去甲斑蝥素復(fù)合鹽衍生物及其抗腫瘤應(yīng)用
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種去甲斑蝥素復(fù)合鹽衍生物，其結(jié)構(gòu)式如式11所示，其中，M及M1各自獨(dú)立的選自正一價(jià)或正二價(jià)陽離子，且M及M1不同時(shí)為正二價(jià)陽離子?；钚詼y試證明，本發(fā)明設(shè)計(jì)并合成得到的去甲斑蝥素復(fù)合鹽衍生物11對于肝癌及結(jié)腸癌兩種具有良好的抑制活性，可望應(yīng)用于制備上述兩種抗腫瘤藥物。
【專利說明】
去甲斑蝥素復(fù)合鹽衍生物及其抗腫瘤應(yīng)用
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明屬于新藥設(shè)計(jì)與合成領(lǐng)域，具體涉及一類新型去甲斑蝥素復(fù)合鹽衍生物及 其抗腫瘤應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 斑蝥，也寫作斑蟊，俗稱班苗、西班牙蒼蠅等，在我國現(xiàn)存最早的中藥學(xué)專著《本草 綱目》、《神農(nóng)本草經(jīng)》等中都曾有記載。斑蝥是芫菁科昆蟲南方大斑蟊或黃黑小斑蟊的干燥 體，屬鞘翅目芫菁科昆蟲，是我國最早發(fā)現(xiàn)的具有抗癌作用的藥材之一。斑蝥性辛，熱，具有 很強(qiáng)的腎毒性，同時(shí)具有破血逐瘀、去除淤積，消腫以及攻毒蝕瘡的功效，臨床常用于惡瘡， 頑癬，狂犬病及癌癥腫痛等的治療。
[0003] 而后的研究表明，斑蝥的體內(nèi)含有一種倍半萜類衍生物，稱之為斑蝥素 (cantharidin，Ci〇Hi2〇4)，具有較高的抗癌活性，具有非常高的藥用價(jià)值。斑蜜素為無色結(jié) 晶，不溶于冷水，微溶于熱水，溶于丙酮和氯仿。斑蝥素主要存在于多種昆蟲中，能使人體皮 膚起皰，斑蝥素及其衍生物抗腫瘤的機(jī)制主要是抑制蛋白質(zhì)與酸的合成，增強(qiáng)機(jī)體對腫瘤 細(xì)胞的殺傷力而達(dá)到治療目的。斑蝥素及其類似物對肝癌，卵巢癌，食道癌等有良好的療 效，它是通過改變蛋白質(zhì)的活性，抗腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移，引起細(xì)胞周期阻滯，抑制腫瘤生長，從而 使得其死亡。其抗腫瘤的機(jī)制為通過減少癌細(xì)胞對氨基酸的攝取，抑制蛋白質(zhì)的合成，刺激 淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、多形核細(xì)胞產(chǎn)生白細(xì)胞介素，從而提高機(jī)體免疫力，同時(shí)殺傷腫瘤細(xì) 胞而達(dá)到治療目的，與其他的抗腫瘤藥物相比，斑蝥素及其衍生物有許多優(yōu)點(diǎn):其在抑制腫 瘤的同時(shí)，不僅沒有免疫抑制的副作用，還能提升機(jī)體白細(xì)胞等。
