新型微滴式數(shù)字pcr光學檢測系統(tǒng)、裝置及方法
【專利摘要】本發(fā)明公開一種新型微滴式數(shù)字PCR光學檢測系統(tǒng)、熒光檢測裝置及方法，新型微滴式數(shù)字PCR光學檢測系統(tǒng)包括激發(fā)光光源模塊、熒光接收檢測模塊以及樣品傳送模塊。樣品傳送模塊包括傳送通道。激發(fā)光光源模塊包括至少兩個光源和第一光纖耦合器，第一光纖耦合器包括至少兩個輸入端，第一光纖耦合器的輸入端與光源連接，熒光接收檢測模塊包括至少兩個熒光探測器和第二光纖耦合器，第二光纖耦合器包括至少兩個輸出端，第二光纖耦合器的輸出端與熒光探測器連接。第一光纖耦合器的輸出端與第二光纖耦合器的輸入端相對設置。本發(fā)明技術方案使新型微滴式數(shù)字PCR光學檢測系統(tǒng)的光路結構簡單，可降低不同熒光染料之間光譜重疊所產(chǎn)生的干擾。
【專利說明】
新型微滴式數(shù)字PCR光學檢測系統(tǒng)、裝置及方法
技術領域
[0001] 本發(fā)明設及PCR檢測技術領域，特別設及一種新型微滴式數(shù)字PCR光學檢測系統(tǒng)、 巧光檢測裝置及新型微滴式數(shù)字PCR光學檢測方法。
【背景技術】
[0002] 聚合酶鏈式反應(Polymerase Chain Reaction,PCR)是一種體外擴增特定核酸的 分子生物學技術，具有特異性強、靈敏度高、高效快捷、操作簡單等突出優(yōu)點，廣泛的應用于 核酸序列分析、微生物檢測、疾病診斷等生命科學領域。傳統(tǒng)的PCR分析技術具有一定的局 限性和不精確性，而新興發(fā)展起來的數(shù)字PCR技術能夠實現(xiàn)核酸分子的絕對定量分析，具有 高精確度、無需標準曲線等優(yōu)勢。近幾年，數(shù)字PCR相關技術得到迅速發(fā)展。
[0003] 數(shù)字PCR是將包含有引物、模板、巧光探針、聚合酶等組分的PCR反應體系分成了眾 多微小的、獨立的反應單元，每個單元盡可能只包含一個或者沒有核酸模板，經(jīng)過PCR擴增 反應后，對每個反應單元的巧光信號進行檢測并統(tǒng)計分析，實現(xiàn)核酸的絕對定量分析。目 前，根據(jù)反應單元形成的不同方式，主要有微反應室/孔板、微流控忍片和微滴式等Ξ種數(shù) 字PCR系統(tǒng)。微滴式數(shù)字PCR系統(tǒng)利用微滴發(fā)生器生成上萬個納升甚至皮升級別的油包水微 反應單元，與其他兩種數(shù)字PCR系統(tǒng)相比，微滴體積更小，通量更高，系統(tǒng)簡單，成本較低，具 有非常好的市場發(fā)展前景。
[0004] 目前微滴式數(shù)字PCR的巧光檢測系統(tǒng)主要由激發(fā)光源、傳送通道、巧光探測器等幾 個模塊組成。為了滿足實際應用需求，通常會用到兩種及W上的巧光染料，運就要求系統(tǒng)包 含兩種及W上的激發(fā)光源和相應的巧光探測器。通常，巧光的光譜比較寬，不同種巧光染料 的激發(fā)光光譜和巧光光譜都會產(chǎn)生重疊，如何避免巧光探測時光譜重疊產(chǎn)生的干擾是一個 難題。
[0005] 目前大部分微滴式數(shù)字新型微滴式數(shù)字PCR光學檢測系統(tǒng)，先對多種光源進行合 束及整形，多束激發(fā)光同時照射微滴激發(fā)巧光，然后收集巧光并分束檢測。然而如此會存在 W下問題:運種光學系統(tǒng)結構復雜，抗擾動能力差，而且不同巧光染料之間光譜重疊所產(chǎn)生 的干擾問題沒得到很好的解決。

【發(fā)明內容】

