專利名稱：細(xì)胞的識(shí)別裝置和識(shí)別方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及細(xì)胞的識(shí)別裝置和識(shí)別方法。特別涉及基于透過光信號(hào)的變動(dòng)來對(duì)分散在流過流徑內(nèi)的液體中的循環(huán)癌細(xì)胞進(jìn)行識(shí)別的細(xì)胞的識(shí)別裝置和識(shí)別方法。
背景技術(shù)：
提出了按照使樣本(被檢微小物)分散的液體在毛細(xì)管內(nèi)流過的方式，來自光源的光照射該液體流，從而測(cè)量液體流中的樣本的光信息(熒光信息)的技術(shù)(例如，參照專利文獻(xiàn)1)。此外，近年來，作為早期發(fā)現(xiàn)癌的方法，檢測(cè)轉(zhuǎn)移到末梢血(peripheral blood)中的癌細(xì)胞即循環(huán)癌細(xì)胞的方法受到了矚目。例如，提出了如下的方法禾_細(xì)胞表面的抗體 /抗原反應(yīng)，磁性分離用微細(xì)的鐵珠標(biāo)記的乳癌癌細(xì)胞，進(jìn)而用APC(活性化蛋白質(zhì)C)標(biāo)記混入了少許的白血球來加以除去，從而僅對(duì)存在于末梢血中的乳癌癌細(xì)胞進(jìn)行識(shí)別。專利文獻(xiàn)1專利第四73387號(hào)公報(bào)但是，在上述的利用細(xì)胞表面的抗體/抗原反應(yīng)來檢測(cè)循環(huán)癌細(xì)胞的方法中，需要開發(fā)對(duì)應(yīng)于乳癌、胃癌等癌種類的抗體，雖然當(dāng)前已開發(fā)了對(duì)應(yīng)于乳癌的抗體，但未開發(fā)出對(duì)應(yīng)于其他癌的抗體，存在必須開發(fā)對(duì)應(yīng)于癌種類的抗體的問題。

發(fā)明內(nèi)容
因此，本發(fā)明是為了解決如上所述的問題點(diǎn)而完成的，其目的在于提供一種無須利用細(xì)胞表面的抗體/抗原反應(yīng)就能夠識(shí)別循環(huán)癌細(xì)胞細(xì)胞的識(shí)別裝置和識(shí)別方法。本發(fā)明者在針對(duì)上述的問題專心研究的結(jié)果，發(fā)現(xiàn)了基于對(duì)使末梢血中的細(xì)胞分散的液體照射光而檢測(cè)出的、該細(xì)胞的透過光信號(hào)的變動(dòng)的極點(diǎn)值，能夠識(shí)別循環(huán)癌細(xì)胞， 從而完成了本發(fā)明。這里，透過光是指通過了使細(xì)胞分散的液體的光、通過了細(xì)胞的光、由細(xì)胞反射/ 散射/衍射的光等由受光部接收到的光，透過光信號(hào)是指將透過光轉(zhuǎn)換為電信號(hào)的信號(hào)。 在接收透過光的任意區(qū)域中，始終接收到光，但在細(xì)胞測(cè)量時(shí)，會(huì)在光接收功率(透過光信號(hào))中產(chǎn)生變動(dòng)。將該變動(dòng)的峰值、寬度、面積等稱為透過光信息。S卩，本發(fā)明的第1方式的細(xì)胞識(shí)別裝置識(shí)別末梢血中的不同的細(xì)胞和細(xì)胞種類， 該細(xì)胞識(shí)別裝置的特征在于，具備照射部，其向使末梢血中的所述細(xì)胞分散后的液體照射一定功率的單模光來作為照射光；受光部，其使處于所述細(xì)胞相對(duì)于所述照射光的相對(duì)位置勻速變化的狀態(tài)的所述液體接收基于從所述照射部照射的所述照射光而產(chǎn)生的所述液體的透過光，并作為透過光信號(hào)來輸出，且該受光部設(shè)置在與所述照射部正對(duì)的位置上；測(cè)量部，其輸入從所述受光部輸出的所述透過光信號(hào)，并測(cè)量所述細(xì)胞引起的所述透過光信號(hào)的變動(dòng)；以及識(shí)別部，其基于由所述測(cè)量部測(cè)量出的所述細(xì)胞引起的所述透過光信號(hào)的變動(dòng)中的極點(diǎn)值，識(shí)別末梢血中的所述細(xì)胞。這里，末梢血細(xì)胞是指存在于末梢血中的細(xì)胞即白血球、紅血球和血小板，末梢血中的細(xì)胞是指末梢血細(xì)胞即白血球、紅血球、血小板和末梢血細(xì)胞以外的細(xì)胞(白血球、紅血球和血小板以外的細(xì)胞)。