專利名稱:一種血小板計數(shù)的裝置的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本實用新型涉及醫(yī)藥生物儀器技術(shù)領(lǐng)域,尤其涉及一種血小板計數(shù)的裝置。
背景技術(shù):
(參考書目 E. D. Olsen, Modern Optical Methods of Analysis, McGraw-Hill, New York, 1975.劉書慧,王景梓.血小板計數(shù)方法的改進(jìn).山東醫(yī)學(xué)院學(xué) 報.1984,22(4) 81-83)血小板聚集實驗是評價血小板功能的一個重要實驗,與心腦血管疾病密切相關(guān)。 血小板聚集儀的工作原理采用的是比濁法,即測量透過懸浮質(zhì)點介質(zhì)的光強(qiáng)度來確定懸浮 物質(zhì)濃度的方法。采用比濁法可以確定富含血小板血漿(PRP)中血小板的濃度,在血小板 聚集儀中以相對濃度100%表示。當(dāng)PRP中加入誘導(dǎo)劑(如ADP等)時,血小板逐漸聚集, 懸浮質(zhì)點介質(zhì)減少,血漿逐漸澄清,透光度隨之增加。根據(jù)透光度的改變可計算出血小板濃 度的變化。血小板濃度的變化即為聚集的血小板數(shù)量,在血小板聚集儀中以血小板聚集率 表示。血小板聚集率=PRP加入誘導(dǎo)劑前血小板相對濃度100% -PRP加入誘導(dǎo)劑后血小板 的相對濃度。在血小板聚集實驗中,要求比濁管內(nèi)的富含血小板血漿(PRP)的血小板計數(shù) 在30X 104/mm3左右為宜。部分國產(chǎn)血小板聚集儀及多數(shù)進(jìn)口血小板聚集儀沒有血小板計 數(shù)功能,需要采用血液細(xì)胞分析儀檢測血小板數(shù)量。這樣會增加實驗設(shè)施,提高實驗成本。 國內(nèi)多數(shù)實驗室未能為血小板聚集儀專門配備血液細(xì)胞分析儀,而是采用傳統(tǒng)顯微鏡檢測 的方法。利用普通血細(xì)胞計數(shù)盤,在顯微鏡下檢測血小板數(shù)量會耗費許多時間和精力。進(jìn) 口血小板聚集儀以其高精度而被許多實驗人員所青睞,解決這些儀器的血小板計數(shù)問題將 為操作人員帶來極大的方便。
發(fā)明內(nèi)容為了克服上述背景技術(shù)中的不足,本實用新型是為了提供一種簡單實用的血小板 計數(shù)裝置,為了實現(xiàn)上述發(fā)明的目的,本實用新型采用如下的技術(shù)方案1.在血小板聚集儀隨機(jī)附帶的比濁管中放置一個半透明的遮光物(如垂直固 定一個毛玻璃片或均勻填充各種凝膠物質(zhì)),使其在485nm波長光線下的透光度為22 38%,將其稱之為標(biāo)準(zhǔn)管。2.利用血小板數(shù)與透光度之間存在的負(fù)相關(guān)關(guān)系,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線或公式計算出標(biāo) 準(zhǔn)管代表的血小板數(shù)。3.將標(biāo)準(zhǔn)管(已知代表具體血小板數(shù))放置于血小板聚集測定儀中調(diào)100%,即 血小板的相對濃度為100% ;以貧血小板血漿(PPP)管調(diào)0,即血小板的相對濃度為0。再 以待測的富含血小板血漿(PRP)測試管代替標(biāo)準(zhǔn)管,可測得一百分?jǐn)?shù),儀器顯示為“血小板 聚集率”,實際為標(biāo)準(zhǔn)管代表的血小板相對濃度100%與PRP中血小板相對濃度的差值。PRP 中血小板的相對濃度=1-“血小板聚集率”。PRP中血小板的相對濃度X標(biāo)準(zhǔn)管對應(yīng)的血 小板計數(shù),即為待測富含血小板血漿的血小板計數(shù)。
圖1是血小板計數(shù)裝置結(jié)構(gòu)示意圖;1、接電腦 2、光源 3、調(diào)0位置4、內(nèi)容物為PPP 5、標(biāo)準(zhǔn)管位置/調(diào)100%位 置6、內(nèi)容物為半透明的遮光物圖2是垂直放置毛玻璃片的標(biāo)準(zhǔn)管示意圖;2、光源7、毛玻璃片圖3是填充凝膠物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)管示意圖;2、光源8、凝膠物質(zhì)
具體實施方式