[0006] 本發(fā)明的主要目的是提供一種新型微滴式數(shù)字PCR光學檢測系統(tǒng)，旨在使其結構 簡單，能夠適用不同染料，降低不同巧光染料之間光譜重疊所產(chǎn)生的干擾。
[0007] 為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提出的新型微滴式數(shù)字PCR光學檢測系統(tǒng)，用于檢測微滴 樣品，包括激發(fā)光光源模塊、巧光接收檢測模塊W及樣品傳送模塊；
[000引所述樣品傳送模塊包括傳送所述微滴樣品的傳送通道；
[0009]所述激發(fā)光光源模塊包括至少兩個光源和第一光纖禪合器，所述第一光纖禪合器 包括至少兩個輸入端，所述第一光纖禪合器的輸入端與所述光源連接，所述第一光纖禪合 器的輸出端設于所述傳送通道的一側；
[0010] 所述巧光接收檢測模塊包括至少兩個巧光探測器和第二光纖禪合器，所述第二光 纖禪合器包括至少兩個輸出端，所述第二光纖禪合器的輸出端與所述巧光探測器連接，所 述第二光纖禪合器的輸入端設于所述傳送通道的另一側.
[0011] 所述第一光纖禪合器的輸出端與所述第二光纖禪合器的輸入端相對設置，W形成 檢測空間。
[0012] 可選地，所述新型微滴式數(shù)字PCR光學檢測系統(tǒng)還包括控制模塊，所述光源為脈沖 光源，所述控制模塊與激發(fā)光光源模塊、巧光接收檢測模塊W及樣品傳送模塊連接。
[0013] 可選地，所述激發(fā)光光源模塊還包括光源檢測器，所述光源檢測器與所述第一光 纖禪合器相連接，且與所述控制模塊電性連接。
[0014] 可選地，所述第一光纖禪合器的輸出端的光纖直徑與所述傳送通道的管徑保持一 致。
[0015] 可選地，兩個所述光源為第一光源和第二光源，兩所述巧光探測器為第一巧光探 測器和第二巧光探測器；
[0016] 所述微滴樣品中包括第一巧光探針和第二巧光探針，所述第一光源激發(fā)所述第一 巧光探針，所述第一巧光探測器探測所述第一巧光探針產(chǎn)生的巧光信號；
[0017] 所述第二光源激發(fā)所述第二巧光探針，所述第二巧光探測器探測所述第二巧光探 針產(chǎn)生的巧光信號。
[0018] 可選地，所述第一巧光探測器與所述第二光纖禪合器的一個輸出端之間設有第一 濾光片，所述第二巧光探測器與所述第二光纖禪合器的另一個輸出端之間設有第二濾光 片。
[0019 ]可選地，所述光源為激光光源或單色Lm)光源，所述光源為單色Lm)光源時，所述光 源前設有窄帶濾光片。
[0020] 可選地，所述樣品傳送模塊為微流控忍片，包括傳送通道、微滴存儲池 W及流速控 制系統(tǒng)；
[0021] 所述控制模塊與所述流速控制系統(tǒng)連接，用于控制所述流速控制系統(tǒng)的流速控制 閥的開閉和所述微滴樣品的流動速度。
[0022] 本發(fā)明還提出一種巧光檢測裝置，包括新型微滴式數(shù)字PCR光學檢測系統(tǒng)，該新型 微滴式數(shù)字PCR光學檢測系統(tǒng)包括激發(fā)光光源模塊、巧光接收檢測模塊W及樣品傳送模塊；
[0023] 所述樣品傳送模塊包括傳送所述微滴樣品的傳送通道；
[0024] 所述激發(fā)光光源模塊包括至少兩個光源和第一光纖禪合器，所述第一光纖禪合器 包括至少兩個輸入端，所述第一光纖禪合器的輸入端與所述光源連接，所述第一光纖禪合 器的輸出端設于所述傳送通道的一側；
[0025] 所述巧光接收檢測模塊包括至少兩個巧光探測器和第二光纖禪合器，所述第二光 纖禪合器包括至少兩個輸出端，所述第二光纖禪合器的輸出端與所述巧光探測器連接，所 述第二光纖禪合器的輸入端設于所述傳送通道的另一側.
