定量測(cè)定人體血液白蛋白含量的干化學(xué)試紙的制作方法
【專(zhuān)利摘要】本實(shí)用新型屬于體外臨床診斷試劑【技術(shù)領(lǐng)域】，具體為一種定量測(cè)定人體血液白蛋白含量的干化學(xué)試紙。該試紙為長(zhǎng)形條，一端為測(cè)試區(qū)，另一端為手持端；其構(gòu)成從上到下依次是上支持層、擴(kuò)散層、反應(yīng)層和下支持層；其中，在上、下支持層相應(yīng)于擴(kuò)散層和反應(yīng)層的區(qū)域分別開(kāi)有圓孔，分別為加樣孔和測(cè)試孔；反應(yīng)層包被有測(cè)定白蛋白所需要試劑。測(cè)試樣本從加樣孔處滴加到擴(kuò)散層上，樣本擴(kuò)散至反應(yīng)層后，樣本中的白蛋白與反應(yīng)層中的試劑發(fā)生顯色反應(yīng)，通過(guò)使用反射式光度計(jì)從測(cè)試孔處測(cè)試反應(yīng)層上的顏色。該試紙條用于定量測(cè)定人體血液中白蛋白的含量，為疾病的診斷提供依據(jù)，適合醫(yī)院急診室推廣使用。
【專(zhuān)利說(shuō)明】定量測(cè)定人體血液白蛋白含量的干化學(xué)試紙
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本實(shí)用新型屬于體外臨床診斷試劑【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種適用于快速測(cè)定人體白蛋白含量的試紙條。
【背景技術(shù)】
[0002]白蛋白分子量為66300，在人體由肝臟合成，是唯一一種不含碳水化合物的血漿蛋白質(zhì)。白蛋白是血漿中多種物質(zhì)重要的結(jié)合物與運(yùn)輸?shù)鞍?，并且是維持血漿滲透壓的主要組分。在臨床檢驗(yàn)中，血液白蛋白通常作為肝功能異常、低蛋白飲食、腎病綜合征等癥狀的診斷指標(biāo)之一。血液中白蛋白濃度也可視為是個(gè)體健康和營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)的指標(biāo)，特別是對(duì)老年和慢性病患者。
[0003]經(jīng)過(guò)多年的發(fā)展，已形成多種測(cè)定白蛋白的方法，如鹽析法、色氨酸法、染料結(jié)合法等。其中染料結(jié)合法測(cè)定白蛋白操作更容易、方法特異性高，現(xiàn)今被大多數(shù)臨床實(shí)驗(yàn)室所使用。
[0004]臨床實(shí)驗(yàn)室所使用的白蛋白測(cè)定試劑類(lèi)型可以分為兩類(lèi)，一類(lèi)是液體試劑，另一類(lèi)為干化學(xué)試劑。干化學(xué)試劑與液體試劑相比具有操作簡(jiǎn)便、測(cè)定快速等優(yōu)點(diǎn)，在醫(yī)院急診檢驗(yàn)科得到了比較廣泛的應(yīng)用。
[0005]目前國(guó)內(nèi)醫(yī)院使用的測(cè)定血液白蛋白干化學(xué)試劑均為進(jìn)口產(chǎn)品，其中以美國(guó)強(qiáng)生和日本富士產(chǎn)品為主。強(qiáng)生和富士的干化學(xué)產(chǎn)品是將膠卷生產(chǎn)領(lǐng)域中的涂層技術(shù)運(yùn)用到了臨床診斷領(lǐng)域，其將測(cè)定反應(yīng)中所需的各種試劑按照反應(yīng)的先后次序自下向上分別均勻的分層涂布在透明塑料薄片上。一方面，這些產(chǎn)品生產(chǎn)工藝比較復(fù)雜，對(duì)生產(chǎn)設(shè)備要求高，生產(chǎn)成本較高，同時(shí)需配備大型的測(cè)試儀器，價(jià)格昂貴，致使一些中小醫(yī)院，特別是社區(qū)醫(yī)院難以接受。另一方面，由于此類(lèi)干化學(xué)試劑所使用材料等原因，日常需要冷藏保存，使用時(shí)需要提前放置室溫平衡半小時(shí)后才可以測(cè)試，導(dǎo)致使用不方便。另外，還存在測(cè)試速度較慢、測(cè)試樣本量較大等缺陷，如強(qiáng)生白蛋白干化學(xué)試劑測(cè)試時(shí)間需要2.5分鐘，富士白蛋白干化學(xué)試劑測(cè)試樣本量需要10微升。
