專利名稱：快速定性與定量分析銀杏制品中所含的活性成分的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種用核磁共振光譜(1H NMR)來(lái)進(jìn)行快速準(zhǔn)確地定性與定量分析銀杏制品中的活性成分的方法，特別是同時(shí)定量銀杏內(nèi)酯及黃酮醇類(lèi)化合物的分析方法。
背景技術(shù)：
銀杏(Ginkgo biloba L.)為一傳統(tǒng)使用的中藥，過(guò)去的研究顯示，銀杏葉所含的銀杏內(nèi)酯(Ginkgo terpene trilactones)及黃酮醇類(lèi)(flavonols)為主要活性成分(參閱參考文獻(xiàn)1～3)。較普遍的認(rèn)定是原料藥供貨商所生產(chǎn)的銀杏葉萃取物中所含的銀杏內(nèi)酯總量應(yīng)在5.4～6.6％以上，黃酮醇類(lèi)總量應(yīng)在21.6～26.4％以上。
針對(duì)銀杏內(nèi)酯的分析方法主要以高效液相色譜儀(HPLC)配合紫外光檢測(cè)器(UV)或折射率檢測(cè)器(RI)作為主要分析工具(參閱參考文獻(xiàn)4～6)，但分析樣品須先經(jīng)過(guò)前處理，除去可能的干擾物質(zhì)，特別是黃酮醇類(lèi)化合物。另外也有以氣相層析儀(GC)配合火焰離子化檢測(cè)器(FID)或質(zhì)譜儀(MS)作為分析工具(參閱參考文獻(xiàn)7～11)，同樣必須先經(jīng)過(guò)樣品前處理，除去可能的干擾物質(zhì)，并將欲分析的銀杏內(nèi)酯化合物修飾成揮發(fā)性較高的結(jié)構(gòu)，以進(jìn)行氣相層析。此外也有人提出可以利用核磁共振光譜儀的分析方法。
針對(duì)黃酮醇類(lèi)的分析則主要以高效液相色譜配合紫外光檢測(cè)器為主要分析工具(參閱參考文獻(xiàn)12)。
目前尚未有同時(shí)有效地分析銀杏內(nèi)酯及黃酮醇兩類(lèi)化合物的方法。

發(fā)明內(nèi)容
由于銀杏內(nèi)酯及黃酮醇類(lèi)化合物為市售銀杏葉萃取物的主要活性成分(參閱參考文獻(xiàn)3)，而這兩類(lèi)活性化合物尤其是銀杏內(nèi)酯，其在銀杏葉中的含量會(huì)隨著銀杏的產(chǎn)地、品種、樹(shù)齡以及銀杏葉嫩、老、青翠、枯黃的情況，以及采收的季節(jié)等因素有很大的變化，所制造出的銀杏萃取物中所含的銀杏內(nèi)酯及黃酮醇化合物的定量工作十分重要。
由于銀杏內(nèi)酯化學(xué)結(jié)構(gòu)(圖6所示)并沒(méi)有明顯的發(fā)色團(tuán)(Cllromophore)，其在銀杏葉中的含量極低，且分離純化不易，容易被銀杏葉中所含的其它具有強(qiáng)的紫外光吸收物質(zhì)所存在的干擾，在過(guò)去分析此類(lèi)化合物極為困難，必須先除去可能的干擾，特別是具有強(qiáng)紫外光吸收的黃酮醇類(lèi)化合物，而該黃酮醇類(lèi)化合物也是另一類(lèi)需要定量分析的活性化合物。因此過(guò)去的方法是犧牲黃酮類(lèi)化合物，只定量分析銀杏內(nèi)酯。樣品前處理的方法通常是先經(jīng)過(guò)管柱層析或固相吸附或超臨界萃取法除去大部分可能的干擾物質(zhì)，再進(jìn)行高效液相色譜法定量分析，并配合改變檢測(cè)器以提高靈敏度。若以氣相層析儀分析時(shí)則須經(jīng)過(guò)結(jié)構(gòu)修飾以提高揮發(fā)性(參閱參考文獻(xiàn)7～11)。這些方法都有靈敏度低、基線(Baseline)不穩(wěn)定、需要樣品前置純化或衍生化步驟及回收率不佳等等缺點(diǎn)。為改善這些缺點(diǎn)，以核磁共振光譜儀作為分析工具的分析方法也被提出(參閱參考文獻(xiàn)13、14)，但同樣也無(wú)法同時(shí)定量黃酮醇類(lèi)化合物。
至于黃酮醇類(lèi)化合物，由于其具有很好的發(fā)色團(tuán)(如圖6所示)，因此可很容易的藉由高效液相色譜配合紫外光檢測(cè)器定量分析。但同樣也由于銀杏內(nèi)酯化學(xué)結(jié)構(gòu)上并沒(méi)有明顯的發(fā)色團(tuán)，故無(wú)法同時(shí)定量銀杏內(nèi)酯化合物。
