一種麝香解痛膏的質(zhì)量檢測(cè)方法
【專利摘要】本發(fā)明的目的是提供一種麝香解痛膏的主要藥效成分檢測(cè)方法，具體為采用水蒸汽蒸餾提取目標(biāo)產(chǎn)物，有機(jī)溶劑溶解待測(cè)目標(biāo)成分，氣相色譜法檢測(cè)目標(biāo)成分。該方法采用特殊的蒸餾提取設(shè)備和有機(jī)溶劑進(jìn)行蒸餾提取，實(shí)現(xiàn)了超低含量麝香酮等待測(cè)目標(biāo)成分的準(zhǔn)確提取，一次性同時(shí)準(zhǔn)確檢測(cè)麝香酮、樟腦、薄荷腦、冰片、桂皮醛、丁香酚的含量，其不僅解決了低含量麝香酮的提取、測(cè)定方法，而且解決了與其他物種揮發(fā)性成分同時(shí)提取檢測(cè)的方法專屬性問題，操作簡(jiǎn)便，具有良好的應(yīng)用價(jià)值。
【專利說明】-種顧香解痛實(shí)的質(zhì)量檢測(cè)方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于藥學(xué)和分析化學(xué)【技術(shù)領(lǐng)域】，具體設(shè)及一種廢香解痛膏的質(zhì)量檢測(cè)方 法。

【背景技術(shù)】
[0002] 廢香解痛膏具有活血、散寒、止痛等功效，具有活血、散寒、止痛功效，用于扭挫傷， 關(guān)節(jié)酸痛等廣泛用于扭挫傷，關(guān)節(jié)酸痛等。
[0003] 處方：生附子 500g 了香 500g 石富蒲500g 紅花 250g 徐長卿 250g 大黃 500g 甘松 250g 川茸 500g 廳香 3.5g 冰片 500g 檀腦 250g 薄荷油150g 桂皮酸 lOOg
[0004] 制法；依據(jù)處方取W上十S味藥中的生附子、了香、石富蒲、紅花、徐長卿、大黃、甘 松、川號(hào)粉碎成粗粉，用90%己醇回流S次，每次1小時(shí)，濾過，合并濾液，減壓濃縮至相對(duì) 密度約為1. 05 (20°C )的流浸膏；取廢香用己離浸潰二次，每次用己離18ml浸潰48小時(shí)， 再用己離一己醇（1:2)混合液15ml，浸潰48小時(shí)，合并浸出液，濾過；取橡膠1750g、氧化鋒 1900g、松香1500g、凡：t林150g、羊毛脂250g、液狀石蠟50g及汽油適量，制成基質(zhì)，加入上 述制備的流浸膏、浸出液和冰片、憧腦、薄荷油、桂皮醒及二甲基亞諷50g，攬勻，濾過，靜置 24?48小時(shí)，涂膏，干燥，卷軸，切段，蓋襯，切片，即得。
[0005] 目前廢香解痛膏尚無法定的質(zhì)量檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)，市場(chǎng)上對(duì)于廢香解痛膏的質(zhì)量控制缺 乏統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)，主要依據(jù)企業(yè)在藥品注冊(cè)時(shí)報(bào)批的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)來執(zhí)行，適用性較差。已公 開的廢香解痛膏文獻(xiàn)大部分采用氣相色譜法測(cè)定廢香解痛膏中的憧腦、冰片、桂皮醒等成 分，也有文獻(xiàn)增加了薄荷腦、了香酪等揮發(fā)性成分的含量測(cè)定指標(biāo)。廢香是一種名貴的中藥 材，在處方中作為君藥，具有開資醒神、活血通絡(luò)、消腫止痛之功效，系多種急救藥及有效中 成藥的重要原料。廢香酬作為廢香的活性成分，是廢香的芳香氣味主要來源，據(jù)研究，由于 廢香酬的含量與廢香的用量直接相關(guān)，因此可將廢香酬的含量作為廢香或其藥物組合物的 質(zhì)量控制指標(biāo)，如中國藥典對(duì)廢香的質(zhì)量控制方法規(guī)定如下；采用無水己醇溶解廢香，然后 應(yīng)用氣相色譜法測(cè)定廢香酬的含量。另外，也有文獻(xiàn)報(bào)道使用石油離、己離等提取廢香酬后 采用氣相色譜法或者氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用測(cè)定廢香酬含量。故關(guān)注廢香解痛膏中廢香的含 量控制問題，是確保廢香解痛膏發(fā)揮藥物療效的關(guān)鍵技術(shù)手段之一。
