專利名稱：一種血小板自動化分析儀及其分析方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種醫(yī)療器材以及分析方法，特別是一種用于能夠快速連續(xù)檢測血液中血小板聚集變化的血小板自動化分析儀及其分析方法。
背景技術：
血小板是血液中的一種細胞類顆粒成份，是血液止血與血栓形成的重要因素。對血小板數(shù)量、體積、聚集率等參數(shù)進行方便快速檢測，在血栓及相關疾病的診斷、預防和治療指導上有著十分重要的意義。隨著技術進步和對血小板研究的深入，各國已經開發(fā)出一些對血小板進行單項類別，或功能檢測的儀器。如現(xiàn)已有的血小板聚集儀(只單純檢測血小板聚集相關參數(shù)，目前主要有以比濁法或直接測量探測電極電阻法為檢測原理的分析儀器)、血液分析儀或血細胞分析儀(該類儀器對血小板的檢測僅限于計數(shù)血小板數(shù)量、體積等，不具備自動連續(xù)多次對同一血樣檢測血小板的能力，即無法實現(xiàn)自動對血小板聚集能力檢測的功能)。因此，迄今為止尚未見采用自動化的、連續(xù)計數(shù)經誘聚劑處理的血樣中血小板數(shù)量變化為原理檢測血小板聚集率的儀器；也未見一臺能同時自動完成對血小板數(shù)量、體積檢測并還同時完成對血小板聚集率功能等多項參數(shù)檢測的儀器。傳統(tǒng)的血小板聚集儀所采用的檢測原理為光學比濁法或電阻法。光學比濁法血小板聚集檢測儀更為常見，但其用血量較大(一般需要采2ml全血)，檢測前還需要分離血漿，操作繁瑣檢測時間長。而電阻法血小板聚集儀是通過檢測血小板聚集在電極上的變化獲得血小板聚集率結果的，用血量也要anl以上。且二種方法均由于其檢測結果重復性較差，臨床較少使用。

發(fā)明內容
發(fā)明目的本發(fā)明所要解決的技術問題是針對現(xiàn)有技術的不足，提供一種血小板自動化分析儀及其分析方法。為了解決上述技術問題，本發(fā)明公開了一種血小板自動化分析儀，包括采樣杯、準備杯、分析杯、加樣針、血樣注射器、誘聚劑注射器、分析液注射器以及血樣混勻裝置；所述采樣杯用于儲存血樣以及血小板聚集反應；采樣杯容積一般為1 5ml，通過加樣針和血樣注射器的每次加樣量為100 1000 μ 1。所述準備杯用于一次稀釋血樣；所述準備杯容積一般為5 20ml，通過加樣針和血樣注射器的每次加樣量為10 50 μ 1，一次稀釋為該加樣量體積的50 300倍。所述分析杯用于二次稀釋血液和檢測血樣；所述分析杯容積一般為5 20ml，通過加樣針和血樣注射器的每次加樣量為10 50 μ 1，二次稀釋為該加樣量體積的50 300倍。經過二次稀釋，使得血小板的終濃度為原始血樣的1/90000 1/10000。所述血樣混勻裝置用于混勻采樣杯、準備杯以及分析杯內的血樣；所述誘聚劑注射器連通誘聚劑儲藏器，用于向采樣杯內加誘聚劑；
3
