專利名稱：扇貝內(nèi)臟活性成分的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種方法，特別是海產(chǎn)品加工廢棄物的綜合利用的方法。
背景技術(shù)：
扇貝味道鮮美、營養(yǎng)豐富，富含鈣、磷、鋅、硒等微量元素和人體必需的氨基酸。目前對扇貝肉的加工利用報道很多，但其加工的大量廢棄物扇貝內(nèi)臟卻往往被人忽視。研究表明扇貝內(nèi)臟中不僅含有豐富的不飽和脂肪酸還含有豐富的多糖物質(zhì)，但一直未被重視和研究。
中國專利申請200510047410(CN1749281A)中公開了蝦夷扇貝多糖的提取工藝，其中原料是蝦夷扇貝去殼的全部肉體組織(包括扇貝柱、腮、性腺、內(nèi)臟、裙邊等)，也可以是扇貝柱、“下腳料”(腮、性腺、內(nèi)臟、裙邊等的全部或部分)或扇貝柱和部分“下腳料”。雖然該工藝可以提取扇貝內(nèi)臟中的多糖，但是，提取的結(jié)果存在多糖收率低、純度不好等缺點(diǎn)，另外，內(nèi)臟中的脂肪也白白浪費(fèi)。
研究表明扇貝內(nèi)臟脂肪中含有豐富的脂肪酸，其中多不飽和脂肪酸EPA含量較高，作為生物體的調(diào)節(jié)因子，EPA具有降低血小板凝集的作用，對腦血栓和動脈硬化也有防治效果。
關(guān)于扇貝養(yǎng)殖技術(shù)方面的研究及報道很多，但有關(guān)其營養(yǎng)價值方面的研究及報道甚少。特別是關(guān)于利用超臨界技術(shù)提取扇貝內(nèi)臟脂肪以及充分利用脫脂后的扇貝內(nèi)臟再提取多糖的方法尚未見報道。
為了克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明人意外地發(fā)現(xiàn)，在提取扇貝內(nèi)臟多糖前用超臨界萃取方法，萃取扇貝內(nèi)臟的脂肪，不但提高了多糖的產(chǎn)率和純度，而且所提取的脂肪本身就是非常好的營養(yǎng)品，還可以用來進(jìn)一步提取多不飽和脂肪酸。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明是以扇貝內(nèi)臟為原料，采用現(xiàn)代生物技術(shù)和食品高新技術(shù)萃取扇貝內(nèi)臟脂肪并充分利用脫脂后的原料提取多糖的方法。
具體地講，本發(fā)明涉及一種扇貝內(nèi)臟活性成分的制備方法，其特征在于包括原料干燥、粉碎、超臨界萃取脂肪、酶解、醇沉、干燥、純化等步驟，其中所述活性成分是扇貝內(nèi)臟的多糖和脂肪。
一、扇貝內(nèi)臟脂肪的超臨界萃取1、原料及處理取新鮮扇貝內(nèi)臟在冷凍干燥機(jī)中保持物料溫度在40℃以下，真空凍干3000min，使物料含水量達(dá)到4％以下。之后用粉碎機(jī)粉碎至20目。
2、扇貝脂肪的萃取方法萃取工藝流程裝料---控制萃取溫度---控制萃取壓力---控制CO2流量---萃取---控制分離溫度與壓力---分離具體實(shí)施方法打開超臨界萃取設(shè)備，設(shè)定萃取溫度為30～70℃等待其升溫，并同時往萃取釜中加入約占萃取釜體積1/3的物料。待萃取溫度達(dá)到設(shè)定值以后，控制萃取壓力為20～40Mpa、CO2流量為10～40L/h，超臨界萃取扇貝內(nèi)臟脂肪，萃取45～120min后，在分離溫度為30～40℃和分離壓力為6～10Mpa的條件下分離出脂肪，并收集。
二、萃取脂肪后的扇貝內(nèi)臟提取多糖的方法萃取脂肪后的扇貝內(nèi)臟提取多糖的方法可以按照CN1749281A中公開了蝦夷扇貝多糖的提取工藝進(jìn)行。
