多星韭中四種核苷類成分的檢測(cè)方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了多星韭或其同屬植物中腺嘌呤、鳥嘌呤核苷、胸腺嘧啶核苷或/和腺嘌呤核苷的UPLC檢測(cè)方法。上述檢測(cè)方法，簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確、分析時(shí)間短、穩(wěn)定性好，可以用于多星韭及其同屬植物(如韭菜)中核苷類成分的檢測(cè)。
【專利說明】多星韭中四種核巧類成分的檢測(cè)方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明設(shè)及多星韭的檢測(cè)方法。

【背景技術(shù)】
[000引 多星韭為百合科（Liliaceae)蔥屬（Allium)植物多星韭Allium wallichii Kunth的干燥全草。鱗莖圓柱狀，或稍作卵形圓柱狀，具稍粗的根；鱗莖外皮黃褐色或淺黃 色，呈片狀破裂或呈纖維狀，有時(shí)近網(wǎng)狀，內(nèi)皮膜質(zhì)，僅頂端破裂。葉狹條形至寬條形，向上 長(zhǎng)漸尖，具明顯的中脈及平行細(xì)脈，比花亭短或長(zhǎng)，或近等長(zhǎng)，寬2. 5?15. 5厘米，長(zhǎng)20? 60厘米?；ㄍ娜~叢中抽出，；棱狀柱形，具3條縱棱，有時(shí)棱為狹翅狀，高20?60厘米， 下部被葉銷；總巷單側(cè)開裂，或2裂，膜質(zhì)，早落；傘形花序扇狀至半球狀，具多數(shù)疏散或密 集的花；小花梗近等長(zhǎng)，比花被片長(zhǎng)2?4倍，基部無小巷片；花紅色、紫紅色、紫色至黑紫 色，星芒狀開展；花被片矩圓形至狹矩圓狀楠圓形，花后反折，先端純或凹缺，等長(zhǎng)，長(zhǎng)5?9 毫米，寬1. 5?2毫米；花絲等長(zhǎng)，錐形，比花被片略短或近等長(zhǎng)，基部合生并與花被片貼生； 子房倒卵狀球形，具3圓棱，基部不具凹陷的蜜穴；花柱比子房長(zhǎng)。花果期7?9月。產(chǎn)四 川（西南部）、西藏（東南部）、云南、貴州、廣西北部（貓兒山）和湖南南部（莽山）。生于 海拔2300?4800米的濕潤(rùn)草坡、林緣、灌叢下或溝邊。印度北部、巧泊爾、錫金和不丹也有 分布。
[0003] 多星韭為彝藥羅窩莫的來源之一，全草入藥，具有活血散疲，枯風(fēng)止癢之功效，用 于治療咖痛、腹痛、百日咳、感冒、跌打傷、牛皮癖等多種疾病n-"。在民間，多星韭也是一種 藥食同源植物，《濱南本草》記載；做菜食，能養(yǎng)血健脾，強(qiáng)筋骨，增力氣?。多星韭在貴州境 內(nèi)資源豐富，主要分布在小韭菜坪和大韭菜坪，當(dāng)?shù)刂饕糜诼糜螛I(yè)開發(fā)。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 發(fā)明人在研究中發(fā)現(xiàn)，多星韭具有良好的抗癌活性（見試驗(yàn)例1)，并通過超高效 液相色譜檢測(cè)出多星韭中含有核巧類成分。目前已知核巧類成分參與生物細(xì)胞DNA的代謝 過程，是生物細(xì)胞維持生命活動(dòng)的基本組成元素，包括腺嚷嶺核巧、腺嚷嶺、鳥嚷嶺、鳥嚷嶺 核巧、胸腺喀晚、胸腺喀晚核巧、胞喀晚等，具有抗病毒、抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)、抗炎、抗屯、肌缺 血、改善屯、腦血管循環(huán)等多種生物活性W。因此，在發(fā)現(xiàn)多星韭具有抗癌活性的基礎(chǔ)上，研 究其藥食同源植物中各核巧類成分的檢測(cè)方法，可W對(duì)該類藥食同源植物的質(zhì)量監(jiān)測(cè)或控 制提供可能。
[0005] 本發(fā)明目的在于提供一種多星韭中核巧類成分的檢測(cè)方法。本發(fā)明的另一目的在 于提供多星韭藥食同源植物的檢測(cè)方法，不限于對(duì)核巧類成分的檢測(cè)。
[0006] 超高效液相色譜 OJltra Performance Liquid QiromatographyWPLC)(又名超高 壓液相色譜、超高速液相色譜）是分離科學(xué)中的一個(gè)全新類別，UPLC借助于HPLC(高效液 相色法）的理論及原理，涵蓋了小顆粒填料、非常低系統(tǒng)體積及快速檢測(cè)手段等全新技術(shù)， 增加了分析的通量、靈敏度及色譜峰容量。本發(fā)明正是采用UPLC進(jìn)行檢測(cè)的。