[0004] 但斑蝥素對泌尿系統(tǒng)和腸胃系統(tǒng)有較大的毒副作用，斑蝥素既是抗腫瘤的活性成 分，同時(shí)也是毒性的主要成分。對其進(jìn)行恰當(dāng)?shù)慕Y(jié)構(gòu)修飾，會(huì)在保留其抗腫瘤活性的基礎(chǔ) 上，大大減低對機(jī)體的毒副作用，以去甲斑蝥素衍生物的合成為例。去甲斑蝥素不但保留了 其較強(qiáng)的抗腫瘤活性和升高白細(xì)胞的作用，還消除了其對泌尿系統(tǒng)的副作用，后來，以去甲 斑蝥素為先導(dǎo)化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)改造成為了研究的熱點(diǎn)。這種優(yōu)勢在抗腫瘤藥物中還是少見 的，所以引起了廣泛的關(guān)注，陸續(xù)合成了許多減少其毒副作用但同時(shí)又保留其活性的同類 藥物，開發(fā)更新高效低毒的衍生物是一個(gè)很好的研究方向。
[0005] 對斑蝥素進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾后用于治療癌癥的衍生物近年來陸續(xù)的出現(xiàn)，并開始運(yùn)用 于臨床治療。如去甲斑蝥素，它比斑蝥素少了兩個(gè)甲基，其毒性明顯減低，而治療作用卻優(yōu) 于斑蟊素。
[0006] 目前，斑蝥素和去甲斑蝥素都已經(jīng)應(yīng)用在臨床中，這兩個(gè)藥物都各具有臨床特點(diǎn)， 但不足之處是:這兩個(gè)藥物的水溶性都較差，生物利用度不高。從化學(xué)結(jié)構(gòu)中看出，斑蝥素 和去甲斑蝥素的結(jié)構(gòu)中均包含了分子內(nèi)酸酐結(jié)構(gòu)。而斑蝥酸即斑蝥素化合物的酸酐水解后 得到的二元羧酸化合物;斑蝥酸還未被開發(fā)成為藥物，僅僅是報(bào)道了其結(jié)構(gòu)式。
[0007]
[0008] 此外，臨床上還研究了斑蝥素鈉，去甲斑蝥素鈉，甲基斑蝥胺等，這些結(jié)構(gòu)改造均 將斑蝥素及去甲斑蝥素的內(nèi)酸酐環(huán)打開，以開環(huán)方式存在，從化學(xué)結(jié)構(gòu)上看;對應(yīng)的開環(huán)化 合物其相應(yīng)的溶解度較大，其體內(nèi)生物利用度也高。對斑蝥素的結(jié)構(gòu)進(jìn)行修飾，尋找高效低 毒的斑蝥素抗腫瘤藥物，具有重要的工業(yè)應(yīng)用價(jià)值和廣泛的市場前景。申請?zhí)枮?21^201410163619.4、21^201410163711.0、21^01410163705.5的中國專利公開了制備去甲基 斑蝥素酸鹽的方法，迄今，尚未有報(bào)道設(shè)計(jì)并合成開環(huán)的去甲斑蝥素復(fù)合鹽衍生物結(jié)構(gòu)及 合成方法。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0009] 為解決現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明的目的在于提供一種新型去甲斑蝥素復(fù)合鹽衍生 物、其合成方法及其抗腫瘤應(yīng)用。
[0010] 為了實(shí)現(xiàn)上述目標(biāo)，本發(fā)明采用如下的技術(shù)方案：
[0011] -方面，本發(fā)明提供了一種新型的去甲斑蝥素復(fù)合鹽衍生物，其結(jié)構(gòu)式如式11所 示，
[0012] ?
