本發(fā)明涉及綠原酸制備
技術領域：
，具體涉及一種從植物中制備高純度綠原酸的方法。
背景技術：
：綠原酸是由咖啡酸與奎尼酸組成的縮酚酸，異名咖啡鞣酸，化學名3-o-咖啡?？崴?，是植物體在有氧呼吸過程中經莽草酸途徑產生的一種苯丙素類化合物。具有很強的藥理作用，如抗菌解毒、消炎利膽等功效。目前，提取純化綠原酸的傳統(tǒng)方法主要有水石灰乳法、水提醇沉法、乙酸乙酯提取法、稀酸提取、單相水提取法等。這些方法單一使用，綠原酸總收率為2.5%左右，純度在40%以下，很難達到95%以上的純度。目前，綠原酸的生產主要存在以下問題：能夠提取高純度綠原酸的方法不適用于工業(yè)化大規(guī)模生產，適于工業(yè)化大規(guī)模生產的方法得到的綠原酸的純度又較低，不能滿足高純度綠原酸的市場需求。近年來，采用大孔樹脂法提取綠原酸的報道較多。申請?zhí)枮?2133448.x的發(fā)明專利公開的是一種大孔樹脂吸附提取高含量綠原酸的工藝方法，該發(fā)明通過綠原酸提液加入大孔樹脂柱中進行飽和吸附，低濃度乙醇洗滌溶解樹脂柱中的綠原酸，使其與柱分離成為綠原酸洗脫液，再回收其中乙醇，將余下的無乙醇綠原酸洗脫液濃縮，然后噴霧干燥可得高于40％綠原酸含量的成品干粉，但是其純度依然不是特別高，很難滿足高純度綠原酸的市場需求。因此，如何在保證生產得到的綠原酸具有較高的純度的前提下實現(xiàn)綠原酸的工業(yè)化大規(guī)模生產，是目前市場亟需解決的問題。技術實現(xiàn)要素：為了克服現(xiàn)有技術中存在的缺點和不足，本發(fā)明的目的在于提供一種從植物中制備高純度綠原酸的方法，本發(fā)明將大孔樹脂富集、萃取和分相法結合，分步梯度純化綠原酸，可以從新鮮植物中制備得到純度在98.0%以上的綠原酸產品，且工藝簡單、易操作，適于大規(guī)模工業(yè)化生產。本發(fā)明的目的通過下述技術方案實現(xiàn)：一種從植物中制備高純度綠原酸的方法，由以下步驟組成：a、預料預處理：取新鮮植物，對其進行干燥處理后再進行粉碎處理，并過網篩得到干燥粉料；b、醇提：取步驟a中制得的干燥粉料加入醇溶液中，一次加熱回流過濾得一次濾液和濾渣，再將濾渣再次加入醇溶液中，二次加熱回流過濾得二次濾液，混合一次濾液和二次濾液得提取液；c、過柱：調步驟b中得到的提取液ph至酸性，再對提取液進行上大孔樹脂柱吸附、醇溶液洗脫濃縮處理，得富集液；d、萃取：調富集液ph至酸性后加入助劑進行萃取得萃取液；e、分相：向萃取液中加入分相劑，混合并靜置后收集下層水相；f、重結晶：對步驟e中得到的下層水相在低溫下進行結晶、抽濾處理得濾餅，再對濾餅真空干燥處理得高純度綠原酸產品。所述步驟a中的干燥處理方式為：分段式熱泵-熱風聯(lián)合干燥，具體干燥方法為：先在35-40℃的干燥溫度下干燥1.5-2h，然后在70-75℃下干燥1.5-2h。本發(fā)明采用先低溫干燥后高溫干燥的分段式熱泵-熱風聯(lián)合干燥方式，干燥速度快，耗時短，能夠有效減少原料中的有效成分綠原酸的流失，原料的有效成分保留率高，有效地保證了最終產品的綠原酸純度。所述步驟a中所采用的網篩的目數(shù)為20目，所述步驟b中采用的醇溶液為乙醇。本發(fā)明采用乙醇作為醇提溶液，環(huán)保安全。