專利名稱：血清鎂檢測(cè)試劑盒及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及用于檢測(cè)血清中鎂含量的檢測(cè)試劑盒及其制備方法。
背景技術(shù)：
鎂是人體必需的常量元素。
血清鎂增高見(jiàn)于腎臟疾病、內(nèi)分泌疾病、多發(fā)性骨髓瘤、嚴(yán)重脫水癥等。血清銅降低見(jiàn)見(jiàn)于慢性腹瀉、吸收不良綜合癥、慢性腎炎綜合癥、甲狀腺機(jī)能亢進(jìn)癥、甲狀旁腺機(jī)能亢進(jìn)癥、糖尿病酸中毒以及長(zhǎng)期使用皮質(zhì)激素治療者等。準(zhǔn)確測(cè)定血清中鎂的含量，對(duì)人體健康至關(guān)重要。
血清鎂的測(cè)定方法有原子吸收分光光度法、酶偶聯(lián)速率測(cè)定法和分光光度法等。原子吸收分光光度法雖準(zhǔn)確性好，但儀器昂貴，不適于常規(guī)分析。酶偶聯(lián)速率測(cè)定法試劑需進(jìn)口、成本高亦難以普及。目前《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》推薦為臨床實(shí)驗(yàn)室常規(guī)分析的甲基百里酚藍(lán)(MTB)法和Calmagite染料法雖簡(jiǎn)便、快速，但兩法的靈敏度、試劑本身穩(wěn)定性及顯色絡(luò)合物的穩(wěn)定性均不甚理想。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種用于測(cè)定血清中鎂含量的操作簡(jiǎn)便快速、靈敏度高且廉價(jià)易得的試劑盒，發(fā)明還要提供這種該試劑盒的制備方法。
本發(fā)明試劑盒的原理是在弱堿性緩沖液中，血清鎂與偶氮類顯色劑作用生成藍(lán)紫色配合物，其顏色深淺與血清鎂含量成正比，與同樣處理的標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)行比較，可求得血清鎂含量。
為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明所采取的技術(shù)方案是一種用于檢測(cè)血清中鎂含量的檢測(cè)試劑盒，它由下列試劑組成(1)偶氮類顯色液偶氮類顯色液中溶質(zhì)包括偶氮類有機(jī)物、表面活性劑和掩蔽劑，溶劑由pH＝8～10的三乙醇胺-鹽酸或三羥甲基氨基甲烷緩沖液組成，
所述表面活性劑為固體表面活性劑、液體表面活性劑或固體表面活性劑和液體表面活性劑的混合物，所述液體表面活性劑為聚氧乙烯異辛基苯基醚，所述固體表面活性劑為聚氧乙烯月桂醚或聚乙烯吡咯烷酮中的一種或兩種任意比例的混合物，所述掩蔽劑為乙二醇雙(α-氨基乙基)醚四乙酸，每升顯色液中溶劑的含量如下

(2)鎂標(biāo)準(zhǔn)液濃度為0.823～1.234mmol/L。
所述溶質(zhì)還包括疊氮鈉，每升顯色液含疊氮鈉0.2～0.8g；所述偶氮類有機(jī)物為偶氮胂III、偶氮胂I或偶氮氯磷I。
本發(fā)明還提供了上述吡啶偶氮類顯色液的制備方法為每升偶氮類顯色液按照上述比例稱取吡啶偶氮類有機(jī)物、表面活性劑和掩蔽劑，用pH＝8～10的三乙醇胺-鹽酸或三羥甲基氨基甲烷緩沖液稀釋為1000ml的吡啶偶氮類顯色液。
本發(fā)明所能達(dá)到的有益效果是用本試劑盒進(jìn)行血清鎂測(cè)定具有靈敏度高，準(zhǔn)確度好，試劑空白值低，試劑簡(jiǎn)單穩(wěn)定、操作快速簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn)，適合臨床常規(guī)普及應(yīng)用。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例一一種血清鎂檢測(cè)試劑盒，本試劑盒是由以下物質(zhì)組成的偶氮類顯色液1瓶鎂標(biāo)準(zhǔn)液(濃度為0.823mmol/L) 1瓶本試劑盒的制備方法是通過(guò)如下步驟實(shí)現(xiàn)的(1)偶氮類顯色液的制備方法a、稱取偶氮氯磷I 50mg，乙二醇雙(α-氨基乙基)醚四乙酸70mg，聚氧乙烯異辛基苯基醚5.0ml，用pH＝9.8的三羥甲基氨基甲烷緩沖液稀釋至1000ml；(2)鎂標(biāo)準(zhǔn)液按常規(guī)方法配置。
