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一種確定最佳SNP數(shù)量及其通過篩選標(biāo)記對(duì)大黃魚生產(chǎn)性能進(jìn)行基因組選擇育種的方法與流程

文檔序號(hào):12900752閱讀:406來源:國知局
一種確定最佳SNP數(shù)量及其通過篩選標(biāo)記對(duì)大黃魚生產(chǎn)性能進(jìn)行基因組選擇育種的方法與流程
本發(fā)明涉及基因組選擇育種領(lǐng)域,尤其涉及一種確定最佳snp數(shù)量及其通過篩選標(biāo)記對(duì)大黃魚生產(chǎn)性能進(jìn)行基因組選擇育種的方法。
背景技術(shù)
:傳統(tǒng)的育種值估計(jì)方法主要通過表型和系譜記錄來進(jìn)行,該方法叫做最佳線性無偏預(yù)測(cè)(bestlinearunbiasedprediction,blup)。盡管blup方法在動(dòng)物育種中取得巨大成功,但是該方法依然有其局限性,這是因?yàn)閭鹘y(tǒng)的方法只能將基因組的信息當(dāng)作“黑箱子”,等位基因的傳遞信息只能通過推斷而不能進(jìn)行直接觀測(cè),這就有可能導(dǎo)致育種值估計(jì)不夠準(zhǔn)確。隨著高通量測(cè)序技術(shù)的發(fā)展,目前已經(jīng)完全有可能在動(dòng)植物上獲得高密的snp標(biāo)記。meuwissen等人在2001年提出基因組選擇(genomicselection)的概念,該方法利用表型記錄和全基因組的分子標(biāo)記信息來估計(jì)個(gè)體的育種值,并根據(jù)育種值的高低進(jìn)行選種。目前,基因組選擇研究已經(jīng)在各個(gè)物種上開展,例如豬、雞、牛、羊、老鼠、大西洋鮭、果蠅、小麥、玉米和松果,等等。大黃魚是中國養(yǎng)殖量最大的海水魚,大黃魚的肉質(zhì)性狀好壞與其經(jīng)濟(jì)價(jià)值關(guān)系十分密切,品質(zhì)好與差的大黃魚市場(chǎng)價(jià)格相差數(shù)十倍,甚至相差數(shù)百倍。但目前還沒有對(duì)大黃魚的肉質(zhì)性狀開展基因組選擇育種的報(bào)道。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:本發(fā)明的目的在于建立大黃魚肉質(zhì)性狀的基因組選擇方法。本發(fā)明不需要系譜記錄,只需要個(gè)體存在性能測(cè)定記錄以及基因組的snp位點(diǎn)信息,首先尋找基因組內(nèi)對(duì)性狀顯著關(guān)聯(lián)的snp位點(diǎn),然后建立表型與篩選之后的標(biāo)記之間的數(shù)學(xué)模型來估計(jì)育種值。為實(shí)現(xiàn)上述目的,一種確定基因組選擇育種的最佳snp數(shù)量的方法,其特征在于,(1)對(duì)所有參考群個(gè)體進(jìn)行生產(chǎn)性能的表型測(cè)定和基因組測(cè)序,獲得基因組的snp位點(diǎn);(2)質(zhì)量控制:從上述所得到的基因組的snp位點(diǎn)中篩選符合下面要求的snp位點(diǎn):maf>0.05,哈代溫伯格平衡檢驗(yàn)p-value>0.001,位點(diǎn)缺失率低于20%;篩選出合格的snp位點(diǎn);通過beagle3.3.2軟件將缺失的基因型補(bǔ)齊;(3)將參考群進(jìn)行50次雜交驗(yàn)證,每次雜交驗(yàn)證都隨機(jī)將80%個(gè)體當(dāng)作訓(xùn)練集,另外20%個(gè)體當(dāng)作驗(yàn)證集;通過單標(biāo)記分析篩選與性狀最顯著關(guān)聯(lián)的snp位點(diǎn),然后只使用篩選出的snp位點(diǎn)用gblup方法計(jì)算驗(yàn)證集個(gè)體的基因組育種值gebv;計(jì)算驗(yàn)證集的基因組育種值gebv與減去固定效應(yīng)的表型值之間的相關(guān)系數(shù),該相關(guān)系數(shù)即為各個(gè)篩選snp數(shù)量下的育種值估計(jì)準(zhǔn)確度;(4)根據(jù)篩選的不同的snp數(shù)量下的育種值估計(jì)準(zhǔn)確度來確定snp篩選的最佳數(shù)量,育種值估計(jì)準(zhǔn)確度最高的情況下的snp數(shù)量即為最佳snp數(shù)量。