所述分析液注射器連通分析液儲藏器，用于向分析杯或準備杯加分析液；所述加樣針、血樣注射器、誘聚劑注射器、分析液注射器分別由電機控制運動；所述加樣針通過管道和閥分別連通血樣注射器和分析液注射器；所述加樣針與血樣注射器連通后，依次將血樣加入采樣杯，從采樣杯中吸取部分血樣加入準備杯，從準備杯中吸取部分稀釋血液加入分析杯；所述加樣針與所述分析液注射器連通后，用于清空加樣針。本發(fā)明中，所述混勻裝置為空氣泵，空氣泵通過管道和閥分別連通采樣杯、準備杯以及分析杯；其中連通采樣杯的管道內徑為0. 2mm 2mm，進氣量為1 20ml/min。本發(fā)明中，優(yōu)選地，所述空氣泵為旋轉泵或混勻注射器。本發(fā)明中，優(yōu)選地，包括一個用于清洗加樣針外壁的清洗頭。每次分析后，清洗頭自動清洗加樣針外表殘留血液，防止附著在加樣針上的血樣造成分析數(shù)據(jù)干擾。本發(fā)明中，優(yōu)選地，包括一個廢液泵，所述廢液泵分別連通采樣杯、準備杯以及分析杯以及清洗頭，當相應的分析完成后廢液泵協(xié)助將各杯進行清洗并將杯中殘余物排空。本發(fā)明還公開一種了血小板分析方法，包括以下步驟步驟1，連通血樣注射器與加樣針，吸取待檢測血樣，加入采樣杯中，并混勻血樣；步驟2，通過血樣注射器和加樣針定量吸取采樣杯中的血樣，加入準備杯；步驟3，通過分析液注射器向準備杯中加入分析液進行一次定量稀釋，并混勻血樣；步驟4，連通血樣注射器與加樣針，定量吸取準備杯中的血樣，加入分析杯；步驟5，通過分析液注射器向分析杯中加入分析液進行二次定量稀釋，并混勻血樣；步驟6，檢測分析杯中血樣的原始血小板數(shù)量；步驟7，通過誘聚劑注射器向采樣杯中加入誘聚劑，并混勻血樣；所述血樣和所述誘聚劑的體積比為1 1 20 1。誘聚劑一般為二磷酸腺苷、或花生四烯酸、或腎上腺素的水溶液。步驟8，每間隔一定時間重復步驟2 步驟5，檢測加入誘聚劑后的各個時間點的分析杯中血樣的血小板數(shù)量；一般間隔時間為30 300s。步驟9，將加入誘聚劑后的各個時間點的血小板數(shù)量與原始血小板數(shù)量相比，獲得血小板聚集率。本發(fā)明中，考慮到分析精度和分析設備的體積問題，采用了兩次稀釋的方式，通過準備杯和分析杯兩個杯子，完成稀釋，相比較傳統(tǒng)的一杯稀釋的方式，檢測精度更好。本發(fā)明所述方法中，優(yōu)選地，采用鼓氣法進行血樣混勻。傳統(tǒng)的血小板分析設備只能靜態(tài)分析血液中的血小板的數(shù)量，無法實現(xiàn)在一定時間，連續(xù)的對血小板聚集能力進行分析，因為血液在一定時間后會出現(xiàn)血小板不均勻的情況，申請人通過大量對比研究發(fā)現(xiàn)， 采用鼓氣法的分析結果最為精確。當然，也可以采用機械攪拌法或者是利用加樣針或者另外的吸管進行抽吸的方法實現(xiàn)待分析血樣的混勻。本發(fā)明中，所述的分析液要求不影響血樣中血小板的聚集反應，也不與血樣中的任何成分發(fā)生反應，不含有顆粒雜質，一般去離子生理鹽水或者市場上出售的血細胞分析儀中的分析液就可以，優(yōu)選滲透壓與血液滲透壓接近的分析液。本發(fā)明首次檢測后獲得的血小板檢測信息為原始狀態(tài)信息。其后檢測的差異將反映出血樣加入誘聚劑后，由于血樣中血小板聚集，因此血樣中單個血小板數(shù)量、體積改變的信息。從而得到血液中原始血小板數(shù)量、體積以及經過加入誘聚劑后，血液中血小板聚集變化。有益效果本發(fā)明突出的優(yōu)點是其檢測樣本直接使用全血，無需分離血漿即可完成血小板聚集率的檢測；而且所需用血量較小(可小于500ul)；通過直接檢測加入誘聚劑前后血小板數(shù)量的變化，連續(xù)進行檢測血液中血小板數(shù)量，能夠獲取一段時間內各個時間點檢測結果。而且該儀器檢測過程完全自動化，因此檢測方便、快速，人為影響因素小。


