本發(fā)明專利涉及一種富含biflorin的植物體及從植物體中提取biflorin的新方法。

背景技術(shù)：

biflorin，中文名為：5,7-二羥基-2-甲基-色原酮-6-C-β-D-葡萄糖苷，白色粉末狀結(jié)晶，分子式為C₁₆H₁₈O₉，分子量354；該化合物為色原酮類化合物。文獻報道，該化合物具有良好的抗炎、抗氧化、抗真菌感染、抗消化系統(tǒng)紊亂等功效。

已有文獻報道，該成分存在于鱗毛蕨科粗莖鱗毛蕨（Dryopteris crassirhizoma）、石蒜科全能花（Pancratium biflorum）、桃金娘科植物丁香（Syzygium aromaticum）等植物中，且現(xiàn)有工藝，從丁香中獲得biflorin為最高，但得率僅為0.51‰，可開發(fā)利用低，且分離方法較為繁瑣，提取后需經(jīng)過萃取、凝膠色譜和多次液相色譜分離最終得到單體化合物，如應用于生產(chǎn)，其成本高、效率低。因此生產(chǎn)上需要找到一種富含biflorin的植物體，且資源豐富，并提取從該植物體上提取biflorin新方法，以降低開發(fā)成本。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明旨在提供一種富含biflorin的植物資源，而且該植物已實現(xiàn)規(guī)模人工栽培，植物資源豐富，為biflorin提供新的來源，同時配套提供一種低成本、安全的biflorin提取生產(chǎn)方法，該方法無需凝膠色譜分離，無需多次液相色譜分離，工藝簡單，成本低。

本發(fā)明所提供的技術(shù)方法如下：

一種富含biflorin的植物體,其特征是biflorin含量0.076%-0.3%，含量是比丁香大1.5倍到6.0倍,該植物體為圓齒野鴉椿（Euscaphis konishii）。

一種從圓齒野鴉椿中提取biflorin的方法，以圓齒野鴉椿干燥的植物體為原料，經(jīng)粉碎-乙醇溶液提取-濃縮提取液至浸膏-硅膠柱色譜洗脫-洗脫液濃縮重結(jié)晶得白色粉末狀結(jié)晶-粉末狀結(jié)晶經(jīng)高效液相色譜分離后得到biflorin單體化合物，具體步驟參數(shù)如下：

取圓齒野鴉椿植物體，經(jīng)干燥后粉碎過20目備用；

乙醇溶液提?。喝A齒野鴉椿粉末1000 g，加60-80%乙醇溶液10000 mL，加熱煮沸2小時，過濾得提取液；濾渣再加入8000 mL 60-80%乙醇溶液，再一次煮沸2小時，過濾，得提取液；

濃縮提取液至浸膏：合并兩次乙醇溶液提取液，減壓濃縮至干得提取物；

硅膠柱色譜洗脫：考慮到分離效果、有機溶劑毒性及生產(chǎn)成本，優(yōu)選二氯甲烷-乙醇-水系統(tǒng)；洗脫溶劑比例為5:1:0.2，洗脫4-6個柱體積，除去雜質(zhì)；然后使用二氯甲烷：乙醇：水為2:1:0.5，洗脫4-6個柱體積，收集洗脫液，濃縮得高濃度biflorin浸膏。

洗脫液濃縮重結(jié)晶：結(jié)晶溶劑選用親水性有機溶劑，首選乙醇。取高濃度biflorin浸膏，加入乙醇，煮沸，至浸膏完全溶解，自然冷卻，析出白色固體。

制備高效液相色譜分離：色譜條件為25%甲醇水溶液。取重結(jié)晶的白色固體，用二甲基亞砜分析純?nèi)芙夂螅⑷胫苽涓咝б合嗌V儀，色譜柱選用YMC-pack ODS-A（250×20 mml.D.），流速8ml/min，檢測波長210nm，柱溫25℃，25%甲醇水溶液洗脫，保留時間為30min左右色譜峰即為化合物biflorin。