進(jìn)一步,所述(3)步驟的單標(biāo)記分析為一元線性回歸,其數(shù)學(xué)模型為:yi=u+sexk+snpij+ei其中,yi為第i個(gè)體的表型值,u為總體平均值,sexk為第k種性別的固定效應(yīng),其中k取值為1或2,分別對(duì)應(yīng)性別雄或雌,snpij為第i個(gè)體的第j位點(diǎn)的snp基因型,ei為第i個(gè)體的隨機(jī)誤差;采用f檢驗(yàn),并獲得檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)量的相伴概率p-value作為檢驗(yàn)snp位點(diǎn)與性狀是否顯著關(guān)聯(lián)的依據(jù),其中p-value越小說明snp與性狀關(guān)聯(lián)越強(qiáng)。進(jìn)一步,所述(3)步驟的通過gblup方法計(jì)算出基因組育種值gebv,其求解方程組如下:其中,x為固定效應(yīng)關(guān)聯(lián)矩陣,b為隨機(jī)效應(yīng)-基因組育種值gebv-關(guān)聯(lián)矩陣,為固定效應(yīng)向量,為隨機(jī)效應(yīng)-基因組育種值gebv-向量,y為表型值向量,g矩陣為個(gè)體之間的加性遺傳相關(guān)矩陣,計(jì)算公式為:其中p的第j列為一向量pj為第j個(gè)snp位點(diǎn)的等位基因“a”的頻率;λ=σe2/σg2=(1-h2)/h2,h2為性狀的遺傳力,各個(gè)方差組分和基因組育種值gebv的計(jì)算使用r語言包“emmreml”,版本3.1。進(jìn)一步,所述生產(chǎn)性能是指肉質(zhì)性狀。進(jìn)一步,所述肉質(zhì)性狀是指n-3高不飽和脂肪酸含量,epa含量、dha含量、ara含量或dpa含量。本發(fā)明還提供一種通過篩選標(biāo)記對(duì)大黃魚生產(chǎn)性能進(jìn)行基因組選擇育種的方法,其特征在于,根據(jù)所述得到的最佳snp數(shù)量里的對(duì)應(yīng)的snp位點(diǎn),測(cè)定待測(cè)大黃魚的所述snp位點(diǎn),通過gblup方法計(jì)算出基因組育種值gebv,根據(jù)基因組育種值gebv計(jì)算出育種值估計(jì)準(zhǔn)確度,根據(jù)育種值估計(jì)準(zhǔn)確度的高低,來進(jìn)行基因組選擇育種。進(jìn)一步,所述育種值估計(jì)準(zhǔn)確度為驗(yàn)證集的基因組育種值gebv與減去固定效應(yīng)的表型值之間的相關(guān)系數(shù),即進(jìn)一步,所述生產(chǎn)性能是指肉質(zhì)性狀。進(jìn)一步,所述肉質(zhì)性狀是指n-3高不飽和脂肪酸含量,epa含量、dha含量、ara含量或dpa含量。本發(fā)明所述所有參考群個(gè)體的數(shù)目至少50個(gè)。所述sexk為第k種性別的固定效應(yīng),其通過表型值和每條魚的性別就可通過gblup模型算出性別的固定效應(yīng)。本發(fā)明所述的12個(gè)snp位點(diǎn)中:c/t,基因型cc純合性,c/t雜合性、tt純合性分別對(duì)應(yīng)的代碼就是0,1和2;a/g,基因型aa純合性,a/g雜合性或者gg純合性分別對(duì)應(yīng)的代碼就是0,1和2;a/t,基因型aa純合性,a/t雜合性或者tt純合性分別對(duì)應(yīng)的代碼就是0,1和2;a/at,基因型aa純合性,a/at雜合性或者atat純合性分別對(duì)應(yīng)的代碼就是0,1和2;g/t,基因型gg純合性,g/t雜合性或者tt純合性分別對(duì)應(yīng)的代碼就是0,1和2;g/gt,基因型gg純合性,g/gt雜合性,gtgt純合性分別對(duì)應(yīng)的代碼就是0,1,2。本發(fā)明的snp位點(diǎn),是通過對(duì)覆蓋全基因組的超過3萬個(gè)snp標(biāo)記與大黃魚肌肉肉質(zhì)性狀關(guān)系進(jìn)行分析后,篩選出的snp位點(diǎn)。本發(fā)明所述單標(biāo)記分析是通過f檢驗(yàn)獲得每個(gè)snp位點(diǎn)的p-value,p-value最低的snp位點(diǎn)就是與性狀最顯著的snp位點(diǎn)。