專利名稱：丙酸睪丸酮引起B(yǎng)eagle犬前列腺增生法的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明丙酸睪丸酮引起B(yǎng)eagle犬前列腺增生法涉及生物、醫(yī)藥研究方法。
現(xiàn)今藥物臨床前藥理學(xué)研究常用的兩種動物模型是《老齡家犬自發(fā)性前列腺增生模型》和《丙酸睪丸素引起大白鼠前列腺增生法》。前者因為是雜種犬，不符合使用純種動物的國際規(guī)范，而且動物體內(nèi)源性的雄激素水平難以控制，影響對被檢測新藥的效果，故而我們運用符合國際規(guī)范的純種Beagle犬，進行研究。將其去勢后皮下注射丙酸睪丸酮，研制出“丙酸睪丸酮引起B(yǎng)eagle犬前列腺增生法”。
本發(fā)明丙酸睪丸酮引起B(yǎng)eagle犬前列腺增生法，是選用2年齡及2年齡以上的雄性Beagle犬，無菌操作下，手術(shù)切除雙側(cè)睪丸，手術(shù)恢復(fù)后，皮下注射溶解于橄欖油(olive oil)的丙酸睪丸酮2.5mg/0.5ml/犬。同時開始藥物處理，連續(xù)一個月。
在上述技術(shù)方案基礎(chǔ)上，本發(fā)明用于藥物開發(fā)研究。
本發(fā)明用于進行藥物分析的方法為一、實驗分組，新藥組分三個劑量組，療程30天。陰性對照組不作處理，可用等量生理鹽水代替藥液，藥物需用特殊溶媒配制時應(yīng)設(shè)溶媒對照組。每組用動物5只，藥物處理時間視藥物作用強度而定。
二、評價指標(1)前列腺的體積(B超和臟器實際解剖體積)，以實驗前的體積為100％，比較用藥前后的變化率。
(2)各葉前列腺的濕重和干重，可附帶觀察睪丸及儲精囊的重量。
(3)前列腺的組織形態(tài)學(xué)檢查，測量腺腔直徑和腺的上皮細胞高度。
(4)生化測定血清酸性磷酸酶，前列腺組織DNA含量測定。
三、數(shù)據(jù)處理顯著性檢測用方差檢驗。百分比相差大于20％，且差異有顯著意義時，可判斷為陽性，三個劑量間應(yīng)有量效關(guān)系。
本發(fā)明方法的優(yōu)越性在于建立了符合國際規(guī)范的良性前列腺增生法，可更確切地反映人類發(fā)病狀況，以用于治療前列腺增生藥物的篩選。
具體實施例方式
1、Beagle犬的B超探測Beagle犬用戊巴比妥鈉25mg/kg麻醉，經(jīng)導(dǎo)管向膀胱內(nèi)注入200ml滅菌生理鹽水，用B型實時超聲顯相儀進行檢查?？仡^置于恥骨上或直腸內(nèi)，仔細掃查顯示前列腺橫斷面及縱斷面聲象圖后，全部進行圖象凍結(jié)固定并攝片。分別用電子尺測量前列腺的最大橫徑，縱徑及厚徑，三徑相乘即為前列腺體積的近似值(cm3)。2、去勢雄性Beagle犬，無菌操作下，手術(shù)切除雙側(cè)睪丸。3、藥物篩選手術(shù)恢復(fù)后，皮下注射溶解于橄欖油(olive oil)的丙酸睪丸素(testosterone propionaste)2.5mg/0.5ml/犬。同時開始藥物處理，連續(xù)一個月。4、結(jié)果分析末次用藥24h后B超探測Beagle犬前列腺體積，剖取各葉前列腺。測量各葉前列腺干濕重、前列腺腺腔直徑及上皮細胞高度，測定血清酸性磷酸酶及前列腺組織DNA含量，利用方差分析進行顯著性檢驗。如果前列腺體積前后百分比相差大于20％，且差異有顯著意義時，則認為該藥具有抗前列腺增生作用。
權(quán)利要求
1，丙酸睪丸酮引起B(yǎng)eagle犬前列腺增生法，是選用2年齡或2年齡以上的雄性Beagle犬，在無菌操作下，手術(shù)切除雙側(cè)睪丸，手術(shù)恢復(fù)后，皮下注射溶解于橄欖油(olive oil)的丙酸睪丸酮2.5mg/0.5ml/犬，同時開始藥物處理，連續(xù)一個月。
2，根據(jù)權(quán)利要求1所述的丙酸睪丸酮引起B(yǎng)eagle犬前列腺增生法的用途，特征在于用于藥物開發(fā)研究。
3，根據(jù)權(quán)利要求2所述的丙酸睪丸酮引起B(yǎng)eagle犬前列腺增生法進行藥物分析的方法一、藥物新藥組分三個劑量組，療程30天，陰性對照組不作處理，可用等量生理鹽水代替藥液，藥物需用特殊溶媒配制時應(yīng)設(shè)溶媒對照組，每組用動物5只，藥物處理時間視藥物作用強度而定；二、評價指標(1)前列腺的體積按B超和臟器實際解剖體積，以實驗前的體積為100％，比較用藥前后的變化率；(2)各葉前列腺的濕重和干重，可附帶觀察睪丸及儲精囊的重量；(3)前列腺的組織形態(tài)學(xué)檢查，測量腺腔直徑和腺的上皮細胞高度；(4)生化測定血清酸性磷酸酶，前列腺組織DNA含量測定；三、數(shù)據(jù)處理顯著性檢測用方差檢驗，百分比相差大于20％，且差異有顯著意義時，可判斷為陽性，且三個劑量間應(yīng)有量效關(guān)系。
全文摘要
本發(fā)明丙酸睪丸酮引起B(yǎng)eagle犬前列腺增生法涉及生物、醫(yī)藥研究方法。丙酸睪丸酮引起B(yǎng)eagle犬前列腺增生法，是選用2年齡的雄性Beagle犬，無菌操作下，手術(shù)切除雙側(cè)睪丸，手術(shù)恢復(fù)后，皮下注射溶解于橄欖油(olive oil)的丙酸睪丸素2.5mg/0.5ml/犬，同時開始藥物處理，連續(xù)一個月，用于藥物研究。本發(fā)明方法的優(yōu)越性在于建立了符合國際規(guī)范的良性前列腺增生法，可更確切地反映人類發(fā)病狀況，以用于治療前列腺增生藥物的篩選。
文檔編號G01N33/15GK1415299SQ0213732
公開日2003年5月7日 申請日期2002年10月8日 優(yōu)先權(quán)日2002年10月8日
發(fā)明者孫祖越, 吳建輝, 朱焰, 鐘恩宏 申請人:上海市計劃生育科學(xué)研究所