[0026] 所述第一光纖禪合器的輸出端與所述第二光纖禪合器的輸入端相對設置，W形成 檢測空間。
[0027] 本發(fā)明還提出一種新型微滴式數(shù)字PCR光學檢測方法，包括:激發(fā)光光源模塊的第 一光源發(fā)出激發(fā)光至第一光纖禪合器后，照射到傳送通道中的微滴樣品；
[0028] 所述微滴樣品中的第一巧光探針經(jīng)激發(fā)后產(chǎn)生的巧光信號，該巧光信號經(jīng)第二光 纖禪合器后，傳送到第一巧光探測器中；
[0029] 在脈沖時間內，所述激發(fā)光光源模塊的第二光源發(fā)出激發(fā)光至第一光纖禪合器 后，照射到傳送通道中的微滴樣品；
[0030] 所述微滴樣品的第二巧光探針經(jīng)激發(fā)后產(chǎn)生的巧光信號，該巧光信號經(jīng)第二光纖 禪合器后，傳送到第二巧光探測器中。
[0031] 本發(fā)明技術方案通過采用光纖禪合和光纖探測技術，采用了時分復用的光纖傳輸 方法，使整套光學系統(tǒng)的結構便于調整，提高了抗擾動能力，降低了生產(chǎn)成本，同時不同巧 光染料的巧光激發(fā)和檢測分時進行，避免了多種巧光染料激發(fā)光和巧光之間光譜重疊所產(chǎn) 生的干擾。
[0032] 在使用時，樣品傳送模塊傳送微滴樣品，微滴樣品在傳送通道傳送時，經(jīng)過檢測空 間。此時，激發(fā)光光源模塊的一個光源發(fā)出探測激光，經(jīng)過第一光纖禪合器后，在第一光纖 禪合器的輸出端輸出后，照射到微滴樣品上，微滴樣品中的巧光染料被激發(fā)，巧光信號經(jīng)過 第二光纖禪合器的輸入端進入，傳送到相應的巧光探測器中，該巧光探測器將收集到的巧 光信號轉化為數(shù)字信號，記錄分析微滴巧光數(shù)據(jù)。然后，激發(fā)光光源模塊的另一個光源發(fā)出 探測激光，經(jīng)過第一光纖禪合器后，在第一光纖禪合器的輸出端輸出后，照射到微滴樣品 上，微滴樣品中的巧光染料被激發(fā)，巧光信號經(jīng)過第二光纖禪合器的輸入端進入，傳送到另 一相應的巧光探測器中，該巧光探測器將收集到的巧光信號轉化為數(shù)字信號，記錄分析微 滴巧光數(shù)據(jù)。
【附圖說明】
[0033] 為了更清楚地說明本發(fā)明實施例或現(xiàn)有技術中的技術方案，下面將對實施例或現(xiàn) 有技術描述中所需要使用的附圖作簡單地介紹，顯而易見地，下面描述中的附圖僅僅是本 發(fā)明的一些實施例，對于本領域普通技術人員來講，在不付出創(chuàng)造性勞動的前提下，還可W 根據(jù)運些附圖示出的結構獲得其他的附圖。
[0034] 圖1為本發(fā)明新型微滴式數(shù)字PCR光學檢測系統(tǒng)一實施例的示意圖。
[0035] 附圖標號說明：
[0036]
[0037] 本發(fā)明目的的實現(xiàn)、功能特點及優(yōu)點將結合實施例，參照附圖做進一步說明。
【具體實施方式】
[0038] 下面將結合本發(fā)明實施例中的附圖，對本發(fā)明實施例中的技術方案進行清楚、完 整地描述，顯然，所描述的實施例僅僅是本發(fā)明的一部分實施例，而不是全部的實施例?；?于本發(fā)明中的實施例，本領域普通技術人員在沒有作出創(chuàng)造性勞動前提下所獲得的所有其 他實施例，都屬于本發(fā)明保護的范圍。
[0039] 需要說明，本發(fā)明實施例中所有方向性指示饋如上、下、左、右、前、后……）僅用 于解釋在某一特定姿態(tài)(如附圖所示）下各部件之間的相對位置關系、運動情況等，如果該 特定姿態(tài)發(fā)生改變時，則該方向性指示也相應地隨之改變。
