專利名稱：通過高效液相色譜法檢測鹽酸艾司洛爾光學(xué)異構(gòu)體的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及通過高效液相色譜法檢測鹽酸艾司洛爾(Esmolol Hydrochloride)光 學(xué)異構(gòu)體的方法，更具體的說是檢測鹽酸艾司洛爾光學(xué)異構(gòu)體生產(chǎn)過程中或者是鹽酸艾司 洛爾光學(xué)異構(gòu)體產(chǎn)品中R-鹽酸艾司洛爾、S-鹽酸艾司洛爾的方法。
背景技術(shù)：
鹽酸艾司洛爾有一個(gè)手性中心，具有2個(gè)光學(xué)異構(gòu)體，其結(jié)構(gòu)式分別為 (S)-Esmolol Hydrochloride(R)-Esmolol Hydrochloride其化學(xué)名分別為4-[(2S)_2-羥基-3_(異丙氨基)丙氧基]苯丙酸甲酯鹽酸鹽， 4-[(2R)-2-羥基-3-(異丙氨基)丙氧基]苯丙酸甲酯鹽酸鹽，分子式=C16H25NO4 ·Ηα，分 子量331. 15。鹽酸艾司洛爾是一種超短效的選擇性P1-受體阻滯劑，不具有內(nèi)在擬交感 活性和膜穩(wěn)定作用。其作用機(jī)制主要作用于心臟P1受體，具有減緩靜息和運(yùn)動(dòng)心率，降低 血壓，降低心肌耗氧量的作用。很多異構(gòu)體通過高效液相色譜法分離的方法是已知的，但流 動(dòng)相、溶劑、柱溫、色譜柱等因素對(duì)于檢測結(jié)果有很大影響或不適用于目標(biāo)檢測物。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供通過高效液相色譜法檢測在鹽酸艾司洛爾光學(xué)異構(gòu)體手性 合成中所得樣品的光學(xué)異構(gòu)體純度，以控制成品的質(zhì)量。本發(fā)明采用纖維素酯類為固定相的手性柱進(jìn)行檢測，纖維素酯類結(jié)構(gòu)中的空穴和 通道與光學(xué)異構(gòu)體選擇性的形成了異構(gòu)體包合物，從而達(dá)到分離。流動(dòng)相對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果中R-鹽酸艾司洛爾、S-鹽酸艾司洛爾分離度及峰形均有很大 影響，經(jīng)發(fā)明人實(shí)驗(yàn)摸索，確定以正己烷-異丙醇-二乙胺(70 98 2 30 0.02 0.5，優(yōu)選為75 90 10 25 0. 05 0. 2，更優(yōu)選為80 20 0. 1)為流動(dòng)相效果很 好。其中加入二乙胺可以改善峰形。溶劑的選擇與R-鹽酸艾司洛爾、S-鹽酸艾司洛爾分離度有關(guān)。經(jīng)實(shí)驗(yàn)確定采用 正丙醇、異丙醇、乙醇、正丁醇、甲醇作為溶解用溶劑，優(yōu)選以異丙醇為溶劑。本發(fā)明提供的通過高效液相色譜法檢測R-鹽酸艾司洛爾、S-鹽酸艾司洛爾的方 法的具體條件如下
1.色譜條件色譜柱采用纖維素酯類為固定相的手性柱；流動(dòng)相為正己烷-異丙 醇-二乙胺(70 98 2 30 0. 02 0. 5，優(yōu)選為 75 90 10 25 0. 05 0. 2， 更優(yōu)選為80 20 0. 1)；檢測波長為200nm 240nm(優(yōu)選為210nm 230nm，更優(yōu)選為 約220nm)；柱溫為20 45°C (優(yōu)選為30 40°C，更優(yōu)選為35°C )；流動(dòng)相流速為0. 5 2. OmL/min (優(yōu)選為 0. 8 1. 2mL/min,更優(yōu)選為約 1. OmL/min)。2.樣品溶液的配置采用有機(jī)溶劑(優(yōu)選選自正丙醇、異丙醇、乙醇、正丁醇、甲 醇，更優(yōu)選為異丙醇)，將樣品配制為含鹽酸艾司洛爾光學(xué)異構(gòu)體0. 1 2. Omg/mL的溶液 (優(yōu)選0. 5 2. Omg/mL,更優(yōu)選為1. Omg/mL)的溶液。3.測定將溶液注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖，并進(jìn)行分析。采用此色譜條件測定R-鹽酸艾司洛爾、S-鹽酸艾司洛爾分離度均超過1. 5，符合 中國藥典要求。此色譜條件同時(shí)可用于鹽酸艾司洛爾光學(xué)異構(gòu)體的定量。


