本發(fā)明屬于基因工程。更具體地,涉及稻瘟菌pmk1蛋白k347位點在作為抑制稻瘟菌致病性及防控稻瘟病的靶點中的應(yīng)用。
背景技術(shù):
1、由稻瘟菌引發(fā)的稻瘟病是水稻上的第一大病害,嚴重威脅全球糧食的安全生產(chǎn),對于稻瘟病的防控刻不容緩。附著胞的形成、附著胞穿透寄主及侵染菌絲的擴展是稻瘟菌侵染寄主的重要環(huán)節(jié),解析這些過程的分子機制為研發(fā)特異高效殺菌劑提供重要的理論基礎(chǔ),同時也可為設(shè)計新型殺菌劑提供新的靶標。
2、新型核酸農(nóng)藥被稱為農(nóng)藥史上第三次革命,核酸農(nóng)藥利用rnai技術(shù)靶向有害生物的必須基因,實現(xiàn)高效的基因沉默,從而有效控制病蟲害的發(fā)生。與傳統(tǒng)化學(xué)農(nóng)藥相比,核酸農(nóng)藥具有靶向性高、易降解、靶點豐富及可靈活設(shè)計等優(yōu)勢,現(xiàn)已被報道對部分植物病原真菌具有較好的防治效果。對于此類技術(shù),靶基因的選擇至關(guān)重要,靶基因位點越精確,對非靶標生物的安全性就越高,尤其是選擇靶基因位點進行點突變的核酸農(nóng)藥,安全系數(shù)高。
3、mapk信號途徑在植物病原真菌侵染寄主以及寄主抵抗病原菌侵染過程中的作用一直是國內(nèi)外研究的熱點?,F(xiàn)有技術(shù)表明,稻瘟菌中pmk1基因(一個mapk蛋白激酶)對于附著胞形成至關(guān)重要,該基因缺失后稻瘟菌無法形成附著胞導(dǎo)致致病力完全喪失。然而,pmk1基因所在的信號通路mapk在所有的真核生物中是保守的,針對pmk1整個基因作為靶點開發(fā)稻瘟菌核酸農(nóng)藥會對哺乳動物、有益生物和植物均有效,影響作物的生長和人體的安全,因此pmk1由于其保守性并不適合作為設(shè)計藥物的靶點。
4、因此,尋找出特異性高的稻瘟菌致病性位點,對于開發(fā)生物安全性高的稻瘟病核酸農(nóng)藥具有重要意義。
技術(shù)實現(xiàn)思路
1、本發(fā)明為了解決上述現(xiàn)有問題,通過研究發(fā)現(xiàn)將稻瘟菌pmk1蛋白k347位點突變后,稻瘟菌的致病力顯著降低,并且會抑制稻瘟菌菌絲的生長與擴張,促進分生孢子萌發(fā)過程中的自噬,抑制稻瘟菌的效應(yīng)蛋白的分泌,因此本發(fā)明提供pmk1蛋白k347位點在作為植物病害防治藥物靶標中的應(yīng)用。
2、本發(fā)明的第一個目的是提供稻瘟菌pmk1蛋白k347位點的應(yīng)用。
3、本發(fā)明的第二個目的是提供突變稻瘟菌pmk1蛋白k347位點的試劑的應(yīng)用。
4、本發(fā)明的第三個目的是提供一種抑制稻瘟菌致病性或防治稻瘟菌所致植物病害的核酸農(nóng)藥。
5、本發(fā)明上述目的通過以下技術(shù)方案實現(xiàn):
6、本發(fā)明研究發(fā)現(xiàn),將稻瘟菌pmk1蛋白k347位點突變后,稻瘟菌的致病力顯著降低,并且會抑制稻瘟菌菌絲的生長與擴張,促進分生孢子萌發(fā)過程中的自噬過程,抑制稻瘟菌的效應(yīng)蛋白的分泌。
7、因此本發(fā)明提供以下應(yīng)用方案:
8、稻瘟菌pmk1蛋白k347位點在作為抑制稻瘟菌致病性的靶點中的應(yīng)用。
9、稻瘟菌pmk1蛋白k347位點在作為防治稻瘟菌所致植物病害的靶點中的應(yīng)用。
10、稻瘟菌pmk1蛋白k347位點在作為防治稻瘟病的靶點中的應(yīng)用。
11、稻瘟菌pmk1蛋白k347位點作為靶點在制備抑制稻瘟菌致病性產(chǎn)品中的應(yīng)用。
12、稻瘟菌pmk1蛋白k347位點作為靶點在制備防治稻瘟菌所致植物病害的產(chǎn)品中的應(yīng)用。