[0040] 另外，在本發(fā)明中設及"第一"、"第二"等的描述僅用于描述目的，而不能理解為指 示或暗示其相對重要性或者隱含指明所指示的技術特征的數(shù)量。由此，限定有"第一"、"第 二"的特征可W明示或者隱含地包括至少一個該特征。另外，各個實施例之間的技術方案可 W相互結合，但是必須是W本領域普通技術人員能夠實現(xiàn)為基礎，當技術方案的結合出現(xiàn) 相互矛盾或無法實現(xiàn)時應當認為運種技術方案的結合不存在，也不在本發(fā)明要求的保護范 圍之內。
[0041] 本發(fā)明提出一種新型微滴式數(shù)字PCR光學檢測系統(tǒng)100,用于檢測微滴樣品40中目 標核酸的濃度。
[0042] 參照圖1，圖1為本發(fā)明新型微滴式數(shù)字PCR光學檢測系統(tǒng)一實施例的示意圖。
[0043] 在本發(fā)明實施例中，如圖1所示，該新型微滴式數(shù)字PCR光學檢測系統(tǒng)100包括激發(fā) 光光源模塊10、巧光接收檢測模塊20、W及樣品傳送模塊(未標示）；
[0044] 樣品傳送模塊包括傳送微滴樣品40的傳送通道31;
[0045] 激發(fā)光光源模塊10包括至少兩個光源（11，12)和第一光纖禪合器13,第一光纖禪 合器13包括至少兩個輸入端131，所述第一光纖禪合器13的輸入端131與光源連接，第一光 纖禪合器13的輸出端132設于傳送通道31的一側；
[0046]巧光接收檢測模塊20包括至少兩個巧光探測器(21，22)和第二光纖禪合器23,第 二光纖禪合器23的兩輸出端232與兩巧光探測器連接，第二光纖禪合器23的輸入端231設于 傳送通道31的另一側；
[0047]第一光纖禪合器13的輸出端132與第二光纖禪合器23的輸入端231相對設置，W形 成檢測空間。
[004引其中，光源和巧光探測器是--對應的關系(如，第一光源11對應第一巧光探測器 21，第二光源12對應第二巧光探測器22)。第一光纖禪合器13的輸入端131的數(shù)量與光源的 數(shù)量保持一致，第二光纖禪合器23的輸出端231的數(shù)量與巧光探測器的數(shù)量保持一致。
[0049] 在使用時，樣品傳送模塊傳送微滴樣品40,微滴樣品40在傳送通道31傳送時，經(jīng)過 檢測空間。此時，激發(fā)光光源模塊10的一個光源發(fā)出探測激光，經(jīng)過第一光纖禪合器13后， 在第一光纖禪合器13的輸出端132輸出后，照射到微滴樣品40上，微滴樣品40中的巧光染料 被激發(fā)后產(chǎn)生巧光信號，該巧光信號經(jīng)過第二光纖禪合器23的輸入端231進入，傳送到相應 的巧光探測器中，該巧光探測器將收集到的巧光信號轉化為數(shù)字信號。然后在預設時間內 (該預設時間滿足兩光源發(fā)出的探測激光均能照射到微滴樣品40上，也即采用時分復用的 方式進行光源的探測激光的發(fā)射），激發(fā)光光源模塊10的另一個光源發(fā)出探測激光，經(jīng)過第 一光纖禪合器13后，在第一光纖禪合器13的輸出端132輸出后，照射到微滴樣品40上，微滴 樣品40中的巧光染料被激發(fā)后產(chǎn)生巧光信號，該巧光信號經(jīng)過第二光纖禪合器23的輸入端 231進入，傳送到另一相應的巧光探測器中，該巧光探測器將收集到的巧光信號轉化為數(shù)字 信號。