所述步驟b中一次加熱回流過濾時加入的醇溶液與干燥粉料的重量比為6-8:1，醇溶液的質量濃度為70-80%，回流溫度為60-75℃，回流時間為1.5-2.5h；步驟b中二次加熱回流過濾時加入的醇溶液與濾渣的重量比為4-6:1，醇溶液的質量濃度為70-80%，回流溫度為60-75℃，回流時間為1.0-1.5h。本發(fā)明采用這樣的二次回流醇提的提取方式，綠原酸的醇提率高，殘渣的綠原酸殘留量少，有效地避免了原料的浪費，減低了生產成本。所述步驟c中用于提取液ph調節(jié)的溶液為鹽酸，所采用的大孔樹脂柱為hpd600大孔樹脂柱，用于洗脫的醇溶液為質量濃度為65-75%的乙醇溶液。本發(fā)明采用hpd600大孔樹脂柱進行吸附，吸附容量大，平均吸附容量達到35.2mg/g，吸附率高，平均吸附率達到89.6%，吸附效果佳，有效地解決了現(xiàn)有技術中吸附容量小，所得綠原酸產品純度不高的問題。優(yōu)選的，所述步驟c中用于洗脫的醇溶液為質量濃度為70%的乙醇溶液。所述步驟d中用于富集液ph調節(jié)的溶液為鹽酸，所述助劑為質量濃度為35-45%的乙酸乙酯,加入的乙酸乙酯與富集液的體積比為1:1。優(yōu)選的，所述步驟d中所述助劑為質量濃度為40%的乙酸乙酯。所述步驟c中提取液的ph調節(jié)和步驟d中富集液的ph調節(jié)均為將ph調節(jié)為2-3。所述步驟e中所述分相劑為乙酸，加入的乙酸與萃取液的體積比為2-3:20，靜置時間為1-2h。本發(fā)明在獲得萃取液后，萃取液為溶解綠原酸的乙酸乙酯相和極少量與乙酸乙酯互溶的水形成的均相，加入乙酸時，整個溶劑系統(tǒng)由加入分相劑（乙酸）前的偏極性逐漸向加入分相劑后的非極性過渡，此時，綠原酸分子不溶于非極性的分相劑，分相劑與乙酸乙酯兩溶劑的互溶效應遠大于乙酸乙酯和少量水的互溶效應，因此，充分靜置后，乙酸乙酯和分相劑兩溶劑形成均相，而乙酸乙酯相中的綠原酸則隨少量的水重新析出，從而達到綠原酸與溶劑分離的目的。因此，本發(fā)明采用乙酸作為分相劑的目的是使溶于乙酸乙酯中的水和綠原酸全部被“擠”出來，“擠”出來的水和綠原酸會出現(xiàn)沉降到溶液的下層，此時下層的水中出現(xiàn)的大量白色絮狀物便是綠原酸，收集下層白色絮狀物，再進行重結晶處理，從而得到高純度的綠原酸產品。本發(fā)明采用這樣的萃取方式，萃取率極高，且能夠有效地將綠原酸和雜質分離，獲得的白色絮狀物中綠原酸的純度高。本發(fā)明采用乙酸和乙酸乙酯相配合，乙酸作為分相劑，其沸點為117.9℃，高于乙酸乙酯的沸點77℃，有效地解決了現(xiàn)有技術中分相劑和萃取助劑分離難，回收得到的分相劑和萃取助劑的純度不高，原料浪費嚴重，生產成本增加的難題，有效地提高了分相劑和萃取助劑的回收率，降低了生產成本。優(yōu)選的，所述步驟e中的靜置時間為1.5h。所述步驟f中結晶處理的溫度為0-4℃，結晶時間為5-8h。所述新鮮植物為平臥菊三七、杜仲葉或金銀花。本發(fā)明的有益效果在于：本發(fā)明本發(fā)明將大孔樹脂富集、萃取和分相法結合，分步梯度純化綠原酸，可以從新鮮植物中制備得到純度在98.0%以上的綠原酸產品，且工藝簡單、易操作，適于大規(guī)模工業(yè)化生產。具體實施方式為了便于本領域技術人員的理解，下面結合實施例對本發(fā)明作進一步的說明，實施方式提及的內容并非對本發(fā)明的限定。