[0006] 文獻(xiàn)《毛細(xì)管氣相色譜法測(cè)定血栓屯、脈寧片中的冰片和廢香酬的含量》（王掙帥， 鄭籃君，馬安宇.中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2013, 3U8): 1807-1809.)，公開了氣相色譜法測(cè)定血 栓屯、脈寧片中冰片和廢香酬的含量，步驟如下；采用己酸己醋超聲提取冰片和廢香酬成分， Agilent DB-Wax毛細(xì)管色譜柱，F(xiàn)ID檢測(cè)器，進(jìn)樣口溫度200°C，檢測(cè)器溫度250°C，柱溫 為程序升溫；起始柱溫140°C，維持lOmin，W 20°C /min升溫至200°C，并維持lOmin ;載氣 為氮?dú)猓魉?. 5ml/min ;分流進(jìn)樣，分流比1:1，進(jìn)樣量1 uL ;實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示冰片的含量為 0. 1967-0. 2015mg/g，廢香酬含量為0. 03835-0. 03986mg/g。該技術(shù)方案測(cè)定的血栓屯、脈寧 片屬于含高純度的廢香提取物（包括廢香酬）的口服制劑，而且該制劑將廢香磨細(xì)粉直接 入藥，故廢香酬在成品藥物中的含量較高，入藥后也基本比較穩(wěn)定；但該技術(shù)方案的缺陷之 處在于：并不適用于對(duì)貼膏劑中的廢香進(jìn)行含量測(cè)定。因?yàn)?，貼膏劑中的廢香含量極低，如 廢香在廢香解痛膏處方中的投藥量占中藥材投藥量的比例不足千分之一，且廢香具有較強(qiáng) 的揮發(fā)性，所W在制備中或者成藥的貶藏中都因易于揮發(fā)而損失藥量，可W說，目前市售的 廢香解痛膏中均僅含痕量的廢香酬，使用該方法難W檢測(cè)。
[0007] 文獻(xiàn)《廢香止痛膏主要成分的分析》（李曉光，了一，成桂紅等.中成 藥，2003, 25(10) :795-797.)公開了 W己酸己醋為溶劑，靜置提取，W正十四燒為內(nèi)標(biāo)物， 氣相色譜法測(cè)定廢香止痛膏中的憧腦、薄荷腦、冰片、水楊酸甲醋、桂皮醒、了香酪和廢香 酬，但實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明"在市售的3種廢香止痛膏中均沒有檢測(cè)到桂皮醒和廢香酬"（見文獻(xiàn) "3討論"部分的最后一段內(nèi)容）。文獻(xiàn)《廢香止痛膏主要成分的分析》（謝曉燕.中國衛(wèi)生 產(chǎn)業(yè)，2012, 9(36) : 181-181.)公開了與上述李曉光該篇文獻(xiàn)完全相同的實(shí)驗(yàn)方法（文章內(nèi) 容基本相同），結(jié)合文獻(xiàn)中"2. 4穩(wěn)定性試驗(yàn)、2. 5重復(fù)性試驗(yàn)、3討論"可推知；該技術(shù)方案 的目的是為了分離冰片、薄荷腦和憧腦等，并不能有效測(cè)定廢香酬的含量。因此，上述兩篇 文獻(xiàn)的氣相色譜法均無法有效檢測(cè)廢香止痛膏中的廢香酬含量，也進(jìn)一步證明了現(xiàn)有技術(shù) 無法解決貼膏劑因廢香酬痕量而難W檢測(cè)的技術(shù)難題。
[000引另外，也有很多文獻(xiàn)報(bào)道因采用氣相色譜法的分離度不能達(dá)到要求，故將廢香酬 進(jìn)行衍生化反應(yīng)后，采用高效液相色譜法分析，W提高廢香酬與其他雜質(zhì)的分離度。但該種 方法的局限性在于；只適用于廢香酬單一成分的測(cè)定，不適合與揮發(fā)性成分等一起進(jìn)行多 組分測(cè)定。
