專利名稱：醫(yī)藥-護膚品中氯霉素和1，2-丙二醇的分析方法
所屬領(lǐng)域本發(fā)明屬于一種對氯霉素和1，2-丙二醇的分析方法，具體地說主要涉及一種醫(yī)藥-護膚液中氯霉素或1，2-丙二醇的定性、定量分析方法
背景技術(shù)：
現(xiàn)代生活中，臉部理護和美容已成為一種生活時尚，以化妝品消耗量為統(tǒng)計，法國、美國、和日本的消耗量位居世界前列；隨著我國經(jīng)濟的迅速發(fā)展，需求量亦呈急劇增長趨勢。琳瑯滿目的化妝品充斥了市場。因為面部的美容護理和治療痤瘡、消滅炎癥、螨蟲等常常是不可分割的，美容-醫(yī)療融為一體的綜合藥液---醫(yī)藥-護膚液成為化妝品市場的重要內(nèi)容。人們對面部護理的需求的極大增長，亦為美容科學(xué)者提出了若干檢測問題。
在我國，生產(chǎn)廣譜抗生素-氯霉素，已有十余年的歷史，批量化工產(chǎn)品的質(zhì)量檢測可依據(jù)中華人民共和國藥典法要求，其中有紫外分光光度測定，熔點測定，比旋光度測定，干燥失重測定。以紫外分光光度測定為最主要的質(zhì)量檢測。它是將產(chǎn)品配成一定濃度的溶液，在一定波長下，測定其吸收度，要達到一定要求。這些方法適合于生產(chǎn)流程定型、產(chǎn)品已確定為氯霉素、且批量生產(chǎn)、樣品量較多的質(zhì)量檢測。對樣品主成分并未確定為氯霉素時，是絕不能以上述方法檢測。此外，有不少化合物，其吸光值和氯霉素極為接近，倘若，僅以紫外分光光度測定未知物，將會導(dǎo)入誤區(qū)。
1，2-丙二醇在我國也有生產(chǎn)供應(yīng)，其質(zhì)量檢測主要是色譜法。這方法也是更適合于生產(chǎn)流程定型、產(chǎn)品已確定為1，2-丙二醇、且批量生產(chǎn)的質(zhì)量檢測。對未確定為1，2-丙二醇時，除應(yīng)該以色譜保留值定性外，還應(yīng)該有其它的分析核實。
對既有美容功能又有醫(yī)藥治療效果的未知化妝品作成分剖析，對醫(yī)藥和護膚液中氯霉素、1，2-丙二醇的分析方法，至今尚無定型的方法及有關(guān)資料報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種對未知醫(yī)藥和護膚液中氯霉素和1，2-丙二醇的分析方法本發(fā)明的分析方法包括如下步驟1、氯霉素的富集稱取3-10克試樣，置于分液漏斗中，加入40-100毫升的乙醚，搖動3-6分鐘，靜置3-6分鐘，將上層液-乙醚可溶物分出，于室溫下干燥，即獲制備段(a)氯霉素的富集物；
2、1，2-丙二醇的富集將上述剩余的下層液再加入50-80毫升的乙醚進行洗滌，棄去洗滌液，，置于烘箱中，150-170℃下4-6小時，待冷卻后，獲制備段(b)1，2-丙二醇的富集物；3、氯霉素分析A、高效液相色譜分析采用的儀器為島津LC-3A高效液相色譜儀；檢測器為UVD-2紫外檢測器；色譜柱Zorbax-ODS，0.46×25cm。柱溫15-30℃；移動相的體積比為甲醇/水＝70-90/30-100，流速為0.8-1.2mL/min；在此條件下，測定制備段(a)的色譜特性，再以純樣品的特性為標準，比較兩者，以確定否；B.