實施例11.血小板標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作取大鼠新鮮血,橘櫞酸鈉抗凝,抗凝劑與血比例為1 9,離心O00Xg,10min)分 離PRP,取PRP再離心(1200 X g,IOmin),得血小板,再以臺氏液懸浮血小板,制成血小板懸 液,并將計數(shù)調(diào)至62.5X 104/mm3。再以臺氏液按10 8比例等比稀釋,獲得6個濃度的血 小板懸液,并在顯微鏡下檢測血小板數(shù)。每種懸液分別以721分光光度計,在485nm波長光 線下,以蒸餾水管調(diào)0,測定透光度。結(jié)果見表1。表1透光度與血小板計數(shù)對應(yīng)關(guān)系
透光度(%)鏡檢血小板數(shù)(萬/mm3)2262. 5275032. 54037. 53242. 525. 54820. 5相關(guān)系數(shù):r= -0. 9867,回歸線斜率:a = -1. 6051,截距:b = 94. 46202.標(biāo)準(zhǔn)管的制備選取一毛玻璃,將其裁剪成寬為比濁管內(nèi)徑,長為比濁管高度的一長方形,垂直固 定在比濁管中。將該比濁管置于721分光光度計中,使毛玻璃片與光線垂直,在485nm波長 光線下,以蒸餾水管調(diào)0,測定透光度,透光度為22%,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算,相當(dāng)于血小板計 數(shù)為59萬/mm3。3.血小板計數(shù)取10只大鼠新鮮血,橘櫞酸鈉抗凝,抗凝劑與血比例為1 9,離心QOOXg,10min),分咼PRP,裝入空比濁管中。剩余部分咼心(1200Xg,IOmin),得貧血小板血菜 (PPP)。在血小板聚集儀中,以標(biāo)準(zhǔn)管調(diào)100 %,以PPP調(diào)0,再以待測PRP測試管代替標(biāo)準(zhǔn) 管,測得PRP中血小板的相對濃度(即1- “血小板聚集率”)X標(biāo)準(zhǔn)管對應(yīng)的血小板計數(shù), 即為待測PRP的血小板計數(shù)。各PRP分別在顯微鏡下檢測血小板計數(shù),結(jié)果顯示鏡檢法和 標(biāo)準(zhǔn)管對比計算法差異很小,經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理無顯著差異,見表2、3。表2血小板相對濃度與血小板計數(shù)對應(yīng)關(guān)系
權(quán)利要求1.一種血小板計數(shù)裝置,其特征是在血小板聚集測定儀基礎(chǔ)上,增加一個具有固定透 光度的比濁管,能夠代表具有相同透光度血漿中的血小板計數(shù)。
2.按權(quán)利要求1所述的血小板計數(shù)裝置,其特征在于該裝置中含有的具有固定透光 度的比濁管,在485nm波長光線下的透光度為22 38%之間的一個固定值。
3.按權(quán)利要求2所述的血小板計數(shù)裝置,其特征在于該裝置中含有的具有固定透光 度的比濁管的制作方法,是在血小板聚集儀隨機(jī)附帶的比濁管中放置一個半透明的遮光 物,使比濁管在485nm波長光線下的透光度在22 38%之間。
4.按權(quán)利要求3所述的血小板計數(shù)裝置,其特征在于該裝置中使用的半透明遮光物 是一個垂直固定于比濁管中、并與光源垂直的毛玻璃片。
5.按權(quán)利要求3所述的血小板計數(shù)裝置,其特征在于該裝置中使用的半透明遮光物 是凝膠物質(zhì)。
6.按權(quán)利要求5所述的血小板計數(shù)裝置,其特征在于該裝置中使用的凝膠物質(zhì)是瓊 脂、明膠、Al (OH) 3膠體、Fe (OH) 3膠體。
7.按權(quán)利要求6所述的血小板計數(shù)裝置,其特征在于該裝置中使用的凝膠物質(zhì)優(yōu)選 為瓊脂。
專利摘要本實用新型是一種簡單、快速進(jìn)行血小板計數(shù)的裝置,屬于醫(yī)藥生物技術(shù)領(lǐng)域。本裝置特點是在血小板聚集測定儀基礎(chǔ)上,增加一個具有固定透光度的比濁管(簡稱“標(biāo)準(zhǔn)管”),其透光度為22~38%之間的一個固定值。本裝置是在血小板聚集測定儀中以標(biāo)準(zhǔn)管調(diào)100%,以貧血小板血漿調(diào)0,再將待測富含血小板血漿測試管代替標(biāo)準(zhǔn)管,測得PRP中血小板的相對濃度×標(biāo)準(zhǔn)管對應(yīng)的血小板計數(shù),即為待測富含血小板血漿的血小板計數(shù)。
文檔編號G01N21/59GK201852770SQ20102055145
公開日2011年6月1日 申請日期2010年9月30日 優(yōu)先權(quán)日2010年9月30日
發(fā)明者席文恭, 徐旭, 湯立達(dá), 趙專友 申請人:天津市新藥安全評價研究中心, 天津藥物研究院