[0009] 綜上所述，由于廢香解痛膏的臨床療效主要來自廢香、揮發(fā)油成分，但處方中的廢 香含量非常低，目前仍無較好的方法可W較為精準(zhǔn)的、同時(shí)測(cè)定上述成分含量。因此，如何 一次性并同時(shí)測(cè)定廢香解痛膏該類膏劑中多種藥效成分的含量，實(shí)現(xiàn)質(zhì)量控制，是本領(lǐng)域 人員急需解決的技術(shù)難題。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0010] 本發(fā)明的目的是提供一種廢香解痛膏的質(zhì)量檢測(cè)方法，具體為采用水蒸汽蒸饋提 取目標(biāo)成分，有機(jī)溶劑溶解待測(cè)目標(biāo)成分，氣相色譜法檢測(cè)目標(biāo)成分；解決了現(xiàn)有技術(shù)不能 一次性同時(shí)精確測(cè)量廢香解痛膏類貼膏劑中多種藥效成分的含量的技術(shù)難題。
[0011] 為此，本發(fā)明采用W下技術(shù)方案：
[0012] 一種廢香解痛膏的質(zhì)量檢測(cè)方法，包括如下步驟：
[0013] A、內(nèi)標(biāo)溶液的制備；
[0014] W蒙為內(nèi)標(biāo)物，用有機(jī)溶劑溶解，制備制成0. 5mg/ml內(nèi)標(biāo)溶液；
[0015] B、對(duì)照品溶液的制備；
[0016] 分別取憧腦、薄荷腦、冰片、桂皮醒、了香酪、廢香酬標(biāo)準(zhǔn)品，用有機(jī)溶劑作溶劑，稀 釋配制成混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，然后加入步驟A制備的內(nèi)標(biāo)溶液，配制成濃度為0. 6mg/ml憧腦、 0. 25mg/ml 薄荷腦、1. 6mg/ml 龍腦、0. 20mg/ml 桂皮醒、0. 2mg/ml 了香酪、0. 32mg/ml 廢香酬 的對(duì)照品溶液；
[0017] C、供試品溶液的制備
[001引取廢香解痛膏數(shù)片置于如圖1所示的蒸饋提取裝置中，用水蒸氣加熱、提取憧腦、 薄荷腦、冰片、桂皮醒、了香酪、廢香酬該6個(gè)待測(cè)目標(biāo)成分，并在蒸饋提取裝置中加入有機(jī) 溶劑，溶解、收集上述提取到的待測(cè)目標(biāo)成分；再加入步驟A制得的內(nèi)標(biāo)溶液，用有機(jī)溶劑 定容后得到供試品溶液；其中，所述的蒸饋提取裝置由鐵架臺(tái)、帶有圓底燒瓶的電熱套加熱 裝置、一端接有漏斗的U型冷凝管組成，其中圓底燒瓶通過鐵架臺(tái)固定設(shè)于電熱套上方，并 通過連通裝置與U型冷凝管的另一端連接，冷凝管兩端接有冷水可W循環(huán)流動(dòng)，U型冷凝管 中裝有所述的有機(jī)溶劑；
[0019] D、檢測(cè)
[0020] 用氣相色譜儀對(duì)溶液和供試品溶液進(jìn)行檢測(cè)分析，計(jì)算，即得。
[0021] 優(yōu)選的，步驟A、步驟B和步驟C中使用的有機(jī)溶劑均是選自正己燒、氯仿、二氯甲 燒中的一種或幾種。
[0022] 更優(yōu)選的，步驟A、步驟B和步驟C中使用的有機(jī)溶劑為正己燒。
[0023] 優(yōu)選的，步驟C中供試品溶液的制備具體如下：
[0024] 取廢香解痛膏50片，去襯蓋，稱重，剪碎至約0. 5cm*0. 5cm，混勻，取相當(dāng)于3-5片 的重量，精密稱定，置于圓底燒瓶，加入10-40ml蒸饋水覆蓋膏片浸泡，在U型管中加入步驟 A所用的有機(jī)溶劑10-80ml，再用電熱套加熱2-6小時(shí)，蒸饋、提取廢香酬巧待測(cè)目標(biāo)成分， 得提取液；將上述提取液移至漏斗，分取有機(jī)層，用鋪有無水硫酸鋼的漏斗濾過，再稱定重 量，用步驟A所用的有機(jī)溶劑補(bǔ)足減失的重量，最后加入步驟A制備的內(nèi)標(biāo)溶液5ml，搖勻， 得到供試品溶液。
