一種旋輪蟲的培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法
【技術領域】
[0001 ]本發(fā)明涉及一種用于污水生物處理的旋輪蟲的培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法。
【背景技術】
[0002]旋輪蟲是一種營附著生活、以游離的細菌、藻類等顆粒為食的輪蟲。在污水生物處理系統(tǒng)中旋輪蟲是一種常見的有益生物，對減少污水中的懸浮固體、提高處理水的澄清度有很大貢獻。因此，在污水生物處理系統(tǒng)中可以通過投加人工培養(yǎng)的旋輪蟲來提高污水生物處理性能。
[0003]為了有效地促進輪蟲的生長，可以在培養(yǎng)過程中添加活性物質或營養(yǎng)物質。例如:在宿輪蟲培養(yǎng)液中添加一定量的蜂蜜殘渣，可增加宿輪蟲的壽命和生育力(國家發(fā)明專利200810203971.0)，此方法效果好，但需要有充分的蜂蜜殘渣來源并對蜂蜜殘渣進行適當?shù)奶幚?在培養(yǎng)褶皺臂尾輪蟲中，添加富含PUFA的魚油，可增強褶皺臂尾輪蟲的存活率(上海海洋大學學報，2009年18卷第五期)，但魚油費用較高，培養(yǎng)成本增大;在微綠球藻中添加甲基睪丸酮10~30yg/L，可提高淡水輪蟲的快速便捷生產(chǎn)(國家發(fā)明專利201110315587.1)，不過甲基睪丸酮作為一種激素，使用不當會產(chǎn)生二次污染且成本較高。
[0004]螺旋藻中富含維生素、氨基酸、礦物元素等營養(yǎng)物質常用作為培養(yǎng)浮游型輪蟲的餌料。但旋輪蟲是一種營附著生長的附著型輪蟲，與浮游型輪蟲相比，所攝食的顆粒物粒徑通常較小，在0.2?3μηι間；而螺旋藻細胞體長200?500μηι，寬5?ΙΟμ??，遠遠大于旋輪蟲可攝食的粒徑范圍。因此，螺旋藻若未經(jīng)粉碎處理將因其粒徑過大而難以被旋輪蟲所攝食。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的在于提供一種配制方法簡便、費用低且營養(yǎng)豐富的旋輪蟲培養(yǎng)基，以及可操作性強、能夠高效地實現(xiàn)旋輪蟲大量培養(yǎng)的方法。
[0006]本發(fā)明的目的之二在于提供使用該培養(yǎng)基進行旋輪蟲大量培養(yǎng)的方法。
[0007]為達到上述目的，本發(fā)明采用如下技術方案:
一種旋輪蟲培養(yǎng)基，其特征在于該培養(yǎng)基由無機鹽培養(yǎng)液、餌料及營養(yǎng)強化劑組成，每10ml無機鹽培養(yǎng)液中添加3?5mL的餌料和0.5?1.5mL的營養(yǎng)強化劑;所述的餌料為螺旋藻餌料;所述的營養(yǎng)強化劑為牛奶。
[0008]上述的無機鹽培養(yǎng)液為每100ml水中含NaHCO30.096g、CaC03 0.06g,MgS04.7H200.06g以及KCl 0.004go
[0009]上述的螺旋藻餌料是將螺旋藻進行超聲波粉碎處理，處理條件為功率600?900W、粉碎時間20?30min，再將經(jīng)粉碎后的螺旋藻懸濁液沉降5?1min后棄去沉淀物、取上部液體然后采用離心法濃縮處理，所得沉積物即為螺旋藻餌料。
[0010]上述的牛奶為市售食品牛奶。
