用氣相色譜法鑒別三個(gè)綠花菜品種的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及綠花菜品種的鑒別，具體涉及用氣相色譜法鑒別三個(gè)綠花菜品種的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]綠花菜屬于十字花科植物，又名青花菜或西蘭花，是常用蔬菜作物。寧波地區(qū)種植的是炎秀、優(yōu)秀和喜鵲三個(gè)品種，這三個(gè)品種從形態(tài)學(xué)很難區(qū)分，分子學(xué)鑒別技術(shù)要求較高，一般縣、鎮(zhèn)級的科研部門沒有能力區(qū)別，因此對綠花菜產(chǎn)地的基層科研部門提供一種簡單、易學(xué)的綠花菜品種鑒別方法，具有實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種用氣相色譜法鑒別三個(gè)綠花菜品種的方法，該方法簡單、易學(xué)，具有鑒別方便、準(zhǔn)確的優(yōu)點(diǎn)。
[0004]本發(fā)明解決上述技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案為:用氣相色譜法鑒別三個(gè)綠花菜品種的方法，其步驟如下:
a、稱取25.0g綠花菜樣品置于試劑瓶中，加入乙腈50.0ml，用勾楽機(jī)以15500 rpm勾楽2min，靜置提取30min，過濾，濾液倒入到加有4g氯化鈉的離心管中，振蕩lmin，搖勾；離心管以4000 rpm離心6min，靜置分層，吸取上層有機(jī)相10.0ml到帶塞的試管中，試管在80°C水浴的氮吹儀中吹至近干，用丙酮定容至5.0ml，得到鑒別樣品；
b、鑒別樣品用氣相色譜法鑒別，氣相色譜條件:載氣為高純氮?dú)?，流?0ml/min;氫氣流量為75ml/min，空氣流量110ml/min ;柱前壓9.95psi，恒流方式，尾吹氮?dú)?；進(jìn)樣口溫度220°C，檢測器溫度25°C ;采用不分流進(jìn)樣方式，進(jìn)樣量I μ 1，進(jìn)樣0.85min后吹掃；DB-1701色譜柱，柱溫程序:初始溫度100°C，以40°C /min升溫至200°C，再以2°C /min升溫至210°C，然后以30°C /min升溫至240°C，并保留4min至樣品全部流出；
c、以鑒別樣品的目標(biāo)峰的保留時(shí)間和峰面積之比定性，其中優(yōu)秀和喜鵲品種有四個(gè)相同保留時(shí)間的目標(biāo)峰，炎秀品種只有二個(gè)相同保留時(shí)間的目標(biāo)峰，即只有3號目標(biāo)峰和4號目標(biāo)峰，四個(gè)目標(biāo)峰的保留時(shí)間分別為:1號目標(biāo)峰為2.434?2.435min，2號目標(biāo)峰為
2.549 ?2.550min，3 號目標(biāo)峰為 3.939 ?3.941min，4 號目標(biāo)峰為 5.487 ?5.489min ;優(yōu)秀品種的3號目標(biāo)峰與I號目標(biāo)峰的峰面積之比為1.9?3.2，喜鵲品種的3號目標(biāo)峰與I號目標(biāo)峰的峰面積之比為11.0?18.2。
[0005]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于用氣相色譜法鑒別三個(gè)綠花菜品種的方法，通過乙腈提取，丙酮定容，得到鑒別樣品，再用氣相色譜法鑒別，鑒別用色譜柱為DB-1701，然后以鑒別樣品的目標(biāo)峰的保留時(shí)間和峰面積之比定性，如優(yōu)秀和喜鵲品種有四個(gè)目標(biāo)峰，炎秀品種只有二個(gè)目標(biāo)峰，優(yōu)秀品種的3號目標(biāo)峰與I號目標(biāo)峰的峰面積之比為1.9?