[0025] 優(yōu)選的，步驟D氣相色譜儀的檢測(cè)條件具體如下：
[0026] 色譜條件及系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)；W聚己二醇20000 (陽G-20M)毛細(xì)管柱為色譜柱（柱 長為30m，內(nèi)徑為0. 25mm，膜厚度為0. 25 y m);進(jìn)樣口溫度為200°C;檢測(cè)器為FID氨火焰離 子化檢測(cè)器，檢測(cè)器溫度為250°C;進(jìn)樣量化1 ;載氣為氮?dú)?，流速?. 3ml/min，氮?dú)饬魉贋?40ml/min，氨氣流速為40ml/min，空氣流速為400ml/min ;分流進(jìn)樣，分流比為2:1 ;理論板 數(shù)按蒙計(jì)算應(yīng)不低于2500 ;
[0027] 柱升溫程序；初始溫度為75°C，W每分鐘3°C的速率升溫至120°C，保持15分鐘； W每分鐘10°C的速率升溫至200°C，保持20分鐘。
[002引更優(yōu)選的，色譜柱為HP-INNOWaX型號(hào)色譜柱，其柱長為30m，內(nèi)徑為0. 32mm，膜厚 度為 0. 25um。
[0029] 需要說明的是，本發(fā)明采用的蒸饋提取裝置（如圖1所示），系針對(duì)本發(fā)明提取對(duì) 象作出特殊改進(jìn)的裝置，其由鐵架臺(tái)、帶有圓底燒瓶的電熱套加熱裝置、一端接有漏斗的U 型冷凝管組成，其中圓底燒瓶通過鐵架臺(tái)固定設(shè)于電熱套上方，并通過連通裝置與U型冷 凝管的另一端連接，冷凝管接有冷水可W循環(huán)流動(dòng)。本發(fā)明的蒸饋提取裝置，不同于常用的 揮發(fā)油測(cè)定方法中的裝置（如圖2所示）或冷凝裝置（如圖3所示）。該是因?yàn)?，廢香解痛 膏中的憧腦、冰片等成分蒸饋后遇冷立即結(jié)塊，在冷凝管中很難再次完全被有機(jī)溶劑溶解， 嚴(yán)重影響了其含量的準(zhǔn)確測(cè)定；而本發(fā)明經(jīng)采用改進(jìn)后的裝置，客服了上述問題，實(shí)現(xiàn)了最 大程度提取物廢香酬等待測(cè)目標(biāo)成分問題。
[0030] 此外，還需要說明的是，本發(fā)明步驟A、步驟B和步驟C中所使用的有機(jī)溶劑，可W 相同，也可W不同，只要滿足在前述的幾種有機(jī)溶劑中的選擇即可。
[0031] 本發(fā)明提供的一種廢香膏的質(zhì)量檢測(cè)方法，具有如下有益效果：
[0032] ①本發(fā)明采用水蒸饋提取，實(shí)現(xiàn)了最大程度提取待測(cè)目標(biāo)成分的目的，而且采用 改進(jìn)的蒸饋提取裝置，有效解決了憧腦、冰片等在常規(guī)的揮發(fā)油提取裝置類冷凝管中易于 結(jié)塊，導(dǎo)致其含量測(cè)定偏低的問題。
[0033] ②本發(fā)明采用正己燒作為有機(jī)溶劑溶解廢香酬等待測(cè)目標(biāo)成分，其沸點(diǎn)較高、毒 性低，符合圖1所示蒸饋提取裝置的應(yīng)用要求；而且正己燒可W有效溶解待測(cè)目標(biāo)成分，本 發(fā)明不僅實(shí)現(xiàn)了超低含量廢香酬W及其他揮發(fā)性成分的準(zhǔn)確提取，還實(shí)現(xiàn)了待測(cè)目標(biāo)成分 與水、單醋型烏頭堿等生物堿、大黃素型慈釀?lì)?，W及其他酪酸等非目標(biāo)成分的分離，有效 提高了待測(cè)目標(biāo)成分的純度。
[0034] ⑨本發(fā)明對(duì)氣相色譜的檢測(cè)條件進(jìn)行了深入的研究，通過改變分流比提高進(jìn)樣 量，且通過特定的程序升溫提高了待測(cè)目標(biāo)成分的分離度，一次性同時(shí)準(zhǔn)確測(cè)定廢香解痛 膏中憧腦、薄荷腦、冰片、桂皮醒、T香酪、廢香酬含量，實(shí)現(xiàn)了待測(cè)目標(biāo)成分的定性與定量， 保證藥品質(zhì)量可控和臨床應(yīng)用安全、有效。