[0013] 其中，Μ及Ml各自獨(dú)立的選自正一價(jià)或正二價(jià)陽離子，且Μ及Ml不同時(shí)為正二價(jià)陽 離子。本發(fā)明的常規(guī)技術(shù)人員清楚，在羧酸與金屬氫氧化物Μ0Η(此處Μ0Η的Μ泛指金屬氫氧 化物中的金屬陽離子）的酸堿成鹽反應(yīng)，得到相應(yīng)羧酸鹽，在該羧酸鹽的結(jié)構(gòu)中，羧酸酸根 離子與金屬陽離子的正負(fù)電荷需要配平。因此，非常清楚，當(dāng)Μ為正一價(jià)陽離子及正二價(jià)陽 離子時(shí)，金屬氫氧化物的結(jié)構(gòu)分別為Μ0Η或Μ(0Η)2,而當(dāng)Μ為正一價(jià)陽離子及正二價(jià)陽離子 時(shí)，在本發(fā)明的式11所示的去甲斑蝥素復(fù)合鹽衍生物結(jié)構(gòu)中，所述去甲斑蝥素復(fù)合鹽衍生 物具有以下的相應(yīng)的結(jié)構(gòu)：
[0014]
[0015] 優(yōu)選的，結(jié)構(gòu)式如式11所示的去甲斑蝥素復(fù)合鹽衍生物，陽離子Μ及Ml各自獨(dú)立的 選自鈉 Na、鉀K、鎂Mg或鋇Ba離子，且Μ及Ml不同時(shí)為正二價(jià)陽離子。
[0016]為了使得表述簡潔，在本文中，包括結(jié)構(gòu)式、合成路線或合成方法等描述中，本發(fā) 明制備得到的復(fù)合鹽的結(jié)構(gòu)通式簡潔地表述為上述結(jié)構(gòu)式11，并不從表達(dá)形式上去考慮配 平正負(fù)離子電荷。而本領(lǐng)域的常規(guī)技術(shù)人員也能夠理解酸堿反應(yīng)得到相應(yīng)鹽，其酸根陰離 子和陽離子的正負(fù)電荷是配平的。
[0017]更優(yōu)選的，結(jié)構(gòu)式如式11所示的去甲斑蝥素復(fù)合鹽衍生物，包括但不限于，以下結(jié) 構(gòu)式：
[0018]
[0019] 另一方面，本發(fā)明提供了如上所述的去甲斑蝥素復(fù)合鹽衍生物11的合成方法，包 括以下步驟：1)、5_烯去甲斑蝥素1(化合物1)與甲醇在三乙胺存在下反應(yīng)得到5-烯去甲斑 蝥素單酸甲酯8(化合物8)，2)、化合物8與第一金屬氫氧化物Μ0Η在甲醇成鹽得到5-烯去甲 斑蝥素甲酯鹽9(化合物9)，3)、化合物9與第二金屬氫氧化物M10H水溶液反應(yīng)得到5-烯去甲 斑蝥素復(fù)合鹽1〇(化合物10)化合物10在有機(jī)溶劑中在催化劑存在下加氫還原得到去甲斑 蝥素復(fù)合鹽11;合成路線1為：
[0020]
[0021 ] 上述合成方法中，所述步驟4)的催化劑選自？(1/(：，？(1(0!〇2/(3，？1:/(：或1^1167附等 氫化催化劑;所述步驟1)的催化劑優(yōu)選Pd/c或Pd(0H)2/C。
[0022] 在上述合成方法中，各步驟采用的有機(jī)溶劑可根據(jù)化學(xué)反應(yīng)類型進(jìn)行適當(dāng)選取， 而反應(yīng)溫度可根據(jù)化學(xué)反應(yīng)類型、以及采用的有機(jī)溶劑進(jìn)行適當(dāng)選取。反應(yīng)時(shí)間可通過層 析法例如薄層色譜或高效液相色譜法監(jiān)控反應(yīng)得到。
[0023] 活性測試證明，本發(fā)明設(shè)計(jì)并合成得到的去甲斑蝥素復(fù)合鹽衍生物11對肝癌及結(jié) 腸癌兩種腫瘤細(xì)胞具有良好的抑制活性。因此，本發(fā)明的第三方面提供了去甲斑蝥素復(fù)合 鹽衍生物11用于制備抗肝癌及結(jié)腸癌兩種腫瘤的藥物中的用途。
[0024] 術(shù)語
[0025] 本文中的縮寫具有以下含義:小時(shí)縮寫為h，分鐘縮寫為min;四氫呋喃縮寫為THF， 求，N，N-二甲基甲酰胺縮寫為DMF、二甲基亞砜縮寫為DMS0。
【具體實(shí)施方式】