元素分析用Vario EL有機元素分析儀(德國EA元素分析系統(tǒng)公司生產(chǎn))采用的氧化溫度為1150℃，還原溫度為850℃，燃燒后的混合氣經(jīng)吸附柱分離，熱導(dǎo)檢測C、H、N、O元素，在此條件下，測定制備段(a)的元素組成，再以純樣品的元素分析為標準，比較兩者，以確定否；C.質(zhì)譜分析用QUATTRO型色質(zhì)聯(lián)用儀(英國VG公司生產(chǎn))采用電子轟擊源(EI)，離化電壓70eV，發(fā)射電流200μA，源溫180℃。在此條件下，測定制備段(a)的質(zhì)譜特征，再以純樣的質(zhì)譜特征為標準，比較兩者，以確定否；D.紅外光譜分析用Magna IR550紅外光譜儀(Nicolet公司制造)，采用溴化鉀壓片法，溴化鉀與樣品的比為200/1(重量)，紅外測定的分辨率為Δγ＝4cm-1，64次掃描，在此條件下，測定制備段(a)的紅外光譜特征，再以純樣的紅外光譜特征為標準，比較兩者，以確定否；E.無機金屬離子測定，所用儀器為ATOMSCAN16型電感耦合離子發(fā)射光譜儀(TJA公司生產(chǎn))，儀器的條件功率1150W；頻率40.68MHz；霧化器壓力30PSI；蠕動泵進樣泵速100RPM；提升量1.4ml/min；在此條件下，對制備段(a)進行無機金屬離子測定，再以純樣為標準，比較兩者，以確定否；4. 1，2-丙二醇分析A.高效液相色譜分析采用的儀器為島津LC-3A高效液相色譜儀，檢測器為RID-2A示差檢測器，色譜柱Zorbax-ODS，0.46×25cm，柱溫15-22℃，移動相為水，流速為0.7-1.2mL/min或移動相體積比為乙腈/水＝10-30/90-70，流速為0.8-1.2mL/min；在此條件下，測定制備段(b)的色譜特性，再以純樣品的特性為為標準，比較兩者，以確定否；B.紅外光譜分析用Magna IR550紅外光譜儀(Nicolet公司制造)，采用溴化鉀壓片法，溴化鉀與樣品的比為200∶1，紅外測定的分辨率為Δγ＝4cm-1，64次掃描，在此條件下，測定制備段(b)的紅外光譜特征，再以純樣的紅外光譜特征為標準，比較兩者，以確定否；C.無機金屬離子測定所用儀器為ATOMSCAN16型電感耦合離子發(fā)射光譜儀(TJA公司生產(chǎn))，儀器的條件功率1150W；頻率40.68MHz；霧化器壓力30PSI；蠕動泵進樣泵速100RPM；提升量1.4ml/min；在此條件下，對制備段(b)進行無機金屬離子測定，再以純樣為標準，比較兩者，以確定否；5.定量方法色譜外標法完成氯霉素和1，2-丙二醇的定量分析。
本發(fā)明適用于檢測和核實含有一定份量氯霉素和1，2-丙二醇的如下樣品。
①固體類-醫(yī)藥-護膚型的化妝品的檢測；②液體類-醫(yī)藥-護膚型的化妝品的檢測；③固體類-醫(yī)藥的檢測；④液體類-醫(yī)藥的檢測；本發(fā)明具有如下優(yōu)點1.解決了未知成分的被濃縮富集問題，并所達濃縮富集物純度高于95％；2.可準確無誤地確定被濃縮富集的未知物；3.應(yīng)用領(lǐng)域的廣泛性，可用于醫(yī)藥、美容領(lǐng)域；4.本發(fā)明還可用于各種抗生素的分析；5.對被檢測的物品可定性、定量分析。
具體實施例方式實施例一樣品來源化妝品市場，1、氯霉素的富集稱取4克試樣，置于分液漏斗中，加入50毫升的乙醚，搖動5分鐘，靜置5鐘，將上層液-乙醚可溶物分出，于室溫下干燥，即獲制備段(a)，即氯霉素的富集物。