所述r語言包“emmreml”,版本3.1見https://cran.r-project.org/web/packages/emmreml/。所述參考群體是采用基因組測(cè)序的,只有估計(jì)群體才可以只獲取目標(biāo)位點(diǎn)的snp基因型,因此本發(fā)明可以節(jié)省估計(jì)群體中的基因型檢測(cè)費(fèi)用。本發(fā)明是首次在大黃魚的生產(chǎn)性能(比如肉質(zhì)性狀)上開展基因組選擇育種研究。肉質(zhì)性狀是大黃魚育種中的重要的經(jīng)濟(jì)性狀,但由于該性狀不能直接對(duì)親魚進(jìn)行測(cè)定,因此通過基因組預(yù)測(cè)育種值的方法更為合理。然而,由于基因組選擇成本昂貴,直接對(duì)所有個(gè)體進(jìn)行測(cè)序不太現(xiàn)實(shí),可以尋找一些節(jié)省基因組選擇費(fèi)用的方法,比如對(duì)參考群進(jìn)行基因組測(cè)序,并篩選一些顯著的標(biāo)記,然后對(duì)估計(jì)群只獲取這些篩選的標(biāo)記的信息,這就可以大大節(jié)省基因組預(yù)測(cè)的費(fèi)用。本發(fā)明采用的就是這種方法來對(duì)大黃魚肉質(zhì)性狀進(jìn)行基因組預(yù)測(cè)。本發(fā)明的肉質(zhì)性狀測(cè)定是指n-3(也稱ω-3)高不飽和脂肪酸含量,epa、dha、ara和dpa含量等等。本發(fā)明的有益效果為:(1)首次將基因組選擇育種技術(shù)應(yīng)用到大黃魚的肉質(zhì)性狀的遺傳改良,為改良養(yǎng)殖大黃魚的品質(zhì)提供了一種有效的方法;(2)通過篩選部分標(biāo)記進(jìn)行候選親魚的基因型檢測(cè),用于基因組育種值gebv預(yù)測(cè),降低了對(duì)候選親魚分子標(biāo)記基因型檢測(cè)的成本,顯著節(jié)省基因組育種費(fèi)用。附圖說明圖1為本發(fā)明篩選最佳的snp數(shù)量的流程圖。圖2為篩選的不同標(biāo)記數(shù)量對(duì)應(yīng)的育種值估計(jì)準(zhǔn)確度的變化圖。具體實(shí)施方式下面詳細(xì)描述本發(fā)明的實(shí)施例,所述實(shí)施例的示例在附圖中示出,其中自始至終相同或類似的標(biāo)號(hào)表示相同或類似的元件或具有相同或類似功能的元件。下面通過參考附圖描述的實(shí)施例是示例性的,旨在用于解釋本發(fā)明,而不能理解為對(duì)本發(fā)明的限制。實(shí)施例中未注明具體技術(shù)或條件者,按照本領(lǐng)域內(nèi)的文獻(xiàn)所描述的技術(shù)或條件或者按照產(chǎn)品說明書進(jìn)行。所用試劑或儀器未注明生產(chǎn)廠商者,均為可以通過市購獲得的常規(guī)產(chǎn)品。實(shí)施例1snp篩選數(shù)量的確定實(shí)驗(yàn)材料:試驗(yàn)數(shù)據(jù)為大黃魚,飼養(yǎng)于福建省寧德市金鈴水產(chǎn)科技有限公司。30尾雄魚和30尾雌魚混養(yǎng)在一個(gè)水池中,通過注射促黃體素釋放素a3(lrh-a3),所有親魚幾乎同一時(shí)間排出精子或卵子,因此所有后代擁有相同的日齡。在后代長(zhǎng)至2年齡時(shí),隨機(jī)選取176個(gè)體(包括61尾雄魚與115尾雌魚)作為本研究的試驗(yàn)材料即參考群,研究性狀為n-3高不飽和脂肪酸含量(n3-hufa)。表型(n-3高不飽和脂肪酸含量)測(cè)定的方法:“總脂質(zhì)的抽出采用folch法,總脂抽出后采用50%koh和乙醇進(jìn)行皂化后再用7%bf3,甲醇(methanol)加熱甲酯化后得到的甲酯(fattyacidmethylester)用色譜純二氯甲烷沖淡,然后用agilent6890氣相色譜儀測(cè)定脂肪酸組成和含量”。步驟:流程見圖1。1.采用gbs(genotyping-by-sequencing)技術(shù)對(duì)所有要研究的個(gè)體即參考群進(jìn)行snp基因型測(cè)定和肉質(zhì)性狀測(cè)定,本實(shí)施例的肉質(zhì)性狀測(cè)定是指n-3高不飽和脂肪酸含量,通過snp基因型測(cè)定獲得基因組的snp位點(diǎn),通過n-3高不飽和脂肪酸含量獲得參考群表型數(shù)據(jù)。