[0026] 以下將通過具體實(shí)施例進(jìn)一步闡述本發(fā)明，但并不用于限制本發(fā)明的保護(hù)范圍。 在不脫離本發(fā)明構(gòu)思的前提下，本領(lǐng)域技術(shù)人員可在權(quán)利要求范圍內(nèi)對制備方法和使用儀 器作出改進(jìn)，這些改進(jìn)也應(yīng)視為本發(fā)明的保護(hù)范圍。因此，本發(fā)明專利的保護(hù)范圍應(yīng)以所附 權(quán)利要求為準(zhǔn)。
[0027] 本發(fā)明中使用的呋喃，順丁烯二酸酐，呋喃，四氫呋喃，二氯甲烷等反應(yīng)試劑及有 機(jī)溶劑均來自上海國藥集團(tuán)。除特別說明外，所用試劑均為化學(xué)純。
[0028] 實(shí)施本發(fā)明上述合成路線中的各步驟反應(yīng)，可以用色譜法、液質(zhì)連用譜來監(jiān)控反 應(yīng)進(jìn)程。色譜法中，可適用薄層色譜TLC還可用氣相色譜法或液相色譜法如HPLC代替等。 [0029]實(shí)施例1.5-烯去甲斑蝥素1的制備
[0030]
[0031]從試劑瓶中取出一定量的順丁烯二酸酐，置于干燥的研體中研細(xì)，再用電子天平 稱取研細(xì)的順丁烯二酸酐12.021g，置于干燥的三口燒瓶中，塞上塞子，再加乙醚攪拌，在乙 醚量為90mL時(shí)順丁烯二酸酐完全溶解。待順丁烯二酸酐完全溶解后，用滴液漏斗緩慢加入 13mL呋喃，用時(shí)13min?？刂茰囟仍?8 °C開始反應(yīng)。反應(yīng)lh后溶液出現(xiàn)白色固體，且時(shí)間越長 白色固體越多。反應(yīng)至24h后抽濾，得白色固體的化合物1，即5-烯去甲斑蝥素。干燥稱重為 17.46g，收率85.8%。熔點(diǎn)：122~123°C，比移值Rf :0.52(展開劑為石油醚：乙酸乙酯=3:
[0032] 實(shí)施例2.5-烯去甲斑蝥素單酸甲酯的合成：
[0033]
[0034]稱取5-烯去甲斑蝥素4.15g于燒瓶中，加25ml甲醇使其溶解，形成懸浮液，向懸浮 液中逐滴加入0.73ml三乙胺，25°C下攪拌24h，反應(yīng)結(jié)束后，旋蒸除去甲醇，將得到的剩余物 質(zhì)溶解于25ml二氯甲烷中，用1當(dāng)量7ml鹽酸萃取一次，留下有機(jī)相，用10ml飽和食鹽水萃取 一次，留下有機(jī)相，加入適量無水硫酸鎂干燥15-30min，抽濾，濾餅用二氯甲烷沖洗2-3次， 留下濾液，將濾液懸蒸，干燥，即得5-烯去甲斑蝥素單酸甲酯（54.5%)，白色固體2.70g。 ^NMRCDMSO-de) ：5：6.44(q,J = 8Hz,2H) ,5.06(s,2H) ,3.67(d,J = 24Hz,2H) ,3.46(d,J = 48Hz,2H),2.71(s,2H)〇13CNMR(DMS0-d6)：5：173.03a72.48a37.10a36.98,80.39,80.06, 51.87,46.33,39.48。
[0035]實(shí)施例3.5-烯去甲斑蝥素甲酯鈉鹽的合成：
[0036]
[0037] 稱取5-烯去甲斑蝥素單酸甲酯500mg于燒瓶中，加25ml甲醇使其溶解，加入氫氧化 鈉105mg，25°C下攪拌反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后，旋蒸，以甲醇為洗脫液過硅膠柱，點(diǎn)板，收集顯色樣 品旋蒸，干燥，即得5-烯去甲斑蝥素甲酯鈉鹽(89.6 % )，白色固體512.5mg。): δ : 6.12(s，2H),5.00(s，2H),4.65(s，3H),2.65(s，2H)</3C 匪 R(D20):δ:177.84,170.95， 136·10，134·05,80·41，47·64。
[0038] 同理，合成了以下產(chǎn)物：
[0039] 5-烯去甲斑蝥素甲酯鎂鹽（94.4%)，白色固體。咕匪1?(〇)(：13)3 :6.40((1(1，了 = 5.2Hz,5.2Hz,2H) ,5.03(d,J=12Hz,2H) ,3.51(s,3H) ,2.63(d,J=13Hz,2H) ,13CNMR (ΟΧη3):δ:173·12，172·58，137·13，136·96,80·46,80·07,51·87,47·14,46·36·