至今尚未出現(xiàn)有效、快速、準(zhǔn)確的分析方法可同時(shí)定量銀杏萃取物中所含的銀杏內(nèi)酯及黃酮醇類(lèi)化合物。
由于核磁共振光譜法的特殊優(yōu)點(diǎn)，包括快速、容易、再現(xiàn)性佳、不需衍生化以及可以不需要有高純度分析標(biāo)的物作為標(biāo)準(zhǔn)品，因此本發(fā)明也利用核磁共振光譜儀做為分析工具，經(jīng)過(guò)簡(jiǎn)單的水解步驟，以不同的氘化溶劑組合做為測(cè)試溶劑，同時(shí)定性與定量分析銀杏內(nèi)酯及黃酮醇類(lèi)化合物。
所欲分析的銀杏內(nèi)酯化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)有共同的特征質(zhì)子H-12，由于H-12的鄰近取代基構(gòu)造有些微不同，導(dǎo)致在核磁共振光譜中有不同的化學(xué)位移，因此可藉由在核磁共振光譜中H-12的化學(xué)位移來(lái)區(qū)分不同的銀杏內(nèi)酯，而且由于結(jié)構(gòu)的特殊性，H-12的化學(xué)位移分布在5.8～6.4ppm之間，在核磁共振光譜中此區(qū)段一般是比較不擁擠的區(qū)域，因此受到其它化合物的質(zhì)子訊號(hào)干擾較少。而黃酮醇化合物同樣具有特征性的質(zhì)子H-2’，同樣由于鄰近取代基的不同，不同黃酮醇的H-2'質(zhì)子也會(huì)呈現(xiàn)不同的化學(xué)位移，可藉此區(qū)分不同的黃酮醇化合物。但是在銀杏葉萃取物中所含有的黃酮醇化合物種類(lèi)非常多，要將所有黃酮醇類(lèi)化合物的H-2’質(zhì)子區(qū)分開(kāi)來(lái)非常困難，而且訊號(hào)也會(huì)互相干擾，逐一定量這些化合物在實(shí)際應(yīng)用上也沒(méi)有太大意義。仔細(xì)分析這些黃酮類(lèi)化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)發(fā)現(xiàn)，這些化合物大都是以山萘酚(kaempferol)、槲皮素(quercetin)及異鼠李素(isorhamnetin)為骨架，在C-3位置上有不同的醣基取代而成。因此若將這些醣取代基以水解方式處理，則應(yīng)可得到對(duì)應(yīng)的山萘酚、槲皮素及異鼠李素。如此原本十分復(fù)雜多樣的黃酮醇類(lèi)化合物藉由水解可減少至3種主要的黃酮醇。因此在7.8～8.8ppm之間的H-2’特征訊號(hào)區(qū)域會(huì)因?yàn)樯儆衅渌衔锏馁|(zhì)子干擾呈現(xiàn)較為干凈的部分，可用來(lái)做為區(qū)分3種不同黃酮醇的特征區(qū)域。如此經(jīng)過(guò)簡(jiǎn)單的水解步驟將可使利用核磁共振光譜儀同時(shí)定量銀杏內(nèi)酯及黃酮醇兩類(lèi)化合物成為可能。
由于銀杏萃取物的水解產(chǎn)物中仍含有非常多的其它成分，這些成分可能會(huì)干擾到欲分析的標(biāo)的訊號(hào)，且所欲分析的標(biāo)的訊號(hào)相互之間也可能會(huì)彼此干擾，因此在測(cè)試溶劑的選擇上必須仔細(xì)考慮。為了將水解產(chǎn)物中所有的成分均溶解，以免造成定量上的不準(zhǔn)確性，如氘化甲醇、氘化二氧亞砜、氘化吡啶等高極性溶劑的選擇是必要的。另外為了將所欲分析的標(biāo)的訊號(hào)彼此分開(kāi)或與其它干擾物質(zhì)子訊號(hào)分開(kāi)，必須藉由如氘化苯、氘化甲苯或氘化吡啶等芳香族溶劑(aromatic solvents)所表現(xiàn)的溶劑效應(yīng)，對(duì)結(jié)構(gòu)相類(lèi)似的化合物的影響不同，選擇以不同比例與高極性氘化溶劑混合，藉以得到較佳的測(cè)試溶劑條件(參見(jiàn)圖2和圖3)。