也可以按照如下方法進(jìn)行將萃取脂肪后的扇貝內(nèi)臟從萃取釜中取出，加入10～60倍體積的pH值為6～8的緩沖溶液，并加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1％～1％的酶活力為90～100萬單位/克的木瓜蛋白酶，于50～80℃水域中酶解1～8個小時。之后迅速升溫至90℃滅酶。在4000n/min的條件下高速離心10min，得到的沉淀物為不溶水解物。向離心所得母液緩緩加入2～6倍體積的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為95％的乙醇，此時不斷攪拌，并于10℃以下溫度過夜。之后離心，所得上清液可進(jìn)行減壓蒸餾，不僅可回收乙醇，還能獲得扇貝內(nèi)臟水解產(chǎn)物，收集離心的沉淀物，于40～70℃干燥或真空干燥，得到的產(chǎn)物即為扇貝內(nèi)臟多糖粗品。將多糖溶解在10～50倍質(zhì)量的水里，離心除去不溶物，在上清液中加入固體K2CO3，使其在溶液中濃度為0.5～4mol/L，10℃以下冷藏過夜。10℃以下收集沉淀。再用5～25倍質(zhì)量的水將其溶解，用堿溶液調(diào)pH至9～11，保持45～55℃滴加H2O2脫色至多糖水解液呈淺黃色為終點(diǎn)。冷卻后離心除去不溶物，清液冷卻至4℃以下，用酸調(diào)pH至1.5～2.5，離心除沉淀，清液中加入固體K2CO3，使其在溶液中濃度達(dá)0.5～4mol/L，冷藏過夜，10℃以下收集沉淀，用乙醇洗滌，丙酮脫水，干燥，即得扇貝內(nèi)臟多糖純品。
本發(fā)明具有如下優(yōu)點(diǎn)1.本發(fā)明用超臨界的方法提取扇貝內(nèi)臟脂肪并用脫脂后的扇貝內(nèi)臟提取多糖，變廢為寶，使扇貝內(nèi)臟得到了充分的利用。
2.本發(fā)明采用超臨界萃取的方法提取扇貝內(nèi)臟脂肪，比索氏提取法提高了9％的得率。
3.本發(fā)明采用超臨界的方法萃取脂肪，排除了遇氧氧化和見光反應(yīng)的可能性，使脂肪能夠保持其自然風(fēng)味。
具體實(shí)施例方式
例1取新鮮扇貝內(nèi)臟在冷凍干燥機(jī)中保持物料溫度在40℃以下，真空凍干3000min，使物料含水量達(dá)到4％以下。之后用粉碎機(jī)粉碎至20目。打開超臨界萃取設(shè)備，設(shè)定萃取溫度為40℃等待其升溫，并同時往萃取釜中加入30g物料。待萃取溫度達(dá)到設(shè)定值以后，控制萃取壓力為25Mpa、CO2流量為20L/h，超臨界萃取扇貝內(nèi)臟脂肪，萃取60min以后，在分離溫度為30℃和分離壓力為7Mpa的條件下分離出脂肪并收集。將脫脂后的扇貝內(nèi)臟從萃取釜中取出，并加入20倍體積的pH值為7的緩沖溶液，再加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1％的木瓜蛋白酶，在60℃水浴中酶解1個小時。之后迅速升溫至90℃滅酶。在4000n/min的條件下高速離心10min，得到的沉淀物為不溶水解物。向離心所得母液緩緩加入3倍體積的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為95％的乙醇，此時不斷攪拌，并于10℃以下溫度過夜。之后離心，所得上清液可進(jìn)行減壓蒸餾，不僅可回收乙醇，還能獲得扇貝內(nèi)臟水解產(chǎn)物，收集離心的沉淀物，并依次用90％的乙醇洗滌、丙酮脫水，于50℃干燥，得到的產(chǎn)物即為扇貝內(nèi)臟多糖粗品。將粗多糖溶解在10倍質(zhì)量的水里，離心除去不溶物，在上清液中加入固體K2CO3，使其在溶液中濃度為0.5mol/L，10℃以下冷藏過夜。10℃以下收集沉淀。再用5倍質(zhì)量的水將其溶解，用堿溶液調(diào)pH至9，保持45℃滴加H2O2脫色至多糖水解液呈淺黃色為終點(diǎn)。冷卻后離心除去不溶物，清液冷卻至4℃以下，用酸調(diào)pH至1.5，離心除沉淀，清液中加入固體K2CO3，使其在溶液中濃度達(dá)0.5mol/L，冷藏過夜，10℃以下收集沉淀，用乙醇洗滌，丙酮脫水，干燥。即得扇貝內(nèi)臟多糖純品。
