專(zhuān)利名稱(chēng)：同時(shí)測(cè)定雞肝中磺胺類(lèi)、喹諾酮類(lèi)、苯并咪唑類(lèi)藥物及其代謝物殘留的分析方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種QuEChERS-UPLC-MS/MS同時(shí)測(cè)定雞肝中磺胺類(lèi)、喹諾酮類(lèi)、苯并 咪唑類(lèi)藥物及其代謝物殘留的分析方法。
背景技術(shù)：
磺胺類(lèi)(Sulifonamides，SAs)和喹諾酮類(lèi)(quinolones，QNs)藥物為廣譜抑菌 藥，因其具有抗菌譜廣、高效、低毒、價(jià)格低廉等特點(diǎn)，在畜牧、水產(chǎn)等養(yǎng)殖生產(chǎn)中廣泛使用。 但過(guò)量使用有可能在人體內(nèi)蓄積，蓄積濃度超過(guò)一定值時(shí)對(duì)人體有害，并導(dǎo)致病原體產(chǎn)生 耐藥性。特別是磺胺二甲基嘧啶等磺胺類(lèi)藥物可能導(dǎo)致致癌、致畸、致突變；奈啶酸已經(jīng) 被證實(shí)有干擾繁殖系統(tǒng)，影響光敏感性、致癌和致突變作用等。因此，國(guó)際食品法典委員會(huì) (CAC)、美國(guó)、歐盟、日本及我國(guó)都規(guī)定，食品中磺胺類(lèi)藥物總量以及磺胺二甲基嘧啶等單個(gè) 磺胺的最大殘留限量(MRLs)為100μ g/kg ；根據(jù)不同品種、組織和藥物種類(lèi)，食品中喹諾酮 藥物的最大殘留限量(MRLs)為10 6000 μ g/kg。苯并咪唑(Benzimidazoles，BMZs)是一類(lèi)在農(nóng)業(yè)和水產(chǎn)養(yǎng)殖中廣泛使用的獸藥， 主要用于防治寄生蟲(chóng)感染。有些苯并咪唑可用作采前和采后殺菌劑，用于控制田間作物、貯 藏水果和蔬菜的真菌感染。研究表明苯并咪唑類(lèi)藥物在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中顯示致畸與致突變作 用，因此中國(guó)、美國(guó)、歐盟、日本等國(guó)家或地區(qū)將苯并咪唑類(lèi)藥物列入限制使用的藥物和動(dòng) 物源性食品殘留檢測(cè)的監(jiān)控對(duì)象，并制訂了最大殘留限量(MRLs)。苯并咪唑類(lèi)藥物在肝臟 中最大殘留限量(MRLs)為50 1000 μ g/kg。測(cè)定磺胺類(lèi)藥物、喹諾酮類(lèi)藥物及苯并咪唑類(lèi)藥物及其代謝物的檢測(cè)方法主要有 液相色譜法(HPLC)和液相色譜法-質(zhì)譜/質(zhì)譜法(HPLC-MS/MQ。HPLC的靈敏度較低且無(wú) 法提供結(jié)構(gòu)信息，一般常作為篩選方法，HPLC-MS/MS靈敏度高，選擇性和特異性好，抗干擾 能力強(qiáng)，能夠?qū)Φ蜐舛鹊臉悠愤M(jìn)行很好的定性確認(rèn)，是目前較為先進(jìn)和常用的動(dòng)物源性食 品中藥物殘留檢測(cè)方法。同時(shí)測(cè)定雞肝中磺胺類(lèi)藥物、喹諾酮類(lèi)藥物及苯并咪唑類(lèi)藥物及 其代謝物殘留的的檢測(cè)方法未見(jiàn)報(bào)道。2003年，美國(guó)農(nóng)業(yè)部農(nóng)業(yè)研究服務(wù)中心的Anastassiades等開(kāi)發(fā)了一種快速 (Quick)、簡(jiǎn)單 asy)、廉價(jià)(Cheap)、高效(Effective)、耐用(Rugged)、安全(Safe)的樣 品前處理方法(簡(jiǎn)稱(chēng)QuChERQ，已被許多國(guó)家和美國(guó)公職分析化學(xué)家協(xié)會(huì)等多個(gè)國(guó)際農(nóng)藥 殘留分析機(jī)構(gòu)廣泛采納。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種同時(shí)測(cè)定雞肝中磺胺類(lèi)、喹諾酮類(lèi)、苯并 咪唑類(lèi)藥物及其代謝物殘留的分析方法。本發(fā)明技術(shù)方案如下一種同時(shí)測(cè)定雞肝中磺胺類(lèi)、喹諾酮類(lèi)、苯并咪唑類(lèi)藥物及其代謝物殘留的分析方法，待測(cè)樣品用乙酸-乙腈溶液提取，NH2吸附劑凈化，正己烷脫脂；然后用Kromasil Eternity C-18色譜柱分離，以0. 1 %甲酸和甲醇作為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫，電噴霧正離子 模式電離，多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式檢測(cè)，內(nèi)標(biāo)法定量。所述的分析方法，所述色譜柱的色譜條件為Kromasil Eternity C-18色譜柱為 10(toimX2. 1 讓?zhuān)?. 5μπι ；柱溫:35°C;樣品室溫度7°C;進(jìn)樣量5μ L ；流速為 0. 25mL/min ；流 動(dòng)相A :0. 甲酸；流動(dòng)相B 甲醇；磺胺類(lèi)藥物和苯并咪唑類(lèi)藥物梯度洗脫程序見(jiàn)表1，喹 諾酮藥物梯度洗脫程序見(jiàn)表2。表1磺胺類(lèi)藥物和苯并咪唑類(lèi)藥物梯度洗脫程序