[0040] 5-烯去甲斑蝥素甲酯鋇鹽(83.9%)，白色固體。1HNMR(CDCl 3)J:6.35(d，J = 48Hz， 2H)，5.29(s，2H)，3.67(s，3H)，2.65(d，J = 8Hz，2H) .13C匪R(CDC13) :δ:179，12，179·02， 177·28，177·21，137·40，134·59,82·21，81·08,52·91，49·93,46·21·
[0041 ]實(shí)施例4.5-烯去甲斑蝥素鉀鎂鹽的合成：
[0042]
[0043]取5-烯去甲斑蝥素甲酯鎂鹽500mg于燒瓶中，加 5ml水使其溶解，按比例加入氫氧 化鉀136.22mg，25°C下攪拌，反應(yīng)結(jié)束后旋蒸除去溶劑，剩余物先以甲醇為洗脫液過硅膠柱 除去原料，再用甲醇:水= 1:1洗脫產(chǎn)品，即得5-烯去甲斑蝥素鉀鎂鹽白色固體213mg，收率 38% </HNMR(D2〇): δ :6.29-6 ·35(ι?，2H)，5.01 (d，16Hz，2H)，2.66(dd，J = 12Hz，8Hz，2H) ? 13C 匪 R(D20):δ:178.26,175.66,136.84,135.98,135.57,134.48,80.75,79.77,52.26， 48.95,47.88,46.19.
[0044] 同理，合成了以下產(chǎn)物：
[0045] 以5-烯去甲斑蝥素甲酯鈉鹽為原料，合成5-烯去甲斑蝥素鈉鉀鹽（34.3%)，白色 固體。
[0046] 1HNMR(D2〇)：5：6.32(s,2H),4.97(s,2H),2.61(s,2H).
[0047] 以5-烯去甲斑蝥素甲酯鎂鹽為原料，合成5-烯去甲斑蝥素鈉鎂鹽（37.7%)，白色 固體。
[0048] 1HNMR(D2〇)：5：6.29(ddJ=12Hz,8Hz,2H),4.98(ddJ=12Hz,8Hz,2H),2.63(ddJ = 8Hz，4Hz，2H).13CNMR(D2〇)J:180.81，178.86，175.96，136.94，135.42，135.21，133.28， 81 · 43，80·86，79·72，52·21，49·42，48·41，46·10·
[0049] 以5-烯去甲斑蝥素甲酯鋇鹽為原料，合成5-烯去甲斑蝥素鉀鋇鹽（26.8%)，白色 固體。
[0050] 以5-烯去甲斑蝥素甲酯鋇鹽為原料，合成5-烯去甲斑蝥素鈉鋇鹽(47%)，白色固 體。
[0051] 實(shí)施例5.去甲斑蝥素鉀鎂鹽的合成：
[0052]
[0053]取5-烯去甲斑蝥素鉀鎂鹽213mg于施蘭克瓶中，加5ml水使其溶解，按比例加入鈀 碳21.3mg，真空除去燒瓶中空氣后通入氫氣，25°C下攪拌使其反應(yīng)，用磷鉬酸監(jiān)測，產(chǎn)物不 顯色，反應(yīng)結(jié)束后抽濾除去鈀碳，所得濾液旋蒸，干燥，即得去甲斑蝥素鉀鎂鹽(97.4%)，白 色固體210mg，R f = 0.45(甲醇：冰乙酸= 1:5)，Mp:250°C .^^^(020)3:4.75(8,2?，2· 91 (s，2H)，1.69(d，J = 8Hz，2H)，1.53(d，J = 8Hz，2H)</3C匪R(D2〇):S: 180.57,80.56,55.04， 2754<JR(KBr):v(cm-l) :3406，1596，1413，1318，1145,989,920,811，722。
[0054] 同理，合成了以下產(chǎn)物：
[0055] 以5-烯去甲斑蝥素鈉鉀鹽為原料，合成去甲斑蝥素鈉鉀鹽(98.4%)，白色固體，Rf = 0.63(甲醇：冰乙酸= 1:5) ,1^:2501^4^^(020)3:4.70(8,210,2.85(8,210,1.63(8, 2H)a.51(d,J = 4Hz,2H)〇13CNMR(D2〇)：5：180.18,79.44,55.12,8.22〇IR(KBr)：v(cm-l)： 3431，1596，1411，1315，1145，990,932,806,569。