此外，白血球分為淋巴球、單核細(xì)胞、顆粒球。此外，不同的細(xì)胞種類是指細(xì)胞種類不同的細(xì)胞，不同的細(xì)胞是指即使是相同種類的細(xì)胞，在細(xì)胞周期等細(xì)胞狀態(tài)不同時(shí)識(shí)別為不同的細(xì)胞的細(xì)胞。本發(fā)明的第2方式的細(xì)胞識(shí)別裝置是上述的本發(fā)明的第1方式的細(xì)胞識(shí)別裝置， 其特征在于，在將沒有所述細(xì)胞的狀態(tài)下的所述液體的所述透過光信號(hào)設(shè)為基準(zhǔn)值時(shí)，所述識(shí)別部比較所述細(xì)胞引起的所述透過光信號(hào)的變動(dòng)中的極大點(diǎn)的值和所述基準(zhǔn)值，在所述極大點(diǎn)的值為所述基準(zhǔn)值以上時(shí)，識(shí)別為該細(xì)胞是末梢血細(xì)胞以外的細(xì)胞。此外，雖然記載為在透過光信號(hào)的變動(dòng)中，在極大點(diǎn)的值為基準(zhǔn)值以上時(shí)，識(shí)別為細(xì)胞是末梢血細(xì)胞以外的細(xì)胞，但由于在測(cè)量開始時(shí)和測(cè)量結(jié)束時(shí)透過光信號(hào)成為基準(zhǔn)值，所以并不包括這種情況。此時(shí)，也可以通過在極大點(diǎn)的值比基準(zhǔn)值大時(shí)，識(shí)別為細(xì)胞是末梢血細(xì)胞以外的細(xì)胞，從而不識(shí)別測(cè)量開始時(shí)和測(cè)量結(jié)束時(shí)的基準(zhǔn)值。本發(fā)明的第3方式的細(xì)胞識(shí)別裝置是上述的本發(fā)明的第1或第2方式的細(xì)胞識(shí)別裝置，其特征在于，由所述識(shí)別部識(shí)別為末梢血細(xì)胞以外的細(xì)胞的所述細(xì)胞是循環(huán)癌細(xì)胞。此外，循環(huán)癌細(xì)胞是轉(zhuǎn)移到末梢血中的癌細(xì)胞。本發(fā)明的第4方式的細(xì)胞識(shí)別裝置是上述的本發(fā)明的第1至第3方式的任一方式所述的細(xì)胞識(shí)別裝置，其特征在于，所述細(xì)胞是被實(shí)施了包括細(xì)胞表面抗體/抗原反應(yīng)、細(xì)胞內(nèi)的熒光蛋白表達(dá)在內(nèi)的熒光處理的細(xì)胞。本發(fā)明的第5方式的細(xì)胞識(shí)別裝置是上述的本發(fā)明的第1至第4方式的任一方式所述的細(xì)胞識(shí)別裝置，其特征在于，所述測(cè)量部還根據(jù)所述透過光信號(hào)的變動(dòng)，測(cè)量透過光信息，所述識(shí)別部還基于由所述測(cè)量部測(cè)量出的所述透過光信息，識(shí)別末梢血中的所述細(xì)胞。本發(fā)明的第6方式的細(xì)胞識(shí)別裝置是上述的本發(fā)明的第1至第5方式的任一方式所述的細(xì)胞識(shí)別裝置，其特征在于，還具備第二受光部，該第二受光部接收基于從所述照射部照射的所述照射光而產(chǎn)生的所述細(xì)胞的散射光和/或熒光，并作為散射/熒光信號(hào)而輸出，并且該第二受光部設(shè)置在與所述照射部正對(duì)的位置以外的位置上，所述測(cè)量部還輸入從所述第二受光部輸出的所述散射/熒光信號(hào)，并測(cè)量所述細(xì)胞引起的所述散射/熒光信號(hào)的變動(dòng)，所述識(shí)別部還基于由所述測(cè)量部測(cè)量出的所述散射/熒光信號(hào)的變動(dòng)，識(shí)別末梢血中的所述細(xì)胞。本發(fā)明的第7方式的細(xì)胞識(shí)別裝置是上述的本發(fā)明的第1至第6方式的任一方式所述的細(xì)胞識(shí)別裝置，其特征在于，所述測(cè)量部還根據(jù)所述散射/熒光信號(hào)的變動(dòng)，測(cè)量散射/熒光信息，所述識(shí)別部還基于由所述測(cè)量部測(cè)量出的所述透過/熒光信息，識(shí)別末梢血中的所述細(xì)胞。本發(fā)明的第8方式的細(xì)胞識(shí)別裝置是上述的本發(fā)明的第1至第7方式的任一方式所述的細(xì)胞識(shí)別裝置，其特征在于，所述照射光是非聚光的單模光。