3.2，喜鵲品種的3號目標(biāo)峰與I號目標(biāo)峰的峰面積之比為11.0?18.2，這三個(gè)品種的保留時(shí)間穩(wěn)定，可以定性為綠花菜，二個(gè)目標(biāo)峰為炎秀品種，至于優(yōu)秀和喜鵲品種的3號目標(biāo)峰與I號目標(biāo)峰的峰面積之比差異大，區(qū)別明顯，因此鑒別準(zhǔn)確，本發(fā)明的方法簡單、易學(xué)，鑒別方便，尤其適用于花菜產(chǎn)地的基層科研部門。
【具體實(shí)施方式】
[0006]以下結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)描述。
[0007]實(shí)施例1
慈溪古塘街道滸山菜場購的綠花菜樣品25.0g綠花菜樣品置于試劑瓶中，加入乙腈50.0ml，用勾楽機(jī)以15500 rpm (r/min)勾楽2min，靜置提取30min，過濾，濾液倒入到加有4g氯化鈉的離心管中，振蕩lmin，搖勻；離心管以4000 rpm離心6min，靜置分層，吸取上層有機(jī)相10.0ml到帶塞的試管中，試管在80°C水浴的氮吹儀中吹至近干，用丙酮定容至5.0ml，得到鑒別樣品；鑒別樣品用氣相色譜法鑒別，氣相色譜條件:載氣為高純氮?dú)猓髁?0ml/min ;氫氣流量為75ml/min，空氣流量110ml/min ;柱前壓9.95psi，恒流方式，尾吹氮?dú)?；進(jìn)樣口溫度220°C，檢測器溫度25°C ;采用不分流進(jìn)樣方式，進(jìn)樣量I μ 1，進(jìn)樣0.85min后吹掃；DB-1701色譜柱，柱溫程序:初始溫度100°C，以40°C /min升溫至200°C，再以2°C /min升溫至210°C，然后以30°C /min升溫至240°C，并保留4min至樣品全部流出；以鑒別樣品的目標(biāo)峰的保留時(shí)間(出峰時(shí)間)和峰面積之比定性定性，溶劑丙酮為內(nèi)標(biāo)物，丙酮的出峰時(shí)間為0.747?0.750min，得到I號目標(biāo)峰的出峰時(shí)間為2.434min，2號目標(biāo)峰的出峰時(shí)間為2.549min，3號目標(biāo)峰的出峰時(shí)間為3.939min，4號目標(biāo)峰的出峰時(shí)間為5.487min，且3號目標(biāo)峰與I號目標(biāo)峰的峰面積之比為2.5，說明該綠花菜為優(yōu)秀品種，可以用HP-5色譜柱進(jìn)一步確認(rèn)。
[0008]實(shí)施例2
與實(shí)施例1基本相同，所不同的只是綠花菜樣品為慈溪市掌起鎮(zhèn)陳家村蔬菜種植戶吳宏華，得到I號目標(biāo)峰的出峰時(shí)間為2.435min，2號目標(biāo)峰的出峰時(shí)間為2.549min，3號目標(biāo)峰的出峰時(shí)間為3.941min，4號目標(biāo)峰的出峰時(shí)間為5.489min，3號目標(biāo)峰與I號目標(biāo)峰的峰面積之比為3.1，說明該綠花菜為優(yōu)秀品種。
[0009]實(shí)施例3
與實(shí)施例1基本相同，所不同的只是綠花菜樣品為慈溪市周巷鎮(zhèn)三江口村葉珍春種植，得到I號目標(biāo)峰的出峰時(shí)間為2.435min，2號目標(biāo)峰的出峰時(shí)間為2.550min，3號目標(biāo)峰的出峰時(shí)間為3.940min，4號目標(biāo)峰的出峰時(shí)間為5.488min，3號目標(biāo)峰與I號目標(biāo)峰的峰面積之比為2.0，說明該綠花菜為優(yōu)秀品種。
[0010]實(shí)施例4
與實(shí)施例1基本相同，所不同的只是綠花菜樣品為鎮(zhèn)海區(qū)澥浦鎮(zhèn)嵐山村岑乾康種植，僅得到3號目標(biāo)峰的出峰時(shí)間為3.939min，4號目標(biāo)峰的出峰時(shí)間為5.488min，說明該綠花菜為炎秀品種。
[0011]實(shí)施例5
與實(shí)施例1基本相同，所不同的只是綠花菜樣品為奉化市岳林街道袁國海種植，得到3號目標(biāo)峰的出峰時(shí)間為3.941min，4號目標(biāo)峰的出峰時(shí)間為5.487min，說明該綠花菜為炎秀品種。
[0012]實(shí)施例6 與實(shí)施例1基本相同，所不同的只是綠花菜樣品為慈溪市逍林鎮(zhèn)水云浦村胡恩保種植，得到I號目標(biāo)峰的出峰時(shí)間為2.435min，2號目標(biāo)峰的出峰時(shí)間為2.550min，3號目標(biāo)峰的出峰時(shí)間為3.940min，4號目標(biāo)峰的出峰時(shí)間為5.488min，3號目標(biāo)峰與I號目標(biāo)峰的峰面積之比為14.5，說明該綠花菜為喜鵲品種。
[0013]實(shí)施例7
