一種2-丁亞砜-1,4-萘醌的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001 ]本發(fā)明涉及一種1，4_萘醌的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 隨著癌癥發(fā)病率的逐年增加，對(duì)腫瘤的發(fā)病原因和機(jī)理以及抗癌藥物的研發(fā)等方 面取得了一定進(jìn)展，但是仍然有許多問(wèn)題需要解決。尋找高效、安全的抗腫瘤新藥已成為研 究熱點(diǎn)。近年來(lái)，萘醌類化合物的抗癌、抗炎、抗菌和抗病毒等多種生理活性備受國(guó)內(nèi)外研 究者關(guān)注。
[0003] 但是天然萘醌類化合物大都存在于植物中，僅從植物中提取和分離萘醌類化合物 遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足研究和應(yīng)用需求，人工合成或仿生合成已成為重要途徑之一。另外，對(duì)萘醌類 化合物結(jié)構(gòu)上的改造會(huì)降低毒副作用的同時(shí)也大大降低了其抗癌的活性，因此尋找新的結(jié) 構(gòu)修飾點(diǎn)，在保留原結(jié)構(gòu)抗癌活性的基礎(chǔ)上最大限度的提高其抗癌效果，降低其毒副作用、 提高其對(duì)癌細(xì)胞的選擇性是合成新型萘醌類衍生物的關(guān)鍵，同時(shí)改變傳統(tǒng)合成路線過(guò)長(zhǎng)、 反應(yīng)條件苛刻、反應(yīng)產(chǎn)率低、原料不易得、試劑昂貴、試劑毒性富過(guò)強(qiáng)等諸多弊端，建立一個(gè) 適合大量合成萘醌類衍生物，且反應(yīng)路線簡(jiǎn)潔產(chǎn)率高的新的合成路線，大量生產(chǎn)高效低毒 的萘醌類衍生物具有廣闊的應(yīng)用前景和重要意義。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 為了解決【背景技術(shù)】中的問(wèn)題，本發(fā)明提供一種2-丁亞砜-1，4-萘醌的制備方法，采 用此法合成的2-丁亞砜-1,4-萘醌化合物抗癌效果好，毒副作用低，對(duì)癌細(xì)胞的選擇性高， 同時(shí)合成反應(yīng)溫度低、易于控制、操作簡(jiǎn)單、方法成熟。
[0005] 為了實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是： 一種2-丁亞砜-l，4-萘醌的制備方法，具體按照以下步驟進(jìn)行： (1) 2-丁巰基-1，4-萘醌的合成 在反應(yīng)容器中加入1，4_萘醌和甲醇，甲醇的量滿足充分溶解1，4_萘醌即可，二者混合 均勻后加入1-丁硫醇，1-丁硫醇與1，4_萘醌的摩爾比為1.5:1，室溫下反應(yīng)3-5小時(shí)后，向反 應(yīng)容器中加入重鉻酸鈉和濃硫酸，重鉻酸鈉與1，4-萘醌的摩爾比為1:5,濃硫酸與1，4-萘醌 的摩爾比為3:4，繼續(xù)反應(yīng)5-10分鐘;然后用二氯甲燒和飽和食鹽水萃取，無(wú)水硫酸鈉干燥， 過(guò)濾，濃縮至干燥，得2-丁巰基-1，4-萘醌； (2) 2-丁亞砜-1，4_萘醌的合成 在反應(yīng)瓶中，加入步驟（1)產(chǎn)物2-丁巰基-1，4-萘醌和氯仿，氯仿的量滿足充分溶解2-丁巰基-1，4-萘醌即可，繼續(xù)加入3-氯過(guò)氧苯甲酸，3-氯過(guò)氧苯甲酸與2-丁巰基-1，4-萘醌 的摩爾比為1.2:1，0°C溫度下反應(yīng)1.5-2.5小時(shí)，反應(yīng)完全后加入5% NaHCO3溶液中和反應(yīng) 中過(guò)剩的3-氯過(guò)氧苯甲酸后終止反應(yīng);反應(yīng)產(chǎn)物經(jīng)二氯甲烷和飽和食鹽水萃取，無(wú)水硫酸 鈉干燥，過(guò)濾，濃縮至干燥，得2-丁亞砜-1，4-萘醌。
[0006] 本發(fā)明的有益效果:本發(fā)明制備方法的合成路線簡(jiǎn)單，反應(yīng)溫度低，得到的2-丁亞 砜-I，4-萘醌產(chǎn)物，抗癌效果明顯，而且對(duì)癌細(xì)胞的選擇性高。
【附圖說(shuō)明】
[0007]圖1是BSNQ對(duì)人肝癌Hep3B細(xì)胞的殺傷作用。
[0008]圖2是BSNQ對(duì)人肝癌HepG2細(xì)胞的殺傷作用。
[0009]圖3是BSNQ對(duì)人肝癌Huh7細(xì)胞的殺傷作用。
[0010]圖4A是用BSNQ處理Hep3B細(xì)胞后，利用熒光顯微鏡觀察細(xì)胞凋亡情況圖。