此外，為定性與定量分析銀杏內(nèi)酯及黃酮醇類(lèi)化合物，必須選擇一適當(dāng)?shù)膬?nèi)標(biāo)準(zhǔn)品。該內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)品必須具有高純度且穩(wěn)定，具有特征吸收訊號(hào)且不被分析樣品中的成分干擾等條件。將各種不同量欲分析的化合物的標(biāo)準(zhǔn)品添加定量的內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)品，以選擇的適當(dāng)溶劑條件進(jìn)行核磁共振光譜掃描，以標(biāo)的訊號(hào)與內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)品特征訊號(hào)的積分比值對(duì)濃度作圖，來(lái)求得各欲分析物的檢量線(見(jiàn)圖4)。
為減少核磁共振光譜圖中其它化合物的干擾訊號(hào)，藉由欲分析成分對(duì)不同溶劑的溶解度不同，再以不同的溶劑萃取以除去更多的干擾物質(zhì)，使核磁共振光譜的干擾降低。銀杏萃取物經(jīng)水解后，以不同溶劑萃取，所得的活性成分部分添加定量的內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)品，以選擇的氘化溶劑系統(tǒng)做為測(cè)試溶劑，進(jìn)行核磁共振光譜掃描，并以檢量線求得各活性成分的含量。
本發(fā)明實(shí)際的進(jìn)行方法(如圖1)是將市售銀杏萃取物或銀杏產(chǎn)品以不同的溫度進(jìn)行水解，通常是利用強(qiáng)酸水解，所得的水解產(chǎn)物利用活性成分如銀杏內(nèi)酯及黃酮醇類(lèi)化合物對(duì)有機(jī)溶劑的溶解度不同，進(jìn)行分配分離。先以低極性有機(jī)溶劑與水進(jìn)行分配萃取除去較低極性的其它成分，再以中等極性溶劑與水進(jìn)行分配萃取，得到含活性成分的萃取層部份。所得的活性成分部分添加定量的適當(dāng)內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)品，如1，3，5-三甲氧基苯(如圖6所示)等，并以選擇的氘化溶劑系統(tǒng)做為測(cè)試溶劑，進(jìn)行核磁共振光譜掃描，并以檢量線求得各活性成分的含量。
本發(fā)明的目的在于提供一種快速定性與定量分析銀杏制品中所含的活性成份的方法，以達(dá)到同時(shí)定量銀杏內(nèi)酯及黃酮醇類(lèi)化合物的分析的目的。
本發(fā)明提供一種快速定性與定量分析銀杏制品中所含的活性成份的方法，主要是針對(duì)銀杏中所含銀杏內(nèi)酯及黃酮醇類(lèi)化合物的定性與定量分析方法，其包含(a)以銀杏內(nèi)酯的H-12及黃酮醇的H-2’做為核磁共振光譜法測(cè)量銀杏制品活性成分的標(biāo)的訊號(hào)；(b)以芳香族溶劑具有明顯溶劑效應(yīng)的氘化溶劑及各種高極性溶劑混合的氘化溶劑系統(tǒng)做為核磁共振光譜法測(cè)量銀杏制品的溶解與測(cè)試溶劑；(c)以苯取代化合物作為核磁共振光譜法測(cè)量銀杏制品的內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)品；(d)以各種濃度及溫度的組合的強(qiáng)酸水解后，以核磁共振光譜法同時(shí)定性與定量分析以測(cè)量銀杏制品的銀杏內(nèi)酯及黃酮醇類(lèi)化合物。
本發(fā)明所提供的方法藉由利用核磁共振光譜(1H NMR)，可快速準(zhǔn)確地定性與定量分析銀杏制品中的活性成分。
上述快速定性與定量分析銀杏制品中所含的活性成份的方法，其中，該芳香族溶劑為氘化苯、氘化甲苯及氘化吡啶；該高極性溶劑為氘化甲醇、氘化丙酮、氘化二氧亞砜及氘化吡啶；該苯取代化合物為1，3，5-三甲氧基苯。