本發(fā)明的第9方式的細(xì)胞識(shí)別裝置是上述的本發(fā)明的第1至第8方式的任一方式所述的細(xì)胞識(shí)別裝置中，其特征在于，還具備分取部，該分取部將由所述識(shí)別部識(shí)別出的末梢血中的所述細(xì)胞分取到規(guī)定的容器中。本發(fā)明的第1方式的細(xì)胞識(shí)別方法識(shí)別末梢血中的細(xì)胞，并使用了照射部和受光部，所述照射部向使末梢血的細(xì)胞分散后的液體照射一定功率的單模光來作為照射光，所述受光部設(shè)置在與所述照射部正對(duì)的位置上且接收透過光后作為透過光信號(hào)而輸出給測(cè)量部，該細(xì)胞識(shí)別方法的特征在于，具備(a)從所述照射部向處于所述細(xì)胞相對(duì)于所述照射光的相對(duì)位置勻速變化的狀態(tài)的所述液體照射所述照射光的步驟；(b)由所述受光部接收基于所述照射光而產(chǎn)生的所述液體的透過光，并作為透過光信號(hào)而輸出給所述測(cè)量部的步驟；(C)在所述測(cè)量部中輸入由所述步驟(b)輸出的所述透過光信號(hào)，并在該測(cè)量部中測(cè)量所述細(xì)胞引起的所述透過光信號(hào)的變動(dòng)的步驟；以及(d)基于由所述步驟(C)測(cè)量出的所述細(xì)胞引起的所述透過光信號(hào)的變動(dòng)中的極點(diǎn)值，識(shí)別末梢血中的所述細(xì)胞的步驟。本發(fā)明的第2方式的細(xì)胞識(shí)別方法是上述的本發(fā)明的第1方式的細(xì)胞識(shí)別方法， 其特征在于，在將沒有所述細(xì)胞的狀態(tài)下的所述液體的所述透過光信號(hào)設(shè)為基準(zhǔn)值時(shí)，所述步驟(d)比較所述細(xì)胞引起的所述透過光信號(hào)的變動(dòng)中的極大點(diǎn)的值和所述基準(zhǔn)值，在所述極大點(diǎn)的值為所述基準(zhǔn)值以上時(shí)，識(shí)別為該細(xì)胞是末梢血細(xì)胞以外的細(xì)胞。本發(fā)明的第3方式的細(xì)胞識(shí)別方法是上述的本發(fā)明的第1或第2方式的細(xì)胞識(shí)別方法，其特征在于，由所述步驟(d)識(shí)別為末梢血細(xì)胞以外的細(xì)胞的所述細(xì)胞是循環(huán)癌細(xì)胞。本發(fā)明的第4方式的細(xì)胞識(shí)別方法是上述的本發(fā)明的第1至第3方式的任一方式所述的細(xì)胞識(shí)別方法，其特征在于，所述細(xì)胞是被實(shí)施了包括細(xì)胞表面抗體/抗原反應(yīng)、細(xì)胞內(nèi)的熒光蛋白表達(dá)在內(nèi)的熒光處理的細(xì)胞。本發(fā)明的第5方式的細(xì)胞識(shí)別方法是上述的本發(fā)明的第1至第4方式的任一方式所述的細(xì)胞識(shí)別方法，其特征在于，所述步驟(c)還根據(jù)所述透過光信號(hào)的變動(dòng)，測(cè)量透過光信息，所述步驟(d)還基于由所述步驟(c)測(cè)量出的所述透過光信息，識(shí)別末梢血中的所述細(xì)胞。本發(fā)明的第6方式的細(xì)胞識(shí)別方法是上述的本發(fā)明的第1至第5方式的任一方式所述的細(xì)胞識(shí)別方法，其特征在于，所述細(xì)胞識(shí)別方法還使用第二受光部，該第二受光部接收基于從所述照射部照射的所述照射光而產(chǎn)生的所述細(xì)胞的散射光和/或熒光，并作為散射/熒光信號(hào)而輸出給所述測(cè)量部，并且該第二受光部設(shè)置在與所述照射部正對(duì)的位置以外的位置上，所述步驟(b)還通過所述第二受光部接收基于所述照射光而產(chǎn)生的所述細(xì)胞的散射光和/或熒光，并作為所述散射/熒光信號(hào)而輸出給所述測(cè)量部，所述步驟(c)還在所述測(cè)量部中輸入由所述步驟(b)輸出的所述散射/熒光信號(hào)，并在該測(cè)量部中測(cè)量所述細(xì)胞引起的所述散射/熒光信號(hào)的變動(dòng)，所述步驟(d)還基于由所述步驟(C)測(cè)量出的所述散射/熒光信號(hào)的變動(dòng)，識(shí)別末梢血中的所述細(xì)胞。