圓齒野鴉椿的植物體包括根、莖、枝、葉、果皮、種子各器官中都含有biflorin，得率0.076%-0.3%，而以果皮中的含量為最高。

上述的圓齒野鴉椿（Euscaphis konishii）發(fā)明所在課題組已突破種苗生產(chǎn)瓶頸，并在國家農(nóng)業(yè)科技成果轉(zhuǎn)化資金資金項目的資助下，先后在福建的南平、三明、福州等地建立2000多畝的人工林，目前均已成林，經(jīng)數(shù)年來反復取樣檢測，各種器官的biflorin提取得率分別在0.076%-0.3%之間，其中種皮的biflorin提取得率為0.3%，而且活性好，極具開發(fā)價值；

采用上述所提供的工藝，無需凝膠色譜分離，無需多次液相色譜分離，比已報道的提取方法更簡單，生產(chǎn)成本低。

下面結(jié)合附圖、實施例對本發(fā)明進一步說明。

附圖說明

圖1. biflorin的核磁共振氫譜

圖2. biflorin的核磁共振碳譜

圖3. biflorin的化學結(jié)構(gòu)式。

具體實施方式

根據(jù)下述實施例，可以更好地理解本發(fā)明。然而，本領(lǐng)域的技術(shù)人員容易理解，實施例所描述的具體物料比、工藝條件及其結(jié)果僅用于說明本發(fā)明，而不應當也不會限制權(quán)力要求書中所詳細描述的本發(fā)明。

實施例1

取圓齒野鴉椿果皮粉末1000 g，加75%乙醇溶液10000 mL，加熱煮沸2小時，過濾得提取液；濾渣再加入8000 mL75%乙醇溶液，再一次煮沸2小時，過濾，得提取液；合并兩次提取液，減壓濃縮至干得提取物205 g；提取物與205g 60-100目硅膠拌樣，800 g 200-300目硅膠干法裝柱，二氯甲烷-乙醇-水（5:1:0.2）5000 mL洗脫，除去雜質(zhì)；二氯甲烷-乙醇-水（2:1:0.5）5000 mL洗脫，收集洗脫液，減壓回收溶劑，得浸膏18.3 g。加入乙醇，煮沸至浸膏全部溶解，放冷，析出白色固體粉末11.2 g。樣品用二甲基亞砜（DMSO）溶解，經(jīng)高效液相色譜分離，條件為檢測波長210nm，甲醇-水（25:75）；最終得biflorin精制品3.0 g，產(chǎn)率為0.3%，純度98.5%。

實施例2

取圓齒野鴉椿種子粉末1000 g，按照實例1方式操作，最終得biflorin精制品1.8 g，產(chǎn)率為0.18%，純度96.8%。

實施例3

取圓齒野鴉椿枝粉末1000 g，按照實例1方式操作，最終得biflorin精制品1.1 g，產(chǎn)率為0.11%，純度95.8%。

實施例4

取圓齒野鴉椿葉粉末1000 g，按照實例1方式操作，最終得biflorin精制品0.85 g，產(chǎn)率為0.085%，純度95.8%。

實施例5

取圓齒野鴉椿根粉末1000 g，按照實例1方式操作，最終得biflorin精制品0.76 g，產(chǎn)率為0.076%，純度97.3%。

實施例6

取圓齒野鴉椿果皮粉末1000 g，按照實例1方式操作，僅改變提取溶劑，使用60%乙醇進行提取，最終得biflorin精制品2.84 g，產(chǎn)率為0.28%，純度94.2%。

實施例7

取圓齒野鴉椿果皮粉末1000 g，按照實例1方式操作，僅改變提取溶劑，使用80%乙醇進行提取，最終得biflorin精制品2.51g，產(chǎn)率為0.25%，純度96.7%。

實施例8

取圓齒野鴉椿果皮粉末1000 g，按照實例1方式操作，僅改變硅膠柱色譜洗脫條件，二氯甲烷-乙醇-水（5:1:0.2）4000 mL洗脫，除去雜質(zhì)；二氯甲烷-乙醇-水（2:1:0.5）4000 mL洗脫；最終得biflorin精制品2.87 g，產(chǎn)率為0.29%，純度97.5%。

實施例9

取圓齒野鴉椿果皮粉末1000 g，按照實例1方式操作，僅改變硅膠柱色譜洗脫條件，二氯甲烷-乙醇-水（5:1:0.2）6000 mL洗脫，除去雜質(zhì)；二氯甲烷-乙醇-水（2:1:0.5）6000 mL洗脫；最終得biflorin精制品3.02 g，產(chǎn)率為0.30%，純度98.8%。