一種柑橘病毒樣品采樣器的制造方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本實用新型涉及一種柑橘病毒樣品采樣器。
【背景技術(shù)】
[0002]柑橘病毒病的主要防治方法是種植無病毒苗木，以及及時根除帶毒植株。為保證苗木無毒，苗圃的母本樹、采穗樹都需要定期做無病毒檢測，出圃苗木需要抽檢是否帶病毒。果園的疑似帶病毒植株需進一步檢查確診，避免無毒植株被根除。
[0003]目前，由于分子生物學(xué)檢測的速度快、效率高，已成為病毒檢測的主要方法。然而，分子生物學(xué)檢測對病毒樣品的新鮮度要求很高。過去，從田間帶到實驗室的枝葉很容易出現(xiàn)枯老，導(dǎo)致分子生物學(xué)檢測無法成功。隨著硝酸纖維素膜在樣品采集上的應(yīng)用，可有效解決樣品的新鮮度問題。硝酸纖維素膜可長時間保存病毒樣品，且省去核酸抽提的繁瑣步驟，從而增強分子生物學(xué)檢測法的優(yōu)勢。
[0004]現(xiàn)有的利用硝酸纖維素膜采集柑橘病毒樣品的方法存在以下缺陷:采樣前，必須特意在硝酸纖維素膜上畫出直線印跡，形成網(wǎng)格狀的采樣區(qū)，區(qū)分各個樣品，采樣操作步驟繁瑣；硝酸纖維素膜質(zhì)地柔軟，在田間采樣時必須佩帶堅硬平臺支撐，否則無法點樣操作；田間很難實現(xiàn)帶無菌手套的采樣操作，手容易接觸膜造成RNase (核糖核酸酶)污染，從而影響后續(xù)的分子生物學(xué)檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。
【實用新型內(nèi)容】
[0005]本實用新型所要解決的技術(shù)問題是，克服上述【背景技術(shù)】的不足，提供一種操作步驟簡單、能避免污染的柑橘病毒樣品采樣器。
[0006]本實用新型解決其技術(shù)問題采用的技術(shù)方案是，一種柑橘病毒樣品采樣器，包括樣品盒，所述樣品盒兩側(cè)的盒壁上均設(shè)有扣手位凹槽，樣品盒的盒壁內(nèi)表面設(shè)有卡扣位，樣品盒內(nèi)底面放置有硝酸纖維素膜，硝酸纖維素膜上放置有網(wǎng)格板，所述網(wǎng)格板內(nèi)部設(shè)有網(wǎng)格，網(wǎng)格板底部緊密接觸硝酸纖維素膜，網(wǎng)格板四周設(shè)有向外延伸的邊沿，網(wǎng)格板外側(cè)設(shè)有與卡扣位配合使用的卡扣腳，網(wǎng)格板與樣品盒卡合。
[0007]進一步，所述樣品盒包括盒蓋，所述盒蓋與盒身鉸接。
[0008]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本實用新型的優(yōu)點如下:
[0009]設(shè)有網(wǎng)格板，網(wǎng)格板的底部緊壓在硝酸纖維素膜上，在硝酸纖維素膜上產(chǎn)生網(wǎng)格狀的壓痕，能形成樣品分界線，省去在硝酸纖維素膜上畫直線印跡的步驟；網(wǎng)格板與樣品盒的卡合能固定硝酸纖維素膜，無需田間再額外佩帶堅硬平臺，而直接將樣品盒放在手上，在網(wǎng)格下的每一塊硝酸纖維素膜上采樣即可，植物組織能夠均勻地壓印于硝酸纖維素膜上，采樣操作步驟簡單，采樣效果好；該采樣器能避免手直接與硝酸纖維素膜接觸，潔凈無菌，避免樣品被污染。
【附圖說明】
[0010]圖1是本實用新型實施例的樣品盒的結(jié)構(gòu)示意圖。
[0011]圖2是本實用新型實施例的網(wǎng)格板的頂部結(jié)構(gòu)示意圖。
[0012]圖3是本實用新型實施例的網(wǎng)格板的底部結(jié)構(gòu)示意圖。
[0013]圖中一樣品盒，2—扣手位凹槽，3—卡扣位，4一盒蓋，5—網(wǎng)格板，6—網(wǎng)格，7—卡扣腳。
【具體實施方式】
[0014]下面結(jié)合附圖及具體實施例對本實用新型作進一步詳細(xì)描述。
[0015]參照圖1，本實施例包括樣品盒1，樣品盒I兩側(cè)的盒壁上均設(shè)有扣手位凹槽2，樣品盒I的盒壁內(nèi)表面設(shè)有卡扣位3，樣品盒I內(nèi)底面放置有硝酸纖維素膜，硝酸纖維素膜上放置有網(wǎng)格板5，網(wǎng)格板5內(nèi)部設(shè)有網(wǎng)格6，網(wǎng)格板5底部緊密接觸硝酸纖維素膜，；參照圖2、圖3，網(wǎng)格板5四周設(shè)有向外延伸的邊沿，網(wǎng)格板5外側(cè)設(shè)有與卡扣位3配合使用的卡扣腳7，網(wǎng)格板5與樣品盒I卡合。
[0016]樣品盒I和網(wǎng)格板5均為矩形結(jié)構(gòu)，樣品盒I和網(wǎng)格板5的邊角均為倒角。
[0017]根據(jù)網(wǎng)格板5的尺寸設(shè)計，樣品盒I的長為98臟，寬為65mm。
