專利名稱：一種高粱中支鏈淀粉和直鏈淀粉含量的測(cè)定方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種植物中淀粉含量的檢測(cè)方法，具體涉及一種高粱中支鏈淀粉和直鏈淀粉含量的測(cè)定方法。
背景技術(shù)：
我國(guó)種植高粱歷史已有數(shù)千年，在中國(guó)的分布極廣。中國(guó)的白酒釀造史也十分悠長(zhǎng)，高粱作為釀酒的主要原料之一，其淀粉含量及其直鏈淀粉和支鏈淀粉的比率與釀酒品質(zhì)和產(chǎn)量有重要關(guān)系，支鏈淀粉含量較高的品種，在發(fā)酵過程中易達(dá)到柔熟、玄清、收汗等工藝標(biāo)準(zhǔn)，淀粉利用率高，被視為釀酒的優(yōu)質(zhì)原料。因此在原料采購(gòu)以及作物育種時(shí)需要探索一種快速簡(jiǎn)便的測(cè)定方法對(duì)兩組分進(jìn)行含量測(cè)定。目前測(cè)定淀粉的方法主要包括旋光法、比色法、碘親和力測(cè)定法和近紅外法。其中對(duì)兩種組分同時(shí)檢測(cè)的方法應(yīng)用最廣的是雙波長(zhǎng)法，該方法已用于小麥、板栗、玉米、木薯、馬鈴薯中淀粉含量的測(cè)定，然而該方法涉及四個(gè)波長(zhǎng)，包括兩個(gè)測(cè)定波長(zhǎng)和通過作圖確定的兩個(gè)參比波長(zhǎng)，因此檢測(cè)方法繁瑣，且雙波長(zhǎng)的假設(shè)容易帶來(lái)誤差，從而降低檢測(cè)精度。

發(fā)明內(nèi)容
針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)存在的上述問題，本發(fā)明的目的是:提供一種方法簡(jiǎn)單，檢測(cè)精度高的高粱中支鏈淀粉和直鏈淀粉含量的測(cè)定方法。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案:一種高粱中支鏈淀粉和直鏈淀粉含量的測(cè)定方法，包括如下步驟:S1:制備支鏈淀粉回歸方程和直鏈淀粉回歸方程，該步驟包括:Sll:取支鏈淀粉純品和直鏈淀粉純品分別置于容器中，分別向兩個(gè)容器中加入乙醇溶液進(jìn)行分散處理，處理后加入氫氧化鈉溶液混勻，封住容器口，沸水浴中攪拌使直鏈淀粉純品和支鏈淀粉純品完全溶解，然后使用蒸餾水定容即得支鏈淀粉初配溶液和直鏈淀粉初配溶液；S12:制備支鏈淀粉回歸方程，取多份步驟Sll中配置的支鏈淀粉初配溶液，調(diào)節(jié)該多份支鏈淀粉初配溶液的PH值至3 4，再加碘試劑，并用蒸餾水定容，最終得到支鏈淀粉濃度為40 90ug/mL的支鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)溶液系列，靜置，以碘為空白，進(jìn)行紫外掃描得到支鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)溶液系列中濃度不同的各份支鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)溶液對(duì)400 SOOnm波長(zhǎng)紫外線的吸光度，然后以濃度不同的各份支鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)，以其吸光度為縱坐標(biāo)制得支鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)支鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)曲線得到支鏈淀粉回歸方程；S13:制備直鏈淀粉回歸方程，取多份步驟Sll中配置的直鏈淀粉初配溶液，調(diào)節(jié)該多份直鏈淀粉初配溶液的PH值至3 4，再加碘試劑，并用蒸餾水定容，最終得到直鏈淀粉濃度為6 26ug/mL的直鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)溶液系列，靜置，以碘為空白，進(jìn)行紫外掃描，得到直鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)溶液系列中濃度不同的各份直鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)溶液對(duì)400 800nm波長(zhǎng)紫外線的吸光度，然后以濃度不同的各份直鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)，以其吸光度為縱坐標(biāo)制得直鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)直鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)曲線得到直鏈淀粉回歸方程；S2:計(jì)算支鏈淀粉的吸收比α和直鏈淀粉的吸收比β:將波長(zhǎng)λ I作為支鏈淀粉的測(cè)定波長(zhǎng)，波長(zhǎng)λ 2作為直鏈淀粉的測(cè)定波長(zhǎng)，λ I和λ 2為400 800nm的范圍內(nèi)，然后分別測(cè)定支鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)溶液系列和直鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)溶液系列中濃度不同的各份標(biāo)準(zhǔn)溶液在λ 及λ2處的吸光度，根據(jù)式(I)和(2)分別計(jì)算Cij和，然后再對(duì)得到的多個(gè)利用統(tǒng)計(jì)學(xué)求平均值得到支鏈淀粉的吸收比α，對(duì)得到的
多個(gè)1^利用統(tǒng)計(jì)學(xué)求平均值得到直鏈淀粉的吸收比β:
權(quán)利要求
