淋球菌聯(lián)檢卡的制作方法
【專利摘要】本實(shí)用新型公開了一種淋球菌聯(lián)檢卡，包括卡體，卡體上間隔設(shè)置有至少兩個樣品槽?？w上設(shè)置有密封樣品槽的上蓋，上蓋為扣壓在卡體上的蓋板或粘貼在卡體表面的密封片。為方便撕開密封片，在密封片的一側(cè)邊延伸設(shè)置有拉片。樣品槽底部設(shè)置有脯氨酸氨基肽酶試劑、1.2丙二醇氧化還原酶試劑、細(xì)胞色素C氧化酶試劑或過氧化物酶試劑。樣品槽的橫斷面呈圓形、方形、三角形或花瓣形，當(dāng)然也可以為其他形狀。本實(shí)用新型的優(yōu)點(diǎn)在于結(jié)構(gòu)簡單，使用方便，檢測人員無需專門培訓(xùn)，檢出率高。根據(jù)聯(lián)檢卡上開設(shè)的樣品槽數(shù)量，可以檢測兩個到四個指標(biāo)（檢測指標(biāo)越多，檢準(zhǔn)率則越高），只要檢測的指標(biāo)同時陽性即可判斷標(biāo)本為陽性，非常直觀。
【專利說明】淋球菌聯(lián)檢卡
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本實(shí)用新型涉及淋球菌的檢測裝置，尤其是涉及一種檢測率高且準(zhǔn)確的淋球菌聯(lián)檢卡。
【背景技術(shù)】
[0002]淋病是國內(nèi)外最常見的性傳播疾病(STD)之一,主要表現(xiàn)為泌尿生殖系統(tǒng)化膿性感染，其病原體是淋病奈瑟氏菌(簡稱淋球菌)。成人感染初期，一般引起男性尿道炎、女性尿道炎與宮頸炎，若未經(jīng)治療，可擴(kuò)展到兩性生殖系統(tǒng)，引起慢性感染，也是導(dǎo)致不育及流產(chǎn)的原因之一；新生兒經(jīng)產(chǎn)道感染可引起淋菌性結(jié)膜炎，并可導(dǎo)致失明。
[0003]人類是淋球菌唯一的自然宿主，且對淋球菌無自然免疫力，病后免疫力弱，故不能防止再感染。
[0004]淋球菌對柱狀上皮細(xì)胞和移行上皮細(xì)胞有特別的親和力。男女性尿道，女性宮頸覆蓋柱狀上皮細(xì)胞和移行上皮細(xì)胞，故易受淋球菌侵襲。淋球菌感染后約有20%的男性無任何癥狀，40%-60%的女性患者無癥狀，因此，僅憑有無臨床癥狀作為判斷是否感染淋球菌的依據(jù)，使得漏診率極高，尤其是女性，所以建立準(zhǔn)確可靠地檢測方法十分必要。
[0005]目前，淋球菌的檢測方法主要有以下幾種:一、直接涂片染色法，取患者膿性分泌物涂片，革蘭氏染色鏡檢，如在多形核白細(xì)胞內(nèi)發(fā)現(xiàn)革蘭氏陰性雙球菌即為陽性。這種方法對于男性尿道分泌物膿性標(biāo)本易于觀察，檢出率達(dá)到90%以上；但女性標(biāo)本檢出率僅為20%-30%，這是因?yàn)榕苑置谖镏泻猩掀ぜ?xì)胞、白細(xì)胞及多種微生物，淋球菌形態(tài)微小(0.6 μ m -0.8 μ m),又常位于白細(xì)胞內(nèi)部，染色鏡檢不易觀察，容易出現(xiàn)假陽性(如:卡他莫拉菌與淋球菌形態(tài)極其相似)。二、培養(yǎng)法，淋球菌培養(yǎng)是目前世界衛(wèi)生組織認(rèn)定推薦的篩選淋球菌的唯一方法，臨床主要采用革蘭氏染色鏡檢與培養(yǎng)法結(jié)合檢測淋球菌，且以培養(yǎng)法為金標(biāo)準(zhǔn)。淋球菌標(biāo)本取后應(yīng)立即接種于預(yù)溫培養(yǎng)基，置5%-10%C02環(huán)境中，35°C -37°C培養(yǎng)24h-48h，觀察有無可疑菌落并進(jìn)行涂片染色及鑒定試驗(yàn)。