本發(fā)明的第7方式的細(xì)胞識(shí)別方法是上述的本發(fā)明的第1至第6方式的任一方式所述的細(xì)胞識(shí)別方法，其特征在于，所述步驟(C)還根據(jù)所述散射/熒光信號(hào)的變動(dòng)，測(cè)量散射/熒光信息，所述步驟(d)還基于由所述步驟(c)測(cè)量出的所述散射/熒光信息，識(shí)別末梢血中的所述細(xì)胞。本發(fā)明的第8方式的細(xì)胞識(shí)別方法是上述的本發(fā)明的第1至第7方式的任一方式所述的細(xì)胞識(shí)別方法，其特征在于，所述照射光是非聚光的單模光。本發(fā)明的第9方式的細(xì)胞識(shí)別方法是上述的本發(fā)明的第1至第8方式的任一方式所述的細(xì)胞識(shí)別方法，其特征在于，還具備(e)將由所述步驟(d)識(shí)別出的末梢血中的所述細(xì)胞分取到規(guī)定的容器中的步驟。(發(fā)明效果)根據(jù)本發(fā)明的細(xì)胞的識(shí)別裝置和識(shí)別方法，無須利用細(xì)胞表面的抗體/抗原反應(yīng)，能夠識(shí)別轉(zhuǎn)移到末梢血中的癌細(xì)胞，即循環(huán)癌細(xì)胞。


圖1是本發(fā)明的一實(shí)施方式的細(xì)胞識(shí)別裝置10的示意側(cè)視圖。圖2是圖1的K-K線的剖視圖。圖3是表示由本發(fā)明的一實(shí)施方式的細(xì)胞識(shí)別裝置10的測(cè)量部40測(cè)量出的、透過光信號(hào)SGl相對(duì)于末梢血中的細(xì)胞的變動(dòng)波形的特征的圖。圖4是表示由本發(fā)明的一實(shí)施方式的細(xì)胞識(shí)別裝置10的測(cè)量部40測(cè)量出的、透過光信號(hào)SGl相對(duì)于循環(huán)癌細(xì)胞的變動(dòng)結(jié)果的一例的圖。圖5是用于說明使用了本發(fā)明的一實(shí)施方式的細(xì)胞識(shí)別裝置10的細(xì)胞的識(shí)別處理步驟的流程圖。圖6是本發(fā)明的一實(shí)施方式的其他細(xì)胞識(shí)別裝置IOa的示意側(cè)視圖。圖7是圖6的K-K線的剖視圖。圖8是用于說明使用了本發(fā)明的一實(shí)施方式的其他細(xì)胞識(shí)別裝置IOa的細(xì)胞的識(shí)別處理步驟的流程圖。圖中10、10a-細(xì)胞識(shí)別裝置；11-液體；IlS-樣本流；15-毛細(xì)管；19-鞘流； 20-照射部；30-受光部；40-測(cè)量部；50-識(shí)別部；60-分取部；70-供給部；80-第二受光部； S-細(xì)胞；L-照射光；SGl-透過光信號(hào)；SG2-散射/熒光信號(hào)。
具體實(shí)施例方式以下，基于附圖詳細(xì)說明本發(fā)明的實(shí)施方式。圖1是本發(fā)明的一實(shí)施方式的細(xì)胞識(shí)別裝置10的示意側(cè)視圖，圖2是圖1的K-K 線的剖視圖。如圖1和圖2所示，本發(fā)明的一實(shí)施方式的細(xì)胞識(shí)別裝置10包括毛細(xì)管 (capillary) 15，其用于使樣本流IlS流過；照射部20，其照射一定功率的單模光作為照射光L ；受光部30，其接收透過光Ll并將其作為透過光信號(hào)SGl來輸出；測(cè)量部40，其輸入從受光部30輸出的透過光信號(hào)SG1，從而測(cè)量細(xì)胞S引起的透過光信號(hào)SGl的變動(dòng)；識(shí)別部 50，其基于細(xì)胞S引起的透過光信號(hào)SGl的變動(dòng)，識(shí)別該細(xì)胞S是否為末梢血細(xì)胞；分取部 60，其基于識(shí)別部50的識(shí)別結(jié)果，將細(xì)胞S分取到規(guī)定的容器中；以及供給部70，其用于對(duì)毛細(xì)管15提供樣本流11S。供給部70對(duì)使從末梢血中取出的細(xì)胞分散的液體11，執(zhí)行去除紅血球和血小板的處理(以下，稱為前處理)。然后，將通過前處理而留下的紅血球和血小板以外的末梢血中的細(xì)胞設(shè)為細(xì)胞S。供給部70將使細(xì)胞S分散的液體11作為樣本流IlS來使其與鞘 (sheath)流19 一同流向Z方向(在圖1中是從上側(cè)向下側(cè)的方向)，并經(jīng)由管(tube) 14提供給毛細(xì)管15。此外，供給部70調(diào)整樣本流IlS和鞘流19的壓力，從而調(diào)整在毛細(xì)管15 內(nèi)的液體11中分散的細(xì)胞S的速度和流量。