[0050] 本發(fā)明技術方案通過采用光纖禪合和光纖探測技術，采用了時分復用的光纖傳輸 方法，使整套光學系統(tǒng)的結構便于調整，提高了抗擾動能力，降低了生產(chǎn)成本；同時不同巧 光染料的巧光激發(fā)和檢測分時進行，避免了多種巧光染料激發(fā)光和巧光之間光譜重疊所產(chǎn) 生的干擾。
[0051 ]可W理解的是，第一光纖禪合器13的輸入端131和第二光纖禪合器23的輸出端232 的個數(shù)可隨實際情況設定。光源的數(shù)目與第一光纖禪合器13的輸入端131數(shù)目保持一致，巧 光探測器的數(shù)目與第二光纖禪合器23的輸出端232數(shù)目保持一致。微滴樣品40可采用一種 巧光染料，也可W包含兩種巧光染料，巧光探測器的檢測巧光信號的波長與對應的巧光染 料相匹配。
[0052] 在本實施例中，所述新型微滴式數(shù)字PCR光學檢測系統(tǒng)100還包括控制模塊(未圖 示），所述控制模塊與激發(fā)光光源模塊10、巧光接收檢測模塊20W及樣品傳送模塊連接。
[0053] 控制模塊能夠根據(jù)樣品傳送模塊統(tǒng)計的微滴樣品40數(shù)量W及巧光檢測模塊檢測 到的數(shù)字信號進行運算而得到目標核酸的濃度，同時控制模塊可控制激發(fā)光光源模塊10的 光源發(fā)出的探測激光的間隔時間。
[0054] 進一步地，參照圖1，激發(fā)光光源模塊10還包括光源檢測器14,光源檢測器14與第 一光纖禪合器13連接，且與控制模塊電性連接。光源檢測器14用于監(jiān)控光源的強度變化，將 收集到的信息發(fā)送到控制模塊，由控制模塊反饋調節(jié)光源的強度，使其保持穩(wěn)定。同時，控 制模塊還將控制調節(jié)光源的脈沖頻率，微滴樣品40的流速W及巧光檢測器的電子快口，使 它們保持同步協(xié)調，實現(xiàn)時分復用的功能。
[0055] 在本實施例中，第一光纖禪合器13的輸出端132的光纖直徑與所述傳送通道31的 管徑保持一致。如此，可避免激發(fā)光同時照射兩個微滴，同時可避免探測激光直接射入到第 二光纖禪合器23的輸入端231，產(chǎn)生雜光，干擾巧光探測器的檢測。
[0056] 進一步的，第一光纖禪合器13的輸出端132的光纖的光軸與第二光纖禪合器23的 輸入端231的光纖的光軸偏離一個小角度(約為3° )，避開透過微滴樣品40的入射光。
[0057] 參照圖1，具體地，兩光源為第一光源11和第二光源12,兩巧光探測器為第一巧光 探測器21和第二巧光探測器22;
[0058] 微滴樣品40中包括第一巧光探針和第二巧光探針，第一光源11激發(fā)所述第一巧光 探針，第一巧光探測器21探測第一巧光探針產(chǎn)生的巧光信號；
[0059] 第二光源12激發(fā)第二巧光探針，第二巧光探測器22探測第二巧光探針產(chǎn)生的巧光 信號。
[0060] 巧光探測器可采用光電倍增管PMT。該第一巧光探針為FAM染料，第二巧光探針為 VIC染料。第一巧光探測器21和第二巧光探測器22分別對應第一光源11和第二光源12。第一 巧光探測器21檢測FAM染料發(fā)出的巧光信號，第二巧光探測器22檢測VIC染料發(fā)出的巧光信 號。
[0061] 可W理解的是，第一光源11、第一巧光探測器21W及第二光源12、第二巧光探測器 22可根據(jù)實際檢測的巧光染料調換，巧光染料也可根據(jù)第一光源11和第二光源12的波長范 圍進行替換。