由于淋球菌對環(huán)境要求較高，抵抗力弱，不耐干燥和寒冷，在取材、保存、轉(zhuǎn)接過程中容易死亡，所以培養(yǎng)法有部分漏檢,檢出率為30%-40%。三、免疫層析法，用于檢測淋球菌的有膠體金、乳膠免疫層析，這類方法直接檢測淋球菌抗原，抗原抗體結(jié)合直接顯色，無信號放大過程，這就要求檢測標(biāo)本中的抗原含量較高，當(dāng)抗原含量低于一定水平時，可能造成漏檢。四、核酸檢測法，用于檢測淋球菌的有聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Polymerase Chain Reaction,PCR )、核酸探針、連接酶鏈(LigaseChain Reaction, LCR)反應(yīng)等方法，這類方法檢測的靈敏度高，特異性好，但操作復(fù)雜，對操作者技術(shù)水平要求較高，試劑昂貴，難以開展。五、生化酶法，用酶法檢測淋球菌試劑較少，主要是氧化酶試劑、發(fā)泡試劑等方法，氧化酶試劑主要用于初篩或培養(yǎng)后確認(rèn)；發(fā)泡試劑對于男性急性淋病檢測準(zhǔn)確可靠，但對于女性分泌物標(biāo)本假陽性較多。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本實(shí)用新型的目的在于提供一種結(jié)構(gòu)簡單、檢測準(zhǔn)確度高、使用方便的淋球菌聯(lián)檢卡。
[0007]為實(shí)現(xiàn)上述目的，本實(shí)用新型可采取下述技術(shù)方案:
[0008]本實(shí)用新型所述的淋球菌聯(lián)檢卡，包括卡體，其特征在于:所述卡體上間隔設(shè)置有至少兩個樣品槽；所述卡體上設(shè)置有密封樣品槽的上蓋，所述上蓋為扣壓在卡體上的蓋板或粘貼在卡體表面的密封片；所述樣品槽底部設(shè)置有脯氨酸氨基肽酶試劑、1.2丙二醇氧化還原酶試劑、細(xì)胞色素C氧化酶試劑或過氧化物酶試劑；所述脯氨酸氨基肽酶試劑、1.2丙二醇氧化還原酶試劑、細(xì)胞色素C氧化酶試劑或過氧化物酶試劑為液體試劑或/和固體試劑。
[0009]所述固體試劑為包被在樣品槽底壁上的固化試劑或包被在樣品槽底部試劑墊上的固化試劑。
[0010]所述樣品槽的橫斷面呈圓形、方形、三角形或花瓣形。
[0011 ] 所述密封片的一側(cè)邊延伸設(shè)置有拉片。
[0012]本實(shí)用新型的優(yōu)點(diǎn)在于結(jié)構(gòu)簡單，使用方便，檢測人員無需專門培訓(xùn)，檢出率高。利用淋球菌所含有的脯氨酸氨基肽酶、1，2-丙二醇氧化還原酶、細(xì)胞色素C氧化酶和過氧化物酶酶活檢測，在樣品槽中分別放入脯氨酸氨基肽酶、1，2-丙二醇氧化還原酶、細(xì)胞色素C氧化酶或過氧化物酶進(jìn)行測試:脯氨酸氨基肽酶可分解相應(yīng)的底物，如果有顏色變化則該指標(biāo)為陽性，反之為陰性；1，2-丙二醇氧化還原酶在1，2-丙二醇和NAD同時存在時，氧化底物并還原NAD，生成NADH的電子經(jīng)1- PMS轉(zhuǎn)移到四唑鹽生成紫色的甲臢，如果生成紫色則該指標(biāo)為陽性，反之為陰性；氧化酶首先使細(xì)胞色素C氧化，再由氧化型細(xì)胞色素C使對苯二胺氧化，生成有色的醌類化合物，如果有顏色變化則該指標(biāo)為陽性，反之為陰性；過氧化物酶，能催化過氧化物氫成為水和原子態(tài)氧，繼而形成氧分子，出現(xiàn)氣泡，如果有顏色生成同時伴有大量氣泡生成為陽性，反之，無顏色變化或無大量氣泡為陰性。
