本發(fā)明涉及一種食品中特丁基對(duì)苯二酚的檢測(cè)方法，屬于食品檢測(cè)領(lǐng)域。

背景技術(shù)：
抗氧化劑通常被人們用于油脂和油炸食品中，是一種來(lái)阻止或延緩食品氧化變質(zhì)、提高食品穩(wěn)定性和延長(zhǎng)食品貯存期的食品添加劑?？寡趸瘎┌磥?lái)源分為天然抗氧化劑和人工合成抗氧化劑，其中特丁基對(duì)苯二酚(TBHQ)是油脂和油炸食品中常用的一種合成抗氧化劑。但是，有研究發(fā)現(xiàn)，過(guò)量的TBHQ的使用會(huì)損傷動(dòng)物的肝微粒體部分，因此對(duì)于它們的使用很多國(guó)家都有一定的限量標(biāo)準(zhǔn)，甚至有些國(guó)家至今尚不允在食品中使用TBHQ。所以對(duì)這些食品中抗氧化劑的測(cè)定是必要的。目前，已經(jīng)有很多測(cè)定TBHQ的方法，例如分光光度法、氣相色譜法、液相色譜法、毛細(xì)管膠束電動(dòng)色譜法、電化學(xué)分析法等。盡管上述方法均有其優(yōu)點(diǎn)，但也存在步驟繁雜、儀器昂貴、使用有毒溶劑等缺點(diǎn)。因此，建立一種簡(jiǎn)單、成本低及環(huán)境友好型并同時(shí)TBHQ的方法迫在眉睫。最近，化學(xué)發(fā)光分析法由于具有線(xiàn)性范圍寬、靈敏度高，儀器簡(jiǎn)單，并且沒(méi)有背景光干擾等優(yōu)點(diǎn)，而被人們廣泛運(yùn)用。魯米諾是最早也是最常見(jiàn)應(yīng)用于化學(xué)發(fā)光中的試劑，魯米諾-高錳酸鉀體系已經(jīng)被用來(lái)檢測(cè)很多種物質(zhì)。然而到目前為止，采用魯米諾-高錳酸鉀體系檢測(cè)TBHQ的相關(guān)研究尚未見(jiàn)報(bào)道。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的是提供一種食品中特丁基對(duì)苯二酚的檢測(cè)方法，克服現(xiàn)有測(cè)定方法步驟繁雜、儀器昂貴、使用有毒溶劑、分析成本高、靈敏度不能滿(mǎn)足需求、線(xiàn)性范圍窄、分析測(cè)定時(shí)間長(zhǎng)等缺點(diǎn)，基于TBHQ對(duì)魯米諾-高錳酸鉀體系的抑制作用，提供了一種全新的簡(jiǎn)單靈敏的檢測(cè)抗氧化劑的方法。本發(fā)明提供的檢測(cè)方法，首先利用高效液相色譜的高分離效率對(duì)抗氧化劑進(jìn)行分離，然后柱后流出，再利用TBHQ對(duì)化學(xué)發(fā)光的影響，建立一種簡(jiǎn)單、靈敏快速測(cè)定TBHQ的HPLC-CL方法，本發(fā)明方法的測(cè)定原理是：當(dāng)無(wú)TBHQ存在時(shí)，魯米諾-高錳酸鉀體系產(chǎn)生一個(gè)很強(qiáng)的化學(xué)發(fā)光信號(hào)；而當(dāng)TBHQ存在時(shí)，由于其會(huì)與反應(yīng)體系中的氧化劑高錳酸鉀發(fā)生反應(yīng)，從而導(dǎo)致化學(xué)信號(hào)降低，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)抗氧化劑的測(cè)定。本發(fā)明所提供的食品中特丁基對(duì)苯二酚的檢測(cè)方法，包括如下步驟：(1)利用高效液相色譜法對(duì)待測(cè)食品中的特丁基對(duì)苯二酚進(jìn)行分離；(2)在流動(dòng)注射的條件下，步驟(1)的流出液與化學(xué)發(fā)光試劑進(jìn)行混合得到一體系，并進(jìn)行化學(xué)發(fā)光反應(yīng)，根據(jù)所述體系的相對(duì)化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度值，即得到食品中特丁基對(duì)苯二酚的濃度；所述化學(xué)發(fā)光試劑為魯米諾-高錳酸鉀體系與堿性pH調(diào)節(jié)劑的混合液：所述魯米諾-高錳酸鉀體系為魯米諾與高錳酸鉀的水溶液。