[0062] 參照圖1，第一巧光探測器21與第二光纖禪合器23的一個輸出端232之間設有第一 濾光片211，第二巧光探測器22與所述第二光纖禪合器23的另一個輸出端232之間設有第二 濾光片221。如此，第一濾光片211和第二濾光片221的設置可W避免激發(fā)光的干擾，使得第 一巧光探測器21和第二巧光探測器22的測量更為精確。
[0063] 進一步地，所述光源為激光光源或單色L邸光源，所述光源為單色L邸光源時，所述 光源前設有窄帶濾光片。
[0064] 所述光源發(fā)出的探測光均進行準直處理，采用單色Lm)光源時，設置窄帶濾光片能 夠最大限度的接近染料最佳激發(fā)波長，同時避免光源對探測的巧光干擾。
[0065] 進一步的，樣品傳送模塊為微流控忍片，包括微滴傳送通道31、微滴存儲池32W及 流速控制系統(tǒng);控制模塊與流速控制系統(tǒng)連接，用于控制流速控制系統(tǒng)的流速控制閥33的 開閉和微滴樣品40的流動速度。
[0066] 在本發(fā)明中，每一微滴樣品40依次流經(jīng)檢測空間，微滴樣品40的流速和脈沖的頻 率一致。如此，微滴樣品40的流動速度和大小都精確可調，使得測量更加精準。
[0067] 本發(fā)明還提出一種新型微滴式數(shù)字PCR光學檢測方法，包括：
[0068] 激發(fā)光光源模塊10的第一光源11發(fā)出激發(fā)光至第一光纖禪合器13后，照射到傳送 通道31中的微滴樣品40;
[0069] 所述微滴樣品40中的第一巧光探針經(jīng)激發(fā)后產(chǎn)生的巧光信號，該巧光信號經(jīng)第二 光纖禪合器23后，傳送到第一巧光探測器21中；
[0070] 在脈沖時間內，所述激發(fā)光光源模塊10的第二光源12發(fā)出激發(fā)光至第一光纖禪合 器13后，照射到傳送通道中的微滴樣品40;
[0071] 所述微滴樣品40的第二巧光探針經(jīng)激發(fā)后產(chǎn)生的巧光信號，該巧光信號經(jīng)第二光 纖禪合器23后，傳送到第二巧光探測器22中。
[0072] 本方法通過采用光纖禪合和光纖探測技術，采用了時分復用的光纖傳輸方法，使 整套光學系統(tǒng)的結構便于調整，提高了抗擾動能力，降低了生產(chǎn)成本，同時不同巧光染料的 巧光激發(fā)和檢測分時進行，避免了多種巧光染料激發(fā)光和巧光之間光譜重疊所產(chǎn)生的干 擾。
[0073] 本發(fā)明還提出一種巧光檢測裝置(未圖示），該巧光檢測裝置包括新型微滴式數(shù)字 PCR光學檢測系統(tǒng)100,該新型微滴式數(shù)字PCR光學檢測系統(tǒng)100參照上述實施例，由于本巧 光檢測裝置采用了上述所有實施例的全部技術方案，因此至少具有上述實施例的技術方案 所帶來的所有有益效果，在此不再一一寶述。
[0074] W上所述僅為本發(fā)明的優(yōu)選實施例，并非因此限制本發(fā)明的專利范圍，凡是在本 發(fā)明的發(fā)明構思下，利用本發(fā)明說明書及附圖內容所作的等效結構變換，或直接/間接運用 在其他相關的技術領域均包括在本發(fā)明的專利保護范圍內。
【主權項】