[0006]本實(shí)用新型采用優(yōu)選的試紙材料，優(yōu)化反應(yīng)配方，制作出一種生產(chǎn)工藝簡(jiǎn)單，可室溫保存，測(cè)試樣本量較小，測(cè)試速度更快的白蛋白干化學(xué)試紙條。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]本實(shí)用新型的目的在于提供一種使用方便、測(cè)試樣本量少、測(cè)試快速的白蛋白測(cè)定干化學(xué)試紙條。
[0008]本實(shí)用新型提供的定量測(cè)定人體血液白蛋白含量的干化學(xué)試紙，其為長(zhǎng)形條，一端為測(cè)試區(qū)，另一端為手持端。測(cè)試區(qū)的構(gòu)成從上到下依次是上支持層、擴(kuò)散層、反應(yīng)層和下支持層；其中，在上支持層、下支持層中對(duì)應(yīng)于擴(kuò)散層和反應(yīng)層的區(qū)域位置分別開(kāi)有圓孔，上支持層上的圓孔為加樣孔，下支持層上的圓孔為測(cè)試孔；所述反應(yīng)層包被有測(cè)定白蛋白所需要試劑。[0009]使用時(shí)，測(cè)試樣本從加樣孔處滴加到擴(kuò)散層上，擴(kuò)散層的作用是將樣本快速均勻的分布到反應(yīng)層，樣本擴(kuò)散至反應(yīng)層后，樣本中的白蛋白與反應(yīng)層中的試劑發(fā)生顯色反應(yīng)，顏色的深淺與樣本中白蛋白的濃度成正比，通過(guò)使用反射式光度計(jì)從測(cè)試孔處測(cè)試反應(yīng)層上的顏色，即可以到達(dá)定量測(cè)定樣本中白蛋白濃度的目的。
[0010]本實(shí)用新型中，所述的上、下支持層可采用聚對(duì)苯二甲酸乙二醇酯、聚苯乙烯或聚氯乙烯等材料，其中以聚對(duì)苯二甲酸乙二醇酯材料為最佳。上、下支持層起到的主要是支撐作用，其可以通過(guò)膠水粘合在一起。支持層可以分為手持區(qū)和測(cè)試區(qū)，測(cè)試區(qū)為試紙條的主體部分。在測(cè)試區(qū)域，擴(kuò)散層和反應(yīng)層材料以上下疊合的方式夾在上、下支持層中間，并且上、下支持層在此區(qū)域開(kāi)有圓孔，分別為加樣孔和測(cè)試孔。
[0011]本實(shí)用新型中，為了減小測(cè)試樣本的用量，擴(kuò)散層的材料不適合使用對(duì)測(cè)試樣本有吸附作用的材料，如濾紙、無(wú)紡布、合成膜等，要能夠保證測(cè)試樣本幾乎全部擴(kuò)散至反應(yīng)層而不被擴(kuò)散層吸附。合適的擴(kuò)散層材料可以選用尼龍、聚乙烯或聚丙烯等，其中以網(wǎng)布形式最佳。為了使樣本能快速均勻的擴(kuò)散至反應(yīng)層，擴(kuò)散層材料可以使用表面活性劑或親水物質(zhì)進(jìn)行親水性處理，表面活性劑為非離子表明活性劑，如聚山梨酯或聚乙二醇辛基苯基醚等，親水物質(zhì)如羥乙基纖維素、聚乙烯吡咯烷酮或醋酸纖維素等，其中優(yōu)選非離子表面活性劑?？刹捎媒莸姆绞綄?duì)擴(kuò)散層進(jìn)行處理。
[0012]本實(shí)用新型中，所述的反應(yīng)層包被的試劑包括染料、緩沖液、表面活性劑等成分。當(dāng)樣本擴(kuò)散至反應(yīng)層時(shí)，樣本中的白蛋白可以與包被在反應(yīng)層上的染料在酸性環(huán)境以及表面活性劑的作用下進(jìn)行顯示反應(yīng)，顏色逐漸由黃色變?yōu)樗{(lán)色，最終反應(yīng)顏色的深淺取決于樣本中白蛋白的濃度。研究表明，反應(yīng)所需要的樣本量和反應(yīng)速度與反應(yīng)層所使用的膜材料以及反應(yīng)層試劑含量有關(guān)。本實(shí)用新型優(yōu)選膜材料以及優(yōu)化反應(yīng)層試劑含量以達(dá)到測(cè)試快速和測(cè)試樣本量小的目的。其中反應(yīng)層膜材料優(yōu)選聚砜、聚醚砜合成膜，孔徑大小為
0.2?15Mm，厚度為50-250Mm。染料為溴甲酚綠或溴甲酚紫，含量為0.05%?1%，所使用的緩沖液為丁二酸緩沖液，PH為4.2，濃度為0.lmol/L?lmol/L，表面活性劑為聚氧乙烯月桂醚，含量為1%?5%。