[0056] 以5-烯去甲斑蝥素鈉鎂鹽為原料，合成去甲斑蝥素鈉鎂鹽(79.3%)，白色固體，Rf = 0.74(甲醇：冰乙酸= 1:5) ,1^:2501:.4^^(020)3:4.72(8,210,2.87(8,210,1.65(8, 2H)a.51(dJ = 8Hz,2H)〇13CNMR(D2〇)：5：180.78,79.91,55.30,27.88〇IR(KBr)：v(cm-l)： 3432，1597，1407，1334,1135，1004,927,793,571。
[0057] 以5-烯去甲斑蝥素鉀鋇鹽為原料，合成去甲斑蝥素鉀鋇鹽(99%)，白色固體，Rf = 0.65(甲醇：冰乙酸= 1:5) ,1^:2501^4^^(020):3:4.69(8,210,2.83(8,210,1.63(8,210, 1.50(8,2!1)。 13〇匪1?(〇2〇)3:180.67,79.58,55.36,28.16。11?(1(8『），（〇11-1) :3421，1591， 1410，1128，1053，991，927,808,706。
[0058] 以5-烯去甲斑蝥素鈉鋇鹽為原料，合成去甲斑蝥素鈉鋇鹽(47.2%)，白色固體，Rf =0.54(甲醇：冰乙酸=1:5)，]\^:250。(：。1!1匪1?(〇2〇)3:4.69(8,2!〇,2.84(8,2!〇，1.64((1，了 =8他，2!〇，1.49((1，了 = 8!^，2!1)。13〇匪1?(〇2〇)3:180.77,79.68,55.36,27.99。11?(1(8『）， (cm-1):3426，1603，1403，1267，1138，994，865，793，571〇
[0059] 實(shí)驗(yàn)例6.去甲斑蝥素復(fù)合鹽11的抗腫瘤活性測試
[0060] 細(xì)胞株和溶劑 [0061 ] 人肝癌細(xì)胞HEPG2，
[0062] 人胃癌細(xì)胞BGC803，
[0063] 人結(jié)腸癌細(xì)胞SW480，
[0064] 人胰腺癌細(xì)胞PANK-1，
[0065] 細(xì)胞培養(yǎng)于含10%胎牛血清的RPMI1640中培養(yǎng)基，
[0066] 溶劑:二甲亞砜(簡稱為DMS0)。
[0067] CCK-8染色法檢測細(xì)胞抗腫瘤活性實(shí)施方案
[0068] 本試驗(yàn)按照SRB方法，以斑蟊素為陽性對照，DMS0溶劑為空白對照，進(jìn)行了濃度為 50nnmol/mL的去甲斑蝥素復(fù)合鹽衍生物11對肝癌細(xì)胞HEPG2、人胃癌細(xì)胞BGC803、結(jié)腸癌細(xì) 胞SW480及人胰腺癌細(xì)胞PANK-1的兩種腫瘤細(xì)胞的抑制活性測試。
[0069] 具體測試方案為：選用待測腫瘤活細(xì)胞比例達(dá)90%以上的細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。細(xì)胞增 殖抑制試驗(yàn)采用EnoGeneCell? Counting Kit-8(簡稱為CCK-8)細(xì)胞活力檢測試劑盒。細(xì)胞 消化、計(jì)數(shù)、制成濃度為1 X 105個(gè)/mL的細(xì)胞懸液，96孔板中每孔加入1 OOyL細(xì)胞懸液(每孔1 X104個(gè)細(xì)胞）；96孔板置于37°C，5%C02培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時(shí)；每孔加入100yL相應(yīng)的含藥 物的培養(yǎng)基，作用濃度為50yMol/L(g卩：微摩爾/升），同時(shí)設(shè)立陰性對照組，溶媒對照組，陽 性對照組（陽性對照分別選用斑蝥素和喜樹堿），每組5復(fù)孔;96孔板置于37°C，5%⑶2培養(yǎng) 箱中培養(yǎng)72小時(shí)后;每孔加入10yL CCK-8溶液，將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱內(nèi)孵育4小時(shí)，用酶標(biāo)儀 測定在450nm處的吸光值(簡稱0D值），計(jì)算各個(gè)化合物對人肝癌細(xì)胞HEPG2及人結(jié)腸癌細(xì)胞 SW480的抑制率。
[0070] 腫瘤細(xì)胞生長抑制率=Π -·^21^^·]χ100% OD(C)-OD(T(.)