[0013]使用時，每個樣品槽中設(shè)置一種試劑，取患者分泌物標(biāo)本置于加樣管中，加入樣品處理液充分混勻，將其分別加入淋球菌檢測卡的各樣品槽內(nèi)，振蕩混勻反應(yīng)一段時間后再分別加入相應(yīng)的檢測試劑，使標(biāo)本中待測物分別與樣品槽中的試劑以及外加的檢測試劑發(fā)生反應(yīng)，即可產(chǎn)生肉眼可見的顏色變化，然后依次讀出各樣品槽內(nèi)的檢測結(jié)果。根據(jù)聯(lián)檢卡上開設(shè)的樣品槽數(shù)量，可以檢測兩個指標(biāo)或三個指標(biāo)或四個指標(biāo)(檢測指標(biāo)越多，檢準(zhǔn)率則越高)，只要檢測的指標(biāo)同時陽性即可判斷標(biāo)本為陽性，非常直觀。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0014]圖1是本實(shí)用新型實(shí)施例1的結(jié)構(gòu)示意圖。
[0015]圖2是圖1的A-A向視圖。
[0016]圖3是本實(shí)用新型實(shí)施例2的結(jié)構(gòu)示意圖。
[0017]圖4是圖3的B-B向視圖。
[0018]圖5是本實(shí)用新型實(shí)施例3的結(jié)構(gòu)示意圖。
[0019]圖6是本實(shí)用新型實(shí)施例4的結(jié)構(gòu)示意圖。
[0020]圖7是本實(shí)用新型實(shí)施例5的結(jié)構(gòu)示意圖。
【具體實(shí)施方式】[0021]實(shí)施例1:
[0022]如圖1、2所示，本實(shí)用新型所述的淋球菌聯(lián)檢卡，包括卡體1，在卡體I上間隔設(shè)置有三個橫斷面為圓形的樣品槽2，在每個樣品槽2底部放置有一種液體試劑5，該液體試劑5為脯氨酸氨基肽酶、1.2丙二醇氧化還原酶、細(xì)胞色素C氧化酶或過氧化物酶中的任意一種，卡體I表面的蓋板3上的三個定位凸臺分別密封扣合在樣品槽2的槽口處。
[0023]使用時，將蓋板3打開，通過向樣品槽2中加入待測樣本與檢測測試反應(yīng)后分別觀察三個樣品槽中的顏色變化即可判斷出三個指標(biāo)是否正常。
[0024]實(shí)施例2:
[0025]如圖3、4所示，本實(shí)用新型所述的淋球菌聯(lián)檢卡，包括卡體1，在卡體I上間隔設(shè)置有三個橫斷面為正方形的樣品槽2，在每個樣品槽2底部內(nèi)側(cè)面上包被有一種固態(tài)檢測試劑6，檢測試劑6為脯氨酸氨基肽酶、1.2丙二醇氧化還原酶、細(xì)胞色素C氧化酶或過氧化物酶中的任意一種，在卡體I的表面設(shè)置有密封樣品槽2的蓋板3。
[0026]使用時，將上蓋4打開，通過向樣品槽2中加入待測樣本與檢測測試反應(yīng)后分別觀察三個樣品槽中的顏色變化即可判斷出三個指標(biāo)是否正常。
[0027]實(shí)施例3:
[0028]如圖5所示，本實(shí)用新型所述的淋球菌聯(lián)檢卡，包括卡體I，在卡體I上間隔設(shè)置有三個橫斷面為三角形的樣品槽2，在每個樣品槽2底部放置有一種固化在試劑墊上的檢測試劑，檢測試劑分別為脯氨酸氨基肽酶、1.2丙二醇氧化還原酶、細(xì)胞色素C氧化酶或過氧化物酶中的任意一種，在卡體I的表面粘貼有透明的密封片4，為便于撕下密封片4，在密封片4的一側(cè)邊延伸設(shè)置有拉片7。
[0029]使用時，手捏拉片7將密封片4撕下，通過向樣品槽2中加入待測樣本與檢測測試反應(yīng)后分別觀察三個樣品槽中的顏色變化即可判斷出三個指標(biāo)是否正常。
[0030]實(shí)施例1-3可分別檢測判斷出其中的三個指標(biāo)是否正常，臨床使用檢測率可達(dá)到90%以上。