實施例1一種從植物中制備高純度綠原酸的方法，由以下步驟組成：a、預料預處理：取新鮮植物，對其進行干燥處理后再進行粉碎處理，并過網篩得到干燥粉料；b、醇提：取步驟a中制得的干燥粉料加入醇溶液中，一次加熱回流過濾得一次濾液和濾渣，再將濾渣再次加入醇溶液中，二次加熱回流過濾得二次濾液，混合一次濾液和二次濾液得提取液；c、過柱：調步驟b中得到的提取液ph至酸性，再對提取液進行上大孔樹脂柱吸附、醇溶液洗脫濃縮處理，得富集液；d、萃?。赫{富集液ph至酸性后加入助劑進行萃取得萃取液；e、分相：向萃取液中加入分相劑，混合并靜置后收集下層水相；f、重結晶：對步驟e中得到的下層水相在低溫下進行結晶、抽濾處理得濾餅，再對濾餅真空干燥處理得高純度綠原酸產品。所述步驟a中的干燥處理方式為：分段式熱泵-熱風聯(lián)合干燥，具體干燥方法為：先在35℃的干燥溫度下干燥1.5h，然后在70℃下干燥1.5h。所述步驟a中所采用的網篩的目數(shù)為20目，所述步驟b中采用的醇溶液為乙醇。所述步驟b中一次加熱回流過濾時加入的醇溶液與干燥粉料的重量比為6:1，醇溶液的質量濃度為70%，回流溫度為60℃，回流時間為1.5h；步驟b中二次加熱回流過濾時加入的醇溶液與濾渣的重量比為4:1，醇溶液的質量濃度為70%，回流溫度為60℃，回流時間為1.0h。所述步驟c中用于提取液ph調節(jié)的溶液為鹽酸，所采用的大孔樹脂柱為hpd600大孔樹脂柱，用于洗脫的醇溶液為質量濃度為65%的乙醇溶液。所述步驟d中用于富集液ph調節(jié)的溶液為鹽酸，所述助劑為質量濃度為35%的乙酸乙酯,加入的乙酸乙酯與富集液的體積比為1:1。所述步驟c中提取液的ph調節(jié)和步驟d中富集液的ph調節(jié)均為將ph調節(jié)為2。所述步驟e中所述分相劑為乙酸，加入的乙酸與萃取液的體積比為2-3:20，靜置時間為1h。所述步驟f中結晶處理的溫度為0℃，結晶時間為5h。所述新鮮植物為平臥菊三七。實施例2一種從植物中制備高純度綠原酸的方法，由以下步驟組成：a、預料預處理：取新鮮植物，對其進行干燥處理后再進行粉碎處理，并過網篩得到干燥粉料；b、醇提：取步驟a中制得的干燥粉料加入醇溶液中，一次加熱回流過濾得一次濾液和濾渣，再將濾渣再次加入醇溶液中，二次加熱回流過濾得二次濾液，混合一次濾液和二次濾液得提取液；c、過柱：調步驟b中得到的提取液ph至酸性，再對提取液進行上大孔樹脂柱吸附、醇溶液洗脫濃縮處理，得富集液；d、萃?。赫{富集液ph至酸性后加入助劑進行萃取得萃取液；e、分相：向萃取液中加入分相劑，混合并靜置后收集下層水相；f、重結晶：對步驟e中得到的下層水相在低溫下進行結晶、抽濾處理得濾餅，再對濾餅真空干燥處理得高純度綠原酸產品。所述步驟a中的干燥處理方式為：分段式熱泵-熱風聯(lián)合干燥，具體干燥方法為：先在36℃的干燥溫度下干燥1.6h，然后在71℃下干燥1.6h。所述步驟a中所采用的網篩的目數(shù)為20目，所述步驟b中采用的醇溶液為乙醇。所述步驟b中一次加熱回流過濾時加入的醇溶液與干燥粉料的重量比為6.5:1，醇溶液的質量濃度為75%，回流溫度為62℃，回流時間為1.7h；步驟b中二次加熱回流過濾時加入的醇溶液與濾渣的重量比為4.5:1，醇溶液的質量濃度為72%，回流溫度為65℃，回流時間為1.1h。所述步驟c中用于提取液ph調節(jié)的溶液為鹽酸，所采用的大孔樹脂柱為hpd600大孔樹脂柱，用于洗脫的醇溶液為質量濃度為67%的乙醇溶液。所述步驟d中用于富集液ph調節(jié)的溶液為鹽酸，所述助劑為質量濃度為37%的乙酸乙酯,加入的乙酸乙酯與富集液的體積比為1:1。