[0035] 總之，該方法不僅解決了低含量廢香酬的提取、測(cè)定方法，而且解決了與其他物種 揮發(fā)性成分同時(shí)提取檢測(cè)的方法專屬性問題，操作簡(jiǎn)便，具有良好的應(yīng)用價(jià)值。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0036] 圖1 ;本發(fā)明設(shè)計(jì)的蒸饋提取裝置，1為鐵架臺(tái)，2為電熱套加熱裝置，3為圓底燒 瓶，4為U型管冷凝管，5為漏斗
[0037] 圖2 ;揮發(fā)油測(cè)定方法中的裝置
[0038] 圖3 ;冷凝裝置
[0039] 圖4 ;不同色譜柱GC圖，其中；4-1是應(yīng)用色譜柱HP-Innowax的色譜圖，4-2是應(yīng) 用色譜柱HP-5的色譜圖，4-3是應(yīng)用色譜柱DB-608的色譜圖
[0040] 圖5 ;不同升溫程序GC圖，其中；5-1是供試品溶液在柱升溫程序A下的色譜圖， 5-2是供試品溶液在柱升溫程序B下的色譜圖，5-3是供試品溶液在柱升溫程序C下的色譜 圖，5-4是混合標(biāo)準(zhǔn)品在柱升溫程序A下的色譜圖
[0041] 1為憧腦，2為薄荷腦，3和4為冰片，5為內(nèi)標(biāo)-蒙，6為桂皮醒，7為了香酪，8為廢 香酬
[00創(chuàng)圖6 ;是缺憧腦的供試品溶液測(cè)定色譜圖
[0043] 圖7 ;是缺薄荷腦的供試品溶液測(cè)定色譜圖
[0044] 圖8 ;是缺冰片的供試品溶液測(cè)定色譜圖
[0045] 圖9 ;是缺桂皮醒的供試品溶液測(cè)定色譜圖
[0046] 圖10 ;是缺了香酪的供試品溶液測(cè)定色譜圖
[0047] 圖11 ;是缺廢香酬的供試品溶液測(cè)定色譜圖
[0048] 圖12 ;是混合標(biāo)準(zhǔn)品的測(cè)定色譜圖，1為憧腦，2為薄荷腦，3和4為冰片，5為內(nèi) 標(biāo)-蒙，6為桂皮醒，7為了香酪，8為廢香酬
[0049] 圖13 ;憧腦的線性關(guān)系考察圖，回歸方程；Y = 3. 768X-0. 037, R2 = 0. 999
[0050] 圖14 ;薄荷腦的線性關(guān)系考察圖，回歸方程；Y = 3. 515X-0. 008, R2 = 1. 000
[005U 圖15 ;冰片的線性關(guān)系考察圖，回歸方程；Y = 3. 343X-0. 085, R2 = 1. 000
[0化引圖16 ;桂皮醒的線性關(guān)系考察圖，回歸方程Y = 2. 407X+0. 019, R2 = 0. 998 [0化引 圖17 ;了香酪的線性關(guān)系考察圖，回歸方程Y = 2. 076X+0. 001，R2 = 1
[0054] 圖18 ;廢香酬的線性關(guān)系考察圖，回歸方程Y = 2. 056X+0. 000, R2 = 1

【具體實(shí)施方式】
[0055] 下面的實(shí)施例，用于進(jìn)一步說明和描述本發(fā)明，但并不意味著本發(fā)明僅限于此。
[0化6] W下是本發(fā)明具體實(shí)施例所設(shè)及的儀器、試劑、試藥的來源介紹：
[0化7] 儀器；安捷倫6890氣相色譜儀、蒸饋提取裝置、TD5102電子天平、BS210S電子天 平。
[0化引試劑；去離子水；己酸己醋（華東醫(yī)藥股份有限公司20130608)、氯仿（華東醫(yī)藥 股份有限公司20130509)、二氯甲燒（華東醫(yī)藥股份有限公司20130417)、正己燒（華東醫(yī) 藥股份有限公司20130710)、甲醇（杭州龍山精細(xì)化工有限公司20130814)、己醇（杭州龍 山精細(xì)化工有限公司20130822)、石油離（國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司20130409)，均為分 析純。