上述的檢測(cè)方法中，所述食品可為食用油；所述食用油可為棉籽油、花生油和大豆油中至少一種。上述的檢測(cè)方法中，所述食品中所述特丁基對(duì)苯二酚的濃度可為5×10-9g/mL～1×10-5g/mL。上述的檢測(cè)方法中，步驟(1)中，所述高效液相色譜法的檢測(cè)條件如下：流動(dòng)相為甲醇與水的混合液，所述甲醇與所述水的體積比可為70：30；流速可為0.5～1.0mL/min，具體可為1.0mL/min。上述的檢測(cè)方法中，步驟(2)中，所述化學(xué)發(fā)光試劑中，所述堿性pH調(diào)節(jié)劑為氫氧化鈉或碳酸鈉-碳酸氫鈉緩沖液；所述化學(xué)發(fā)光試劑中，所述魯米諾的濃度可為0.1～0.8mmol/L，具體可為0.8mL/min，所述高錳酸鉀的濃度可為0.01～0.2mmol/L，具體可為0.2mL/min，所述氫氧化鈉的濃度可為0.05～0.5mmol/L，具體可為0.5mL/min；所述化學(xué)發(fā)光試劑的流速可為1.0～2.95mL/min。上述的檢測(cè)方法中，步驟(2)中，按照下述步驟實(shí)現(xiàn)對(duì)食品中特丁基對(duì)苯二酚的濃度的檢測(cè)：1)配制至少3種含有特丁基對(duì)苯二酚的標(biāo)準(zhǔn)溶液；2)按照步驟(1)和步驟(2)分別對(duì)所述食品標(biāo)準(zhǔn)樣品進(jìn)行處理，得到相應(yīng)的化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度值，以所述標(biāo)準(zhǔn)樣品中特丁基對(duì)苯二酚的濃度為橫坐標(biāo)，以與所述標(biāo)準(zhǔn)樣品相應(yīng)的體系的相對(duì)化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度值為縱坐標(biāo)，制作標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)；3)根據(jù)步驟(2)中測(cè)定的相對(duì)化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度值和所述標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，即得到食品中的特丁基對(duì)苯二酚的濃度。上述的檢測(cè)方法中，所述食品標(biāo)準(zhǔn)樣品中所述特丁基對(duì)苯二酚的濃度可為5×10-9～1×10-5g/mL?；瘜W(xué)發(fā)光試劑在檢測(cè)食品中特丁基對(duì)苯二酚中的應(yīng)用也屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍；所述化學(xué)發(fā)光試劑為魯米諾-高錳酸鉀體系(即魯米諾與高錳酸鉀的水溶液)，并包含堿性pH調(diào)節(jié)劑如氫氧化鈉，用于調(diào)整酸堿度；所述食品為食用油；所述食用油為棉籽油、花生油和大豆油中至少一種；所述化學(xué)發(fā)光試劑中，所述魯米諾的濃度為0.1～0.8mmol/L，所述高錳酸鉀的濃度為0.01～0.2mmol/L，所述氫氧化鈉的濃度為0.05～0.5mmol/L。由于選擇性差是化學(xué)發(fā)光分析法的固有的缺點(diǎn)，不適合應(yīng)用于復(fù)雜樣品的研究，本發(fā)明通過(guò)將化學(xué)發(fā)光與高效液相色譜分離手段相結(jié)合，從而很好的解決了這一問(wèn)題，基于此，本發(fā)明成功地建立了以魯米諾-高錳酸鉀體系來(lái)測(cè)定TBHQ的新分析方法，并以HPLC分離，測(cè)定食用油中的TBHQ。本發(fā)明檢測(cè)方法具有以下優(yōu)點(diǎn)：(1)檢出限，TBHQ為0.1ng/mL，較以前的方法靈敏度提高1個(gè)數(shù)量級(jí)，線(xiàn)性范圍寬；(2)該方法的分析時(shí)間在6分鐘以?xún)?nèi)；(3)檢測(cè)器成本低(<2000$)，...