下面結合附圖和具體實施方式
對本發(fā)明做更進一步的具體說明，本發(fā)明的上述和 /或其他方面的優(yōu)點將會變得更加清楚。圖1為本發(fā)明的裝置結構示意圖。圖2為本發(fā)明儀器與比濁法儀器測定血小板最大聚集率的相關性分析
具體實施例方式如圖1所示，本發(fā)明公開了一種血小板自動化分析儀，包括采樣杯1、準備杯2、分析杯3、加樣針4、血樣注射器5、誘聚劑注射器6、分析液注射器7以及血樣混勻裝置。所述采樣杯用于儲存血樣；所述準備杯用于一次稀釋血樣；所述分析杯用于二次稀釋血液和檢測血樣；所述血樣混勻裝置用于混勻采樣杯、準備杯以及分析杯內的血樣；所述誘聚劑注射器連通誘聚劑儲藏器10，用于向采樣杯內加誘聚劑。所述分析液注射器連通分析液儲藏器11，用于向分析杯或準備杯加分析液。所述加樣針、血樣注射器、誘聚劑注射器、分析液注射器分別由電機控制運動；所述加樣針通過管道和閥分別連通血樣注射器和分析液注射器；所述加樣針與血樣注射器連通后，依次將血樣加入采樣杯，從采樣杯中吸取部分血樣加入準備杯，從準備杯中吸取部分稀釋血液加入分析杯；所述加樣針與所述分析液注射器連通后，用于清空加樣針。所述混勻裝置為空氣泵，空氣泵通過管道和閥分別連通采樣杯、準備杯以及分析杯；其中連通采樣杯的管道內徑為0. 2mm 2mm，進氣量為1 20ml/min。所述空氣泵為旋轉泵8或混勻注射器9，可以擇一使用或者同時配合使用。本發(fā)明包括一個用于清洗加樣針外壁的清洗頭12。本發(fā)明包括一個廢液泵13，所述廢液泵分別連通采樣杯、準備杯以及分析杯以及清洗頭。本發(fā)明還公開了一種血小板分析方法，包括以下步驟步驟1，連通血樣注射器與加樣針，吸取待檢測血樣，加入采樣杯中，并混勻血樣；步驟2，通過血樣注射器和加樣針定量吸取采樣杯中的血樣，加入準備杯；步驟3，通過分析液注射器向準備杯中加入分析液進行一次定量稀釋，并混勻血樣；步驟4，連通血樣注射器與加樣針，定量吸取準備杯中的血樣，加入分析杯；步驟5，通過分析液注射器向分析杯中加入分析液進行二次定量稀釋，并混勻血樣；步驟6，檢測分析杯中血樣的原始血小板數(shù)量；步驟7，通過誘聚劑注射器向采樣杯中加入誘聚劑，并混勻血樣；步驟8，每間隔一定時間重復步驟2 步驟5，檢測加入誘聚劑后的各個時間點的分析杯中血樣的血小板數(shù)量；步驟9，將加入誘聚劑后的各個時間點的血小板數(shù)量與原始血小板數(shù)量相比，獲得血小板聚集率。本發(fā)明中，優(yōu)選地，采用鼓氣法進行血樣混勻。實施例1更具體地說，如圖1所示，本實施例所述的血小板分析儀包括采樣杯1，采樣杯1通過誘聚劑添加管道I以及閥V16連通誘聚劑儲藏器10，同時閥V16與誘聚劑注射器6連通， 采樣杯1的底部過閥V4分別連通混勻注射器9以及閥V8，閥V4與混勻注射器9之間設有閥V10，閥VlO還與外部空氣連通。準備杯2通過分析液添加管道II連接閥V15，閥V15依次通過管道連接閥V14、閥 V12、閥V13，最終連通分析液儲藏器11。準備杯2底部通過閥V2分別連通旋轉泵8以及閥 V8，閥V2與旋轉泵8之間設有閥V7。