[0059] 試藥；廢香解痛膏（批號(hào)110406, 120312, 120904, 121 low ;憧腦（批號(hào)為 110747-21008,中國藥品生物制品檢定所）；薄荷腦（批號(hào)110728-200506,中國食品藥品檢 定研究院）；天然冰片（批號(hào)111688-200501，中國藥品生物制品檢定所）、桂皮醒（批號(hào)為 110710-201217,中國藥品生物制品檢定所）、蒙（批號(hào)為N110796-H1306018, ALADDIN)，了 香醒（批號(hào)為10725-201213,中國食品藥品檢定研究院）、廢香酬（批號(hào)為110719-201215， 中國食品藥品檢定研究院）。
[0060] 實(shí)施例1 ;供試品制備方法考察（提取溶劑及其用量、提取時(shí)間）
[0061] (1)內(nèi)標(biāo)溶液的制備
[006引 W蒙為內(nèi)標(biāo)物，分別用依據(jù)正交表1、2篩選的有機(jī)溶劑溶解，制成0. 5mg/ml內(nèi)標(biāo) 溶液；
[0063] (2)供試品溶液的制備；依圖1安裝好蒸饋提取裝置，取廢香解痛膏50片，去襯 蓋，稱重，剪碎至約0. 5cm*0. 5cm，混勻，取相當(dāng)于4片的重量，共9份，精密稱定，置于蒸饋 提取裝置中的圓底燒瓶，加入10-40ml蒸饋水浸泡，蒸饋水的用量W完全覆蓋住膏片為佳， 在U型管中加入有機(jī)溶劑適量，再用電熱套加熱、蒸饋、提取廢香酬和其他揮發(fā)性成分（依 據(jù)Lg(3 4)正交表加入有機(jī)溶劑及用量，并依據(jù)正交表1、2進(jìn)行正交試驗(yàn)）。將上述提取液 移至漏斗，分取有機(jī)層，用鋪有無水硫酸鋼的漏斗濾過，再稱定重量，用步驟（1)選擇的有 機(jī)溶劑補(bǔ)足減失的重量，最后加入步驟（1)制得的內(nèi)標(biāo)溶液5ml，搖勻，得到供試品溶液。
[0064] (3)對(duì)照品溶液的制備
[00化]分別取適量的憧腦、薄荷腦、冰片、桂皮醒、了香酪、廢香酬標(biāo)準(zhǔn)品，用供試品溶液 制備時(shí)所選擇的有機(jī)溶劑稀釋配制成混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，然后加入步驟（1)制得的內(nèi)標(biāo)溶液配 制成濃度為0. 6mg/ml憧腦、0. 25mg/ml薄荷腦、.6mg/ml龍腦、0. 20mg/ml桂皮醒、0. 2mg/ml 了香酪、0. 32mg/ml廢香酬的對(duì)照品溶液。
[0066] (4)檢測(cè)
[0067] 用氣相色譜儀對(duì)溶液和供試品溶液進(jìn)行檢測(cè)分析，計(jì)算，即得。
[0068] 色譜條件及系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)；HP-INNOWaX型號(hào)色譜柱（30m*0. 32mm*0. 25um);進(jìn) 樣口溫度為200°C ;檢測(cè)器溫度為250°C ;進(jìn)樣量化1 ;分流比為2:1 ;載氣為氮?dú)?，流速?1. 3ml/min，氮?dú)饬魉贋?0ml/min，氨氣流速為40ml/min，空氣流速為400ml/min ;分流進(jìn) 樣，分流比為2:1 ;進(jìn)樣口溫度為200°C ;檢測(cè)器為FID氨火焰離子化檢測(cè)器，檢測(cè)溫度為 250°C ;理論板數(shù)按蒙計(jì)算應(yīng)不低于2500。
[0069] 柱升溫程序；初始溫度為75°C，W每分鐘2°C的速率升溫至110。保持10分鐘； W每分鐘5°C的速率升溫至200°C，保持20分鐘。
[0070] 表1因素水平表
[0071]

【權(quán)利要求】