權(quán)利要求
1.一種同時(shí)測(cè)定雞肝中磺胺類(lèi)、喹諾酮類(lèi)、苯并咪唑類(lèi)藥物及其代謝物殘留的分析方 法，其特征在于，待測(cè)樣品用乙酸-乙腈溶液提取，NH2吸附劑凈化，正己烷脫脂；然后用 Kromasil Eternity C-18色譜柱分離，以0. 1 %甲酸和甲醇作為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫，電噴 霧正離子模式電離，多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式檢測(cè)，內(nèi)標(biāo)法定量。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的分析方法，其特征在于，所述色譜柱的色譜條件為=Kromasil Eternity C-18色譜柱為10(toimX2. 1讓?zhuān)?. 5μπι;柱溫35°C ；樣品室溫度7°C ；進(jìn)樣量 5 μ L ；流速為0. 25mL/min ；流動(dòng)相A :0. 甲酸；流動(dòng)相B 甲醇；磺胺類(lèi)藥物和苯并咪唑類(lèi) 藥物梯度洗脫程序見(jiàn)表1，喹諾酮藥物梯度洗脫程序見(jiàn)表2。表1磺胺類(lèi)藥物和苯并咪唑類(lèi)藥物梯度洗脫程序
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的分析方法，其特征在于，所述質(zhì)譜條件為電噴霧離子源(ESI+)；毛細(xì)管電壓為3. 2kV ；萃取電壓為4. OV ；預(yù)六極桿電壓為0. IV ；源溫為120°C ；脫溶 劑溫度為380°C ；脫溶劑氣速為800L/h ；錐孔反吹氣速為60L/h ；采用多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM)模 式，其他質(zhì)譜分析參數(shù)見(jiàn)表3。表全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種QuEChERS提取凈化-超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(QuEChERS-UPLC-MS/MS)同時(shí)測(cè)定雞肝中12種磺胺類(lèi)，19種喹諾酮類(lèi)和8種苯并咪唑類(lèi)藥物及其代謝物殘留的分析方法。樣品用1％乙酸-乙腈溶液提取，NH2吸附劑凈化，正己烷脫脂。然后用Kromasil Eternity C18色譜柱(100mm×2.1mm，2.5μm)分離，以0.1％甲酸和甲醇作為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫，電噴霧正離子(ESI+)模式電離，多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM)模式檢測(cè)，內(nèi)標(biāo)法定量。39種藥物在5～100μg/kg的空白添加濃度范圍內(nèi)線性良好(r＞0.98)，在10～50μg/kg的添加水平范圍內(nèi)，平均回收率為72％～121％，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為1.5％～23.4％，39種藥物的檢出限(LOD)為5μg/kg，測(cè)定低限(LOQ)為10μg/kg。該方法簡(jiǎn)便、快速、靈敏、準(zhǔn)確、耐用，適合雞肝中磺胺類(lèi)、喹諾酮類(lèi)和苯并咪唑類(lèi)藥物殘留的確證和定量測(cè)定。
文檔編號(hào)G01N30/02GK102128891SQ201010595298
公開(kāi)日2011年7月20日 申請(qǐng)日期2010年12月20日 優(yōu)先權(quán)日2010年12月20日
發(fā)明者姚偉琴, 張萬(wàn)權(quán), 張紅霞, 李曉巖, 李鋒格, 竇輝, 蘇敏 申請(qǐng)人:新疆出入境檢驗(yàn)檢疫局檢驗(yàn)檢疫技術(shù)中心