此外，分散在上述的液體11中的細(xì)胞S是從末梢血中取出的細(xì)胞，但也可以是對(duì)從末梢血中取出的細(xì)胞實(shí)施了包括核染色、細(xì)胞表面的抗體/抗原反應(yīng)、細(xì)胞內(nèi)的熒光蛋白表達(dá)等在內(nèi)的熒光處理的細(xì)胞。此外，前處理的步驟例如是，首先，利用MilliQ (純水)將包含溶血?jiǎng)┖凸潭▌?(甲醛)這兩者的人體專用溶血?jiǎng)?FACS Lysing Solution)稀釋10倍，并在15ml的試驗(yàn)管中裝入6. 5 7ml。接著，在試驗(yàn)管中加入Iml的全血檢體(穩(wěn)定的人紅血球和白血球的懸浮液，且具有典型、正常的人全血所具有的溶血、散射光、抗原發(fā)現(xiàn)和抗體染色性)，利用移液管(pipette)平穩(wěn)地混合，并在室溫中保管15 30分鐘。之后，以IOOOrpm進(jìn)行5 分鐘的離心分離，吸引上清液，并增加5ml的磷酸鹽緩沖液(PBS)后再次進(jìn)行懸浮。將重復(fù)了 3次該離心分離和再次懸浮的樣本在室溫下保管兩個(gè)小時(shí)，進(jìn)一步在4°C下保管M小時(shí)。 最后，使樣本通過40 μ m網(wǎng)眼(mesh)的過濾器后結(jié)束前處理。照射部20對(duì)毛細(xì)管15內(nèi)的液體11照射一定功率的單模光作為照射光L。例如， 如圖1和圖2所示，照射部20由激光光源21和照射用的光纖22構(gòu)成。作為激光光源21， 例如有激光二極管這樣的光源。此外，在對(duì)毛細(xì)管15內(nèi)的液體11照射照射光L時(shí)，供給部 70調(diào)整樣本流IlS和鞘流19的壓力，使得細(xì)胞S相對(duì)于來自照射部20的照射光L的相對(duì)位置勻速地變化。這里，優(yōu)選照射光L為非聚光的單模光。此外，單模光具有高斯分布的強(qiáng)度模型。受光部30設(shè)置在經(jīng)由毛細(xì)管15與照射部20正對(duì)的位置，并接收基于照射光L的液體11的透過光Li，并作為透過光信號(hào)SGl而輸出給測(cè)量部40。例如，如圖1和圖2所示， 受光部30由受光用的光纖31和受光元件32構(gòu)成。此外，作為受光元件32，例如有光電倍增管、光檢測(cè)器這樣的元件。這里，優(yōu)選照射部20的第一光軸Dl和受光部30的第二光軸
D2 一致。此外，在對(duì)毛細(xì)管15內(nèi)的液體11照射照射光L時(shí)，供給部70調(diào)整樣本流IlS和鞘流19的壓力，使得細(xì)胞S相對(duì)于照射光L的相對(duì)位置勻速地變化。由此，受光部30接收細(xì)胞S相對(duì)于照射光L的相對(duì)位置勻速地變化的狀態(tài)的液體11的透過光Ll，并作為透過光信號(hào)SGl而輸出給測(cè)量部40。測(cè)量部40輸入從受光部30輸出的透過光信號(hào)SGl，測(cè)量細(xì)胞S引起的透過光信號(hào) SGl的變動(dòng)，并將該測(cè)量結(jié)果輸出給識(shí)別部50。這里，細(xì)胞S引起的透過光信號(hào)SGl的變動(dòng)是因?yàn)闃?gòu)成細(xì)胞S的物質(zhì)(例如，細(xì)胞核等)的種類、形狀、大小、個(gè)數(shù)等差異而導(dǎo)致的照射光L透過細(xì)胞S時(shí)的光的衍射現(xiàn)象、光的干涉現(xiàn)象、光的吸收現(xiàn)象、光的散射現(xiàn)象等所引起的。識(shí)別部50基于從測(cè)量部40輸入的細(xì)胞S引起的透過光信號(hào)SGl的變動(dòng)中的極點(diǎn)值，識(shí)別細(xì)胞S。即，識(shí)別細(xì)胞S是末梢血細(xì)胞(即，白血球)，還是末梢血細(xì)胞以外的細(xì)胞。 在這里，僅根據(jù)透過光信號(hào)SGl的變動(dòng)中的極點(diǎn)值進(jìn)行細(xì)胞S的識(shí)別，但也可以組合極點(diǎn)值和極點(diǎn)的個(gè)數(shù)來進(jìn)行細(xì)胞S的識(shí)別。此外，識(shí)別處理的細(xì)節(jié)將在后面敘述。