篩選上述合格的snp位點(diǎn),從而進(jìn)行質(zhì)量控制,篩選的標(biāo)準(zhǔn)為:maf>0.05,哈代-溫伯格平衡檢驗(yàn)p-value>0.001,位點(diǎn)缺失率低于20%的snp標(biāo)記,一共獲得基因組中32249個(gè)合格的snp位點(diǎn)。缺失基因型填充:對(duì)于缺失的位點(diǎn),使用軟件beagle3.3.2版本的imputation程序補(bǔ)齊。2.為了盡可能減小誤差,本試驗(yàn)采取雜交驗(yàn)證的方式來觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果。具體做法為:從176個(gè)體中隨機(jī)抽取140(80%)個(gè)體作為訓(xùn)練集,其余20%個(gè)體作為驗(yàn)證集。在每次雜交驗(yàn)證中,先將所有標(biāo)記(即32249個(gè)合格的snp位點(diǎn))一起加入gblup模型,通過r語言包“emmreml”,版本3.1(https://cran.r-project.org/web/packages/emmreml/)來計(jì)算驗(yàn)證集的基因組育種值gebv和固定效應(yīng)值,然后通過單標(biāo)記分析篩選與性狀最顯著關(guān)聯(lián)的snp位點(diǎn),用來計(jì)算驗(yàn)證集的基因組育種值gebv。篩選的標(biāo)記數(shù)量依次為100,50,45,40,35,30,25,20,18,16,14,12,10,8,6,4和2個(gè)。育種值估計(jì)準(zhǔn)確度評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)為驗(yàn)證集的基因組育種值(gebv)與減去固定效應(yīng)的表型值(計(jì)算方法見上述語言包“emmreml”,版本3.1)之間的相關(guān)系數(shù),即也即圖2中的相關(guān)準(zhǔn)確度。相關(guān)系數(shù)越高,說明方法的預(yù)測(cè)能力越好。上述過程重復(fù)50次,取50次結(jié)果的平均值作為最終的預(yù)測(cè)結(jié)果。結(jié)果見圖2。通過單標(biāo)記分析篩選的snp數(shù)量與育種值估計(jì)準(zhǔn)確度的關(guān)系如圖2所示??梢钥闯霎?dāng)通過單標(biāo)記分析篩選到12個(gè)左右的snp位點(diǎn)時(shí),育種值估計(jì)準(zhǔn)確度最高,因此對(duì)于估計(jì)群體,只需要獲得對(duì)性狀最顯著的12個(gè)左右的snp位點(diǎn)標(biāo)記的基因型即可,這樣就節(jié)省了在估計(jì)群中的基因組選擇的費(fèi)用。12個(gè)snp位點(diǎn)分別如下:其中括號(hào)內(nèi)即為snp位點(diǎn)。>lg21_4693033_snpaccgctgtgaccccacttacttgacattacagtgaacccaaaatttccctgtgttttgattacagtaaatagatcaaaaggatcgcaaaacaactacgtcatgacagcaatttgtagtctgaattcatattttatcaagtctggccacaa(a/g)caaacttttaaactgcttgttttctgaagagagttcatacaaggatatactaacttagttcaaaataaagtaaagctggggtcaactgacaaacatatttttaactctgttgcttactttcccctaagcagtctcaaggttctcacctatseqidno:1>lg22_11996721_snpcaaacaaacatacgttacttactggagcctcttaagtgctgtcagaaggcattcctgtgatggtgttttagggcttggtgtttcacatagcaggtatttcatcacacgtctctgatcattgcagggtttactgtattagcaactcaattt(a/t)aaaaaagctgcatgtttaatgcccagagcaagcaacaccgatgcttttcatatgtcactcttcaactaacatgtgatatattacataacattaaactactgtaaattgtactctattgctctcattttaacctttctcccaaagttttacseqidno:2>000000740_50889_snpgggccaaggacgagagacaaacagaacagggaccctcacatgtaattcatattttggcagacccccctaccagtacctctgcggaccctctaggggttgcggagcccccagttgaagacccctgcattagaggatgccacgccgggtttg(a/t)gtttctggaattttatggaccaaacaatgaatcgattaattaagaaaacgatcgacagattaatcagtgattaataactgaaaaacctcatggctaactcgtgatctgcaataaaacatcagcatcctatggacgtgagctgcagggtggseqidno:3>lg8_593637_snpggacagtgaggtcgagaggtggtggtgctctgttacaacatgacgtaatatggtaagggggggatttggtcgattctggagaattcgttcgactgtccaagaagaattttgggtattacaaaatttttacagtgtcagagttcctgctga(a/g)gcccctgtgtgcagtttttggactaaagcagagccccgtgctttcatactgtttattaaagacttgcagagtgtttatgtatcatagaaaccctcaactaacccttttaaagtactttttttggggcgtattttctgattaatgaaacgtseqidno:4>lg8_17227801_snpgtccccatctgctttcaagtctttccacatatgtcgcaggtgctgctctttcattttctgggcctccagacttccacacacaaatctcctgaggctatagcaaggactccagcgtccacactcagctggcagttgaagacgaggtatttt(a/g)agcgagacggtgaaagcgcagggagagatgagaattcattaattaattgcaaatatcttttaaaccataaagaccacacacagctgatgtgtatgtactgactggtgactcgggtttacttttttgatttttcggaaagtttctctttagseqidno:5>lg8_26071645_snpactaaattaatcacacgcattttgaattcattaattaatccagttgtttaatttttgtagcttgaattcaatcatctctgcctgtttaaagaaactttcatttttatgtttaacttcacgtgtgccaggattaaatccgataactgaaaa(c/t)gttgtttcatgtttcagaagcttcatatttctgattttttttattgatcaacattcagggagaaaataaaaggcaggaagtcatttcaactcaaaacaaagtgcgcctgtccgaatgcgtaattgcgcagtgacccgtgtttccgactgtseqidno:6>lg9_29137219_snptaaaaaatggtcgaccacattgttttatgaaaaagtggattttttttatttcaggtttccgtgtcgagagaatacagatgagcttcttttagcaagaagaagctaaccgatgagactatagtgaacagttaggatccaacctgcaagagt(a/t)taaacatcgtgattgttttattaagatttgtgaattaaagcacaaagtgtaactcagtaagaactgaagacaagacaacatgtgttatgagtgttggctggattataacgagaatgttttaatgttttaatagcaaactgagaataaataseqidno:7>000000271_220169_indelcctgtttaaagaaaacatttgtcatttacctctcttatatgcacagtgttgtttgcgtcctgcgttatcaggctgtccgcgacaccagttatgatagttgtaacgtgtaccatcactccagaaccagtaacgttcctggaagacagaaca(g/gt)taaggacattgaatatgagaaatccaaaacacattgaattaaatacccatcagactttgtctaatgtacctgctgtgcatcagagaatccgatccatactgctctgttgcgtgccacagcacggtcacattattttcatacgtgctgtgcseqidno:8>000000271_220171_snptgtttaaagaaaacatttgtcatttacctctcttatatgcacagtgttgtttgcgtcctgcgttatcaggctgtccgcgacaccagttatgatagttgtaacgtgtaccatcactccagaaccagtaacgttcctggaagacagaacagt(a/at)aggacattgaatatgagaaatccaaaacacattgaattaaatacccatcagactttgtctaatgtacctgctgtgcatcagagaatccgatccatactgctctgttgcgtgccacagcacggtcacattattttcatacgtgctgtgcacseqidno:9>lg11_15004652_indelagggaaacaatcatggtacagcgcaactaggacatgagatttaactagggctgccacgttagtcacgattatgtcgacaaacaaacaactaatttagtagtcgacgcattgtttccgcgtgaattcagggcggtgttgtaattttaacca(a/at)tcctgcaatttttccgcaacttccgcgaagtctgcccgggggattcaactcggcaggtcagggacggccggacggtgtgggaggatcccctcttgggacctctccccggcgctggctggcccccgccaggcgcatttcctcggtggcggcseqidno:10>lg4_5626625_snpgatgggtttatgttctgactttgggggtgattaacaggacactaccttagggttcataggttaaaacccaattcgataaataggtgagactaagatcattaagagcttaaaagaattcagaaaaagaattgattctgaagcagacaaata(g/t)ccagagaaaaggttgcactctggtaatgttcttaagatgataaaagttatatttgtaatatgaggttcatcaaagataatcaggtttttttatttgttaacagggttttaatatcagtgcttgtagtttcatgtttagtttctctctgagseqidno:11>lg13_4408368_snptttctcaagaagtgccgcctttttgaagctccattgtaaacgaaagaaaatatcaagttttatcaaactgttatatgttatcttggattttctgtggaatcgaattctctcggggaaaacattcactccttcactcctcaagcttattct(c/t)tttacaaatagaagtgtcagctgagctcttcttcaaagacatctccactcttatcatttctttgacgccatctgctggatcctcattaccttcatttcactgaaagttcaaagcagagctgcacacatcagcacaacgcacatccttctgseqidno:12實(shí)施例2:197尾魚的肉質(zhì)性狀篩選實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)材料:試驗(yàn)數(shù)據(jù)為大黃魚,飼養(yǎng)于福建省寧德市金鈴水產(chǎn)科技有限公司。30尾雄魚和30尾雌魚混養(yǎng)在一個(gè)水池中,通過注射促黃體素釋放素a3(lrh-a3),所有親魚幾乎同一時(shí)間排出精子或卵子,因此所有后代擁有相同的日齡。在后代長(zhǎng)至2年齡時(shí),隨機(jī)選取197個(gè)體(包括89尾雄魚與108尾雌魚)。測(cè)定這197尾魚的12個(gè)snp位點(diǎn),通過gblup方法(其求解方程組如r語言包“emmreml”,版本3.1所示。)計(jì)算出基因組育種值gebv。將基因組育種值gebv最高的4尾雄魚和5尾雌魚篩選出來作為選育組,并從群體內(nèi)隨機(jī)抽取181尾個(gè)體(84雄97雌)作為對(duì)照組。對(duì)不同組后代個(gè)體的n3-hufa、epa和dha含量進(jìn)行表型測(cè)定,結(jié)果如表1所示。