用于檢測氯霉素的免疫抗原和包被抗原的制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開一種用于檢測氯霉素的免疫抗原和包被抗原的制備，其特征在于：采用活潑硫酯法，將氯霉素半抗原與載體蛋白進行偶聯(lián)，制備氯霉素免疫抗原和包被抗原；所述氯霉素半抗原通過縮醛法為氯霉素引入間隔臂制備而成。本發(fā)明通過優(yōu)化偶聯(lián)技術(shù)路線，以達到結(jié)構(gòu)優(yōu)化，提高抗體質(zhì)量，從而進一步增加氯霉素免疫膠體金快速檢測的靈敏度和特異性的免疫抗原和包被抗原。
【專利說明】用于檢測氯霉素的免疫抗原和包被抗原的制備
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及食品、化妝品中氯霉素檢測【技術(shù)領(lǐng)域】，尤其是指用于檢測氯霉素的免疫抗原和包被抗原的制備。
【背景技術(shù)】
[0002]氯霉素是一種廣譜抗生素，其抗菌效果好，價格低廉，曾廣泛應(yīng)用于預(yù)防和治療動物疾病。然而氯霉素具有嚴(yán)重的毒副作用，會引起動物機體正常菌群失調(diào)，同時可能引起人的再生障礙性貧血，粒狀白細(xì)胞缺乏癥等疾病。
[0003]歐盟2377/90/EEC法規(guī)、美國FDA等均規(guī)定氯霉素不能任何動物制食品，以及動物的飼料和生長環(huán)境中使用。2002年我國農(nóng)業(yè)部發(fā)布235號公告《動物性食品中獸藥最高殘留量》，規(guī)定氯霉素及其鹽、酯(包括:琥珀氯霉素)在所有食品動物、所有可食組織中不得檢出。
[0004]氯霉素因其抗菌消炎作用，對皮膚炎癥有一定療效，因此常被添加在祛痘除螨類化妝品中。但由于人體臉部皮膚柔嫩，黏膜血管豐富，對藥物吸收非?？?，氯霉素會被迅速吸收，從而破壞皮膚表面的正常菌群，導(dǎo)致皮疹、速發(fā)性過敏等不良反應(yīng)。如果長期使用含有氯霉素的化妝品，還有可能導(dǎo)致內(nèi)臟損傷。因此歐盟化妝品法規(guī)(EC) 1223/2009和我國衛(wèi)生部頒布的《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》均將包括氯霉素在內(nèi)的抗生素類化合物列在“禁用清單”中。
[0005]對氯霉素的檢測方法有微生物檢測法、色譜分析法、免疫檢測法。微生物檢測法靈敏度低；色譜分析法樣品前處理麻煩，費用高；免疫分析法具有快速、靈敏度高、高通量的特點。其中免疫分析方法有酶聯(lián)免疫法、膠體金免疫層析技術(shù)等。其中酶聯(lián)免疫分析法操作相對繁瑣，對操作人員的專業(yè)知識要求較高，相比之下，膠體金免疫層析技術(shù)基于肉眼水平的檢測，不需任何儀器設(shè)備和試劑，比酶聯(lián)免疫法省略了加顯色劑和終止液的步驟，更簡化的操作，體積小，易攜帶，幾分鐘就可用肉眼觀察到顏色鮮明的實驗結(jié)果，并可保存實驗結(jié)果。
[0006]現(xiàn)有膠體金免疫層析技術(shù)在氯霉素檢測的靈敏度和特異性還是存在缺陷，因而，有必要在現(xiàn)有技術(shù)上，從優(yōu)化免疫抗原、包被抗原的結(jié)構(gòu)及偶聯(lián)技術(shù)角度出發(fā)，提高抗體的特異性、親和力，從而增加氯霉素免疫膠體金快速檢測的靈敏度和特異性。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種通過優(yōu)化偶聯(lián)技術(shù)路線，以達到結(jié)構(gòu)優(yōu)化，提高抗體質(zhì)量，從而進一步增加氯霉素免疫膠體金快速檢測的靈敏度和特異性的免疫抗原和包被抗原。
[0008]為解決上述技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案:一種用于檢測氯霉素的免疫抗原和包被抗原的制備，其特征在于:采用活潑硫酯法，將氯霉素半抗原與載體蛋白進行偶聯(lián)，制備氯霉素免疫抗原和包被抗原；所述氯霉素半抗原通過縮醛法為氯霉素引入間隔臂制備而成，具有式(I)所示結(jié)構(gòu)，
[0009]
【權(quán)利要求】
1.一種用于檢測氯霉素的免疫抗原和包被抗原的制備，其特征在于:采用活潑硫酯法，將氯霉素半抗原與載體蛋白進行偶聯(lián)，制備氯霉素免疫抗原和包被抗原；所述氯霉素半抗原通過縮醛法為氯霉素引入間隔臂制備而成，具有式(I)所示結(jié)構(gòu)，
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于檢測氯霉素的免疫抗原和包被抗原的制備，其特征在于:所述載體蛋白是指常規(guī)的可作為免疫載體使用的可溶性蛋白質(zhì)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于檢測氯霉素的免疫抗原和包被抗原的制備，其特征在于:所述載體蛋白為牛血清白蛋白和/或卵清蛋白和/或血藍蛋白。
【文檔編號】G01N33/68GK103869083SQ201410114776
【公開日】2014年6月18日 申請日期:2014年3月25日 優(yōu)先權(quán)日:2014年3月25日
【發(fā)明者】潘嘉慧, 田峻, 趙亮亮, 沈國權(quán), 朱海云, 楊輝 申請人:佛山市質(zhì)量計量監(jiān)督檢測中心