一種檢驗五加芪粉質(zhì)量的方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種檢驗五加芪粉質(zhì)量的方法，包括對五加芪粉進行定性分析和定量檢測。與靈芪加口服液質(zhì)量檢驗方法相比，該方法使用了高效液相色譜法測定五加芪粉中的黃芪甲苷含量，并增加了總糖含量的測定方法，同時采用薄層色譜法分別檢測五加芪粉中的黃芪甲苷和異嗪皮啶。該方法專屬性、重復(fù)性、準確性良好，可用于對五加芪粉的質(zhì)量進行綜合評價，從而有效控制該產(chǎn)品的質(zhì)量，保證其臨床使用安全、有效、穩(wěn)定。
【專利說明】-種檢驗五加巧粉質(zhì)量的方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于中藥檢測【技術(shù)領(lǐng)域】，涉及一種檢驗五加茂粉質(zhì)量的方法，該方法可用 于對五加茂粉的質(zhì)量進行綜合評價。

【背景技術(shù)】
[0002] 隨著養(yǎng)殖業(yè)向集約化和工廠化發(fā)展，畜禽對病原微生物的易感性不斷增加，病害 頻繁發(fā)生，為了防治疾病，傳統(tǒng)做法是大量使用抗生素類藥物，結(jié)果使耐藥菌株不斷增多， 導(dǎo)致畜禽免疫功能急劇下降、生長受阻，抗生素的濫用還導(dǎo)致疫苗接種反應(yīng)增強，副作用加 大或使免疫接種失敗，給養(yǎng)殖業(yè)造成很大的經(jīng)濟損失。
[0003] 免疫增強劑是一類單獨或與抗原同時使用增強動物機體非特異性和特異性免疫 的物質(zhì)，目前使用的免疫增強劑種類很多，包括生物性免疫增強劑，如干擾素；化學(xué)性免疫 增強劑，如左旋咪哇等，其存在著高劑量產(chǎn)生免疫抑制或?qū)C體有害等缺點，研制開發(fā)無毒 害、作用強的新型中藥免疫增強劑已成為迫切需要。
[0004] 五加茂粉由黃茂和刺五加兩味中藥組成，處方來源于《國家中成藥標準》中的靈茂 加口服液，靈茂加口服液由靈芝、黃茂和刺五加；味中藥組成，從節(jié)約養(yǎng)殖成本上考慮去除 價格昂貴的靈芝，并通過小鼠脾臟淋己細胞增殖試驗篩選出黃茂與刺五加的最佳比例。本 處方具有補中益氣、扶正巧邪的功能，臨床用于提高機體免疫力，配合疫苗使用提高疫苗免 疫效果。臨床試驗結(jié)果表明，五加茂粉W每升水〇.2g混飲，連用7日，具有提高雞非特異性 免疫能力，提高雞新城疫、禽流感（H9)抗體水平，同時可提高雞的生產(chǎn)性能。
[0005] 五加茂粉是根據(jù)傳統(tǒng)中醫(yī)理論開發(fā)的中藥免疫增強劑，尚無質(zhì)量標準，不利于控 制其質(zhì)量，為保證臨床使用安全、有效、穩(wěn)定，有必要建立一個完善的質(zhì)量標準及其檢驗方 法。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是針對上述現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種檢驗五加茂粉 質(zhì)量的方法，通過建立其檢驗方法，可增強該藥的有效性、質(zhì)量可控性和穩(wěn)定性。
[0007] 為此，本發(fā)明提供了一種檢驗五加茂粉質(zhì)量的方法，包括對五加茂粉進行定性分 析和定量檢測，其中，對五加茂粉進行定量檢測包括檢測五加茂粉中黃茂甲巧的含量W及 五加茂粉中總糖的含量。
[0008] 根據(jù)本發(fā)明，所述五加茂粉由刺五加和黃茂組成。
[0009] 本發(fā)明中，所述五加茂粉中總糖為五加茂粉中的刺五加所含糖類成分和黃茂所含 糖類成分的總和。