所述步驟c中提取液的ph調節(jié)和步驟d中富集液的ph調節(jié)均為將ph調節(jié)為2.5。所述步驟e中所述分相劑為乙酸，加入的乙酸與萃取液的體積比為2.2:20，靜置時間為1.2h。所述步驟f中結晶處理的溫度為1℃，結晶時間為6h。所述新鮮植物為平臥菊三七。實施例3一種從植物中制備高純度綠原酸的方法，由以下步驟組成：a、預料預處理：取新鮮植物，對其進行干燥處理后再進行粉碎處理，并過網篩得到干燥粉料；b、醇提：取步驟a中制得的干燥粉料加入醇溶液中，一次加熱回流過濾得一次濾液和濾渣，再將濾渣再次加入醇溶液中，二次加熱回流過濾得二次濾液，混合一次濾液和二次濾液得提取液；c、過柱：調步驟b中得到的提取液ph至酸性，再對提取液進行上大孔樹脂柱吸附、醇溶液洗脫濃縮處理，得富集液；d、萃?。赫{富集液ph至酸性后加入助劑進行萃取得萃取液；e、分相：向萃取液中加入分相劑，混合并靜置后收集下層水相；f、重結晶：對步驟e中得到的下層水相在低溫下進行結晶、抽濾處理得濾餅，再對濾餅真空干燥處理得高純度綠原酸產品。所述步驟a中的干燥處理方式為：分段式熱泵-熱風聯(lián)合干燥，具體干燥方法為：先在37℃的干燥溫度下干燥1.8h，然后在73℃下干燥1.8h。所述步驟a中所采用的網篩的目數(shù)為20目，所述步驟b中采用的醇溶液為乙醇。所述步驟b中一次加熱回流過濾時加入的醇溶液與干燥粉料的重量比為7:1，醇溶液的質量濃度為75%，回流溫度為66℃，回流時間為2h；步驟b中二次加熱回流過濾時加入的醇溶液與濾渣的重量比為5:1，醇溶液的質量濃度為75%，回流溫度為68℃，回流時間為1.3h。所述步驟c中用于提取液ph調節(jié)的溶液為鹽酸，所采用的大孔樹脂柱為hpd600大孔樹脂柱，用于洗脫的醇溶液為質量濃度為70%的乙醇溶液。所述步驟d中用于富集液ph調節(jié)的溶液為鹽酸，所述助劑為質量濃度為40%的乙酸乙酯,加入的乙酸乙酯與富集液的體積比為1:1。所述步驟c中提取液的ph調節(jié)和步驟d中富集液的ph調節(jié)均為將ph調節(jié)為2.5。所述步驟e中所述分相劑為乙酸，加入的乙酸與萃取液的體積比為2.5:20，靜置時間為1.5h。所述步驟f中結晶處理的溫度為2℃，結晶時間為7h。所述新鮮植物為平臥菊三七。實施例4一種從植物中制備高純度綠原酸的方法，由以下步驟組成：a、預料預處理：取新鮮植物，對其進行干燥處理后再進行粉碎處理，并過網篩得到干燥粉料；b、醇提：取步驟a中制得的干燥粉料加入醇溶液中，一次加熱回流過濾得一次濾液和濾渣，再將濾渣再次加入醇溶液中，二次加熱回流過濾得二次濾液，混合一次濾液和二次濾液得提取液；c、過柱：調步驟b中得到的提取液ph至酸性，再對提取液進行上大孔樹脂柱吸附、醇溶液洗脫濃縮處理，得富集液；d、萃取：調富集液ph至酸性后加入助劑進行萃取得萃取液；e、分相：向萃取液中加入分相劑，混合并靜置后收集下層水相；f、重結晶：對步驟e中得到的下層水相在低溫下進行結晶、抽濾處理得濾餅，再對濾餅真空干燥處理得高純度綠原酸產品。所述步驟a中的干燥處理方式為：分段式熱泵-熱風聯(lián)合干燥，具體干燥方法為：先在39℃的干燥溫度下干燥1.9h，然后在74℃下干燥1.8h。所述步驟a中所采用的網篩的目數(shù)為20目，所述步驟b中采用的醇溶液為乙醇。所述步驟b中一次加熱回流過濾時加入的醇溶液與干燥粉料的重量比為7.5:1，醇溶液的質量濃度為78%，回流溫度為72℃，回流時間為2.2h；步驟b中二次加熱回流過濾時加入的醇溶液與濾渣的重量比為5.5:1，醇溶液的質量濃度為78%，回流溫度為72℃，回流時間為1.4h。