[0011]—種旋輪蟲的培養(yǎng)方法，采用上述的旋輪蟲培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，其特征在于該培養(yǎng)方法為:將旋輪蟲接種于旋輪蟲培養(yǎng)基，使旋輪蟲的初始密度為10?200ind/mL;在25?30°C中靜置培養(yǎng)3~5天，然后再置于溫度為28?32°C、轉速為10?20r/min的條件下振蕩培養(yǎng)5?10天，使旋輪蟲的密度達到2000?3500ind/ml。
[0012]本發(fā)明提供的旋輪蟲培養(yǎng)基的成分簡單、配制方法簡易，旋輪蟲培養(yǎng)基中作為旋輪蟲餌料的粒徑大小符合旋輪蟲的攝食范圍，可提高餌料的利用率，作為營養(yǎng)強化劑的使用牛奶來源廣泛、富含可促進旋輪蟲生長的EPA、DHA和ARA等高不飽和脂肪酸(HUFAs)等物質。本發(fā)明提供的旋輪蟲培養(yǎng)方法為旋輪蟲提供了適宜的生長的環(huán)境，縮短了培養(yǎng)周期，并能實現(xiàn)旋輪蟲的大量培養(yǎng)。
[0013]采用本發(fā)明大量培養(yǎng)的旋輪蟲可被投入污水生物處理反應器中以提高污水生物處理性能。
【附圖說明】
[0014]圖1為不同的培養(yǎng)基下旋輪蟲的種群密度比較圖。
【具體實施方式】
[0015]下面結合具體實施例對本發(fā)明進行進一步的描述。
[0016]1.材料準備
(1)旋輪蟲:實驗所用旋輪蟲分離自上海市某污水廠的活性污泥
(2)無機鹽培養(yǎng)液:NaHC030.096g、CaC03 0.06g^MgSO4.7H20 0.06g、KCl 0.004g及去自來水100mL，煮沸并滅菌。
[0017](3)餌料:選取處于對數(shù)增長期的螺旋藻，采用超聲波細胞粉碎機對螺旋藻進行粉碎處理，超聲波處理條件為功率800W、粉碎時間30min，將超聲波處理過的螺旋藻懸濁液沉降1min后棄去沉淀物、取上部液體并進行離心處理，棄去離心管中的上清液后的殘留物即為螺旋藻餌料。
[0018](4)營養(yǎng)強化劑:市售牛奶。
[0019]2.儀器和設備
CHA-S氣浴恒溫振蕩器(江蘇金壇市江南儀器廠)；
QHX-300BS-m型人工氣候箱(上海新苗醫(yī)療器械制造有限公司)；
SYQ-DSX-280B手提式不銹鋼壓力蒸汽滅菌鍋(上海申安醫(yī)療器械廠)；
JY92-1 IN型超聲波細胞破碎機(寧波新芝生物科技股份有限公司)；
37XB型倒置生物顯微鏡(上海光學儀器五廠)；
5804R型高速冷凍離心機(上海飛鴿儀器有限公司)
AL204型分析天平(梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司)；
移液器(范圍100?100mL，20~200mL，0.5?1mL)(加拿大BBI公司)；
78HW-1恒溫磁力攪拌器(江蘇省金壇市江南儀器廠)
3.培養(yǎng)效果評價
設置A、B、C、D四個實驗組，每組設三個平行。A組(對照組)培養(yǎng)基只含有10ml的無機鹽培養(yǎng)液;B組培養(yǎng)基在無機鹽培養(yǎng)液的基礎上添加5mL未粉碎的螺旋藻餌料;C組培養(yǎng)基在無機鹽培養(yǎng)液的基礎上添加5mL粉碎后的螺旋藻餌料;D組培養(yǎng)基在無機鹽培養(yǎng)液的基礎上添加5mL粉碎后的螺旋藻餌料和ImL營養(yǎng)強化劑牛奶。