圖1 按照實(shí)施例1的條件分離R-鹽酸艾司洛爾、S-鹽酸艾司洛爾的高效液相色 譜圖。圖2 按照實(shí)施例2的條件分離R-鹽酸艾司洛爾、S-鹽酸艾司洛爾的高效液相色 譜圖。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1.儀器SHIMADZU LC-IOAT高效液相色譜儀，SPD-IOAvp紫外檢測器，OV-IOO柱溫 箱；色譜柱=CHIRALCEL OD-H 色譜柱(0. 46 X 25cm, 5 μ m)；流動(dòng)相正己烷-異丙醇-二乙胺(80 20 0.1)柱溫35°C 流速1· OmL/min檢測波長220nm。定位溶液1的配制精密稱取R-鹽酸艾司洛爾適量，用異丙醇溶解并稀釋成 1. Omg/mL ；定位溶液2的配制精密稱取S-鹽酸艾司洛爾適量，用異丙醇溶解并稀釋成 1. Omg/mL ；混合樣品溶液的配制精密稱取R-鹽酸艾司洛爾、S-鹽酸艾司洛爾適量，用異丙 醇溶解并稀釋成含R-鹽酸艾司洛爾、S-鹽酸艾司洛爾各1. Omg/mL ；測定各取定位溶液1、定位溶液2和混合樣品溶液各20 μ L注入高效液相色譜 儀，記錄色譜圖，譜圖見圖1。R-鹽酸艾司洛爾、S-鹽酸艾司洛爾的分離度為5. 1。實(shí)施例2.儀器SHIMADZU LC-IOAT高效液相色譜儀，SPD-IOAvp紫外檢測器，OV-IOO柱溫 箱；色譜柱:Sino-Chiral OD 色譜柱(O. 46 X 25cm，5 μ m)；流動(dòng)相正己烷-異丙醇-二乙胺(85 15 0.1)
柱溫35°C流速L0mL/min檢測波長220nm。
定位溶液1的配制精密稱取R-鹽酸艾司洛爾適量，用異丙醇溶解并稀釋成 1. Omg/mL ；定位溶液2的配制精密稱取S-鹽酸艾司洛爾適量，用異丙醇溶解并稀釋成 1. Omg/mL ；混合樣品溶液的配制精密稱取R-鹽酸艾司洛爾、S-鹽酸艾司洛爾適量，用異丙 醇溶解并稀釋成含R-鹽酸艾司洛爾、S-鹽酸艾司洛爾各1. Omg/mL ；測定各取定位溶液1、定位溶液2和混合樣品溶液各20 μ L注入高效液相色譜 儀，記錄色譜圖，譜圖見圖2。R-鹽酸艾司洛爾、S-鹽酸艾司洛爾的分離度為4. 9。
權(quán)利要求
通過高效液相色譜法檢測鹽酸艾司洛爾光學(xué)異構(gòu)體的方法，具體如下1)色譜條件色譜柱采用纖維素酯類為固定相的手性柱；流動(dòng)相為正己烷-異丙醇-二乙胺，比例為70～98∶2～30∶0.02～0.5；檢測波長為200nm～240nm；柱溫為20～45℃；流動(dòng)相流速為0.5～2.0ml/min；2)樣品溶液的配制采用有機(jī)溶劑將樣品配制成為含鹽酸艾司洛爾0.1～2.0mg/mL的溶液，所述有機(jī)溶劑選自正丙醇、異丙醇、乙醇、正丁醇、甲醇；3)測定將溶液注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖并進(jìn)行分析。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述流動(dòng)相正己烷_異丙醇_二乙胺比例 為 75 90 10 25 0.05 0.2。
3.根據(jù)權(quán)利要求1和2所述的方法，其特征在于所述流動(dòng)相正己烷_異丙醇_二乙胺 比例為 80 20 0.1。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于檢測波長為210nm 230nm。
5.根據(jù)權(quán)利要求1和4所述的方法，其特征在于檢測波長為220nm。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于柱溫為30 40°C。
7.根據(jù)權(quán)利要求1和6所述的方法，其特征在于柱溫為35°C。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于流動(dòng)相流速為0.8 1. 2mL/min。
9.根據(jù)權(quán)利要求1和8所述的方法，其特征在于流動(dòng)相流速為1.OmL/min。
10.根據(jù)權(quán)利要求1-9任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于樣品溶液的配制中采用的有機(jī) 溶劑為異丙醇。
11.根據(jù)權(quán)利要求1-9任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于將樣品溶液配制為含鹽酸艾司 洛爾光學(xué)異構(gòu)體0. 5 2. Omg/mL的溶液。
12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的方法，其特征在于將樣品溶液配制為含鹽酸艾司洛爾光學(xué) 異構(gòu)體1. Omg/mL的溶液。
全文摘要
本發(fā)明提供了通過高效液相色譜法檢測鹽酸艾司洛爾光學(xué)異構(gòu)體的方法，具體如下(1)色譜條件色譜柱采用纖維素酯類為固定相的手性柱；流動(dòng)相為正己烷-異丙醇-二乙胺；檢測波長為200nm～240nm。(2)采用有機(jī)溶劑將樣品配制為含鹽酸艾司洛爾0.1～2.0mg/mL的溶液。(3)測定，記錄色譜圖。本發(fā)明測定方法的R-鹽酸艾司洛爾、S-鹽酸艾司洛爾分離度均超過1.5，符合中國藥典要求。本發(fā)明提供方法同時(shí)可用于鹽酸艾司洛爾光學(xué)異構(gòu)體的定量。
文檔編號(hào)G01N30/02GK101881755SQ20091003129
公開日2010年11月10日 申請(qǐng)日期2009年5月4日 優(yōu)先權(quán)日2009年5月4日
發(fā)明者倪桃, 冒宜蘭, 馮明聲, 姚曉敏, 張璐, 曹于平, 郁博媛, 鄭文艷 申請(qǐng)人:南京海辰藥業(yè)有限公司