[0011]圖4B是圖4A的定量分析圖。
[0012]圖5A是用BSNQ處理Hep3B細(xì)胞后，利用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡情況圖。
[0013]圖5B是圖5A的定量分析圖。
[0014] 圖6A是用BSNQ處理HepG2細(xì)胞后，利用熒光顯微鏡觀察細(xì)胞凋亡情況圖。
[0015] 圖6B是圖5A的定量分析圖。
[0016]圖7A是用BSNQ處理Huh7細(xì)胞后，利用熒光顯微鏡觀察細(xì)胞凋亡情況圖。
[0017] 圖7B是圖7A的定量分析圖。
【具體實(shí)施方式】
[0018] 下面結(jié)合具體的實(shí)施例、實(shí)驗(yàn)例及附圖對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的說(shuō)明： 實(shí)施例1 米用下述步驟制備2-丁亞諷-1，4_蔡醒： (1) 2-丁巰基-1，4-萘醌的合成 在100 ml反應(yīng)瓶中，加入1,4-萘醌158.15 mg (I mmol)和甲醇30 ml，混合均勾后加入 1_丁硫醇166 μL (1.5 mmol)，室溫下反應(yīng)4小時(shí)后，向混合物中加入重絡(luò)酸鈉59.6 mg (0.2 mmol)和濃硫酸40.8 μL (0.75 mmol)，反應(yīng)5-10分鐘后結(jié)束。經(jīng)二氯甲烷和飽和食鹽 水萃取，適量無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾，濃縮至干燥，得粗品，經(jīng)TLC制備，得2-丁巰基-1，4-萘 醌； (2) 2-丁亞諷-1，4_蔡醒的合成(BSNQ) 在50 ml反應(yīng)瓶中，加入上述產(chǎn)物2-丁疏基-1,4-萘醌246.32 mg (Immol)和氯仿20 ml，緩緩加入3-氯過(guò)氧苯甲酸(MCPBA)276.1 mg (1.2 mmol)，0°C溫度下反應(yīng)兩個(gè)小時(shí)，反 應(yīng)完全后加入5% NaHCO3溶液，終止反應(yīng)。經(jīng)二氯甲燒和飽和食鹽水萃取，無(wú)水硫酸鈉干燥， 過(guò)濾，濃縮至干燥，得粗品，經(jīng)TLC制備，得到2-丁亞砜-1，4-萘醌。
[0019] 實(shí)驗(yàn)例 一、BSNQ對(duì)癌細(xì)胞的殺傷作用 實(shí)驗(yàn)方法：（MTT實(shí)驗(yàn)） ① 接種細(xì)胞:用含10%胎小牛血清的培養(yǎng)液配成單個(gè)細(xì)胞懸液，以每孔10000個(gè)細(xì)胞接 種到96孔板，每孔體積為200 μL; ② 培養(yǎng)細(xì)胞:5% CO2，37°C孵育24 h，至細(xì)胞單層鋪滿孔底； ③ 血清饑餓:加藥2 h以前換培養(yǎng)液(含1% FBS的培養(yǎng)液）； ④ 藥物處理:將制備出的BSNQ分別取終濃度為0，1，3，10，30，40，50，60、70、80、100 μΜ 處理人肝癌H印3B、!fepG2和Huh7細(xì)胞24 h; ⑤ 呈色反應(yīng):每孔加 MTT溶液(5 mg/ml，用I3BS配制，pH 7.4)20 μL。繼續(xù)孵育2-4 h后， 小心吸棄孔內(nèi)培養(yǎng)上清液，小心用I3BS洗滌2次，然后每孔加100 μL二甲基亞砜(DMSO)，震 蕩1 〇分鐘，使結(jié)晶充分溶解； ⑥ 比色:選擇490 nm波長(zhǎng)，在酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀上測(cè)定各孔光吸收值，記錄結(jié)果，以時(shí)間 為橫坐標(biāo)，吸光值為縱坐標(biāo)繪制細(xì)胞生長(zhǎng)柱狀圖，結(jié)果見(jiàn)圖1 -圖3及表1。
[0020]結(jié)果分析： 在圖1 -圖3中可以看出BSNQ(IC5t): 1.40 μΜ)對(duì)人肝癌Hep3B、HepG2和Huh7都具有良 好的殺傷能力，其殺傷強(qiáng)度隨藥物濃度的增加而逐漸升高。
[0021 ] 由下表1也可以看出，BSNQ(IC5t): 1.40 μΜ)對(duì)人肝癌Hep3B、HepG2和Huh7都具有良 好的殺傷能力，其殺傷強(qiáng)度隨藥物濃度的增加而逐漸升高。
[0022]表1 BSNQ對(duì)人肝癌細(xì)胞殺傷作用的1(：50值
二、BSNQ對(duì)癌細(xì)胞的凋亡作用 實(shí)驗(yàn)方法：（體外實(shí)驗(yàn)-Annexin-V染色法） ① 接種細(xì)胞:用