專利名稱：一種三叉神經(jīng)根切片及其制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種標本處理方法，更具體地說，涉及一種三叉神經(jīng)根切片的制片方法。
背景技術(shù)：
三叉神經(jīng)(trigeminal nerve)是粗大的腦神經(jīng)，為混合神經(jīng)，含有感覺和運動 兩種纖維。而三叉神經(jīng)痛是在面部三叉神經(jīng)分布區(qū)內(nèi)反復(fù)發(fā)作的陣發(fā)性劇烈神經(jīng)痛，是 耳_神經(jīng)外科、口腔科、內(nèi)科等的常見病之一，也是國際公認的疑難雜癥之一。因此，在醫(yī)學(xué) 領(lǐng)域，為了研究正常的或是病態(tài)的三叉神經(jīng)根顯微結(jié)構(gòu)，常常需要制作三叉神經(jīng)根連續(xù)組 織切片。在現(xiàn)有技術(shù)制作三叉神經(jīng)根連續(xù)組織切片中，通常采用在未被石蠟包埋情況下一 神經(jīng)根便被分段切斷一將此小段的神經(jīng)根常規(guī)石蠟包埋一分別進行切片，最后進入各種選 擇性組織染色程序。在臨床解剖學(xué)中，三叉神經(jīng)可分為感覺根和運動根，其分支繁多，走行，分布龐雜。 一般認為，軀體感覺纖維的胞體位于半月節(jié)內(nèi)，其中樞突形成感覺根，約30 40束，集成一 略扁的神經(jīng)根〔2. 8mmX (6 7)mm〕進入腦干內(nèi)，長約20mm。運動根源于運動核，與中腦核 發(fā)出的本體感受纖維集合而成，由6 10個根絲合成小束，寬1. 5 2mm，在出腦干處，與感 覺根之間被少量腦橋的橫纖維分開，出腦干后走行于感覺根的前內(nèi)側(cè)。由于三叉神經(jīng)根長度長，常規(guī)切片機未能對其橫切面切片，需分段進行，且三叉神 經(jīng)根的分支多，細小、柔軟，所以，直接對沒有經(jīng)過石蠟包埋的三叉神經(jīng)根進行分段切斷，往 往會使得整個三叉神經(jīng)根松散變形，甚至纖維束脫落，終使組織切片未能展示原來的真實 結(jié)構(gòu)。因此，需要一種能夠制作三叉神經(jīng)根保持原有組織結(jié)構(gòu)、高質(zhì)量的組織切片的方 法。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題在于，針對現(xiàn)有技術(shù)的切片前過程中，容易出現(xiàn)整個三 叉神經(jīng)根松散、纖維束脫落、質(zhì)量差的缺陷，提供一種能夠制作反映組織原狀、高質(zhì)量的的 三叉神經(jīng)根切片制作方法。本發(fā)明解決其技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案是構(gòu)造一種三叉神經(jīng)根切片的石蠟制 片方法，包括下列步驟Si、將固定好的三叉神經(jīng)根整根進行大包埋；S2、將被包埋的三叉神經(jīng)根沿橫切面分段切斷成小段；S3、將每一小段三叉神經(jīng)根再次在包埋框中進行小包埋，并在組織切片機上進行 切片。在本發(fā)明所述的三叉神經(jīng)根切片的制片方法中，在步驟S2中，所述三叉神經(jīng)根小 段的長度范圍為4 5mm。
在本發(fā)明所述的三叉神經(jīng)根切片的制片方法中，在步驟S2中，將融化的石蠟注入 包埋框包埋所述三叉神經(jīng)根整根，然后置于室溫下冷卻成形，再將成形的石蠟塊取出，并沿 神經(jīng)根橫切面，將蠟塊分次切成長度為5mm的小段。在本發(fā)明所述的三叉神經(jīng)根切片的制片方法中，所述步驟S3進一步包括將所述 三叉神經(jīng)根小段蠟塊修整后再放入包埋框中補蠟包埋。在本發(fā)明所述的三叉神經(jīng)根切片的制片方法中，所述步驟S3進一 步包括依序在 組織切片機上進行連續(xù)的常規(guī)切片，切片厚度為4 8 μ m。在本發(fā)明所述的三叉神經(jīng)根切片的制片方法中，所述方法進一步包括采用伊紅對 獲得的切片進行染色。本發(fā)明解決其技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案是，構(gòu)造一種采用本發(fā)明的三叉神經(jīng)根 切片制作方法所制作的三叉神經(jīng)根切片。實施本發(fā)明的三叉神經(jīng)根切片及其制作方法，能夠利用常用的組織切片機和石蠟 包埋法，最大限度地保持三叉神經(jīng)根的組織結(jié)構(gòu)，防止其神經(jīng)纖維束的脫失、位移，可制作 出高質(zhì)量的橫斷面的三叉神經(jīng)根連續(xù)組織切片。