[0010] 一方面，由于刺五加和黃茂都含有多糖和寡糖等糖類成分，現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明 該些多糖類和寡糖類成分均有增強免疫功能的作用。因此，檢測五加茂粉中的刺五加和黃 茂的總含糖量可W用于評價五加茂粉的質(zhì)量。
[0011] 根據(jù)本發(fā)明，采用苯酷-硫酸法檢測五加茂粉中總糖含量，包括W無水葡萄糖為 對照樣品，采用紫外-可見分光光度法，在490nm波長處測定經(jīng)苯酷-硫酸處理后的對照樣 品和五加茂粉待測樣品的吸光度，并按外標法W吸光度值計算待測樣品中的總糖含量。
[0012] 在本發(fā)明的一個具體實施例中，采用苯酷-硫酸法檢測五加茂粉中總糖含量，包 括W下步驟：
[0013] (1)制備對照樣品溶液
[0014] 取無水葡萄糖適量，精密稱定，加水制成每1ml含無水葡萄糖0. 6mg的溶液，即得。
[0015] (2)制備待測樣品溶液
[0016] 取待測樣品約50mg，精密稱定，置50ml量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，即 得。
[0017] (3)測量待測樣品中總糖含量
[001引精密量取對照樣品溶液與待測樣品溶液各2ml，置于25ml量瓶中，精密加入5%苯 酷溶液1ml，搖勻，迅速精密加入硫酸5ml，搖勻，置于水浴中保溫15min，取出，置于冰水浴 中冷卻3min，加水稀釋至近刻度，再置冰水浴中冷卻3min，取出，加水至刻度，搖勻；另外量 取水2. 0ml，同上平行操作作為空白對照，用紫外-可見分光光度法，在490nm波長處測定上 述經(jīng)苯酷-硫酸處理后的對照樣品和五加茂粉待測樣品的吸光度，并按外標法W吸光度值 計算待測樣品中的總糖含量。
[0019] 另一方面，由于黃茂為該配方中的君藥，黃茂甲巧是其特征有效成分，藥理研究表 明黃茂甲巧具有增強機體免疫力的作用。因此，檢測五加茂粉中黃茂甲巧的含量可W用于 評價五加茂粉的質(zhì)量。
[0020] 在本發(fā)明的一個【具體實施方式】中，采用液相色譜法對五加茂粉中黃茂甲巧含量進 行檢測，包括W下步驟：
[0021] (1)進行色譜條件選擇和系統(tǒng)適用性試驗
[0022] W十八焼基娃焼鍵合娃膠為填充劑，W己膳-水(體積比為35:65)為流動相，采用 蒸發(fā)光散射檢測器進行檢測，理論培板數(shù)按黃茂甲巧峰計算應(yīng)不低于4000。
[0023] (2)制備對照樣品溶液
[0024] 取黃茂甲巧對照樣品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含0. 5mg的溶液，即得。
[0025] (3)制備待測樣品溶液
[0026] 取待測樣品2g，精密稱定，置于具塞錐形瓶中，加入50ml甲醇超聲提取30分鐘，抽 濾，將濾渣連同濾紙放回錐形瓶中，再加50ml甲醇超聲提取30分鐘，抽濾，用30ml甲醇洗 涂濾渣和濾紙，合并濾液，減壓回收溶劑并濃縮至干，所獲得的產(chǎn)物加水10ml，微熱使溶解， 用水飽和的正下醇振搖提取4次，每次40ml，合并正下醇液，用氨試液充分洗涂2次，每次約 40ml，棄去氨液，將正下醇溶液中的溶劑蒸干，所獲得的產(chǎn)物加甲醇溶解，轉(zhuǎn)移至10ml量瓶 中，加甲醇至刻度，搖勻，即得。
[0027] (4)采用液相色譜法檢測待測樣品中的黃茂甲巧含量
[0028] 分別精密吸取對照樣品溶液5 y 1、15 y 1，待測樣品溶液10 y 1，注入液相色譜儀， 測定，用外標兩點法對數(shù)方程計算，即得到樣品中的黃茂甲巧含量。
[0029] 根據(jù)本發(fā)明，對五加茂粉進行定性分析包括對五加茂粉中黃茂進行鑒定，W及對 五加茂粉中刺五加進行鑒定。