分析杯3是一套器材的組合，可以采用日本sysmex公司生產的KX-21型號的血液分析儀，當然也可以采用以下描述的具體結構，兩者的原理是相同的。就本實施例而言，所述的分析杯主要包括杯體31、定量器32以及真空杯33，杯體31上的分析液添加管道III 與閥V15連接。杯體31底部通過閥Vl連通旋轉泵8以及閥V8，閥Vl與旋轉泵8之間設有閥V6。杯體31側壁的下部設有分析孔311，分析孔311分別通過管道連通定量器32和清洗液儲藏器14。分析孔311與定量器32之間設有閥V5以及連通空氣的旁路閥V9。定量器32通過閥V3分別連通旋轉泵8和真空杯33，真空杯33通過管道連接閥V8。分析孔311 和清洗液儲藏器14之間設有閥V17，清洗液儲藏器14內的清洗液用于清洗定量器32以及真空杯33。所述閥V8同時連通廢液泵13和閥VII，閥Vll連接清洗頭12，清洗頭12通過閥 V12和閥V13連通分析液儲藏器11。其中閥V13通過管道連接分析液儲藏器11。所述加樣針4分別連接閥V14和閥V12。所述血樣注射器5連接閥V14。本實施例中未特別說明的部件之間的連通方式，均采用管道直接連通。本實施例的使用流程為步驟1，控制閥V14連通加樣針4與血樣注射器5，從裝有拘櫞酸鈉抗凝血樣的試管(圖中未示出)中吸取200 500uL的全血作為血樣，加樣針移到采樣杯1內，控制閥 V14，將血樣注入到采樣杯中，通過控制閥VlO和閥V4，由混勻注射器9向采樣杯底部注入空氣，氣體由下向上混勻血樣。在此期間將加樣針4移動至清洗頭12，通過控制閥V12和閥 V13，清洗頭使用分析液清洗加樣針外壁，控制血樣注射器5使用分析液清洗加樣針內壁， 從而清洗去除粘附在針內外表面的殘余血液。步驟2，控制閥V14連通加樣針4與血樣注射器5從采樣杯中吸取10 30uL的混勻血樣，并加入準備杯2中。
6
步驟3，通過控制閥V13，閥V12，閥V14，閥V15，由分析液注射器和加樣針，以及分析液添加管道II加入3. 25ml的分析液到準備杯中進行血樣的一次稀釋。分析液既可以通過分析液注射器和加樣針添加，也可以通過分析液添加管道III添加，本實施例選擇同時添加。旋轉泵8通過閥V7和閥V2向準備杯底部注入空氣混勻一次稀釋的血樣。在此期間將加樣針移動至清洗頭，通過控制閥V12和閥V13，清洗頭使用分析液清洗加樣針外壁， 控制血樣注射器5使用分析液清洗加樣針內壁，從而清洗去除粘附在針內外表面的殘余血液。步驟4，控制閥V14連通加樣針4與血樣注射器5從準備杯中吸取10 30uL的一次稀釋并混勻后的血樣，并加入分析杯3中。步驟5，通過控制閥V13，閥V12，閥V14，閥V15，經過分析液注射器和加樣針，以及分析液添加管道III加入3. 25ml的分析液到分析中進行血樣的二次稀釋。分析液既可以通過分析液注射器和加樣針添加，也可以通過分析液添加管道III添加，本實施例選擇同時添加。旋轉泵8通過閥V6，閥Vl向準備杯底部注入空氣混勻二次稀釋的血樣。廢液泵 13通過閥V8把真空杯33抽真空形成負壓，真空杯通過閥V3、閥V5把分析杯的二次稀釋的血樣從分析孔311抽出，通過定量器32計量保證每次抽出的液體一致。每次檢測完成后， 控制閥V9起開后再關閉，使管路中在檢測時形成的負壓釋放掉，管路內恢復成與外環(huán)境一致的氣壓。