下面將結(jié)合附圖及實施例對本發(fā)明作進一步說明，附圖中圖1是本發(fā)明的三叉神經(jīng)根切片制作方法的第一實施例的方法流程圖；圖2是本發(fā)明的三叉神經(jīng)根切片制作方法的第二實施例的方法流程圖。
具體實施例方式圖1是本發(fā)明的三叉神經(jīng)根切片制作方法的第一實施例的方法流程圖。如圖1所 示，該方法包括下列步驟si、將固定好的三叉神經(jīng)根整根進行大包埋；S2、將被包埋的三 叉神經(jīng)根沿橫切面分段切斷成小段；S3、將每一小段三叉神經(jīng)根再次在包埋框中進行小包 埋，并在組織切片機上進行切片。在本發(fā)明的其他實施例中，還可包括如染色、脫蠟等常規(guī) 切片制作步驟。圖2是本發(fā)明的三叉神經(jīng)根切片制作方法的第二實施例的方法流程圖。該方法包 括下列步驟si、固定，將新鮮三叉神經(jīng)根整根轉(zhuǎn)移到含有固定液的器皿中固定過夜；S2、 將固定好的三叉神經(jīng)根整根進行大包埋。可采用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的任何包埋劑和包埋 方法包埋所述三叉神經(jīng)根。在本發(fā)明的優(yōu)選實施例中，采用的包埋劑是石蠟。S3、將被包埋 的三叉神經(jīng)根沿橫切面分段切斷成小段。每一小段的長度范圍為4 5mm。優(yōu)選5mm。S4、 順序?qū)⑺鋈嫔窠?jīng)根小段按順序分別再次在包埋框中用石蠟包埋，再依序在組織切片機 上進行連續(xù)切片成厚度為5μπι的切片。在本發(fā)明的其他實施例中，也可根據(jù)需要將所述三 叉神經(jīng)根小段切成其他厚度。優(yōu)選的厚度范圍為4 8μπι。S5、采用二甲苯脫蠟，再經(jīng)逐級 梯度乙醇水化。該脫水步驟采用75%、85%、95%以及100%的乙醇逐級脫水。S6、采用染 色劑染色脫蠟后的三叉神經(jīng)根切片。所述染色劑優(yōu)選伊紅。下面結(jié)合實施例對本發(fā)明的三叉神經(jīng)根切片及其制作方法進行說明。實施例1本實施例以人尸體上獲取的三叉神經(jīng)根為樣本來制備三叉神經(jīng)根切片，其具體包括下列步驟1、取材和固定。選取常規(guī)福爾馬林(甲醛溶液)固定處理的尸體，每具隨即解剖 一側(cè)顱內(nèi)段(即腦干至半月節(jié)之間)的三叉神經(jīng)的神經(jīng)根樣本，并采用10%的福爾馬林固 定24小時。2、大包埋及分段，將融化的石蠟注入包埋框包埋所述三叉神經(jīng)根整根，然后置于 室溫下冷卻成形，再將成形的石蠟塊取出，并沿神經(jīng)根橫切面，將蠟塊分次切成長度為5mm 的小段。在本發(fā)明的其他實施例中，還可采用石蠟和蜂蠟的混合物。也可在浸蠟以后將其 放置到冷水中冷卻。也可將蠟塊切成其他厚度的大切片。3、小包埋及切片，順序?qū)⑺鋈嫔窠?jīng)根小段按順序分別再次在包埋框中用石蠟 包埋，再依序在組織切片機上進行連續(xù)切片成厚度為5 μ m的切片，也可根據(jù)需要，將所述 三叉神經(jīng)根小段切成其他厚度的切片。包埋和切片過程可與步驟2中相同和不同。實施例21、取材和固定。選取常規(guī)福爾馬林(甲醛溶液)固定處理的尸體，每具隨即解剖 一側(cè)顱內(nèi)段(即腦干至半月節(jié)之間)的三叉神經(jīng)的神經(jīng)根樣本，并采用80-95%的乙醇溶液 固定24小時。2、大包埋及分段，將融化的石蠟和蜂蠟混合物(7 3)注入包埋框包埋所述三叉 神經(jīng)根整根，然后置于室溫下冷卻成形，再將成形的石蠟塊取出，并沿神經(jīng)根橫切面，將蠟 塊分次切成長度為5mm的小段。3、小包埋及切片，順序?qū)⑺鋈嫔窠?jīng)根小段按順序分別再次在包埋框中用石蠟 包埋，再依序在組織切片機上進行連續(xù)切片成厚度為8 μ m的切片。包埋和切片過程可與步 驟3中相同和不同。4、脫蠟及脫水，采用二甲苯脫蠟，再經(jīng)逐級梯度乙醇脫水。可用二甲苯脫蠟，再逐 級經(jīng)純酒精及梯度酒精直至蒸餾水。脫水步驟可采用75%、85%、95%以及100%的乙醇逐 級脫水5、染色，染色的目的是使細胞組織內(nèi)的不同結(jié)構(gòu)呈現(xiàn)不同的顏色以便于觀察。 未經(jīng)染色的細胞組織其折光率相似，不易辨認。經(jīng)染色可顯示細胞內(nèi)不同的細胞器及內(nèi) 含物以及不同類型的細胞組織。染色劑種類繁多，應(yīng)根據(jù)觀察要求及研究內(nèi)容采用不同 的染色劑及染色方法，還要注意選用適宜的固定劑才能取得滿意的結(jié)果。