表1利用篩選的12個(gè)標(biāo)記進(jìn)行選育后,選育組與對(duì)照組n3-hufa、epa和dha含量測(cè)定結(jié)果表組別epadhaepa+dhan3-hufa選育組4.460±0.328511.692±0.333716.152±0.005219.269±0.3487對(duì)照組3.920±0.021611.115±0.498815.035±0.478517.316±0.4325選育組/對(duì)照組113.78%105.19%107.43%111.28%從表1可以看出,采用本發(fā)明的方法選育出的大黃魚肌肉中n3-hufa、epa和dha的含量明顯高于對(duì)照組。盡管上面已經(jīng)示出和描述了本發(fā)明的實(shí)施例,可以理解的是,上述實(shí)施例是示例性的,不能理解為對(duì)本發(fā)明的限制,本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員在不脫離本發(fā)明的原理和宗旨的情況下在本發(fā)明的范圍內(nèi)可以對(duì)上述實(shí)施例進(jìn)行變化、修改、替換和變型。sequencelisting<110>集美大學(xué)<120>一種確定最佳snp數(shù)量及其通過篩選標(biāo)記對(duì)大黃魚生產(chǎn)性能進(jìn)行基因組選擇育種的方法<130>jmdx-17008-cni<160>12<170>patentinversion3.5<210>1<211>302<212>dna<213>大黃魚(larimichthyscrocea)<220><221>snp位點(diǎn)<222>(151)..(152)<223>wy代表aa,ag或gg<400>1accgctgtgaccccacttacttgacattacagtgaacccaaaatttccctgtgttttgat60tacagtaaatagatcaaaaggatcgcaaaacaactacgtcatgacagcaatttgtagtct120gaattcatattttatcaagtctggccacaawycaaacttttaaactgcttgttttctgaa180gagagttcatacaaggatatactaacttagttcaaaataaagtaaagctggggtcaactg240acaaacatatttttaactctgttgcttactttcccctaagcagtctcaaggttctcacct300at302<210>2<211>302<212>dna<213>大黃魚(larimichthyscrocea)<220><221>snp位點(diǎn)<222>(151)..(152)<223>wx代表aa,at或tt<400>2caaacaaacatacgttacttactggagcctcttaagtgctgtcagaaggcattcctgtga60tggtgttttagggcttggtgtttcacatagcaggtatttcatcacacgtctctgatcatt120gcagggtttactgtattagcaactcaatttwnaaaaaagctgcatgtttaatgcccagag180caagcaacaccgatgcttttcatatgtcactcttcaactaacatgtgatatattacataa240cattaaactactgtaaattgtactctattgctctcattttaacctttctcccaaagtttt300ac302<210>3<211>302<212>dna<213>大黃魚(larimichthyscrocea)<220><221>snp位點(diǎn)<222>(151)..(152)<223>wx代表aa,at或tt<400>3gggccaaggacgagagacaaacagaacagggaccctcacatgtaattcatattttggcag60acccccctaccagtacctctgcggaccctctaggggttgcggagcccccagttgaagacc120cctgcattagaggatgccacgccgggtttgwngtttctggaattttatggaccaaacaat180gaatcgattaattaagaaaacgatcgacagattaatcagtgattaataactgaaaaacct240catggctaactcgtgatctgcaataaaacatcagcatcctatggacgtgagctgcagggt300gg302<210>4<211>302<212>dna<213>大黃魚(larimichthyscrocea)<220><221>snp位點(diǎn)<222>(151)..