檢測(cè)方法1.手工分析法血清(U管)、鎂標(biāo)準(zhǔn)液(S管)、蒸餾水管(B管)各取50μl，然后在各管中分別加入顯色液3.0ml，混勻，在分光光度計(jì)上用1cm光徑比色皿空白管調(diào)零，然后在580nm處讀取各管的吸光度(A)。
2.自動(dòng)分析儀分析參數(shù)反應(yīng)類型終點(diǎn)法；波長(zhǎng)640nm(主)/750nm(次)；反應(yīng)溫度37℃；校準(zhǔn)方法Linear；顯色液300μl；標(biāo)本5μl；讀數(shù)時(shí)間180秒。
血清鎂的含量(μmol/L)＝0.823×Au/As實(shí)施例二一種血清鎂檢測(cè)試劑盒，本試劑盒是由以下物質(zhì)組成的偶氮類顯色液 1瓶鎂標(biāo)準(zhǔn)液(濃度為1.234mmol/L) 1瓶本試劑盒的制備方法是通過(guò)如下步驟實(shí)現(xiàn)的(1)偶氮類顯色液的制備方法a、稱取偶氮胂III75mg，乙二醇雙(α-氨基乙基)醚四乙酸75mg，聚氧乙烯異辛基苯基醚5.0ml，聚氧乙烯月桂醚10.0g，用pH＝9.0的三乙醇胺-鹽酸緩沖液稀釋至1000ml；(2)鎂標(biāo)準(zhǔn)液按常規(guī)方法配置。
檢測(cè)方法1.手工分析法血清(U管)、鎂標(biāo)準(zhǔn)液(S管)、蒸餾水管(B管)各取50μl，然后在各管中分別加入顯色液3.0ml，混勻，在分光光度計(jì)上用1cm光徑比色皿空白管調(diào)零，然后在650nm處讀取各管的吸光度(A)。
2.自動(dòng)分析儀分析參數(shù)反應(yīng)類型終點(diǎn)法；波長(zhǎng)650nm(主)/750nm(次)；反應(yīng)溫度37℃；校準(zhǔn)方法Linear；顯色液300μl；標(biāo)本5μl；讀數(shù)時(shí)間180秒。
血清鎂的含量(μmol/L)＝1.234×Au/As實(shí)施例三一種血清鎂檢測(cè)試劑盒，本試劑盒是由以下物質(zhì)組成的偶氮類顯色液 1瓶鎂標(biāo)準(zhǔn)液(濃度為0.983mmol/L) 1瓶本試劑盒的制備方法是通過(guò)如下步驟實(shí)現(xiàn)的(1)偶氮類顯色液的制備方法a、稱取偶氮氯磷I 85mg，乙二醇雙(α-氨基乙基)醚四乙酸100mg，疊氮鈉0.5g，聚乙烯吡咯烷酮15.0g，用pH＝9.5三羥甲基氨基甲烷緩沖液稀釋至1000ml；(2)鎂標(biāo)準(zhǔn)液按常規(guī)方法配置。
檢測(cè)方法手工分析法血清(U管)、鎂標(biāo)準(zhǔn)液(S管)、蒸餾水管(B管)各取50μl，然后在各管中分別加入顯色液3.0ml，混勻，在分光光度計(jì)上用1cm光徑比色皿空白管調(diào)零，然后在580nm處讀取各管的吸光度(A)。
血清鎂的含量(μmol/L)＝0.983×Au/As實(shí)施例四一種血清鎂檢測(cè)試劑盒，本試劑盒是由以下物質(zhì)組成的偶氮類顯色液 1瓶鎂標(biāo)準(zhǔn)液(濃度為0.823mmol/L)1瓶本試劑盒的制備方法是通過(guò)如下步驟實(shí)現(xiàn)的(3)偶氮類顯色液的制備方法a、稱取偶氮胂I 100mg，乙二醇雙(α-氨基乙基)醚四乙酸120mg，聚氧乙烯異辛基苯基醚10.0ml，用pH＝8.5的三乙醇胺-鹽酸緩沖液稀釋至1000ml；(4)鎂標(biāo)準(zhǔn)液按常規(guī)方法配置。
檢測(cè)方法1.手工分析法血清(U管)、鎂標(biāo)準(zhǔn)液(S管)、蒸餾水管(B管)各取50μl，然后在各管中分別加入顯色液3.0ml，混勻，在分光光度計(jì)上用1cm光徑比色皿空白管調(diào)零，然后在580nm處讀取各管的吸光度(A)。