[0071] 實(shí)驗(yàn)結(jié)果詳見表1。
[0072] 表1、去甲斑蝥素復(fù)合鹽衍生物11對于兩種腫瘤細(xì)胞的抑制活性
[0073]
[0074] 由表1可知，在50nmol/L的相當(dāng)?shù)偷淖饔脻舛认?，本發(fā)明合成得到的去甲斑蝥素復(fù) 合鹽衍生物11對人肝癌細(xì)胞HEPG2及人結(jié)腸癌細(xì)胞SW480兩種腫瘤細(xì)胞具有一定的抑制效 果，可將其用于制備抗肝癌及結(jié)腸癌的候選藥物。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種新塑的去甲斑螯素復(fù)合鹽衍生物，其結(jié)構(gòu)式如式11所示，其中，M及Ml各自獨(dú)立的選自正一價(jià)或正二價(jià)陽離子，且M及Ml不同時(shí)為正二價(jià)陽離子。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述去甲斑蝥素復(fù)合鹽衍生物，其特征在于，為以下結(jié)構(gòu)：3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述去甲斑蝥素復(fù)合鹽衍生物，其特征在于，陽離子M及Ml各自獨(dú) 立的選自鈉 Na、鉀K、鎂Mg或鋇Ba離子，且M及Ml不同時(shí)為正二價(jià)陽離子。4. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述去甲斑蝥素復(fù)合鹽衍生物，其特征在于，包括以下結(jié)構(gòu)： 5. 根據(jù)權(quán)利要求3所述去甲斑蝥素復(fù)合鹽衍生物的合成方法，其特征在于，包括步驟： 1)、5_烯去甲斑蝥素1與甲醇在三乙胺存在下反應(yīng)得到5-烯去甲斑蝥素單酸甲酯8,2)、化合 物8與第一金屬氫氧化物MOH在甲醇成鹽得到5-烯去甲斑蝥素甲酯鹽9,3)、化合物9與第二 金屬氫氧化物MlOH水溶液反應(yīng)得到5-烯去甲斑蝥素復(fù)合鹽10,4)、化合物10在有機(jī)溶劑中 在催化劑存在下加氫還原得到去甲斑蝥素復(fù)合鹽11;合成路線為：其中，M及Ml各自獨(dú)立的選自正一價(jià)或正二價(jià)陽離子，且M及Ml不同時(shí)為正二價(jià)陽離子。6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的合成方法，其特征在于，所述步驟4)的催化劑選自Pd/C，Pd (0H)2/C，Pt/C或Raney Ni。7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的合成方法，其特征在于，所述步驟4)的催化劑選自Pd/C或Pd (OH)2/C〇8. 權(quán)利要求1-4任意一項(xiàng)所述的去甲斑蝥素復(fù)合鹽衍生物11用于制備肝癌及結(jié)腸癌兩 種抗腫瘤藥物中的用途。
【文檔編號】C07D493/08GK106008545SQ201610452205
【公開日】2016年10月12日
【申請日】2016年6月21日
【發(fā)明人】趙長闊, 王先恒, 賈佳, 羅燦敏
【申請人】遵義醫(yī)學(xué)院