1.一種高粱中支鏈淀粉和直鏈淀粉含量的測(cè)定方法，其特征在于，包括如下步驟: S1:制備支鏈淀粉回歸方程和直鏈淀粉回歸方程，該步驟包括: 511:取支鏈淀粉純品和直鏈淀粉純品分別置于容器中，分別向兩個(gè)容器中加入乙醇溶液進(jìn)行分散處理，處理后加入氫氧化鈉溶液混勻，封住容器口，沸水浴中攪拌使直鏈淀粉純品和支鏈淀粉純品完全溶解，然后使用蒸餾水定容即得支鏈淀粉初配溶液和直鏈淀粉初配溶液； 512:制備支鏈淀粉回歸方程，取多份步驟Sll中配置的支鏈淀粉初配溶液，調(diào)節(jié)該多份支鏈淀粉初配溶液的PH值至3 4，再加碘試劑，并用蒸餾水定容，最終得到支鏈淀粉濃度為40 90ug/mL的支鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)溶液系列，靜置，以碘為空白，進(jìn)行紫外掃描得到支鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)溶液系列中濃度不同 的各份支鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)溶液對(duì)400 SOOnm波長(zhǎng)紫外線的吸光度，然后以濃度不同的各份支鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)，以其吸光度為縱坐標(biāo)制得支鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)支鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)曲線得到支鏈淀粉回歸方程； 513:制備直鏈淀粉回歸方程，取多份步驟Sll中配置的直鏈淀粉初配溶液，調(diào)節(jié)該多份直鏈淀粉初配溶液的PH值至3 4，再加碘試劑，并用蒸餾水定容，最終得到直鏈淀粉濃度為6 26ug/mL的直鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)溶液系列，靜置，以碘為空白，進(jìn)行紫外掃描，得到直鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)溶液系列中濃度不同的各份直鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)溶液對(duì)400 800nm波長(zhǎng)紫外線的吸光度，然后以濃度不同的各份直鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)，以其吸光度為縱坐標(biāo)制得直鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)直鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)曲線得到直鏈淀粉回歸方程； 52:計(jì)算支鏈淀粉的吸收比α和直鏈淀粉的吸收比β:將波長(zhǎng)λ I作為支鏈淀粉的測(cè)定波長(zhǎng)，波長(zhǎng)λ 2作為直鏈淀粉的測(cè)定波長(zhǎng)，λ I和λ 2為400 800nm的范圍內(nèi)，然后分別測(cè)定支鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)溶液系列和直鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)溶液系列中濃度不同的各份標(biāo)準(zhǔn)溶液在λ I及λ 2處的吸光度，根據(jù)式(I)和(2)分別計(jì)算％和，然后再對(duì)得到的多個(gè)％利用統(tǒng)計(jì)學(xué)求平均值得到支鏈淀粉的吸收比α，對(duì)得到的多個(gè)1^利用統(tǒng)計(jì)學(xué)求平均值得到直鏈淀粉的吸收比β:
2.如權(quán)利要求1所述的高粱中支鏈淀粉和直鏈淀粉含量的測(cè)定方法，其特征在于，所述支鏈淀粉的測(cè)定波長(zhǎng)λ I為450 600nm，直鏈淀粉的測(cè)定波長(zhǎng)λ 2為550 700nm。
3.如權(quán)利要求2所述的高粱中支鏈淀粉和直鏈淀粉含量的測(cè)定方法，其特征在于，所述支鏈淀粉的測(cè)定波長(zhǎng)λ I為540nm，直鏈淀粉的測(cè)定波長(zhǎng)λ 2為640nm。
4.如權(quán)利要求1所述的高粱中支鏈淀粉和直鏈淀粉含量的測(cè)定方法，其特征在于，所述支鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)溶液和直鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)溶液的PH均為3.5。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種高粱中支鏈淀粉和直鏈淀粉含量的測(cè)定方法，該方法包括三個(gè)步驟，第一制備支鏈淀粉回歸方程和直鏈淀粉回歸方程，第二計(jì)算支鏈淀粉的吸收比α和直鏈淀粉的吸收比β，第三樣品測(cè)定，在該步驟中，通過給定公式計(jì)算支鏈淀粉和直鏈淀粉在測(cè)定波長(zhǎng)的吸光度，然后再將相應(yīng)的將吸收比和吸光度帶入相應(yīng)的回歸方程中即得支鏈淀粉和直鏈淀粉的濃度。本發(fā)明提供的測(cè)定方法僅需兩個(gè)波長(zhǎng)，排除了雙波長(zhǎng)的零假設(shè)帶來(lái)的誤差，與雙波長(zhǎng)相比該方法的原理、計(jì)算方法更簡(jiǎn)單，且最終計(jì)算得到的直鏈淀粉和支鏈淀粉含量的精確度高。
文檔編號(hào)G01N21/33GK103163128SQ20131007998
公開日2013年6月19日 申請(qǐng)日期2013年3月13日 優(yōu)先權(quán)日2013年3月13日
發(fā)明者霍丹群, 蔣蘭, 侯長(zhǎng)軍, 王洪彬 申請(qǐng)人:重慶大學(xué)