(152)<223>wy代表aa,ag或gg<400>4ggacagtgaggtcgagaggtggtggtgctctgttacaacatgacgtaatatggtaagggg60gggatttggtcgattctggagaattcgttcgactgtccaagaagaattttgggtattaca120aaatttttacagtgtcagagttcctgctgawygcccctgtgtgcagtttttggactaaag180cagagccccgtgctttcatactgtttattaaagacttgcagagtgtttatgtatcataga240aaccctcaactaacccttttaaagtactttttttggggcgtattttctgattaatgaaac300gt302<210>5<211>302<212>dna<213>大黃魚(larimichthyscrocea)<220><221>snp位點(diǎn)<222>(151)..(152)<223>wy代表aa,ag或gg<400>5gtccccatctgctttcaagtctttccacatatgtcgcaggtgctgctctttcattttctg60ggcctccagacttccacacacaaatctcctgaggctatagcaaggactccagcgtccaca120ctcagctggcagttgaagacgaggtattttwyagcgagacggtgaaagcgcagggagaga180tgagaattcattaattaattgcaaatatcttttaaaccataaagaccacacacagctgat240gtgtatgtactgactggtgactcgggtttacttttttgatttttcggaaagtttctcttt300ag302<210>6<211>302<212>dna<213>大黃魚(larimichthyscrocea)<220><221>snp位點(diǎn)<222>(151)..(152)<223>mx代表cc,ct或tt<400>6actaaattaatcacacgcattttgaattcattaattaatccagttgtttaatttttgtag60cttgaattcaatcatctctgcctgtttaaagaaactttcatttttatgtttaacttcacg120tgtgccaggattaaatccgataactgaaaamngttgtttcatgtttcagaagcttcatat180ttctgattttttttattgatcaacattcagggagaaaataaaaggcaggaagtcatttca240actcaaaacaaagtgcgcctgtccgaatgcgtaattgcgcagtgacccgtgtttccgact300gt302<210>7<211>302<212>dna<213>大黃魚(larimichthyscrocea)<220><221>snp位點(diǎn)<222>(151)..(152)<223>wx代表aa,at或tt<400>7taaaaaatggtcgaccacattgttttatgaaaaagtggattttttttatttcaggtttcc60gtgtcgagagaatacagatgagcttcttttagcaagaagaagctaaccgatgagactata120gtgaacagttaggatccaacctgcaagagtwntaaacatcgtgattgttttattaagatt180tgtgaattaaagcacaaagtgtaactcagtaagaactgaagacaagacaacatgtgttat240gagtgttggctggattataacgagaatgttttaatgttttaatagcaaactgagaataaa300ta302<210>8<211>302<212>dna<213>大黃魚(larimichthyscrocea)<220><221>snp位點(diǎn)<222>(151)..(152)<223>yh代表gg,ggt或gtgt<400>8cctgtttaaagaaaacatttgtcatttacctctcttatatgcacagtgttgtttgcgtcc60tgcgttatcaggctgtccgcgacaccagttatgatagttgtaacgtgtaccatcactcc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