13、稻瘟菌pmk1蛋白k347位點作為靶點在制備防治稻瘟病的產(chǎn)品中的應(yīng)用。
14、稻瘟菌pmk1蛋白k347位點作為靶點在抑制稻瘟菌菌絲生長中的應(yīng)用。
15、稻瘟菌pmk1蛋白k347位點作為靶點在制備抑制稻瘟菌菌絲生長產(chǎn)品中的應(yīng)用。
16、稻瘟菌pmk1蛋白k347位點作為靶點在調(diào)控稻瘟菌分生孢子細胞自噬中的應(yīng)用。
17、稻瘟菌pmk1蛋白k347位點作為靶點在制備調(diào)控稻瘟菌分生孢子細胞自噬產(chǎn)品中的應(yīng)用。
18、稻瘟菌pmk1蛋白k347位點作為靶點在調(diào)控稻瘟菌效應(yīng)蛋白外泌的應(yīng)用。
19、稻瘟菌pmk1蛋白k347位點作為靶點在制備調(diào)控稻瘟菌效應(yīng)蛋白外泌產(chǎn)品中的應(yīng)用。
20、具體地,所述pmk1蛋白的氨基酸序列如seq?id?no.1所示,所述k347位點為pmk1蛋白氨基酸序列第347位。
21、可選地,編碼該氨基酸序列的pmk1基因核苷酸序列如seq?id?no.2所示,所述k347位點為pmk1基因核苷酸序列第1039~1041位。
22、同時,本發(fā)明還提供以下應(yīng)用方案:
23、突變稻瘟菌pmk1蛋白k347位點的試劑在制備抑制稻瘟菌致病性產(chǎn)品中的應(yīng)用。
24、突變稻瘟菌pmk1蛋白k347位點的試劑在制備防治稻瘟菌所致植物病害的產(chǎn)品中的應(yīng)用。
25、突變稻瘟菌pmk1蛋白k347位點的試劑在制備防治稻瘟病的產(chǎn)品中的應(yīng)用。
26、一種抑制稻瘟菌致病性或防治稻瘟菌所致植物病害的核酸農(nóng)藥,含有能夠突變稻瘟菌pmk1蛋白k347位點的試劑。
27、作為可選的實施方案,所述能夠突變稻瘟菌pmk1蛋白k347位點的試劑,比如本發(fā)明的pkn-pmk1k347r載體。
28、本發(fā)明具有以下有益效果:
29、本發(fā)明研究發(fā)現(xiàn),將稻瘟菌pmk1蛋白k347位點突變后,稻瘟菌的致病力顯著降低,并且會抑制稻瘟菌菌絲的生長與擴張,促進分生孢子萌發(fā)過程中的自噬過程,抑制稻瘟菌的效應(yīng)蛋白的分泌。上述實驗結(jié)果證明,稻瘟菌pmk1蛋白k347位點是稻瘟菌致病的關(guān)鍵位點。相比于針對整個pmk1基因進行藥物設(shè)計,針對本發(fā)明的k347位點來設(shè)計藥物,范圍精確,具有很高的特異性和生物安全性。
30、本發(fā)明為開發(fā)稻瘟菌的抑菌藥物提供了新的靶標位點,該位點在防控稻瘟病方面具有很好的應(yīng)用前景與價值。
1.稻瘟菌pmk1蛋白k347位點在作為抑制稻瘟菌致病性的靶點中的應(yīng)用。
2.稻瘟菌pmk1蛋白k347位點在作為防治稻瘟菌所致植物病害的靶點中的應(yīng)用。
3.稻瘟菌pmk1蛋白k347位點在作為防治稻瘟病的靶點中的應(yīng)用。
4.稻瘟菌pmk1蛋白k347位點作為靶點在制備抑制稻瘟菌致病性產(chǎn)品中的應(yīng)用。
5.稻瘟菌pmk1蛋白k347位點作為靶點在制備防治稻瘟菌所致植物病害的產(chǎn)品中的應(yīng)用。
6.稻瘟菌pmk1蛋白k347位點作為靶點在制備防治稻瘟病的產(chǎn)品中的應(yīng)用。
7.突變稻瘟菌pmk1蛋白k347位點的試劑在制備抑制稻瘟菌致病性產(chǎn)品中的應(yīng)用。
8.突變稻瘟菌pmk1蛋白k347位點的試劑在制備防治稻瘟菌所致植物病害的產(chǎn)品中的應(yīng)用。
9.突變稻瘟菌pmk1蛋白k347位點的試劑在制備防治稻瘟病的產(chǎn)品中的應(yīng)用。
10.一種抑制稻瘟菌致病性或防治稻瘟菌所致植物病害的核酸農(nóng)藥,其特征在于,含有能夠突變稻瘟菌pmk1蛋白k347位點的試劑。