步驟6，檢測分析杯中血樣的原始血小板數(shù)量。本次檢測結束后，分析液注射器7通過控制閥V13、閥V12、閥V14、閥V15分別向準備杯2和分析杯1加入細1分析液，浸泡等待下次測試。在下次測試前，廢液泵13通過控制閥V8和閥V2排空準備杯2，廢液泵13通過控制閥V8和閥Vl排空分析杯3。步驟7，通過控制閥V16連通誘聚劑注射器6、誘聚劑儲藏器10以及誘聚劑添加管道I，向采樣杯ι中添加10 50ul誘聚劑，并控制閥V4和閥VlO連通混勻注射器9和采樣杯1，向采樣杯1的底部注入空氣，該管道內徑為1mm，進氣量為1 20ml/min，由此混勻加入誘聚劑后的血樣。步驟8，每間隔60s，重復步驟2 步驟5，將加入誘聚劑后的血樣依次加入準備杯和分析杯，進行二次稀釋和混勻，并分析加入誘聚劑后的各個時間點的分析杯中血樣的血
小板數(shù)量。步驟9，將加入誘聚劑后的各個時間點的血小板數(shù)量與原始血小板數(shù)量相比，獲得血小板聚集率。本血樣分析完成之后，分析液注射器7通過閥V13、閥V12、閥V14、閥V15分別向準備杯2和分析杯1加入細1分析液，浸泡等待下次測試。分析液注射器7通過閥V13、閥V12、閥V14和加樣針管路向采樣杯注入2ml分析液，然后廢液泵13通過控制閥V8、閥V4排空采樣杯，重復本步驟3次，以實現(xiàn)采樣杯的清洗干凈，用于等待另一份血樣的檢測分析。本實施例中的分析液要保持恒溫(18 39°C中某特定溫度，試劑恒溫要求誤差小于士 1.5°C )，其恒溫的方式可以是試劑瓶預先加溫，或分析液體注入準備杯、分析杯前的管路上設加溫裝置實現(xiàn)；或設置試劑瓶加溫結合管路加溫、以及設置加樣針、采樣杯、準備杯、分析杯恒溫設施確保血樣在全部檢測過程中的溫度不得低于18°C ；且各環(huán)節(jié)溫差不得大于士 1.5°C。其實現(xiàn)方式可以是在各個相關部件上加恒溫裝置或在儀器內部設計總體恒溫機構。實施例2一種血小板分析儀檢測血小板聚集率測試結果重復性，及與比濁法檢測血小板聚集率結果相關性比較。1)本發(fā)明儀器與某比濁法(該比濁法參見Born GVR. Aggregation of blood platelets by adenosine diphosphate and its reversal. Nature(Lond. ). 1962 ； 194 927)儀器測定結果的重復性比較。以1份枸櫞酸鈉抗凝全血為標本，分別用本發(fā)明的儀器及比濁法儀器檢測其0-5 分鐘內的血小板聚集率，各重復檢測10次。結果見下表。本實施例中的設備與實施例1中的設備相同，步驟與實施例1的步驟相同，其中， 使用的分析液為生理鹽水，誘聚劑為二磷酸腺苷水溶液，第一次稀釋倍數(shù)為M0，第二次稀釋倍數(shù)為Mo。表1 本發(fā)明儀器測定1 5分鐘內血小板聚集率(儀器型號PL_11)
權利要求