2. 1，2-丙二醇的富集將上述剩余的下層液再加入50-80毫升的乙醚進行洗滌，棄去洗滌液，，置于烘箱中，150下4小時，待冷卻后，獲制備段(b)，即1，2-丙二醇的富集物。
3.氯霉素分析A.高效液相色譜分析采用的儀器為島津LC-3A高效液相色譜儀；檢測器為UVD-2紫外檢測器；色譜柱Zorbax-ODS，0.46×25cm；柱溫17℃；移動相為甲醇/水＝85/15(V％)，1.0mL/min；組分的濃縮效果以HPLC分析，所獲制備段中氯霉素的純度達99％(色譜內(nèi)歸一法，

圖1)。其中，圖1為制備段份(a)的高效液相色譜分析譜圖，色譜條件為紫外檢測器；254nm；流動相為甲醇/水＝85/15(V/V)；流速1.0mL/min.在此條件下，制備段(a)中氯霉素的出峰時間和純樣氯霉素的出峰時間完全一致。
B元素分析Vario EL有機元素分析儀(德國EA元素分析系統(tǒng)公司生產(chǎn))采用的氧化溫度為1150℃，還原溫度為850℃，燃燒后的混合氣經(jīng)吸附柱分離，熱導(dǎo)檢測C、H、N、O元素。元素分析結(jié)果制備段(a)的元素分析結(jié)果與氯霉素的元素組成比較列于表1。從表1可見，制備樣的元素組成與氯霉素的(理論)元素的組成一致。
表1元素分析結(jié)果

C.質(zhì)譜分析所用儀器為QUATTRO型色質(zhì)聯(lián)用儀(英國VG公司生產(chǎn))采用電子轟擊源(EI)，離化電壓70eV，發(fā)射電流200μA，源溫180℃。
抽提濃縮段(a)的質(zhì)譜圖示于圖2-A。質(zhì)譜解析結(jié)構(gòu)中無N、S官能團；圖2-B純樣氯霉素標準譜圖；圖2C為標準譜圖對應(yīng)的結(jié)構(gòu)式。比較圖2-A和圖2-B，明確可見，質(zhì)譜特性相同。
D.紅外光譜分析Magna IR550紅外光譜儀，Nicolet公司制造，采用溴化鉀壓片法，溴化鉀與樣品的比為200∶1，紅外測定的分辨率為Δγ＝4cm-1，64次掃描。
制備段(a)的紅外光譜圖示于圖3，氯霉素(純試劑)的標準光譜圖示于圖4，比較兩個譜圖，完全相同。
E.機金屬離子測定，所用儀器為ATOMSCAN16型電感耦合離子發(fā)射光譜儀(TJA公司生產(chǎn))。儀器的條件功率1150W；頻率40.68MHz；霧化器壓力30PSI；蠕動泵進樣泵速100RPM；提升量1.4ml/min.。無機金屬離子測定結(jié)果富集濃縮物不含有金屬元素。鉀小于0.05ppm(1ppm為百萬分之一)，鈉小于0.01ppm，鉛小于0.02ppm，鐵小于0.0004ppm。
4.樣品含有氯霉素的定性結(jié)論在所獲富集濃縮段(a)的純度達到了99％后，以上述各種方法進行了分析。其中，無機金屬離子測定結(jié)果是富集濃縮物不含有金屬元素，這和純樣氯霉素一致。元素分析結(jié)果是制備段(a)的元素與純樣氯霉素的元素組成相同。制備段(a)的紅外光譜特征與純樣氯霉素的紅外光譜特征組成相同。制備段(a)的質(zhì)譜圖與純樣氯霉素的質(zhì)譜圖相同。高效液相色譜分析所獲富集濃縮段(a)的色譜保留值與純樣氯霉素的色譜保留值相同。以5種先進分析儀器的分析結(jié)果相互驗證，可準確地確定了制備段(a)為氯霉素。