2.自動(dòng)分析儀分析參數(shù)反應(yīng)類型終點(diǎn)法；波長(zhǎng)580nm(主)/750nm(次)；反應(yīng)溫度37℃；校準(zhǔn)方法Linear；顯色液300μl；標(biāo)本5μl；讀數(shù)時(shí)間180秒。
血清鎂的含量(μmol/L)＝0.823×Au/As實(shí)施例五一種血清鎂檢測(cè)試劑盒，本試劑盒是由以下物質(zhì)組成的偶氮類顯色液 1瓶鎂標(biāo)準(zhǔn)液(濃度為1.234mmol/L) 1瓶本試劑盒的制備方法是通過(guò)如下步驟實(shí)現(xiàn)的(5)偶氮類顯色液的制備方法a、稱取偶氮胂III 150mg，乙二醇雙(α-氨基乙基)醚四乙酸150mg，聚氧乙烯月桂醚10g、聚乙烯吡咯烷酮8g，疊氮鈉0.8g，用pH＝8.5的三乙醇胺-鹽酸緩沖液稀釋至1000ml；(6)鎂標(biāo)準(zhǔn)液按常規(guī)方法配置。
檢測(cè)方法1.手工分析法血清(U管)、鎂標(biāo)準(zhǔn)液(S管)、蒸餾水管(B管)各取50μl，然后在各管中分別加入顯色液3.0ml，混勻，在分光光度計(jì)上用1cm光徑比色皿空白管調(diào)零，然后在650nm處讀取各管的吸光度(A)。
2.自動(dòng)分析儀分析參數(shù)反應(yīng)類型終點(diǎn)法；波長(zhǎng)650nm(主)/750nm(次)；反應(yīng)溫度37℃；校準(zhǔn)方法Linear；顯色液300μl；標(biāo)本5μl；讀數(shù)時(shí)間180秒。
血清鎂的含量(μmol/L)＝1.234×Au/As。
權(quán)利要求
1.一種用于檢測(cè)血清中鎂含量的檢測(cè)試劑盒，它由下列試劑組成(1)偶氮類顯色液偶氮類顯色液中溶質(zhì)主要包括偶氮類有機(jī)物、表面活性劑和掩蔽劑，溶劑由pH＝8～10的三乙醇胺-鹽酸或三羥甲基氨基甲烷緩沖液組成，所述表面活性劑為固體表面活性劑、液體表面活性劑或固體表面活性劑和液體表面活性劑的混合物，所述液體表面活性劑為聚氧乙烯異辛基苯基醚，所述固體表面活性劑為聚氧乙烯月桂醚或聚乙烯吡咯烷酮中的一種或兩種任意比例的混合物，所述掩蔽劑為乙二醇雙(α-氨基乙基)醚四乙酸，每升顯色液中溶劑的含量如下
(2)鎂標(biāo)準(zhǔn)液濃度為0.823～1.234mmol/L。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于檢測(cè)血清中鎂含量的檢測(cè)試劑盒，其特征在于所述溶質(zhì)還包括疊氮鈉，每升顯色液含疊氮鈉0.2～0.8g。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于檢測(cè)血清中鎂含量的檢測(cè)試劑盒，其特征在于所述偶氮類有機(jī)物為偶氮胂III、偶氮胂I或偶氮氯磷I。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于檢測(cè)血清中鎂含量的檢測(cè)試劑盒的制備方法，其特征在于吡啶偶氮類顯色液的制備方法為每升偶氮類顯色液按照上述比例稱取吡啶偶氮類有機(jī)物、表面活性劑和掩蔽劑，用pH＝8～10的三乙醇胺-鹽酸或三羥甲基氨基甲烷緩沖液稀釋為1000ml的吡啶偶氮類顯色液。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種用于測(cè)定血清中鎂含量的試劑盒及其該試劑盒的制備方法。本發(fā)明試劑盒的原理是在弱堿性緩沖液中，血清鎂與偶氮類顯色劑作用生成藍(lán)紫色配合物，其顏色深淺與血清鎂含量成正比，與同樣處理的標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)行比較，可求得血清鎂含量。本發(fā)明試劑盒操作簡(jiǎn)便快速、靈敏度高且廉價(jià)易得，適合臨床常規(guī)普及應(yīng)用。
文檔編號(hào)G01N21/77GK1869705SQ20061008390
公開日2006年11月29日 申請(qǐng)日期2006年6月6日 優(yōu)先權(quán)日2006年6月6日
發(fā)明者周鐵麗, 曹建明, 王占岳 申請(qǐng)人:周鐵麗