[0030] 第H方面，由于異嗦皮巧是刺五加的特征化學(xué)成分。因此，在本發(fā)明中，對五加茂 粉中刺五加進行鑒定主要是鑒定其中的異嗦皮巧。
[0031] 本發(fā)明中，對五加茂粉中刺五加進行鑒定是采用薄層色譜法鑒定五加茂粉中的異 嗦皮巧。
[0032] 在本發(fā)明的一個實施方式中，采用薄層色譜法鑒定五加茂粉中的異嗦皮巧，包括 W異嗦皮巧為對照樣品，W甲醇為溶劑，氯甲焼-甲醇-水為展開劑，將對照樣品溶液 和五加茂粉待測樣品提取物溶液在同一娃膠G薄層板上點樣展開，并置于紫外光燈下進行 檢視。如果檢視的結(jié)果為待測樣品色譜中，在與對照樣品色譜相應(yīng)的位置上，顯示與對照樣 品相同的藍色英光斑點，則說明五加茂粉待測樣品中含有異嗦皮巧。
[0033] 在本發(fā)明的一個具體實施例中，在采用薄層色譜法鑒定五加茂粉中的異嗦皮巧的 過程中，所述展開劑H氯甲焼-甲醇-水的體積比為19:1:0. 1。
[0034] 與現(xiàn)有技術(shù)在薄層色譜分析過程中采用H氯甲焼-甲醇組成的展開劑相比，上述 實施例中的該種組成的展開劑及其配比可W在薄層色譜分析過程中使主斑點分離度更好。
[0035] 本發(fā)明中所用術(shù)語"主斑點"是指異嗦皮巧斑點，亦即在待測樣品色譜中，在與對 照樣品色譜相應(yīng)的位置上，顯示與對照樣品相同的藍色英光的斑點。與待測樣品中其他雜 質(zhì)斑點相比，該斑點是最強的斑點。
[0036] 在本發(fā)明的一個具體實施例中，對五加茂粉中刺五加進行鑒定是采用薄層色譜法 鑒定五加茂粉中的異嗦皮巧，包括W下步驟：
[0037] (1)從待測樣品中提取異嗦皮巧
[0038] 取待測樣品lOg，加入甲醇50ml，加熱回流1小時，過濾，將濾液中的溶劑蒸干，并 將所獲得的產(chǎn)物加水10ml溶解，用H氯甲焼振搖提取2次，每次10ml，合并H氯甲焼溶液， 將H氯甲焼溶液中的溶劑蒸干，并將所獲得的提取物加甲醇1ml溶解，制成五加茂粉待測 樣品提取物溶液。
[0039] (2)制備對照樣品溶液
[0040] 取異嗦皮巧對照樣品，加甲醇制成每1ml含0. 5mg的對照樣品溶液。
[0041] (3)采用薄層色譜法檢測五加茂粉中的刺五加
[0042] 吸取上述步驟（1)和（2)中的兩種溶液各5 yl，分別點于同一娃膠G薄層板上， 氯甲焼-甲醇-水（體積比為19:1:0. 1)為展開劑展開，取出，瞭干，置于紫外光燈 (365nm)下檢視。如果待測樣品色譜中，在與對照樣品色譜相應(yīng)的位置上，顯示與對照樣品 相同的藍色英光斑點，即說明待測樣品中含有異嗦皮巧。
[0043] 第四方面，由于黃茂甲巧是黃茂的特征化學(xué)成分。因此，在本發(fā)明中，對五加茂粉 中黃茂進行鑒定主要是鑒定其中的黃茂甲巧。
[0044] 本發(fā)明中，對五加茂粉中黃茂進行鑒定是采用薄層色譜法鑒定五加茂粉中的黃茂 甲巧，包括W黃茂甲巧作對照樣品氯甲焼-甲醇-水(體積比為13:7:2)的下層溶液 為展開劑，將對照樣品溶液和五加茂粉待測樣品提取物溶液在同一娃膠G薄層板上點樣展 開，并噴W 10%硫酸己醇溶液，105C加熱至斑點顯色清晰。如果待測樣品色譜中，在與對照 樣品色譜相應(yīng)的位置上，顯示與對照樣品相同顏色的斑點，即說明待測樣品中含有黃茂甲 巧，亦即含有黃茂。
[0045] 在本發(fā)明的一個具體實施例中，對五加茂粉中黃茂進行鑒定是采用薄層色譜法鑒 定五加茂粉中的黃茂甲巧，其包括W下步驟：
[0046] (1)從待測樣品中提取黃茂甲巧
[0047] 取待測樣品Ig，加入甲醇20ml，加熱回流1小時，過濾，將濾液加于中性氧化鉛柱 (100?120目，5g，內(nèi)徑10?15mm)上，用40%甲醇100ml洗脫，收集洗脫液，蒸干溶劑，所 獲得的產(chǎn)物加水30ml溶解，用水飽和的正下醇振搖提取2次，每次20ml，合并正下醇液，用 水洗涂2次，每次20ml，棄去水液，將正下醇溶液中的溶劑蒸干，所獲得的產(chǎn)物加入甲醇1ml 溶解，作為待測樣品溶液。