本方法最大效益在于可同時(shí)定量銀杏萃取物中所含的活性成分包括銀杏內(nèi)酯(白果內(nèi)酯(bilobalide)，銀杏內(nèi)酯A(ginkgolide A)，銀杏內(nèi)酯B(ginkgolide B)，銀杏內(nèi)酯C(ginkgolide C)，銀杏內(nèi)酯J(ginkgolideJ))及黃酮醇(山萘酚(kaempferol)，槲皮素(quencetin)，異鼠李素(isorhamnetin))化合物，而只需要經(jīng)過(guò)簡(jiǎn)單的水解步驟就可達(dá)成，不需要犧牲黃酮醇類(lèi)化合物來(lái)分析銀杏內(nèi)酯，或是為了分析黃酮醇類(lèi)化合物而無(wú)法檢測(cè)銀杏內(nèi)酯。而且不需經(jīng)過(guò)柱層析或固相萃取或超臨界流析等等預(yù)純化方法，可減少在前置純化過(guò)程中欲分析成分的流失，避免再現(xiàn)性不佳及回收率低的缺點(diǎn)。也不需要經(jīng)過(guò)衍生化反應(yīng)導(dǎo)致產(chǎn)率不固定造成分析結(jié)果的不準(zhǔn)確。且核磁共振光譜法本身的優(yōu)點(diǎn)包括快速、再現(xiàn)性佳，且若儀器狀況良好，欲分析物的標(biāo)準(zhǔn)品及檢量線可不需要。


圖l為本發(fā)明方法的簡(jiǎn)單流程示意圖；圖2為以不同氘化溶劑組合做為測(cè)試溶劑測(cè)定酸水解后的銀杏萃取物的核磁共振光譜圖，其中(A)氘化吡啶，(B)氘化二氧亞砜-氘化甲苯，(C)氘化二氧亞砜-氘化苯，(D)氘化甲醇-氘化甲苯，(E)氘化甲醇-氘化苯，(F)氘化甲醇；圖3為以不同比例的氘化甲醇及氘化苯做為測(cè)試溶劑的酸水解后的銀杏萃取物的核磁共振光譜圖，其中(A)氘化甲醇-氘化苯(25∶75)，(B)氘化甲醇-氘化苯(50∶50)，(C)氘化甲醇-氘化苯(65∶35)，(D)氘化甲醇-氘化苯(75∶25)，(E)氘化甲醇；圖4為各欲分析成分的標(biāo)準(zhǔn)品在氘化甲醇及氘化苯65∶35的比例做為測(cè)試溶劑所得的核磁共振光譜圖，其中(A)白果內(nèi)酯，(B)銀杏內(nèi)酯A，(C)銀杏內(nèi)酯B，(D)銀杏內(nèi)酯C，(E)銀杏內(nèi)酯J，(F)山萘酚，(G)槲皮素，(H)異鼠李素，IS內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)品(1，3，5-三甲氧基苯)；圖5為各種市售的銀杏萃取物經(jīng)水解及分配萃取所得的部分以氘化甲醇及氘化苯65∶35的比例做為測(cè)試溶劑所得的核磁共振光譜圖，其中(A)樣品一，(B)樣品二，(C)樣品三，(D)樣品四，(E)樣品五，(F)樣品六，(G)樣品七，(H)樣品八，(I)樣品九，IS內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)品(1，3，5-三甲氧基苯)；圖6為銀杏內(nèi)酯、黃酮醇類(lèi)化合物及1，3，5-三甲氧基苯的化學(xué)結(jié)構(gòu)。圖中峰號(hào)說(shuō)明1 白果內(nèi)酯(bilobalide)2 銀杏內(nèi)酯A(ginkgolide A)
3 銀杏內(nèi)酯B(ginkgolide B)4 銀杏內(nèi)酯C(ginkgolide C)5 銀杏內(nèi)酯J(ginkgolide J)6 山萘酚(kaempferol)7 槲皮素(quencetin)8 異鼠李素(isorhamnetin)IS 內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)品，1，3，5-三甲氧基苯BB 白果內(nèi)酯(bilobalide)gA 銀杏內(nèi)酯A(ginkgolide A)gB 銀杏內(nèi)酯B(ginkgolide B)gC 銀杏內(nèi)酯C(ginkgolide C)gJ 銀杏內(nèi)酯J(ginkgolide J)K 山萘酚(kaempferol)Q 槲皮素(quencetin)I 異鼠李素(isorhamnetin)具體實(shí)施方式
本發(fā)明以市售銀杏萃取物的定量分析做為實(shí)例說(shuō)明。