[0020]A、B、C、D四個實驗組的培養(yǎng)方法均采用如下的培養(yǎng)步驟:用200yL移液槍隨機從續(xù)代培養(yǎng)且經(jīng)過去離子水清洗過的旋輪蟲中，吸取1000個旋輪蟲移入含有培養(yǎng)基的錐形瓶中，使旋輪蟲的初始密度達10ind/mL;將四個實驗組接種有旋輪蟲的錐形瓶均置于同一的恒溫光照培養(yǎng)箱中30 °C下培養(yǎng)5天，再置于轉速為20r/min的恒溫震蕩箱中30 °C下培養(yǎng)1天。培養(yǎng)過程中，每24小時在顯微鏡下觀察各組旋輪蟲的生長狀況并對活的旋輪蟲進行計數(shù)。
[0021]圖1顯示了A、B、C、D四個實驗組中經(jīng)過5天靜置培養(yǎng)和10天振蕩培養(yǎng)后的旋輪蟲的種群密度。由圖可知，本實施例中實驗組D的旋輪蟲的種群密度均高于其他A、B、C實驗組，顯示了采用粉碎后的螺旋藻做餌料和牛奶作為營養(yǎng)強化劑均能有效地促進旋輪蟲生長。
【主權項】
1.一種旋輪蟲培養(yǎng)基，其特征在于該培養(yǎng)基由無機鹽培養(yǎng)液、餌料及營養(yǎng)強化劑組成，每10ml無機鹽培養(yǎng)液中添加3~5mL的餌料和0.5?1.5mL的營養(yǎng)強化劑;所述的餌料為螺旋藻餌料;所述的營養(yǎng)強化劑為牛奶。2.根據(jù)權利要求1所述的旋輪蟲培養(yǎng)基，其特征在于所述的無機鹽培養(yǎng)液為每100ml水中含NaHCO3 0.096g、CaCO3 0.06g^MgSO4.7H20 0.06g以及KCl 0.004g。3.根據(jù)權利要求1所述的旋輪蟲培養(yǎng)基，其特征在于所述的螺旋藻餌料是將螺旋藻進行超聲波粉碎處理，處理條件為功率600?900W、粉碎時間20~30min，再將經(jīng)粉碎后的螺旋藻懸濁液沉降5?1min后棄去沉淀物、取上部液體然后采用離心法濃縮處理，所得沉積物即為螺旋藻餌料。4.根據(jù)權利要求1所述的旋輪蟲培養(yǎng)基，其特征在于所述的牛奶為市售食品牛奶。5.—種旋輪蟲的培養(yǎng)方法，采用根據(jù)權利要求1所述的旋輪蟲培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，其特征在于該培養(yǎng)方法為:將旋輪蟲接種于旋輪蟲培養(yǎng)基，使旋輪蟲的初始密度為10?200ind/mL;在25?30°C中靜置培養(yǎng)3~5天，然后再置于溫度為28?32°C、轉速為10?20r/min的條件下振蕩培養(yǎng)5?10天，使旋輪蟲的密度達到2000?3500ind/ml。
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種旋輪蟲培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法，該培養(yǎng)基由無機鹽培養(yǎng)液、餌料及營養(yǎng)強化劑組成，每100ml無機鹽培養(yǎng)液中添加3~5mL的餌料和0.5~1.5mL的營養(yǎng)強化劑；所述的餌料為螺旋藻餌料；所述的營養(yǎng)強化劑為牛奶。本發(fā)明所述的螺旋藻經(jīng)超聲波粉碎后的粒徑大小適于旋輪蟲攝食，可提高餌料的利用率；所述旋輪蟲營養(yǎng)強化劑為牛奶，可為旋輪蟲提供生長所必需的營養(yǎng)物質和促進旋輪蟲的生長的生物活性物質，使旋輪蟲的密度達到2000~3500ind/ml。本發(fā)明具有操作簡便、費用省、效果好的特點。
【IPC分類】A01K67/033
【公開號】CN105638581
【申請?zhí)枴?br>【發(fā)明人】林瑋, 丁國際, 胡夢楠, 崔海濤, 黃攀攀
【申請人】上海大學
【公開日】2016年6月8日
【申請日】2016年3月3日