[0013]為定量測(cè)定血液中白蛋白含量，可使用與本發(fā)明干化學(xué)試紙條配套的反射式光度計(jì)進(jìn)行測(cè)試。該儀器可以將反應(yīng)溫度控制在37±0.5°C，測(cè)定波長(zhǎng)為630nm，達(dá)到設(shè)定反應(yīng)時(shí)間后，儀器自動(dòng)讀取反射光密度，并通過(guò)內(nèi)置的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)將光信號(hào)轉(zhuǎn)化為白蛋白濃度，自動(dòng)報(bào)告和儲(chǔ)存測(cè)試結(jié)果，并可打印。
【專(zhuān)利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0014]圖1為本實(shí)用新型的干化學(xué)試紙結(jié)構(gòu)圖示。
[0015]圖2為本實(shí)用新型的干化學(xué)試紙結(jié)構(gòu)解析圖。
[0016]圖中標(biāo)號(hào):1為測(cè)試區(qū)，2為手持區(qū)，3為上支持層，4為下支持層，5為擴(kuò)散層，6為反應(yīng)層，7為加樣孔，8為測(cè)試孔。
【具體實(shí)施方式】
[0017]實(shí)施例1:
[0018]上、下支持層材料采用聚對(duì)苯二甲酸乙二醇酯材質(zhì),厚度為0.18mm,長(zhǎng)度為20cm,寬度為20cm。其中上下支持層單面附有粘膠。分別在一端打出加樣孔和測(cè)試孔，孔直徑為4 mm,孔距 8mm η
[0019]擴(kuò)散層的制備:擴(kuò)散層采用尼龍網(wǎng)布，將網(wǎng)布在1%的聚乙二醇辛基苯基醚水溶液中浸泡5分鐘，在45度烘箱中干燥30分鐘，將處理好的網(wǎng)布黏貼在上支持層的加樣孔位置。
[0020]反應(yīng)層的制備:反應(yīng)層采用聚砜膜，將聚砜膜黏貼在下支持層的測(cè)試孔位置。將配制好的反應(yīng)液滴加到聚砜膜上，5 μ I/孔。將包被過(guò)試劑的反應(yīng)層放入45度干燥箱中，60分鐘后取出，將其與制備好的擴(kuò)散層對(duì)齊邊緣粘合在一起。用滾刀機(jī)其切割成8mm寬的試紙條，放入干燥筒。
[0021]反應(yīng)液試劑的配方如下:
[0022]丁二酸緩沖液0.5mol/l
[0023]溴甲酚綠0.2%
[0024]聚氧乙烯月桂醚3%
[0025]測(cè)試不同濃度的白蛋白樣本，將5μ I測(cè)試樣本滴加于加樣孔，用反射式光度計(jì)進(jìn)行測(cè)定，測(cè)試時(shí)間為I分鐘。
[0026]
【權(quán)利要求】
1.一種定量測(cè)定人體血液白蛋白含量的干化學(xué)試紙，其特征在于為長(zhǎng)形條，一端為測(cè)試區(qū)，另一端為手持端；測(cè)試區(qū)的構(gòu)成從上到下依次是上支持層、擴(kuò)散層、包被有測(cè)定白蛋白所需要試劑的反應(yīng)層和下支持層；其中，在上支持層、下支持層中對(duì)應(yīng)于擴(kuò)散層和反應(yīng)層的區(qū)域位置分別開(kāi)有圓孔，上支持層上的圓孔為加樣孔，下支持層上的圓孔為測(cè)試孔。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的干化學(xué)試紙，其特征在于所述反應(yīng)層膜選用聚砜或聚醚砜合成膜，該膜的孔徑大小為0.2?15Mm，厚度為50-250Mm。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的干化學(xué)試紙，其特征在于所述擴(kuò)散層采用尼龍、聚乙烯或聚丙烯的網(wǎng)布形式。
【文檔編號(hào)】G01N21/78GK203758917SQ201320792112
【公開(kāi)日】2014年8月6日 申請(qǐng)日期:2013年12月3日 優(yōu)先權(quán)日:2013年12月3日
【發(fā)明者】寧紹華, 田漪, 朱世成, 李基
申請(qǐng)人:上?？迫A生物工程股份有限公司