[0018]網(wǎng)格板5內(nèi)網(wǎng)格6的數(shù)量和尺寸根據(jù)成人手抓物品的舒適感、硝酸纖維素膜的利用率和點樣的舒適感設(shè)計，網(wǎng)格板5的網(wǎng)格6為矩形網(wǎng)格，每行網(wǎng)格6的數(shù)量為8個，每列網(wǎng)格6的數(shù)量為5個；網(wǎng)格6的長寬高均為10mm。
[0019]樣品盒I包括盒蓋4，盒蓋4與盒身鉸接。
[0020]樣品盒I和網(wǎng)格板5以聚乙烯塑料為材料，經(jīng)過吹塑加工制成。樣品盒I與硝酸纖維素膜的接觸面光滑平整，網(wǎng)格板5與硝酸纖維素膜的的接觸面光滑平整。網(wǎng)格板5四周向外延伸的邊沿能標(biāo)記字母或數(shù)字，用作網(wǎng)格6的坐標(biāo)。網(wǎng)格板5外側(cè)的扣腳7與樣品盒I的盒壁內(nèi)表面的卡扣位3卡合，使網(wǎng)格板5的底部緊壓在硝酸纖維素膜上，在硝酸纖維素膜上產(chǎn)生網(wǎng)格狀的壓痕，形成樣品分界線。樣品盒I盒壁上的扣手位凹槽2方便手指伸入，從樣品盒I內(nèi)取出網(wǎng)格板5。
[0021]在接觸硝酸纖維素膜之前，樣品盒I和網(wǎng)格板5需經(jīng)除RNase酶處理。
[0022]該采樣器在田間采樣的具體使用步驟如下:
[0023](I)用消毒的剪刀將待檢測柑橘植株的幼嫩的枝條或者葉柄剪出平滑整齊的切P ;
[0024](2)打開樣品盒I的盒蓋4，左手拿樣品盒1，右手將柑橘枝條或者葉柄在一個網(wǎng)格孔的硝酸纖維素膜上按壓，持續(xù)1-2秒，使植物汁液印跡在硝酸纖維素膜上，重復(fù)該步驟6-8次，且各個印跡不重疊；
[0025](3)待樣品印跡完后，蓋上盒蓋4 ;
[0026](4)樣品采集完畢，保存在干燥的環(huán)境中，進行后續(xù)的分子生物學(xué)檢測。
[0027]該采樣器在實驗室進行病毒檢測的具體使用步驟如下:
[0028](I)打開盒蓋4，取出網(wǎng)格板5，帶手套取出硝酸纖維膜，用消毒剪刀將每個樣品的印跡按照網(wǎng)格板5按壓的分區(qū)剪開；
[0029](2)每個樣品印跡放入一個PCR管中，加入洗脫液50微升；密封后置于PCR儀中，95°C保溫5min，立即置于冰上靜置4min ；
[0030](3)按照實時熒光PCR (PCR:聚合酶鏈反應(yīng)，體外酶促合成特異DNA片段的一種方法)的流程進行后續(xù)的實驗。
[0031]本領(lǐng)域的技術(shù)人員可以對本實用新型實施例進行各種修改和變型，倘若這些修改和變型在本實用新型權(quán)利要求及其等同技術(shù)的范圍之內(nèi)，則這些修改和變型也在本實用新型的保護范圍之內(nèi)。
[0032]說明書中未詳細(xì)描述的內(nèi)容為本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的現(xiàn)有技術(shù)。
【主權(quán)項】
1.一種柑橘病毒樣品采樣器，其特征在于:包括樣品盒(1)，所述樣品盒(I)兩側(cè)的盒壁上均設(shè)有扣手位凹槽(2)，樣品盒(I)的盒壁內(nèi)表面設(shè)有卡扣位(3)，樣品盒(I)內(nèi)底面放置有硝酸纖維素膜，硝酸纖維素膜上放置有網(wǎng)格板(5)，所述網(wǎng)格板(5)內(nèi)部設(shè)有網(wǎng)格(6)，網(wǎng)格板(5)底部緊密接觸硝酸纖維素膜，網(wǎng)格板(5)四周設(shè)有向外延伸的邊沿，網(wǎng)格板(5)外側(cè)設(shè)有與卡扣位(3)配合使用的卡扣腳(7)，網(wǎng)格板(5)與樣品盒(I)卡合。
2.如權(quán)利要求1所述的柑橘病毒樣品采樣器，其特征在于:所述樣品盒(I)包括盒蓋(4)，所述盒蓋(4)與盒身鉸接。
【專利摘要】一種柑橘病毒樣品采樣器，包括樣品盒，樣品盒兩側(cè)的盒壁上均設(shè)有扣手位凹槽，樣品盒的盒壁內(nèi)表面設(shè)有卡扣位，樣品盒內(nèi)底面放置有硝酸纖維素膜，硝酸纖維素膜上放置有網(wǎng)格板，網(wǎng)格板內(nèi)部設(shè)有網(wǎng)格，網(wǎng)格板底部緊密接觸硝酸纖維素膜，網(wǎng)格板四周設(shè)有向外延伸的邊沿，網(wǎng)格板外側(cè)設(shè)有與卡扣位配合使用的卡扣腳，網(wǎng)格板與樣品盒卡合。本實用新型的網(wǎng)格板在硝酸纖維素膜上產(chǎn)生網(wǎng)格狀的壓痕，形成樣品分界線，在網(wǎng)格下的每一塊硝酸纖維素膜上采樣即可，植物組織能夠均勻地壓印于硝酸纖維素膜上，采樣效果好；且避免手直接與硝酸纖維素膜接觸，潔凈無菌，避免樣品被污染。
【IPC分類】C12M1-26
【公開號】CN204509333
【申請?zhí)枴緾N201520161730
【發(fā)明人】戴素明, 鄧子牛, 李芳 , 李大志
【申請人】湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)
【公開日】2015年7月29日
【申請日】2015年3月23日