1、制作檢量線以不同濃度的各欲分析物標(biāo)準(zhǔn)品加入一定量的內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)品(1，3，5-三甲氧基苯)，加入390μL氘化甲醇及210μL氘化苯做為測(cè)試溶劑進(jìn)行核磁共振光譜分析(圖4)。仔細(xì)積分各標(biāo)準(zhǔn)物的特征質(zhì)子吸收訊號(hào)及內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)品的特征吸收訊號(hào)。以各標(biāo)準(zhǔn)物的標(biāo)的訊號(hào)與內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)品的標(biāo)的訊號(hào)的積分值比對(duì)濃度作圖，得到各欲分析物的檢量線。
表1白果內(nèi)酯(bilobalide)、銀杏內(nèi)酯A(ginkgolide A)、銀杏內(nèi)酯B(ginkgolide B)、銀杏內(nèi)酯C(ginkgolide C)、銀杏內(nèi)酯J(ginkgolideJ)、山萘酚(kaempferol)、槲皮素(quencetin)、異鼠李素(isorhamnetin)的檢量線(Calibration curve)。

2、精確稱取50mg的市售銀杏萃取物A，以30mL 5％ HCl水溶液加熱回流30分鐘，溫度120℃。
3、反應(yīng)回到室溫加入30mL環(huán)已烷進(jìn)行分配萃取，保留水層。重復(fù)3次。
4、加入30mL甲乙酮與水進(jìn)行分配萃取，收集甲乙酮層。重復(fù)3次。
5、將所收集得的甲乙酮層減壓濃縮至干，加入390μL氘化甲醇及210μL氘化苯，及一定量的內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)品，進(jìn)行核磁共振光譜分析(圖5)。仔細(xì)積分各標(biāo)準(zhǔn)物的特征質(zhì)子吸收訊號(hào)及內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)品的特征吸收訊號(hào)，求得各標(biāo)準(zhǔn)物的標(biāo)的訊號(hào)與內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)品的標(biāo)的訊號(hào)的積分值。藉由檢量線就可得到各欲分析成分的含量。
表2藉由核磁共振光譜法所測(cè)定的白果內(nèi)酯(Bilobalide(BB))、銀杏內(nèi)酯A(ginkgolide A(gA))、銀杏內(nèi)酯B(ginkgolide B(gB))、銀杏內(nèi)酯C(ginkgolide C(gC))、銀杏內(nèi)酯J(ginkgolide J(gJ))、山萘酚(kaempferol(K))、槲皮素(quercetin(Q))及異鼠李素(isorhamnetin(I))在各種不同市售銀杏萃取物中的含量(測(cè)量3次取平均值)

6、回收率試驗(yàn)精確稱取3mg的各標(biāo)準(zhǔn)品，以30mL 5％HCl水溶液加熱回流30分鐘，溫度120℃。依照步驟3.4.5.求得各欲分析成分的含量，并推算回收率。
表3白果內(nèi)酯(Bilobalide)(BB)、銀杏內(nèi)酯A(ginkgolide A)(gA)、銀杏內(nèi)酯B(ginkgolide B)(gB)、銀杏內(nèi)酯C(ginkgolide C)(gC)、銀杏內(nèi)酯J(ginkgolide J)(gJ)、山萘酚(kaempferol)(K)、槲皮素(quercetin)(Q)及異鼠李素(isorhamnetin)(I)經(jīng)鹽酸水溶液加熱回流30分鐘后以環(huán)己烷及甲乙酮分配萃取所得的回收率(recovery)

本方法同時(shí)定量銀杏萃取物中所含的活性成分包括銀杏內(nèi)酯(白果內(nèi)酯(bilobalide)、銀杏內(nèi)酯A(ginkgolide A)、銀杏內(nèi)酯B(ginkgolide B)、銀杏內(nèi)酯C(ginkgolide C)、銀杏內(nèi)酯J(ginkgolide J))及黃酮醇(山萘酚(kaempferol)、槲皮素(quercetin)及異鼠李素(isorhamnetin))化合物，而只需經(jīng)過(guò)簡(jiǎn)單的水解步驟就可達(dá)成。檢量線的線性極佳，線性相關(guān)系數(shù)值0.999以上。