5. 1，2-丙二醇分析A.高效液相色譜分析采用的儀器為島津LC-3A高效液相色譜儀；檢測器為RID-2A示差檢測器；色譜柱Zorbax-ODS，0.46×25cm。柱溫18℃，移動相為水0.8mL/min或乙腈/水＝20/80(V％)，1.0mL/min；柱溫18℃。對制備段(b)的富集物進行分析，高效液相色譜分析結(jié)果富集濃縮段(b)的色譜保留值與純樣1，2-丙二醇的色譜保留值相同。示差檢測器上的分離譜圖見圖8。
B.紅外光譜分析Magna IR550紅外光譜儀，Nicolet公司制造，采用溴化鉀壓片法，溴化鉀與樣品的比為200∶1，紅外測定的分辨率為Δγ＝4cm-1，64次掃描。紅外光譜特性比較制備段(b)的紅外光譜圖示于圖5，純試劑-1，2-丙二醇的標準光譜示于圖6，比較圖5、圖6，譜圖特征相同。
C.無機金屬離子測定所用儀器為ATOMSCAN16型電感耦合離子發(fā)射光譜儀(TJA公司生產(chǎn))。儀器的條件功率1150W；頻率40.68MHz；霧化器壓力30PSI；蠕動泵進樣泵速100RPM；提升量1.4ml/min.。無機金屬離子測定結(jié)果富集濃縮物不含有金屬元素，鉀小于0.05ppm(1ppm為百萬分之一)，鈉小于0.01ppm，鉛小于0.02ppm，鐵小于0.0004ppm。
6.樣品中1，2-丙二醇的定性結(jié)論對富集濃縮段(段b)不含有金屬元素。紅外光譜分析結(jié)果制備段(b)的紅外光譜特征與純樣1，2-丙二醇的紅外光譜特征基本相同(制備段b含有微量雜質(zhì))。高效液相色譜分析結(jié)果富集濃縮段(b)的色譜保留值與純樣1，2-丙二醇的色譜保留值相同。以此3種先進分析儀器的相互驗證，可以確定制備段(b)為1，2-丙二醇。與氯霉素相比，醇類化合物常是美容基質(zhì)物的成分，因此，對1，2-丙二醇的核實工作量略少于對氯霉素。
7.其它成分的定性采用高效液相色譜保留值的定性方法，定性組分有羅紅霉素，地塞米松、乙二醇、乙醇和水。氯霉素、羅紅霉素、地塞米松、在紫外檢測-甲醇/水的色譜體系中，它們的色譜保留值和對應(yīng)的純樣品一致(圖7)。圖7中的試樣為移動相的可溶物，峰序為①氯霉素；②羅紅霉素；③地塞米松。1，2-丙二醇、乙二醇、乙醇的分離示于圖8，所用的檢測器系示差檢測器，移動相為水，流速為0.8毫升/分，試樣為水的可溶物。峰序為①1，2-丙二醇；②乙二醇③乙醇。樣品中的水分測定是采用高效液相色譜-RID-2A-乙腈/水的色譜體系(前面已述)，因大部分護膚品中均含有水分，故不再列出分離譜圖。
8.組分定量結(jié)果對已定性的各組分，以色譜外標法完成其定量。所獲結(jié)果列于下表表2表2組分定量結(jié)果

權(quán)利要求
1.醫(yī)藥-護膚品中氯霉素和1，2-丙二醇的分析方法，其特征在于包括如下步驟(1)、氯霉素的富集稱取3-10克試樣，置于分液漏斗中，加入40-100毫升的乙醚，搖動3-6分鐘，靜置3-6分鐘，將上層液-乙醚可溶物分出，于室溫下干燥，即獲制備段(a)氯霉素的富集物；(2)、1，2-丙二醇的富集將上述剩余的下層液再加入50-80毫升的乙醚進行洗滌，棄去洗滌液，，置于烘箱中，150-170℃下4-6小時，待冷卻后，獲制備段(b)1，2-丙二醇的富集物；(3)、氯霉素分析A、高效液相色譜分析采用的儀器為島津LC-3A高效液相色譜儀；檢測器為UVD-2紫外檢測器；色譜柱Zorbax-ODS，0.46×25cm。