1. 一種新型微滴式數(shù)字PCR光學檢測系統(tǒng)，用于檢測微滴樣品，其特征在于，包括激發(fā) 光光源模塊、熒光接收檢測模塊以及樣品傳送模塊； 所述樣品傳送模塊包括傳送所述微滴樣品的傳送通道； 所述激發(fā)光光源模塊包括至少兩個光源和第一光纖親合器，所述第一光纖親合器包括 至少兩個輸入端，所述第一光纖親合器的輸入端與所述光源連接，所述第一光纖親合器的 輸出端設于所述傳送通道的一側； 所述熒光接收檢測模塊包括至少兩個熒光探測器和第二光纖耦合器，所述第二光纖耦 合器包括至少兩個輸出端，所述第二光纖耦合器的輸出端與所述熒光探測器連接，所述第 二光纖耦合器的輸入端設于所述傳送通道的另一側； 所述第一光纖耦合器的輸出端與所述第二光纖耦合器的輸入端相對設置，以形成檢測 空間。2. 如權利要求1所述的新型微滴式數(shù)字PCR光學檢測系統(tǒng)，其特征在于，所述新型微滴 式數(shù)字PCR光學檢測系統(tǒng)還包括控制模塊，所述光源為脈沖光源，所述控制模塊與激發(fā)光光 源模塊、熒光接收檢測模塊以及樣品傳送模塊連接。3. 如權利要求2所述的新型微滴式數(shù)字PCR光學檢測系統(tǒng)，其特征在于，所述激發(fā)光光 源模塊還包括光源檢測器，所述光源檢測器與所述第一光纖耦合器相連接，且與所述控制 模塊電性連接。4. 如權利要求1至3中任意一項所述的新型微滴式數(shù)字PCR光學檢測系統(tǒng)，其特征在于， 所述第一光纖耦合器的輸出端的光纖直徑與所述傳送通道的管徑保持一致。5. 如權利要求4所述的新型微滴式數(shù)字PCR光學檢測系統(tǒng)，其特征在于，兩個所述光源 為第一光源和第二光源，兩所述熒光探測器為第一熒光探測器和第二熒光探測器； 所述微滴樣品中包括第一熒光探針和第二熒光探針，所述第一光源激發(fā)所述第一熒光 探針，所述第一熒光探測器探測所述第一熒光探針產(chǎn)生的熒光信號； 所述第二光源激發(fā)所述第二熒光探針，所述第二熒光探測器探測所述第二熒光探針產(chǎn) 生的焚光信號。6. 如權利要求5所述的新型微滴式數(shù)字PCR光學檢測系統(tǒng)，其特征在于，所述第一熒光 探測器與所述第二光纖耦合器的一個輸出端之間設有第一濾光片，所述第二熒光探測器與 所述第二光纖耦合器的另一個輸出端之間設有第二濾光片。7. 如權利要求5所述的新型微滴式數(shù)字PCR光學檢測系統(tǒng)，其特征在于，所述光源為激 光光源或單色LED光源，所述光源為單色LED光源時，所述光源前設有窄帶濾光片。8. 如權利要求2所述的新型微滴式數(shù)字PCR光學檢測系統(tǒng)，其特征在于，所述樣品傳送 模塊為微流控芯片，包括傳送通道、微滴存儲池以及流速控制系統(tǒng)； 所述控制模塊與所述流速控制系統(tǒng)連接，用于控制所述流速控制系統(tǒng)的流速控制閥的 開閉和所述微滴樣品的流動速度。9. 一種熒光檢測裝置，其特征在于，包括如權利要求1至8任一所述的新型微滴式數(shù)字 PCR光學檢測系統(tǒng)。10. -種新型微滴式數(shù)字PCR光學檢測方法，其特征在于，包括： 激發(fā)光光源模塊的第一光源發(fā)出激發(fā)光至第一光纖耦合器后，照射到傳送通道中的微 滴樣品； 所述微滴樣品中的第一熒光探針經(jīng)激發(fā)后產(chǎn)生的熒光信號，該熒光信號經(jīng)第二光纖耦 合器后，傳送到第一熒光探測器中； 在脈沖時間內，所述激發(fā)光光源模塊的第二光源發(fā)出激發(fā)光至第一光纖耦合器后，照 射到傳送通道中的微滴樣品； 所述微滴樣品的第二熒光探針經(jīng)激發(fā)后產(chǎn)生的熒光信號，該熒光信號經(jīng)第二光纖耦合 器后，傳送到第二熒光探測器中。
【文檔編號】C12Q1/68GK106010954SQ201610298916
【公開日】2016年10月12日
【申請日】2016年5月5日
【發(fā)明人】張道森, 關燁鋒
【申請人】廣東順德工業(yè)設計研究院(廣東順德創(chuàng)新設計研究院)