得到的分析結(jié)果再現(xiàn)性極佳，變異值均控制在3.2％以內(nèi)?；厥章蕦?shí)驗(yàn)顯示欲分析成分并不因?yàn)樗饧拜腿∵^(guò)程而產(chǎn)生變化。避免管柱層析或固相萃取或超臨界流析等等預(yù)純化方法，產(chǎn)生在前置純化過(guò)程中欲分析成分的流失、再現(xiàn)性不佳及回收率低的缺點(diǎn)。也不需經(jīng)過(guò)衍生化反應(yīng)導(dǎo)致產(chǎn)率不固定造成分析結(jié)果的不準(zhǔn)確。并同時(shí)定量銀杏萃取物所含的活性成分包括銀杏內(nèi)酯(白果內(nèi)酯(bilobalide)、銀杏內(nèi)酯A(ginkgolide A)、銀杏內(nèi)酯B(ginkgolide B)、銀杏內(nèi)酯C(ginkgolide C)、銀杏內(nèi)酯J(ginkgolide J))及黃酮醇(山萘酚(kaempferol)、槲皮素(quercetin)及異鼠李素(isorhamnetin))化合物。
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14.Choi，Y.H.；Choi，H.K.；Hazekamp，A.；Bermejo，P.；Schilder，Y.；Erkelens，C.；Verpoorte，R.Chem.Pharm.Bull.2003，51，358-161.
權(quán)利要求
1.一種快速定性與定量分析銀杏制品中所含的活性成份的方法，為針對(duì)銀杏中所含銀杏內(nèi)酯及黃酮醇類(lèi)化合物的定性與定量分析方法，其包含(a)以銀杏內(nèi)酯的H-12及黃酮醇的H-2’做為核磁共振光譜法測(cè)量銀杏制品活性成分的標(biāo)的訊號(hào)；(b)以芳香族溶劑具有明顯溶劑效應(yīng)的氘化溶劑及各種高極性溶劑混合的氘化溶劑系統(tǒng)做為核磁共振光譜法測(cè)量銀杏制品的溶解與測(cè)試溶劑；(c)以苯取代化合物作為核磁共振光譜法測(cè)量銀杏制品的內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)品；(d)以各種濃度及溫度的組合的強(qiáng)酸水解后，以核磁共振光譜法同時(shí)定性與定量分析以測(cè)量銀杏制品的銀杏內(nèi)酯及黃酮醇類(lèi)化合物。
2.如權(quán)利要求1所述的快速定性與定量分析銀杏制品中所含的活性成份的方法，其中，該芳香族溶劑為氘化苯、氘化甲苯及氘化吡啶。
3.如權(quán)利要求1所述的快速定性與定量分析銀杏制品中所含的活性成份的方法，其中，該高極性溶劑為氘化甲醇、氘化丙酮、氘化二氧亞砜及氘化吡啶。
4.如權(quán)利要求1所述的快速定性與定量分析銀杏制品中所含的活性成份的方法，其中，該苯取代化合物為1，3，5-三甲氧基苯。
全文摘要
本方法提供一種快速定性與定量分析銀杏制品中所含的活性成分的方法，其藉由核磁共振光譜儀(NMR)定性與定量分析銀杏制品中所含的活性成分，特別是針對(duì)銀杏中所含銀杏內(nèi)酯(Ginkgo terpene trilactones)及黃酮醇類(lèi)(flavonols)的定性與定量分析方法?，F(xiàn)有技術(shù)無(wú)法同時(shí)定性與定量分析該兩類(lèi)活性成分，本方法將銀杏萃取物與制品水解后經(jīng)由簡(jiǎn)易處理，再利用核磁共振光譜儀分析，以不同氘化溶劑系統(tǒng)同時(shí)定性與定量分析銀杏內(nèi)酯及黃酮醇類(lèi)。本方法可快速且準(zhǔn)確性高的應(yīng)用在銀杏制品的質(zhì)量控制中，特別是同時(shí)針對(duì)銀杏內(nèi)酯(Ginkgo terpene trilactones)及黃酮醇類(lèi)(flavonols)的定性與定量分析。
文檔編號(hào)G01N33/02GK1763514SQ20041008604
公開(kāi)日2006年4月26日 申請(qǐng)日期2004年10月22日 優(yōu)先權(quán)日2004年10月22日
發(fā)明者吳天賞, 李佳穎, 王玉杯 申請(qǐng)人:南光化學(xué)制藥股份有限公司