相關(guān)申請(qǐng)的交叉引用

本申請(qǐng)要求于2015年4月28日提交的標(biāo)題為“核苷酸化合物及其用途”的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)第62/154041號(hào)和于2015年2月25日提交的標(biāo)題為“核苷酸化合物及其用途”的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)第62/120789號(hào)的優(yōu)先權(quán)，其全部?jī)?nèi)容整體援引加入。

本發(fā)明公開(kāi)了藥學(xué)和化學(xué)領(lǐng)域的組合物和方法。一些公開(kāi)的實(shí)施方案涉及核苷酸化合物、藥物組合物及其制備方法和使用方法。在一些實(shí)施方案中，這樣的核苷酸化合物是有用的抗病毒和抗代謝劑。

發(fā)明背景

提供下列背景描述以幫助理解本發(fā)明，但不承認(rèn)其是(或描述)本發(fā)明的現(xiàn)有技術(shù)。

核苷/核苷酸及其衍生物化合物已廣泛用作抗病毒和抗代謝治療劑以治療諸如hiv、hcv和hbv的病毒性疾病及實(shí)體腫瘤。盡管在具有改善的治療活性和藥代動(dòng)力學(xué)性質(zhì)的新一代基于核苷(酸)的藥物的領(lǐng)域中有顯著進(jìn)步，但仍然需要新的藥劑來(lái)對(duì)抗耐藥性和遺傳異質(zhì)性。

發(fā)明概述

本發(fā)明描述了新的吉西他濱衍生物的核苷和核苷酸化合物(諸如磷酸酯和氨基磷酸酯)，其制備及其用途。一些實(shí)施方案涉及前藥用于治療病毒性疾病和各種癌的用途，所述病毒性疾病和各種癌包括但不限于肝炎、肝纖維化、脂肪肝、瘧疾、hiv、hpv、非小細(xì)胞肺癌、胰腺癌、膀胱癌、乳腺癌、肝癌、淋巴瘤和其他類(lèi)型的腫瘤。