[0031]實(shí)施例4:
[0032]當(dāng)遇到疑難雜癥，需要同時檢測四個指標(biāo)時，則聯(lián)檢卡卡體I上的樣品槽2可以設(shè)置為四個，如圖6所示，在這四個樣品槽中依次放入脯氨酸氨基肽酶、1.2丙二醇氧化還原酶、細(xì)胞色素C氧化酶和過氧化物酶檢測試劑，制造時，這些檢測試劑可以為液體試劑，也可以為固體試劑，在卡體I的表面粘貼有透明的密封片4，為便于撕下密封片4，在密封片4的一側(cè)邊延伸設(shè)置有拉片7。
[0033]使用方法同實(shí)施例1-3。
[0034]實(shí)施例5:
[0035]當(dāng)需要大批量檢測標(biāo)本時，聯(lián)檢卡卡體I上的樣品槽2可以僅設(shè)置為兩個，如圖7所示，不用設(shè)置上蓋，使用的液體試劑另放。檢測時，將脯氨酸氨基肽酶、1.2丙二醇氧化還原酶、細(xì)胞色素C氧化酶和過氧化物酶中的任意兩種液體試劑分別倒入兩個樣品槽2內(nèi)，然后再加入待測樣本與檢測測試反應(yīng)后觀察兩個樣品槽中的顏色變化判斷這兩個指標(biāo)是否正常，以此確定該標(biāo)本為陰性或陽性。對于大批量的標(biāo)本檢測，使用此聯(lián)檢卡進(jìn)行檢測，檢測效率及檢準(zhǔn)率均可滿足要求。由于聯(lián)檢卡內(nèi)不放置檢測試劑，所以結(jié)構(gòu)簡單，成本低且便于運(yùn)輸儲存。[0036]在上述實(shí)施例中，樣品槽2的橫斷面可以呈圓形、方形、三角形或花瓣形等形狀，當(dāng)然也可以呈其他常規(guī)的橢圓形等形狀，放入樣品槽內(nèi)的檢測試劑可以是液體的，也可以是固體的，甚至一個聯(lián)檢卡內(nèi)的幾個樣品槽內(nèi)放置的檢測試劑也可以是不同形態(tài)的，即固體試劑和液體試劑交叉放置，都不會影響該聯(lián)檢卡的檢測效果。
【權(quán)利要求】
1.一種淋球菌聯(lián)檢卡，包括卡體(1)，其特征在于:所述卡體(I)上間隔設(shè)置有至少兩個樣品槽(2);所述卡體(I)上設(shè)置有密封樣品槽的上蓋，所述上蓋為扣壓在卡體(I)上的蓋板(3)或粘貼在卡體(I)表面的密封片(4);所述樣品槽(2)底部設(shè)置有脯氨酸氨基肽酶試劑、1.2丙二醇氧化還原酶試劑、細(xì)胞色素C氧化酶試劑或過氧化物酶試劑；所述脯氨酸氨基肽酶試劑、1.2丙二醇氧化還原酶試劑、細(xì)胞色素C氧化酶試劑或過氧化物酶試劑為液體試劑(5)或/和固體試劑(6)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的淋球菌聯(lián)檢卡，其特征在于:所述固體試劑(6)為包被在樣品槽底壁上的固化試劑或包被在樣品槽底部試劑墊上的固化試劑。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的淋球菌聯(lián)檢卡，其特征在于:所述樣品槽(2)的橫斷面呈圓形、方形、三角形或花瓣形。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的淋球菌聯(lián)檢卡，其特征在于:所述密封片(4)的一側(cè)邊延伸設(shè)置有拉片(7)。
【文檔編號】G01N21/78GK203630045SQ201320648812
【公開日】2014年6月4日 申請日期:2013年10月21日 優(yōu)先權(quán)日:2013年10月21日
【發(fā)明者】楊紅云, 張利娟, 王莉敏, 金湘東, 呂萌, 劉志磊, 楊靜靜, 楊曉華, 耿曉東, 張碩, 付光宇, 吳學(xué)煒 申請人:鄭州安圖生物工程股份有限公司