1.一種血小板自動化分析儀，其特征在于包括采樣杯、準備杯、分析杯、加樣針、血樣注射器、誘聚劑注射器、分析液注射器以及血樣混勻裝置；所述采樣杯用于儲存血樣； 所述準備杯用于一次稀釋血樣； 所述分析杯用于二次稀釋血液和檢測血樣； 所述血樣混勻裝置用于混勻采樣杯、準備杯以及分析杯內的血樣； 所述誘聚劑注射器連通誘聚劑儲藏器，用于向采樣杯內加誘聚劑； 所述分析液注射器連通分析液儲藏器，用于向分析杯或準備杯加分析液； 所述加樣針、血樣注射器、誘聚劑注射器、分析液注射器分別由電機控制運動； 所述加樣針通過管道和閥分別連通血樣注射器和分析液注射器； 所述加樣針與血樣注射器連通后，依次將血樣加入采樣杯，從采樣杯中吸取部分血樣加入準備杯，從準備杯中吸取部分稀釋血液加入分析杯；所述加樣針與所述分析液注射器連通后，用于清空加樣針。
2.根據(jù)權利要求1所述的一種血小板自動化分析儀，其特征在于，所述混勻裝置為空氣泵，空氣泵通過管道和閥分別連通采樣杯、準備杯以及分析杯；其中連通采樣杯的管道內徑為0. 2mm 2mm，進氣量為1 20ml/min。
3.根據(jù)權利要求2所述的一種血小板自動化分析儀，其特征在于，所述空氣泵為旋轉泵或混勻注射器。
4.根據(jù)權利要求1或2所述的一種血小板自動化分析儀，其特征在于，包括一個用于清洗加樣針外壁的清洗頭。
5.根據(jù)權利要求4所述的一種血小板自動化分析儀，其特征在于，包括一個廢液泵，所述廢液泵分別連通采樣杯、準備杯以及分析杯以及清洗頭。
6.一種使用權利要求1所述血小板自動化分析儀的血小板分析方法，其特征在于，包括以下步驟步驟1，連通血樣注射器與加樣針，吸取待檢測血樣，加入采樣杯中，并混勻血樣； 步驟2，通過血樣注射器和加樣針定量吸取采樣杯中的血樣，加入準備杯； 步驟3，通過分析液注射器向準備杯中加入分析液進行一次定量稀釋，并混勻血樣； 步驟4，連通血樣注射器與加樣針，定量吸取準備杯中的血樣，加入分析杯； 步驟5，通過分析液注射器向分析杯中加入分析液進行二次定量稀釋，并混勻血樣； 步驟6，檢測分析杯中血樣的原始血小板數(shù)量； 步驟7，通過誘聚劑注射器向采樣杯中加入誘聚劑，并混勻血樣； 步驟8，每間隔一定時間重復步驟2 步驟5，檢測加入誘聚劑后的各個時間點的分析杯中血樣的血小板數(shù)量；步驟9，將加入誘聚劑后的各個時間點的血小板數(shù)量與原始血小板數(shù)量相比，獲得血小板聚集率。
7.根據(jù)權利要求6所述的一種血小板分析方法，其特征在于，采用鼓氣法進行血樣混勻。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種血小板自動化分析儀，包括采樣杯、準備杯、分析杯、加樣針、血樣注射器、誘聚劑注射器、分析液注射器以及血樣混勻裝置。本發(fā)明還公開了一種血小板分析方法，包括以下步驟步驟1，吸取待檢測血樣，加入采樣杯中；步驟2，吸取采樣杯中的血樣，加入準備杯；步驟3，向準備杯中加入分析液進行一次定量稀釋；步驟4，定量吸取準備杯中的血樣，加入分析杯；步驟5，向分析杯中加入分析液進行二次定量稀釋；步驟6，檢測分析杯中血樣的原始血小板數(shù)量；步驟7，向采樣杯中加入誘聚劑；步驟8，每間隔一定時間重復步驟2～步驟5，檢測加入誘聚劑后的各個時間點的分析杯中血樣的血小板數(shù)量；步驟9，獲得血小板聚集率。
文檔編號G01N35/00GK102253230SQ20111018407
公開日2011年11月23日 申請日期2011年7月1日 優(yōu)先權日2011年7月1日
發(fā)明者余凡, 徐新, 曹寧, 李想, 楊維杰, 董自權 申請人:南京神州英諾華醫(yī)療科技有限公司