1. 一種麝香解痛膏的質(zhì)量檢測(cè)方法，其特征在于，包括如下步驟： A、 內(nèi)標(biāo)溶液的制備 以萘為內(nèi)標(biāo)物，用有機(jī)溶劑溶解，制備制成〇. 5mg/ml內(nèi)標(biāo)溶液； B、 對(duì)照品溶液的制備 分別取樟腦、薄荷腦、冰片、桂皮醛、丁香酚、麝香酮標(biāo)準(zhǔn)品，用有機(jī)溶劑作溶劑，稀釋 配制成混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，然后加入步驟A制備的內(nèi)標(biāo)溶液，配制成濃度為0.6mg/ml樟腦、 0? 25mg/ml 薄荷腦、1. 6mg/ml 龍腦、0? 20mg/ml 桂皮醛、0? 2mg/ml 丁香酷、0? 32mg/ml 麝香酮 的對(duì)照品洛液； C、 供試品溶液的制備 取麝香解痛膏數(shù)片置于蒸餾提取裝置中，用水蒸氣加熱、提取樟腦、薄荷腦、冰片、桂皮 醛、丁香酚、麝香酮這6個(gè)待測(cè)目標(biāo)成分，在蒸餾提取裝置中加入有機(jī)溶劑，溶解、收集上述 提取到的待測(cè)目標(biāo)成分；再加入步驟A制備的內(nèi)標(biāo)溶液，用有機(jī)溶劑定容后得到供試品溶 液；其中，所述的蒸餾提取裝置由鐵架臺(tái)、帶有圓底燒瓶的電熱套加熱裝置、一端接有漏斗 的U型冷凝管組成，其中圓底燒瓶通過鐵架臺(tái)固定設(shè)于電熱套上方，并通過連通裝置與U型 冷凝管的另一端連接，冷凝管接有冷水可以循環(huán)流動(dòng)； D、 檢測(cè) 用氣相色譜儀對(duì)溶液和供試品溶液進(jìn)行檢測(cè)分析，計(jì)算，即得。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的麝香解痛膏的質(zhì)量檢測(cè)方法，其特征在于，所述步驟A、步驟 B和步驟C中使用的有機(jī)溶劑選自正己烷、氯仿、二氯甲烷中的一種或幾種。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的麝香解痛膏的質(zhì)量檢測(cè)方法，其特征在于，所述步驟A、 步驟B和步驟C中使用的有機(jī)溶劑為正己烷。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的麝香解痛膏的質(zhì)量檢測(cè)方法，其特征在于，所述步驟C中供試 品溶液的制備具體步驟如下： 取麝香解痛膏50片，去襯蓋，稱重，剪碎至約0. 5cm*0. 5cm，混勾，取相當(dāng)于3-5片的重 量，精密稱定，置于圓底燒瓶，加入10_40ml蒸餾水覆蓋膏片，浸泡，在U型管中加入步驟A 所用的有機(jī)溶劑10-80ml，再用電熱套加熱2-6小時(shí)，蒸餾、提取待測(cè)目標(biāo)成分，得提取液； 將上述提取液移至漏斗，分取有機(jī)層，用鋪有無水硫酸鈉的漏斗濾過，再稱定重量，用步驟A 所用的有機(jī)溶劑補(bǔ)足減失的重量，最后加入步驟A制備的內(nèi)標(biāo)溶液5ml，搖勻，得到供試品 溶液。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的麝香解痛膏的質(zhì)量檢測(cè)方法，其特征在于，步驟D氣相色譜儀 的檢測(cè)條件具體如下： 色譜條件及系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)：以聚乙二醇20000毛細(xì)管柱為色譜柱；進(jìn)樣口溫度為 200°C ;檢測(cè)器為FID氫火焰離子化檢測(cè)器，檢測(cè)器溫度為250°C ;進(jìn)樣量2ul ;載氣為氮?dú)猓?流速為1. 3ml/min，氮?dú)饬魉贋?0ml/min，氫氣流速為40ml/min，空氣流速為400ml/min ;分 流進(jìn)樣，分流比為2:1 ;理論板數(shù)按萘計(jì)算不低于2500 ; 柱升溫程序：初始溫度為75°C，以每分鐘3°C的速率升溫至120°C，保持15分鐘；以每 分鐘10 °C的速率升溫至200 °C，保持20分鐘。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1或5所述的麝香解痛膏的質(zhì)量檢測(cè)方法，其特征在于，所述的色譜柱 為HP-INNOWaX型號(hào)色譜柱，其柱長為30m，內(nèi)徑為0? 32臟，膜厚度為0? 25um。