例2取新鮮扇貝內(nèi)臟在冷凍干燥機(jī)中保持物料溫度在40℃以下，真空凍干3000min，使物料含水量達(dá)到4％以下。之后用粉碎機(jī)粉碎至20目。打開超臨界萃取設(shè)備，設(shè)定萃取溫度為50℃等待其升溫，并同時往萃取釜中加入35g物料。待萃取溫度達(dá)到設(shè)定值以后，控制萃取壓力為30Mpa、CO2流量為25L/h，超臨界萃取扇貝內(nèi)臟脂肪，萃取60min以后，在分離溫度為35℃和分離壓力為8Mpa的條件下分離出脂肪并收集。將脫脂后的扇貝內(nèi)臟從萃取釜中取出，并加入30倍體積的pH值為8的緩沖溶液，再加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.5％的木瓜蛋白酶，在60℃水浴中酶解2個小時。之后迅速升溫至90℃滅酶。在4000n/min的條件下高速離心10min，得到的沉淀物為不溶水解物。向離心所得母液緩緩加入3倍體積的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為95％的乙醇，此時不斷攪拌，并于10℃以下溫度過夜。之后離心，所得上清液可進(jìn)行減壓蒸餾，不僅可回收乙醇，還能獲得扇貝內(nèi)臟水解產(chǎn)物，收集離心的沉淀物，并依次用90％的乙醇洗滌、丙酮脫水，于50℃干燥，得到的產(chǎn)物即為扇貝內(nèi)臟多糖粗品。將粗多糖溶解在20倍質(zhì)量的水里，離心除去不溶物，在上清液中加入固體K2CO3，使其在溶液中濃度為0.5mol/L，10℃以下冷藏過夜。10℃以下收集沉淀。再用10倍質(zhì)量的水將其溶解，用堿溶液調(diào)pH至9，保持45℃滴加H2O2脫色至多糖水解液呈淺黃色為終點(diǎn)。冷卻后離心除去不溶物，清液冷卻至4℃以下，用酸調(diào)pH至1.5，離心除沉淀，清液中加入固體K2CO3，使其在溶液中濃度達(dá)0.5mol/L，冷藏過夜，10℃以下收集沉淀，用乙醇洗滌，丙酮脫水，干燥。即得扇貝內(nèi)臟多糖純品。
例3取新鮮扇貝內(nèi)臟在冷凍干燥機(jī)中保持物料溫度在40℃以下，真空凍干3000min，使物料含水量達(dá)到4％以下。之后用粉碎機(jī)粉碎至20目。打開超臨界萃取設(shè)備，設(shè)定萃取溫度為55℃并等待其升溫，并同時往萃取釜中加入30g物料。待萃取溫度達(dá)到設(shè)定值以后，控制萃取壓力為35Mpa、CO2流量為30L/h，超臨界萃取扇貝內(nèi)臟脂肪，萃取60min以后，在分離溫度為35℃和分離壓力為9Mpa的條件下分離出脂肪并收集。將脫脂后的扇貝內(nèi)臟從萃取釜中取出，并加入30倍體積的pH值為8的緩沖溶液，再加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為O.3％的木瓜蛋白酶，在60℃水域中酶解2個小時。之后迅速升溫至90℃滅酶。在4000n/min的條件下高速離心10min，得到的沉淀物為不溶水解物。向離心所得母液緩緩加入4倍體積的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為95％的乙醇，此時不斷攪拌，并于10℃以下溫度過夜。之后離心，所得上清液可進(jìn)行減壓蒸餾，不僅可回收乙醇，還能獲得扇貝內(nèi)臟水解產(chǎn)物，收集離心的沉淀物，并依次用90％的乙醇洗滌、丙酮脫水，于50℃干燥，得到的產(chǎn)物即為扇貝內(nèi)臟多糖粗品。將粗多糖溶解在40倍質(zhì)量的水里，離心除去不溶物，在上清液中加入固體K2CO3，使其在溶液中濃度為0.5mol/L，10℃以下冷藏過夜。10℃以下收集沉淀。再用20倍質(zhì)量的水將其溶解，用堿溶液調(diào)pH至9，保持45℃滴加H2O2脫色至多糖水解液呈淺黃色為終點(diǎn)。冷卻后離心除去不溶物，清液冷卻至4℃以下，用酸調(diào)pH至1.5，離心除沉淀，清液中加入固體K2CO3，使其在溶液中濃度達(dá)0.5mol/L，冷藏過夜，10℃以下收集沉淀，用乙醇洗滌，丙酮脫水，干燥。即得扇貝內(nèi)臟多糖純品。