分取部60基于由識(shí)別部50識(shí)別出的識(shí)別結(jié)果，在分取末梢血細(xì)胞時(shí)，將作為末梢血細(xì)胞的細(xì)胞S分取到規(guī)定的容器(未圖示)中，而在分取末梢血細(xì)胞以外的細(xì)胞時(shí)，將作為末梢血細(xì)胞以外的細(xì)胞的細(xì)胞S分取到規(guī)定的容器(未圖示)中。接著，參照?qǐng)D3和圖4以及表1說明在本發(fā)明的一實(shí)施方式的細(xì)胞識(shí)別裝置10的識(shí)別部50中執(zhí)行的細(xì)胞S的識(shí)別處理的細(xì)節(jié)。圖3是表示由本發(fā)明的一實(shí)施方式的細(xì)胞識(shí)別裝置10的測(cè)量部40測(cè)量出的、透過光信號(hào)SGl相對(duì)于末梢血中的細(xì)胞的變動(dòng)波形的特征的圖。如圖3所示，能夠?qū)⑼高^光信號(hào)SGl相對(duì)于末梢血中的細(xì)胞的變動(dòng)波形分類為如下的四個(gè)波形圖案如圖3(a)所示的具有一個(gè)極小點(diǎn)的第一波形圖案；如圖3(b)所示的具有兩個(gè)極小點(diǎn)且極大點(diǎn)的值在基準(zhǔn)值A(chǔ)以下的第二波形圖案；如圖3 (c)所示的具有三個(gè)以上的極小點(diǎn)且極大點(diǎn)的值在基準(zhǔn)值A(chǔ)以下的第三波形圖案；以及如圖3(d)所示的極大點(diǎn)的值比基準(zhǔn)值A(chǔ)大的第四波形圖案。這里，將沒有細(xì)胞S的狀態(tài)的液體11的透過光信號(hào) SGl的值設(shè)為基準(zhǔn)值A(chǔ)。此外，在細(xì)胞S引起的透過光信號(hào)SGl的變動(dòng)的極大點(diǎn)中排除如下的變動(dòng)，即細(xì)胞S引起的透過光信號(hào)SGl的測(cè)量結(jié)束時(shí)，在附近產(chǎn)生的過沖(overshoot) 所引起的變動(dòng)。此外，若僅關(guān)注極點(diǎn)值，則只有第四波形圖案具有極點(diǎn)值比基準(zhǔn)值A(chǔ)大的值，在第一波形圖案、第二波形圖案以及第三波形圖案中，極點(diǎn)值全部在基準(zhǔn)值A(chǔ)以下。接著，在表1中表示由本發(fā)明的一實(shí)施方式的細(xì)胞識(shí)別裝置10的測(cè)量部40測(cè)量出透過光信號(hào)SGl相對(duì)于末梢血中的白血球的變動(dòng)波形的結(jié)果。表1是表示了對(duì)于混有淋巴球、單核細(xì)胞、顆粒球的白血球和只有淋巴球的白血球的上述四個(gè)波形圖案的測(cè)量比例 (% )的表。表1
權(quán)利要求
1.一種細(xì)胞識(shí)別裝置，其識(shí)別末梢血中的不同的細(xì)胞和細(xì)胞種類，該細(xì)胞識(shí)別裝置的特征在于，具備照射部，其向使末梢血中的所述細(xì)胞分散后的液體照射照射光； 受光部，其使處于所述細(xì)胞相對(duì)于所述照射光的相對(duì)位置勻速變化的狀態(tài)的所述液體接收基于從所述照射部照射的所述照射光而產(chǎn)生的所述液體的透過光，并作為透過光信號(hào)來輸出，且該受光部設(shè)置在與所述照射部正對(duì)的位置上；測(cè)量部，其輸入從所述受光部輸出的所述透過光信號(hào)，并測(cè)量所述細(xì)胞引起的所述透過光信號(hào)的變動(dòng)；以及識(shí)別部，其基于由所述測(cè)量部測(cè)量出的所述細(xì)胞引起的所述透過光信號(hào)的變動(dòng)中的極點(diǎn)值，識(shí)別末梢血中的所述細(xì)胞。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的細(xì)胞識(shí)別裝置，其特征在于，在將沒有所述細(xì)胞的狀態(tài)下的所述液體的所述透過光信號(hào)設(shè)為基準(zhǔn)值時(shí)，所述識(shí)別部比較所述細(xì)胞引起的所述透過光信號(hào)的變動(dòng)中的極大點(diǎn)的值和所述基準(zhǔn)值，在所述極大點(diǎn)的值為所述基準(zhǔn)值以上時(shí)，識(shí)別為該細(xì)胞是末梢血細(xì)胞以外的細(xì)胞。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的細(xì)胞識(shí)別裝置，其特征在于，由所述識(shí)別部識(shí)別為末梢血細(xì)胞以外的細(xì)胞的所述細(xì)胞是循環(huán)癌細(xì)胞。