柱溫15-30℃；移動相的體積比為甲醇/水＝70-90/30-100，流速為0.8-1.2mL/min；在此條件下，測定制備段a的色譜特性，再以純樣品的特性為標準，比較兩者，以確定否；B.元素分析用Vario EL有機元素分析儀采用的氧化溫度為1150℃，還原溫度為850℃，燃燒后的混合氣經(jīng)吸附柱分離，熱導(dǎo)檢測C、H、N、O元素，在此條件下，測定制備段a的元素組成，再以純樣品的元素分析為標準，比較兩者，以確定否；C.質(zhì)譜分析用QUATTRO型色質(zhì)聯(lián)用儀采用電子轟擊源，離化電壓70eV，發(fā)射電流200μA，源溫180℃。在此條件下，測定制備段a的質(zhì)譜特征，再以純樣的質(zhì)譜特征為標準，比較兩者，以確定否；D.紅外光譜分析用Magna IR550紅外光譜儀，采用溴化鉀壓片法，溴化鉀與樣品的重量比為200/1，紅外測定的分辨率為Δγ＝4cm-1，64次掃描，在此條件下，測定制備段a的紅外光譜特征，再以純樣的紅外光譜特征為標準，比較兩者，以確定否；E.無機金屬離子測定，所用儀器為ATOMSCAN16型電感耦合離子發(fā)射光譜儀，儀器的條件功率1150W；頻率40.68MHz；霧化器壓力30PSI；蠕動泵進樣泵速100RPM；提升量1.4ml/min；在此條件下，對制備段a進行無機金屬離子測定，再以純樣為標準，比較兩者，以確定否；(4)、1，2-丙二醇分析A高效液相色譜分析采用的儀器為島津LC-3A高效液相色譜儀，檢測器為RID-2A示差檢測器，色譜柱Zorbax-ODS，0.46×25cm，柱溫15-22℃，移動相為水，流速為0.7-1.2mL/min或移動相體積比為乙腈/水＝10-30/90-70，流速為0.8-1.2mL/min；在此條件下，測定制備段b的色譜特性，再以純樣品的特性為為標準，比較兩者，以確定否；B.紅外光譜分析用Magna IR550紅外光譜儀，采用溴化鉀壓片法，溴化鉀與樣品的比為200∶1，紅外測定的分辨率為Δγ＝4cm-1，64次掃描，在此條件下，測定制備段b的紅外光譜特征，再以純樣的紅外光譜特征為標準，比較兩者，以確定否；C.無機金屬離子測定所用儀器為ATOMSCAN16型電感耦合離子發(fā)射光譜儀，儀器的條件功率1150W；頻率40.68MHz；霧化器壓力30PSI；蠕動泵進樣泵速100RPM；提升量1.4m1/min；在此條件下，對制備段b進行無機金屬離子測定，再以純樣為標準，比較兩者，以確定否；(5).定量方法色譜外標法完成氯霉素和1，2-丙二醇的定量分析。
全文摘要
醫(yī)藥－護膚品中氯霉素和1，2－丙二醇的分析方法是先進行氯霉素和1，2－丙二醇的富集，再用高效液相色譜、元素分析、質(zhì)譜分析、紅外光譜分析、無機金屬離子測定對氯霉素富集物定性分析，用高效液相色譜分析、紅外光譜分析、無機金屬離子測定對1，2－丙二醇富集物定性分析，色譜外標法完成氯霉素和1，2－丙二醇的定量分析。本發(fā)明解決了未知成分的被濃縮富集問題，對被檢測的物品可定性、定量分析，應(yīng)用領(lǐng)域的廣泛性。
文檔編號G01N21/71GK1482455SQ0312426
公開日2004年3月17日 申請日期2003年4月30日 優(yōu)先權(quán)日2003年4月30日
發(fā)明者張昌鳴, 楊建麗, 劉振宇 申請人:中國科學(xué)院山西煤炭化學(xué)研究所