[004引（2)制備對照樣品溶液
[0049] 取黃茂甲巧對照樣品，加甲醇制成每1ml含0. 5mg的溶液，作為對照樣品溶液。
[0050] (3)采用薄層色譜法檢測五加茂粉中的黃茂
[0051] 吸取上述步驟（1)和（2)中的兩種溶液各4ul，分別點于同一娃膠G薄層板上， 氯甲焼-甲醇-水(體積比為13:7:2)的下層溶液為展開劑展開，取出，瞭干，噴W 10% (v/v)硫酸己醇溶液，105C加熱至斑點顯色清晰。如果待測樣品色譜中，在與對照樣品色譜 相應(yīng)的位置上，顯示與對照樣品相同顏色的斑點，即說明待測樣品中含有黃茂甲巧，亦即含 有黃茂。
[0052] 本發(fā)明提供了一種檢驗五加茂粉質(zhì)量的方法，包括對五加茂粉進行定性分析和定 量檢測。與靈茂加口服液質(zhì)量檢驗方法相比，該方法使用了高效液相色譜法測定五加茂粉 中的黃茂甲巧含量，并增加了總糖含量的測定方法，同時采用薄層色譜法分別檢測五加茂 粉中的黃茂甲巧和異嗦皮巧。該方法專屬性、重復(fù)性、準確性良好，可用于對五加茂粉的質(zhì) 量進行綜合評價，從而有效控制該產(chǎn)品的質(zhì)量，保證其臨床使用安全、有效、穩(wěn)定。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0053] 下面結(jié)合附圖來對本發(fā)明作進一步詳細說明：
[0054] 圖1是實施例2中黃茂鑒定薄層色譜圖；
[0055] 圖中附圖標記如下；1黃茂甲巧；2?4待測樣品；5陰性對照。
[0056] 圖2是實施例2中刺五加鑒定薄層色譜圖；
[0057] 圖中附圖標記如下；1異嗦皮巧；2?4待測樣品；5陰性對照。
[0058] 圖3是實施例3中采用高效液相色譜法測定黃茂甲巧含量的專屬性試驗色譜圖；
[0059] 圖中附圖標記如下；1黃茂甲巧對照樣品色譜圖；2待測樣品色譜圖；3陰性對照 色譜圖。

【具體實施方式】
[0060] 下面將結(jié)合實施例和附圖來詳細說明本發(fā)明，該些實施例和附圖僅起說明性作 用，并不局限于本發(fā)明的應(yīng)用范圍。各實施例中的材料均為分析試驗用品。
[0061] 實例1 ;制備五加茂粉
[0062] 五加茂粉；處方；黃茂800g，刺五加200g。
[0063] 制法；W上2味中藥粉碎成最粗粉，加8倍量水，浸泡1小時，煎煮回流提取化，濾 過，濾渣再加水提取2次，每次加8倍量水并回流提取化，分次過濾，合并濾液，趁熱（50? 6(TC )離也，上清液減壓濃縮至相對密度約1. 2 (《7(TC )，噴霧干燥，得成品300g。
[0064] 實例2 ;五加茂粉鑒別方法專屬性考察
[00財 （1)試劑與樣品
[006引對照樣品：黃茂甲巧，批號；110781-200613,購自中國食品藥品檢定研究院；異嗦 皮口產(chǎn)，批號；110837-200304,購自中國食品藥品檢定研究院。
[0067] 五加茂粉讀施例1制備。
[006引陰性對照樣品：按照實施例1方法制備各鑒別項陰性對照樣品。
[006引（2)黃茂的鑒別