4.根據(jù)權(quán)利要求1至3的任一項(xiàng)所述的細(xì)胞識(shí)別裝置，其特征在于，所述細(xì)胞是被實(shí)施了包括細(xì)胞表面抗體/抗原反應(yīng)、細(xì)胞內(nèi)的熒光蛋白表達(dá)在內(nèi)的熒光處理的細(xì)胞。
5.根據(jù)權(quán)利要求1至4的任一項(xiàng)所述的細(xì)胞識(shí)別裝置，其特征在于， 所述測(cè)量部還根據(jù)所述透過光信號(hào)的變動(dòng)，測(cè)量透過光信息，所述識(shí)別部還基于由所述測(cè)量部測(cè)量出的所述透過光信息，識(shí)別末梢血中的所述細(xì)胞。
6.根據(jù)權(quán)利要求1至5的任一項(xiàng)所述的細(xì)胞識(shí)別裝置，其特征在于，該細(xì)胞識(shí)別裝置還具備第二受光部，該第二受光部接收基于從所述照射部照射的所述照射光而產(chǎn)生的所述細(xì)胞的散射光和/或熒光，并作為散射/熒光信號(hào)而輸出，并且該第二受光部設(shè)置在與所述照射部正對(duì)的位置以外的位置上，所述測(cè)量部還輸入從所述第二受光部輸出的所述散射/熒光信號(hào)，并測(cè)量所述細(xì)胞引起的所述散射/熒光信號(hào)的變動(dòng)，所述識(shí)別部還基于由所述測(cè)量部測(cè)量出的所述散射/熒光信號(hào)的變動(dòng)，識(shí)別末梢血中的所述細(xì)胞。
7.根據(jù)權(quán)利要求1至6的任一項(xiàng)所述的細(xì)胞識(shí)別裝置，其特征在于， 所述測(cè)量部還根據(jù)所述散射/熒光信號(hào)的變動(dòng)，測(cè)量散射/熒光信息，所述識(shí)別部還基于由所述測(cè)量部測(cè)量出的所述透過/熒光信息，識(shí)別末梢血中的所述細(xì)胞。
8.根據(jù)權(quán)利要求1至7的任一項(xiàng)所述的細(xì)胞識(shí)別裝置，其特征在于， 所述照射光是非聚光的單模光。
9.根據(jù)權(quán)利要求1至8的任一項(xiàng)所述的細(xì)胞識(shí)別裝置，其特征在于，該細(xì)胞識(shí)別裝置還具備分取部，該分取部將由所述識(shí)別部識(shí)別出的末梢血中的所述細(xì)胞分取到規(guī)定的容器中。
10.一種細(xì)胞識(shí)別方法，該細(xì)胞識(shí)別方法識(shí)別末梢血中的細(xì)胞，并使用了照射部和受光部，所述照射部向使末梢血中的細(xì)胞分散后的液體照射照射光，所述受光部設(shè)置在與所述照射部正對(duì)的位置上且接收透過光后作為透過光信號(hào)而輸出給測(cè)量部，該細(xì)胞識(shí)別方法的特征在于，具備(a)從所述照射部向處于所述細(xì)胞相對(duì)于所述照射光的相對(duì)位置勻速變化的狀態(tài)的所述液體照射所述照射光的步驟；(b)由所述受光部接收基于所述照射光而產(chǎn)生的所述液體的透過光，并作為透過光信號(hào)而輸出給所述測(cè)量部的步驟；(c)在所述測(cè)量部中輸入由所述步驟(b)輸出的所述透過光信號(hào)，并在該測(cè)量部中測(cè)量所述細(xì)胞引起的所述透過光信號(hào)的變動(dòng)的步驟；以及(d)基于由所述步驟(c)測(cè)量出的所述細(xì)胞引起的所述透過光信號(hào)的變動(dòng)中的極點(diǎn)值，識(shí)別末梢血中的所述細(xì)胞的步驟。
11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的細(xì)胞識(shí)別方法，其特征在于，在將沒有所述細(xì)胞的狀態(tài)下的所述液體的所述透過光信號(hào)設(shè)為基準(zhǔn)值時(shí)，所述步驟 (d)比較所述細(xì)胞引起的所述透過光信號(hào)的變動(dòng)中的極大點(diǎn)的值和所述基準(zhǔn)值，在所述極大點(diǎn)的值為所述基準(zhǔn)值以上時(shí)，識(shí)別為該細(xì)胞是末梢血細(xì)胞以外的細(xì)胞。