經(jīng)典的蘇木精 (Hematoxylin)和伊紅(曙紅，Eosin)染色法是組織學(xué)標本及病理切片標本的常規(guī)染色，本 領(lǐng)域技術(shù)人員了解并熟悉這一常規(guī)方法并能熟練應(yīng)用。在本發(fā)明的實施例中，可采用伊紅 進行染色。實施本發(fā)明的三叉神經(jīng)根切片及其制作方法，能夠保持三叉神經(jīng)根的組織結(jié)構(gòu)， 防止其神經(jīng)纖維束的脫失、位移，可制作出高質(zhì)量的橫斷面的三叉神經(jīng)根切片。此外，本領(lǐng)域技術(shù)人員知悉，本發(fā)明的三叉神經(jīng)根切片制作方法還可以用于其他 類似和相近的生物組織切片的制作。并且在本發(fā)明的三叉神經(jīng)根切片的制作方法中，除本 發(fā)明中陳述的步驟以外，還可包括本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的其他切片制作步驟，并且也可采 用任何已知的試劑進行各個步驟的處理。因此，雖然本發(fā)明是通過具體實施例進行說明的， 本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當明白，在不脫離本發(fā)明范圍的情況下，還可以對本發(fā)明進行各種變換及等同替代，也就是說，在現(xiàn)有技術(shù)中公開的各種切片制造方法和試劑都可以用于本發(fā)明。因此，本發(fā)明不局限于所公開的具體實施例，而應(yīng)當包括落入本發(fā)明權(quán)利要求范圍內(nèi)的全 部實施方式。
權(quán)利要求
一種三叉神經(jīng)根切片的制片方法，其特征在于，包括下列步驟S1、將固定好的三叉神經(jīng)根整根進行大包埋；S2、將被包埋的三叉神經(jīng)根沿橫切面分段切斷成小段；S3、將每一小段三叉神經(jīng)根再次在包埋框中進行小包埋，并在組織切片機上進行切片。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的三叉神經(jīng)根切片制作方法，其特征在于，在所述步驟S2中，所 述三叉神經(jīng)根小段的長度范圍為4 5mm。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的三叉神經(jīng)根切片制作方法，其特征在于，在步驟S2中，將融化 的石蠟注入包埋框包埋所述三叉神經(jīng)根整根，然后置于室溫下冷卻成形，再將成形的石蠟 塊取出，并沿神經(jīng)根橫切面，將蠟塊分次切成長度為5mm的小段。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的三叉神經(jīng)根切片制作方法，其特征在于，所述步驟S3進一步 包括將所述三叉神經(jīng)根小段蠟塊修整后再放入包埋框中補蠟包埋。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的三叉神經(jīng)根切片制作方法，其特征在于，所述步驟S3進一步 包括依序在組織切片機上進行連續(xù)的常規(guī)切片，切片厚度為4 Sum。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的三叉神經(jīng)根切片制作方法，其特征在于，所述方法進一步包 括采用伊紅對獲得的切片進行染色。
7.一種由權(quán)利要求1-6中任一權(quán)利要求所述方法制得的三叉神經(jīng)根切片。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種三叉神經(jīng)切片制作方法，包括下列步驟S1、將固定好的三叉神經(jīng)根整根進行大包埋；S2、將被包埋的三叉神經(jīng)根沿橫切面分段切斷成小段；S3、將每一小段三叉神經(jīng)根再次在包埋框中進行小包埋，并在組織切片機上進行切片。實施本發(fā)明的三叉神經(jīng)根切片及其制作方法，能夠保持三叉神經(jīng)根的組織結(jié)構(gòu)，防止其神經(jīng)纖維束的脫失、位移，可制作出高質(zhì)量的橫斷面的三叉神經(jīng)根切片。
文檔編號G01N1/06GK101832884SQ20091010604
公開日2010年9月15日 申請日期2009年3月13日 優(yōu)先權(quán)日2009年3月13日
發(fā)明者徐勝美, 李明, 林春招, 江遠仕, 王少洪, 鐘世鎮(zhèn), 黃宗青 申請人:江遠仕;深圳市福田區(qū)人民醫(yī)院