[0070] 取實施例1制備的樣品Ig，加甲醇20mL，加熱回流1小時，濾過，濾液加于中性氧 化鉛柱（100?120目，5g，內(nèi)徑10?15mm)上，用40%甲醇100血洗脫，收集洗脫液，蒸干， 殘渣加水30mL使溶解，用水飽和的正下醇振搖提取2次，每次20mU合并正下醇液，用水洗 涂2次，每次20mU棄去水液，正下醇液蒸干，殘渣加甲醇ImL使溶解，作為待測樣品溶液； 另取黃茂甲巧對照樣品，加甲醇制成每ImL含0. 5mg溶液，作為對照樣品溶液；按處方配比 稱取刺五加并按實施例1制備工藝制備樣品作為陰性對照樣品，取陰性對照樣品同法操作 制備陰性對照溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述H種溶液各4 y以分別點于同一娃膠G薄 層板上，氯甲焼-甲醇-水(體積比為13:7:2)的下層溶液作為展開劑，展開，取出，瞭 干，噴W 10%硫酸己醇溶液，105C加熱至斑點顯色清晰，結(jié)果見圖1。從圖1的結(jié)果可W看 出，在與對照樣品色譜相應(yīng)的位置上，待測樣品顯相同顏色的斑點，陰性對照不顯示斑點， 表明方法專屬性良好。
[0071] (3)刺五加的鑒別
[0072] 取實施例1制備的樣品lOg，加甲醇50血，加熱回流1小時，濾過，濾液蒸干，殘渣 加水lOmL使溶解，用H氯甲焼振搖提取2次，每次lOmL，合并H氯甲焼液，蒸干，殘渣加甲醇 ImL使溶解，作為待測樣品溶液；另取異嗦皮巧對照樣品，加甲醇制成每ImL含0. 5mg的溶 液，作為對照樣品溶液；按處方配比稱取黃茂并按實施例1制備工藝制備樣品作為陰性對 照樣品，取陰性對照樣品同法操作制備陰性對照溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述H種溶 液各5 y L，分別點于同一娃膠G薄層板上，WS氯甲焼-甲醇-水(體積比為19:1:0. 1)為 展開劑，展開，取出，瞭干，置紫外光燈（365nm)下檢視，結(jié)果見圖2。從圖2的結(jié)果可W看出， 在與對照樣品色譜相應(yīng)的位置上，待測樣品顯相同的藍色英光斑點，陰性對照無干擾，表明 方法專屬性良好。
[0073] 實例3 ;黃茂甲巧含量測定方法學(xué)考察
[0074] (1)儀器與試劑、樣品
[00巧]儀器；高效液相色譜儀，e2695型，美國沃特世公司
[0076] 蒸發(fā)光散射檢測器，2424型，美國沃特世公司
[0077] 電子分析天平，AB135-S型，梅特勒巧利多公司
[0078] 試劑；己膳為色譜純；水為二次重蒸水；其他試劑均為分析純。
[0079] 對照樣品：黃茂甲巧，批號；110781-200613,購自中國食品藥品檢定研究院。
[0080] 五加茂粉讀施例1制備。
[0081] (2)色譜條件
[0082] 色譜柱為 Kromasill00-5C18 柱（150X4. 6mm，5y m);流動相為己膳-水（35:65); 蒸發(fā)光散射檢測器檢測，漂移管溫度為6(TC，噴霧器溫度為36C ;柱溫為3(TC ;流速為 1. Oml/min。
[008引 （3)溶液的制備
[0084] 對照樣品溶液的制備；精密稱取黃茂甲巧對照樣品25. 4mg，置50ml量瓶中，加甲 醇溶解并稀釋至刻度，即得。
[0085] 待測樣品溶液的制備：取實施例1制備的樣品1. 9896g，精密稱定，置具塞錐形瓶 中，加50ml甲醇超聲提取30分鐘，抽濾，濾渣連同濾紙放回錐形瓶中，再加50ml甲醇超聲 提取30分鐘，抽濾，用30ml甲醇洗涂濾渣和濾紙，合并濾液，減壓回收溶劑并濃縮至干，殘 渣加水10ml，微熱使溶解，用水飽和的正下醇振搖提取4次，每次40ml，合并正下醇液，用氨 試液充分洗涂2次，每次約40ml，棄去氨液，正下醇液蒸干，殘渣加甲醇溶解，轉(zhuǎn)移至10ml量 瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得。
[0086] 陰性對照溶液的制備：按照實施例1的制備方法制備缺黃茂的陰性對照樣品，取 陰性對照樣品，再按照待測樣品溶液的制備方法制備陰性對照溶液，即得。
[0087] (4)專屬性試驗