一些實(shí)施方案涉及式i的化合物或其立體異構(gòu)體或互變異構(gòu)體或藥學(xué)上可接受的鹽：

其中：

r¹是鹵素、氫同位素或任選被取代的c1-c6烷基；

r²選自or⁵和nr⁵r⁶；

r³選自h、任選被取代的c1-c6烷基、任選被取代的c1-c6雜烷基、和任選被取代的c1-c6烷?；?；

r⁴選自h、單磷酸酯、二磷酸酯、三磷酸酯，和

或者r³和r⁴可任選地連接；

r⁵選自h、氘、任選被取代的c1-c8烷基、任選被取代的c1-c8烷?；?、任選被取代的芳?；腿芜x被取代的雜芳?；?/p>

r⁶選自氘、任選被取代的c1-c8烷酰基、任選被取代的芳酰基和任選被取代的雜芳?；?；或者當(dāng)r¹是氘時(shí)，r⁶是h；

r⁷是苯基或萘基；

r⁸和r⁹獨(dú)立地是c1-c6烷基；

r¹⁰選自h、任選被取代的c1-c8烷基、任選被取代的c1-c8烷?；⑷芜x被取代的芳?；腿芜x被取代的雜芳?；?；

r¹¹和r¹²是氘；或者r¹¹是氘且r¹²是氫；或者r¹²是氘且r¹¹是氫。

在一些實(shí)施方案中，所述化合物選自：

和其立體異構(gòu)體或藥學(xué)上可接受的鹽。

一些實(shí)施方案涉及治療疾病、病癥或病況的方法，其包括向有此需要的個(gè)體給藥有效量的任意上述化合物。

在一些實(shí)施方案中，所述疾病是病毒性疾病。

在一些實(shí)施方案中，所述疾病是某些類(lèi)型的癌癥。

一些實(shí)施方案還包括向有此需要的個(gè)體給藥有效量的至少一種另外的治療劑。

在一些實(shí)施方案中，所述個(gè)體是哺乳動(dòng)物。

在一些實(shí)施方案中，所述個(gè)體是人類(lèi)。

一些實(shí)施方案涉及在細(xì)胞中抑制病毒或腫瘤復(fù)制的方法，其包括使所述細(xì)胞與任意上述化合物接觸。

在一些實(shí)施方案中，所述細(xì)胞是體內(nèi)的。

在一些實(shí)施方案中，所述細(xì)胞是離體的。

在一些實(shí)施方案中，所述細(xì)胞是哺乳動(dòng)物的。

在一些實(shí)施方案中，所述細(xì)胞是人類(lèi)的。

發(fā)明詳述

本實(shí)施方案涉及關(guān)于新的生物活性核苷衍生物化合物(諸如核苷磷酸酯、核苷氨基磷酸酯(phosphonamidate))的組合物和方法，其制備和其用途。這些化合物及其立體異構(gòu)體和藥學(xué)上可接受的鹽由式i或其立體異構(gòu)體或互變異構(gòu)體或藥學(xué)上可接受的鹽表示：

其中：

r¹是鹵素、氫同位素或任選被取代的c1-c6烷基；

r²選自or⁵和nr⁵r⁶；

r³選自h、任選被取代的c1-c6烷基、任選被取代的c1-c6雜烷基、和任選被取代的c1-c6烷?；?；

r⁴選自h、單磷酸酯、二磷酸酯、三磷酸酯，和

或者r³和r⁴可任選地連接；

r⁵選自h、氘、任選被取代的c1-c8烷基、任選被取代的c1-c8烷?；?、任選被取代的芳?；腿芜x被取代的雜芳酰基；

r⁶選自氘、任選被取代的c1-c8烷?；?、任選被取代的芳?；腿芜x被取代的雜芳?；?；或者當(dāng)r¹是氘時(shí)，r⁶是h；

r⁷是苯基或萘基；

r⁸和r⁹獨(dú)立地是c1-c6烷基；

r¹⁰選自h、任選被取代的c1-c8烷基、任選被取代的c1-c8烷酰基、任選被取代的芳?；腿芜x被取代的雜芳?；?；

r¹¹和r¹²是氘；或者r¹¹是氘且r¹²是氫；或者r¹²是氘且r¹¹是氫。

某些磷酸酯衍生物的藥物是高電荷(highlycharged)化合物，其由于在胃腸道中吸收差而通常具有差的口服生物利用度。某些藥物是高度親脂性化合物，其由于在胃腸道中吸收差而通常具有差的口服生物利用度。在一些實(shí)施方案中，式i的化合物具有優(yōu)于母體藥物/藥劑的口服生物利用度。

式i的化合物具有不對(duì)稱(chēng)中心，其中立體化學(xué)是未指定的，通常當(dāng)提及式i的化合物時(shí)，包括這些化合物的非對(duì)映異構(gòu)體混合物及單獨(dú)的立體異構(gòu)體。

某些式i的化合物含有雜環(huán)，其中雙鍵可互變異構(gòu)化為不同的構(gòu)型，通常當(dāng)提及式i的化合物時(shí)，包括這些化合物的互變異構(gòu)體混合物及單獨(dú)的互變異構(gòu)體。

本文提供的化合物、組合物和方法的一些實(shí)施方案包括包含本文提供的化合物和藥學(xué)上可接受的載體的藥物組合物。

一些實(shí)施方案還包括向有此需要的個(gè)體給藥有效量的第二種或多種治療劑與本文提供的化合物的組合。

本文提供的化合物、組合物和方法的一些實(shí)施方案包括治療病毒性疾病的方法，其包括向有此需要的個(gè)體給藥有效量的本文提供的化合物。

本文提供的化合物、組合物和方法的一些實(shí)施方案包括治療各種類(lèi)型的癌癥的方法，其包括向有此需要的個(gè)體給藥有效量的本文提供的化合物。

在一些實(shí)施方案中，所述個(gè)體是哺乳動(dòng)物。

在一些實(shí)施方案中，所述個(gè)體是人類(lèi)。

本文提供的化合物、組合物和方法的一些實(shí)施方案包括在細(xì)胞中測(cè)試化合物的方法，其包括使所述細(xì)胞與請(qǐng)求保護(hù)的化合物接觸。

