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技術(shù)編號：12712712

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本發(fā)明涉及DNA的體外重組技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種大分子DNA的無縫分步組裝連接的方法。背景技術(shù)通過DNA體外重組技術(shù)合成大分子DNA片段在基因功能研究上的需求越來越多。大片段合成的一個最基本的要求就是將多個小的DNA片段按照一定的方向和精確的堿基順序組裝在一起形成較大的DNA分子。傳統(tǒng)的方法依賴于限制性內(nèi)切酶的酶切和DNA連接酶的連接。在載體構(gòu)建中，這種方法一般適用于小于3kb的DNA片段的插入，一旦插入的DNA分子過大，常常會導(dǎo)致沒有合適的酶切位點用來連接插入片段和載體，如果用稀有酶切位點來分...
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