12.根據(jù)權(quán)利要求10或11所述的細(xì)胞識(shí)別方法，其特征在于，由所述步驟(d)識(shí)別為末梢血細(xì)胞以外的細(xì)胞的所述細(xì)胞是循環(huán)癌細(xì)胞。
13.根據(jù)權(quán)利要求10至12的任一項(xiàng)所述的細(xì)胞識(shí)別方法，其特征在于，所述細(xì)胞是被實(shí)施了包括細(xì)胞表面抗體/抗原反應(yīng)、細(xì)胞內(nèi)的熒光蛋白表達(dá)在內(nèi)的熒光處理的細(xì)胞。
14.根據(jù)權(quán)利要求10至13的任一項(xiàng)所述的細(xì)胞識(shí)別方法，其特征在于，所述步驟(c)還根據(jù)所述透過光信號(hào)的變動(dòng)，測(cè)量透過光信息，所述步驟(d)還基于由所述步驟(c)測(cè)量出的所述透過光信息，識(shí)別末梢血中的所述細(xì)胞。
15.根據(jù)權(quán)利要求10至14的任一項(xiàng)所述的細(xì)胞識(shí)別方法，其特征在于，所述細(xì)胞識(shí)別方法還使用第二受光部，該第二受光部接收基于從所述照射部照射的所述照射光而產(chǎn)生的所述細(xì)胞的散射光和/或熒光，并作為散射/熒光信號(hào)而輸出給所述測(cè)量部，并且該第二受光部設(shè)置在與所述照射部正對(duì)的位置以外的位置上，所述步驟(b)還通過所述第二受光部接收基于所述照射光而產(chǎn)生的所述細(xì)胞的散射光和/或熒光，并作為所述散射/熒光信號(hào)而輸出給所述測(cè)量部，所述步驟(c)還在所述測(cè)量部中輸入由所述步驟(b)輸出的所述散射/熒光信號(hào)，并在該測(cè)量部中測(cè)量所述細(xì)胞引起的所述散射/熒光信號(hào)的變動(dòng)，所述步驟(d)還基于由所述步驟(c)測(cè)量出的所述散射/熒光信號(hào)的變動(dòng)，識(shí)別末梢血中的所述細(xì)胞。
16.根據(jù)權(quán)利要求10至15的任一項(xiàng)所述的細(xì)胞識(shí)別方法，其特征在于，所述步驟(c)還根據(jù)所述散射/熒光信號(hào)的變動(dòng)，測(cè)量散射/熒光信息，所述步驟(d)還基于由所述步驟(c)測(cè)量出的所述散射/熒光信息，識(shí)別末梢血中的所述細(xì)胞。
17.根據(jù)權(quán)利要求10至16的任一項(xiàng)所述的細(xì)胞識(shí)別方法，其特征在于， 所述照射光是非聚光的單模光。
18.根據(jù)權(quán)利要求10至17的任一項(xiàng)所述的細(xì)胞識(shí)別方法，其特征在于，該細(xì)胞識(shí)別方法還具備(e)將由所述步驟(d)識(shí)別出的末梢血中的所述細(xì)胞分取到規(guī)定的容器中的步驟。
全文摘要
本發(fā)明提供一種無須利用細(xì)胞表面的抗體/抗原反應(yīng)就能夠識(shí)別循環(huán)癌細(xì)胞的細(xì)胞的識(shí)別裝置和識(shí)別方法。細(xì)胞識(shí)別裝置具備毛細(xì)管，其用于使樣本流流過；照射部，其照射照射光；受光部，其接收透過光并作為透過光信號(hào)而輸出；測(cè)量部，其輸入從受光部輸出的透過光信號(hào)，測(cè)量細(xì)胞引起的透過光信號(hào)的變動(dòng)；識(shí)別部，其基于由測(cè)量部測(cè)量出的細(xì)胞引起的透過光信號(hào)的變動(dòng)中的極點(diǎn)值，識(shí)別細(xì)胞是否為末梢血細(xì)胞；分取部，其基于識(shí)別部的識(shí)別結(jié)果，將細(xì)胞分取到規(guī)定的容器中；以及供給部，其用于向毛細(xì)管提供樣本流。
文檔編號(hào)G01N21/64GK102272581SQ201080001873
公開日2011年12月7日 申請(qǐng)日期2010年3月31日 優(yōu)先權(quán)日2010年3月31日
發(fā)明者徐杰, 月井健, 高橋亨 申請(qǐng)人:古河電氣工業(yè)株式會(huì)社