[008引分別精密吸取對照樣品溶液15 y L、待測樣品溶液10 y L、陰性對照溶液10 y L，注 入液相色譜儀，按照上述色譜條件進行試驗，記錄色譜圖，結(jié)果表明：待測樣品色譜中黃茂 甲巧的保留時間與對照樣品一致，而陰性對照在對照樣品、待測樣品色譜峰相應(yīng)的位置上 無干擾，方法專屬性良好，色譜圖見圖3。
[0089] (5)線性范圍考察
[0090] 精密稱取黃茂甲巧對照樣品25. 4mg，加甲醇制成0. 508mg/血的溶液，按上述色譜 條件分別進樣3 y L、5 y L、10 y L、15 y L、20 y L測定。W峰面積對數(shù)（y)為縱坐標，W進樣 量對數(shù)（X)為橫坐標，繪制標準曲線，得回歸方程y=l. 4828X+5. 312，r=0. 9991，結(jié)果表明， 在1. 524 y g?10. 16 y g范圍內(nèi)，黃茂甲巧峰面積對數(shù)與進樣量對數(shù)有良好的線性關(guān)系，數(shù) 據(jù)見表1。
[0091] 表1線性關(guān)系試驗結(jié)果
[0092]

【權(quán)利要求】
1. 一種檢驗五加芪粉質(zhì)量的方法，包括對五加芪粉進行定性分析和定量檢測，其中，對 五加芪粉進行定量檢測包括檢測五加芪粉中黃芪甲苷的含量以及五加芪粉中總糖的含量。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述五加芪粉中總糖為五加芪粉中的刺 五加所含糖類成分和黃芪所含糖類成分的總和。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2中任意一項所述的方法，其特征在于，采用苯酚-硫酸法檢測五 加芪粉中總糖含量，包括以無水葡萄糖為對照樣品，采用紫外-可見分光光度法，在490nm 波長處測定經(jīng)苯酚-硫酸處理后的對照樣品和五加芪粉待測樣品的吸光度，并按外標法以 吸光度值計算待測樣品中的總糖含量。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1到3中任意一項所述的方法，其特征在于，對五加芪粉進行定性分析 包括對五加芪粉中黃芪進行鑒定，以及對五加芪粉中刺五加進行鑒定。
5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于，對五加芪粉中刺五加進行鑒定是采用薄 層色譜法鑒定五加芪粉中的異嗪皮啶。
6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，采用薄層色譜法鑒定五加芪粉中的異嗪 皮啶，包括以異嗪皮啶為對照樣品，以甲醇為溶劑，以三氯甲烷-甲醇-水為展開劑，將對照 樣品溶液和五加芪粉待測樣品提取物溶液在同一硅膠G薄層板上點樣展開，并置于紫外光 燈下進行檢視。
7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，如果檢視的結(jié)果為待測樣品色譜中，在與 對照樣品色譜相應(yīng)的位置上，顯示與對照樣品相同的藍色熒光斑點，則說明五加芪粉待測 樣品中含有異嗪皮啶。
8. 根據(jù)權(quán)利要求6或7所述的方法，其特征在于，在采用薄層色譜法鑒定五加芪粉中的 異嗪皮啶的過程中，所述展開劑三氯甲烷-甲醇-水的體積比為19:1:0. 1。
9. 根據(jù)權(quán)利要求1到8中任意一項所述的方法，其特征在于，所述五加芪粉由刺五加和 黃苗組成。
【文檔編號】G01N30/02GK104422664SQ201310384971
【公開日】2015年3月18日 申請日期:2013年8月29日 優(yōu)先權(quán)日:2013年8月29日
【發(fā)明者】張許科, 劉興金, 張曉會 申請人:洛陽惠中獸藥有限公司