與實(shí)施例1基本相同，所不同的只是綠花菜樣品為慈溪市逍林鎮(zhèn)聯(lián)明村方振財(cái)種植，得到I號目標(biāo)峰的出峰時(shí)間為2.434min，2號目標(biāo)峰的出峰時(shí)間為2.549min，3號目標(biāo)峰的出峰時(shí)間為3.941min，4號目標(biāo)峰的出峰時(shí)間為5.489min，3號目標(biāo)峰與I號目標(biāo)峰的峰面積之比為18.0，說明該綠花菜為喜鵲品種。
[0014]實(shí)施例8
與實(shí)施例1基本相同，所不同的只是綠花菜樣品為慈溪市逍林鎮(zhèn)逍路沿村蔣士波種植，得到I號目標(biāo)峰的出峰時(shí)間為2.435min，2號目標(biāo)峰的出峰時(shí)間為2.550min，3號目標(biāo)峰的出峰時(shí)間為3.939min，4號目標(biāo)峰的出峰時(shí)間為5.487min，3號目標(biāo)峰與I號目標(biāo)峰的峰面積之比為11.2，說明該綠花菜為喜鵲品種。
[0015]我們經(jīng)過多次反復(fù)研宄表明:寧波市的3個(gè)綠花菜品種，“炎秀”綠花菜品種只有3號峰、4號峰，沒有I號峰、2號峰，優(yōu)秀、喜鵲4個(gè)目標(biāo)峰有相同的保留時(shí)間，保留時(shí)間很穩(wěn)定，且3號峰/I號峰之比均各自在一定的范圍之內(nèi)，優(yōu)秀品種3號峰與I號峰面積之比在
1.9?3.2之間；喜鵲品種3號峰與I號峰面積之比在11.0?18.2之間，區(qū)別明顯。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.用氣相色譜法鑒別三個(gè)綠花菜品種的方法，其特征在于步驟如下: a、稱取25.0g綠花菜樣品置于試劑瓶中，加入乙腈50.0ml，用勾楽機(jī)以15500 rpm勾楽.2min，靜置提取30min，過濾，濾液倒入到加有4g氯化鈉的離心管中，振蕩lmin，搖勾；離心管以4000 rpm離心6min，靜置分層，吸取上層有機(jī)相10.0ml到帶塞的試管中，試管在80°C水浴的氮吹儀中吹至近干，用丙酮定容至5.0ml，得到鑒別樣品； b、鑒別樣品用氣相色譜法鑒別，氣相色譜條件:載氣為高純氮?dú)?，流?0ml/min;氫氣流量為75ml/min，空氣流量110ml/min ;柱前壓9.95psi，恒流方式，尾吹氮?dú)?；進(jìn)樣口溫度220°C，檢測器溫度25°C ;采用不分流進(jìn)樣方式，進(jìn)樣量I μ 1，進(jìn)樣0.85min后吹掃；DB-1701色譜柱，柱溫程序:初始溫度100°C，以40°C /min升溫至200°C，再以2°C /min升溫至210°C，然后以30°C /min升溫至240°C，并保留4min至樣品全部流出； c、以鑒別樣品的目標(biāo)峰的保留時(shí)間和峰面積之比定性，其中優(yōu)秀和喜鵲品種有四個(gè)相同保留時(shí)間的目標(biāo)峰，炎秀品種只有二個(gè)相同保留時(shí)間的目標(biāo)峰，即只有3號目標(biāo)峰和4號目標(biāo)峰，四個(gè)目標(biāo)峰的保留時(shí)間分別為:1號目標(biāo)峰為2.434?2.435 min，2號目標(biāo)峰為.2.549 ?2.550 min, 3 號目標(biāo)峰為 3.939 ?3.941 min, 4 號目標(biāo)峰為 5.487 ?5.489 min ；優(yōu)秀品種的3號目標(biāo)峰與I號目標(biāo)峰的峰面積之比為1.9?3.2，喜鵲品種的3號目標(biāo)峰與I號目標(biāo)峰的峰面積之比為11.0?18.2。
【專利摘要】發(fā)明公開了一種用氣相色譜法鑒別三個(gè)綠花菜品種的方法，通過乙腈提取，丙酮定容，得到鑒別樣品，再用氣相色譜法鑒別，鑒別用色譜柱為DB-1701，然后以鑒別樣品的目標(biāo)峰的保留時(shí)間和峰面積之比定性，如優(yōu)秀和喜鵲品種有四個(gè)目標(biāo)峰，炎秀品種只有二個(gè)目標(biāo)峰，優(yōu)秀品種的3號目標(biāo)峰與1號目標(biāo)峰的峰面積之比為1.9～3.2，喜鵲品種的3號目標(biāo)峰與1號目標(biāo)峰的峰面積之比為11.0～18.2，這三個(gè)品種的保留時(shí)間穩(wěn)定，至于優(yōu)秀和喜鵲品種的3號目標(biāo)峰與1號目標(biāo)峰的峰面積之比差異大，區(qū)別明顯，因此鑒別準(zhǔn)確，本發(fā)明的方法簡單、易學(xué)，鑒別方便，尤其適用于花菜產(chǎn)地的基層科研部門。
【IPC分類】G01N30-88
【公開號】CN104777262
【申請?zhí)枴緾N201510179941
【發(fā)明人】王冬群
【申請人】慈溪市農(nóng)業(yè)監(jiān)測中心
【公開日】2015年7月15日
【申請日】2015年4月16日