7.根據(jù)權(quán)利要求1或2或4或5所述的麝香解痛膏的質(zhì)量檢測(cè)方法，其特征在于，包括 如下步驟： A、 內(nèi)標(biāo)溶液的制備 以萘為內(nèi)標(biāo)物，用有機(jī)溶劑溶解，制備制成〇. 5mg/ml內(nèi)標(biāo)溶液； B、 對(duì)照品溶液的制備 分別取樟腦、薄荷腦、冰片、桂皮醛、丁香酚、麝香酮標(biāo)準(zhǔn)品，用有機(jī)溶劑作溶劑，稀釋 配制成混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，然后加入步驟A制備的內(nèi)標(biāo)溶液，配制成濃度為0.6mg/ml樟腦、 0? 25mg/ml 薄荷腦、1. 6mg/ml 龍腦、0? 20mg/ml 桂皮醛、0? 2mg/ml 丁香酷、0? 32mg/ml 麝香酮 的對(duì)照品洛液； C、 供試品溶液的制備 取麝香解痛膏50片，去襯蓋，稱重，剪碎至約0. 5cm*0. 5cm，混勾，取相當(dāng)于5片的重 量，精密稱定，置于圓底燒瓶，加入40ml蒸餾水覆蓋膏片，浸泡，在U型管中加入步驟正己 烷60ml，再用電熱套加熱4小時(shí)，蒸餾、提取待測(cè)目標(biāo)成分，得提取液；將上述提取液移至漏 斗，分取有機(jī)層，用鋪有無水硫酸鈉的漏斗濾過，再稱定重量，用正己烷補(bǔ)足減失的重量，最 后加入步驟A制備的內(nèi)標(biāo)溶液5ml，搖勻，得到供試品溶液；其中，所述的蒸餾提取裝置由由 鐵架臺(tái)、帶有圓底燒瓶的電熱套加熱裝置、一端接有漏斗的U型冷凝管組成，其中圓底燒瓶 通過鐵架臺(tái)固定設(shè)于電熱套上方，并通過連通裝置與U型冷凝管的另一端連接，冷凝管接 有冷水可以循環(huán)流動(dòng)； D、 檢測(cè) 用氣相色譜儀對(duì)溶液和供試品溶液進(jìn)行檢測(cè)分析，計(jì)算，即得； 其中，色譜條件及系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)：以聚乙二醇20000毛細(xì)管柱為色譜柱；進(jìn)樣口溫 度為20(TC ;檢測(cè)器為FID氫火焰離子化檢測(cè)器，檢測(cè)器溫度為250°C ;進(jìn)樣量2ul ;載氣為 氮?dú)?，流速?. 3ml/min，氮?dú)饬魉贋?0ml/min，氫氣流速為40ml/min，空氣流速為400ml/ min ;分流進(jìn)樣，分流比為2:1 ;理論板數(shù)按萘計(jì)算不低于2500 ; 柱升溫程序：初始溫度為75°C，以每分鐘3°C的速率升溫至120°C，保持15分鐘；以每 分鐘10 °C的速率升溫至200 °C，保持20分鐘； 色譜柱選自HP-INNOWaX型號(hào)色譜柱，其柱長為30m，內(nèi)徑為0? 32mm，膜厚度為0? 25um。
【文檔編號(hào)】G01N30/02GK104502476SQ201410782394
【公開日】2015年4月8日 申請(qǐng)日期:2014年12月17日 優(yōu)先權(quán)日:2014年12月17日
【發(fā)明者】吳華鈴, 金漢臺(tái), 何厚洪, 印曉紅, 陳卿, 姚建標(biāo), 王建方, 閔會(huì), 胡江寧, 呂麗麗 申請(qǐng)人:浙江康恩貝中藥有限公司