(shù)脂是D101大孔樹(shù)脂，或非極性或弱極性大孔樹(shù)脂，或中極性大孔樹(shù)脂。8、根據(jù)權(quán)利要求7所述的治療胃腸功能紊亂的組合物的制備方法，其特征在于，第(6)步驟中所述的洗脫步驟為是先用50~60%乙醇進(jìn)行洗脫后，再采用60~85%乙醇進(jìn)行洗脫；所用的乙醇總量為樹(shù)脂體積的6~84咅。9、權(quán)利要求1所述的治療胃腸功能紊亂的組合物在制備治療胃腸功能紊亂或抗腸易激綜合癥藥物中的應(yīng)用。10、權(quán)利要求9所述的治療胃腸功能紊亂的組合物在制備治療胃腸功能紊亂或抗腸易激綜合癥藥物中的應(yīng)用，其特征在于，所述的劑型為口刀良制劑或非腸道給藥的劑型。全文摘要治療胃腸功能紊亂的組合物、其制備方法及其在制備治療胃腸功能紊亂藥物中的應(yīng)用。組合物的原料藥為6∶6∶6∶6～9重量比例的柴胡、炙甘草、枳實(shí)和白芍，該組合物中的重量百分比組成中含有總黃酮類(lèi)24.5％～46.5％；總皂苷類(lèi)10.5％～31.6％，特征是組合物中還含有柚皮苷17.0％～35.4％；甘草酸1.1％～8.5％；芍藥苷3.2％～13.7％。制備方法原料藥的水煎液濃縮，大孔吸附樹(shù)脂吸附，水煎液全部通過(guò)樹(shù)脂柱后，繼續(xù)沖洗至近無(wú)色，再用重量比50～85％乙醇洗脫，收集洗脫液，減壓回收溶劑至干，得到本組合物。本發(fā)明提取物治療胃腸功能紊亂總有效率顯著高于湯劑和西藥。文檔編號(hào)A61K36/752GK101623366SQ20091018326公開(kāi)日2010年1月13日申請(qǐng)日期2009年7月18日優(yōu)先權(quán)日2009年7月18日發(fā)明者吳劍波,楊星昊,升郭申請(qǐng)人:南京師范大學(xué)