[0007] 具體地，本發(fā)明提供了多星韭或其同屬植物中腺嚷嶺、鳥嚷嶺核巧、胸腺喀晚核 巧、腺嚷嶺核巧中的一種或多種成分的UPLC檢測(cè)方法，它包括如下操作步驟：
[000引 （1)取待檢樣品，加水提取，收集提取液，制備供試品溶液；
[0009] (2)取腺嚷嶺、鳥嚷嶺核巧、胸腺喀晚核巧、腺嚷嶺核巧中的一種或兩種W上的混 合物，制備對(duì)照品溶液；
[0010] 做將供試品溶液、對(duì)照品溶液分別注入超高效液相色譜儀中，采用外標(biāo)法檢測(cè)即 可；其中，色譜條件如下：
[0011] 色譜柱：十八燒基娃燒鍵合娃膠為填料 [001引 檢測(cè)波長(zhǎng)；255?265nm
[001引流動(dòng)相冰-甲醇系統(tǒng)，其梯度程序如下：
[0014]

【權(quán)利要求】
1. 多星韭或同屬植物中腺嘌呤、鳥嘌呤核苷、胸腺嘧啶核苷、腺嘌呤核苷中的一種或多 種成分的UPLC檢測(cè)方法，其特征在于：它包括如下操作步驟： (1) 取待檢樣品，加水提取，收集提取液，制備供試品溶液； (2) 取腺嘌呤、鳥嘌呤核苷、胸腺嘧啶核苷、腺嘌呤核苷中的一種或兩種以上的混合物， 制備對(duì)照品洛液； (3) 將供試品溶液、對(duì)照品溶液分別注入超高效液相色譜儀中，采用外標(biāo)法檢測(cè)即可； 其中，色譜條件如下： 色譜柱：十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料 檢測(cè)波長(zhǎng)：255?265nm 流動(dòng)相：水-甲醇系統(tǒng)，其梯度程序如下：
〇
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于：步驟（1)中，加水提取的方式為超 聲。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于：步驟（2)中，對(duì)照品溶液的溶劑選自 水、甲醇或甲醇水溶液。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于：步驟（3)中，所述檢測(cè)波長(zhǎng)為260nm。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于：步驟（3)中，所述色譜柱填料的粒徑 為1. 7?3. 5ym，為1. 7?I. 8ym，更優(yōu)選為I. 8ym。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1或5所述的檢測(cè)方法，其特征在于：所述色譜柱尺寸為： 2.IXIOOmm;優(yōu)選地，所述色譜柱的型號(hào)為：ACQMTYUPLCHSST3,1. 8ym，2.IX100mm。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于：所述流動(dòng)相流速為0. 2ml/min;色譜 柱柱溫為30°C。
8. 根據(jù)權(quán)利要求1?7任意一項(xiàng)所述的檢測(cè)方法，其特征在于：所述待檢樣品為百合 科蔥屬植物多星韭AlliumwallichiiKunth或其同屬植物的根及莖、葉、花蕾、種子或全 草。
9. 根據(jù)權(quán)利要求1或8所述的檢測(cè)方法，其特征在于：所述同屬植物為韭菜Allium tuberosumRottl.exSpreng. 〇
10. 多星韭的質(zhì)量控制檢測(cè)方法，其特征在于：它是采用UPLC法進(jìn)行檢測(cè)的，包括如下 操作步驟： (1) 取待檢樣品，加水提取，收集提取液，制備供試品溶液； (2) 將供試品溶液注入超高效液相色譜儀中，檢測(cè)即可；其中，色譜條件如下： 色譜柱：十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料 檢測(cè)波長(zhǎng)：255?265nm 流動(dòng)相：水-甲醇系統(tǒng)，其梯度程序如下：
【文檔編號(hào)】G01N30/88GK104502511SQ201510003094
【公開日】2015年4月8日 申請(qǐng)日期:2015年1月4日 優(yōu)先權(quán)日:2015年1月4日
【發(fā)明者】劉圓, 許云章, 劉盼盼 申請(qǐng)人:西南民族大學(xué), 劉圓