權(quán)利要求
1.一種扇貝內(nèi)臟活性成分的制備方法，其特征在于包括原料干燥、粉碎、超臨界萃取脂肪、酶解、醇沉、干燥、純化步驟，其中所述活性成分是扇貝內(nèi)臟脂肪或多糖。
2.如權(quán)利要求1所述的扇貝內(nèi)臟活性成分的制備方法，其特征在于所述原料干燥步驟包括將扇貝內(nèi)臟放入冷凍干燥機(jī)中保持物料溫度在40℃以下，真空凍干3000min，使物料含水量達(dá)到4％以下。
3.如權(quán)利要求1或2所述的扇貝內(nèi)臟活性成分的制備方法，其特征在于所述粉碎步驟包括將原料用粉碎機(jī)粉碎至20目以下。
4.如權(quán)利要求3所述的扇貝內(nèi)臟活性成分的制備方法，其特征在于所述萃取脂肪步驟包括控制萃取溫度為30～70℃、萃取壓力為20～40Mpa、CO2流量為10～40L/h的條件下用超臨界CO2萃取設(shè)備萃取蝦夷扇貝內(nèi)臟脂肪45～120min，之后在分離溫度為30～40℃和分離壓力為6～10Mpa的條件下分離出脂肪，并收集。
5.如權(quán)利要求1至4任一項(xiàng)所述的扇貝內(nèi)臟活性成分的制備方法，其特征在于所述酶解步驟包括將經(jīng)超臨界萃取脂肪后的扇貝內(nèi)臟，加入10～60倍體積的pH值為6～8的緩沖溶液，再加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1％～1％的酶活力為90～100萬單位/克的木瓜蛋白酶，在50～80℃水浴中加熱1～8小時，滅酶后再將酶解液離心除雜。
6.如權(quán)利要求1至5任一項(xiàng)所述的扇貝內(nèi)臟活性成分的制備方法，其特征在于所述醇沉步驟包括將除雜后的酶解液加入2～6倍體積的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為95％的乙醇醇沉。
7.如權(quán)利要求1-6任一項(xiàng)所述的蝦夷扇貝內(nèi)臟多糖提取工藝，其特征在于所述干燥步驟包括將醇沉出的粗多糖于40～70℃干燥或真空干燥。
8.如權(quán)利要求1-7任一項(xiàng)所述的扇貝內(nèi)臟活性成分的制備方法，其特征在于所述純化工藝包括將粗多糖溶解在10～50倍質(zhì)量的水里，離心除去不溶物，在上清液中加入固體K2CO3，使其在溶液中濃度為0.5～4mol/L，10℃以下冷藏過夜，10℃以下收集沉淀，再用5～25倍質(zhì)量的水將其溶解，用堿溶液調(diào)pH至9～11，保持45～55℃滴加H2O2脫色至多糖水解液呈淺黃色為終點(diǎn)，冷卻后離心除去不溶物，清液冷卻至4℃以下，用酸調(diào)pH至1.5～2.5，離心除沉淀，清液中加入固體K2CO3，使其在溶液中濃度達(dá)0.5～4mol/L，冷藏過夜，10℃以下收集沉淀，用乙醇洗滌，丙酮脫水，干燥。
9.權(quán)利要求4或8所述方法制得的產(chǎn)品。
全文摘要
一種扇貝內(nèi)臟活性成分的制備方法，其實(shí)施部分包括原料處理，裝料、控制萃取溫度、壓力以及CO
文檔編號C08B37/00GK1827755SQ20061007308
公開日2006年9月6日 申請日期2006年4月13日 優(yōu)先權(quán)日2006年4月13日
發(fā)明者朱蓓薇, 董秀萍, 馬媛, 楊靜峰, 王璐, 朱莉莉 申請人:大連輕工業(yè)學(xué)院