所述步驟c中用于提取液ph調節(jié)的溶液為鹽酸，所采用的大孔樹脂柱為hpd600大孔樹脂柱，用于洗脫的醇溶液為質量濃度為72%的乙醇溶液。所述步驟d中用于富集液ph調節(jié)的溶液為鹽酸，所述助劑為質量濃度為42%的乙酸乙酯,加入的乙酸乙酯與富集液的體積比為1:1。所述步驟c中提取液的ph調節(jié)和步驟d中富集液的ph調節(jié)均為將ph調節(jié)為3。所述步驟e中所述分相劑為乙酸，加入的乙酸與萃取液的體積比為2.8:20，靜置時間為1.8h。所述步驟f中結晶處理的溫度為3℃，結晶時間為7h。所述新鮮植物為杜仲葉。實施例5一種從植物中制備高純度綠原酸的方法，由以下步驟組成：a、預料預處理：取新鮮植物，對其進行干燥處理后再進行粉碎處理，并過網篩得到干燥粉料；b、醇提：取步驟a中制得的干燥粉料加入醇溶液中，一次加熱回流過濾得一次濾液和濾渣，再將濾渣再次加入醇溶液中，二次加熱回流過濾得二次濾液，混合一次濾液和二次濾液得提取液；c、過柱：調步驟b中得到的提取液ph至酸性，再對提取液進行上大孔樹脂柱吸附、醇溶液洗脫濃縮處理，得富集液；d、萃?。赫{富集液ph至酸性后加入助劑進行萃取得萃取液；e、分相：向萃取液中加入分相劑，混合并靜置后收集下層水相；f、重結晶：對步驟e中得到的下層水相在低溫下進行結晶、抽濾處理得濾餅，再對濾餅真空干燥處理得高純度綠原酸產品。所述步驟a中的干燥處理方式為：分段式熱泵-熱風聯(lián)合干燥，具體干燥方法為：先在40℃的干燥溫度下干燥2h，然后在75℃下干燥2h。所述步驟a中所采用的網篩的目數(shù)為20目，所述步驟b中采用的醇溶液為乙醇。所述步驟b中一次加熱回流過濾時加入的醇溶液與干燥粉料的重量比為8:1，醇溶液的質量濃度為80%，回流溫度為75℃，回流時間為2.5h；步驟b中二次加熱回流過濾時加入的醇溶液與濾渣的重量比為6:1，醇溶液的質量濃度為80%，回流溫度為75℃，回流時間為1.5h。所述步驟c中用于提取液ph調節(jié)的溶液為鹽酸，所采用的大孔樹脂柱為hpd600大孔樹脂柱，用于洗脫的醇溶液為質量濃度為75%的乙醇溶液。所述步驟d中用于富集液ph調節(jié)的溶液為鹽酸，所述助劑為質量濃度為45%的乙酸乙酯,加入的乙酸乙酯與富集液的體積比為1:1。所述步驟c中提取液的ph調節(jié)和步驟d中富集液的ph調節(jié)均為將ph調節(jié)為3。所述步驟e中所述分相劑為乙酸，加入的乙酸與萃取液的體積比為3:20，靜置時間為2h。所述步驟f中結晶處理的溫度為4℃，結晶時間為8h。所述新鮮植物為金銀花。本發(fā)明的實施例1-實施例5的hpd600大孔樹脂柱的吸附容量和吸附率如下表：　吸附容量（mg/g）吸附率（%）實施例135.289.6%實施例235.589.8%實施例335.690.0%實施例435.891.0%實施例534.889.2經hlpc檢測本發(fā)明的實施例1-實施例5的最終成品純度檢測結果如下表：　最終產品純度（%）實施例198.5實施例298.7實施例398.9實施例499實施例598.2上述實施例為本發(fā)明較佳的實現(xiàn)方案，除此之外，本發(fā)明還可以其它方式實現(xiàn)，在不脫離本發(fā)明構思的前提下任何顯而易見的替換均在本發(fā)明的保護范圍之內。當前第1頁12