在一些實(shí)施方案中，所述細(xì)胞是體內(nèi)的。

在一些實(shí)施方案中，所述細(xì)胞是離體的。

在一些實(shí)施方案中，所述細(xì)胞是哺乳動(dòng)物的。

在一些實(shí)施方案中，所述細(xì)胞是人類(lèi)的。

定義

根據(jù)本公開(kāi)和如本文使用的，除非另外明確說(shuō)明，下列術(shù)語(yǔ)用下列含義定義。應(yīng)當(dāng)理解，上文的一般描述和下文的詳細(xì)描述都僅是示例性和說(shuō)明性的，并不限制請(qǐng)求保護(hù)的主題。在本申請(qǐng)中，除非另外具體說(shuō)明，單數(shù)形式的使用包括復(fù)數(shù)形式。在本申請(qǐng)中，除非另外說(shuō)明，“或(者)”的使用意指“和/或”。此外，術(shù)語(yǔ)“包括/包含(including)”及其他形式(諸如“includes”和“included”)的使用是非限制性的。

如本文使用的，范圍和量可表達(dá)為“大約”具體的值或范圍?！按蠹s”還包括準(zhǔn)確的量。因此“大約10％”意指“大約10％”以及“10％”。

如本文使用的，“任選的”或“任選地/任選存在的”意指其后所描述的事件或情況確實(shí)發(fā)生或不發(fā)生，并且該描述包括所述事件或情況發(fā)生的情形以及不發(fā)生的情形。例如，任選被取代的基團(tuán)意指所述基團(tuán)未被取代或被取代。

除非上下文另外清楚地指明，如本文使用的，單數(shù)形式的“a”、“an”和“the”包括復(fù)數(shù)的所指物。因此，例如，提及包含“治療劑”的組合物包括具有一種或多種治療劑的組合物。

術(shù)語(yǔ)“烷基”是指具有至多且包括10個(gè)碳原子的的飽和脂族基團(tuán)(包括直鏈、支鏈和環(huán)狀基團(tuán))。合適的烷基包括甲基、乙基、正丙基、異丙基和環(huán)丙基。所述烷基可任選地被1-3個(gè)取代基取代。

術(shù)語(yǔ)“任選被取代的”或“被取代(的)”包括被1-4個(gè)取代基取代的基團(tuán)，所述取代基獨(dú)立地選自低級(jí)烷基、低級(jí)芳基、低級(jí)芳烷基、低級(jí)環(huán)烷基、低級(jí)雜環(huán)烷基、羥基、低級(jí)烷氧基、低級(jí)芳基氧基、全鹵代烷氧基、芳烷氧基、低級(jí)雜芳基、低級(jí)雜芳基氧基、低級(jí)雜芳基烷基、低級(jí)雜芳烷氧基、疊氮基、氨基、鹵素、低級(jí)烷硫基、氧代基、低級(jí)?；榛?、低級(jí)羧基酯、羧基、甲酰氨基、硝基、低級(jí)酰氧基、低級(jí)氨基烷基、低級(jí)烷基氨基芳基、低級(jí)烷基芳基、低級(jí)烷基氨基烷基、低級(jí)烷氧基芳基、低級(jí)芳基氨基、低級(jí)芳烷基氨基、低級(jí)烷基磺?；?、低級(jí)甲酰氨基烷基芳基、低級(jí)甲酰氨基芳基、低級(jí)羥基烷基、低級(jí)鹵代烷基、低級(jí)烷基氨基烷基羧基、低級(jí)氨基甲酰氨基烷基、氰基、低級(jí)烷氧基烷基、低級(jí)全鹵代烷基、磷酸酯、膦酸酯或氨基磷酸酯和低級(jí)芳基烷氧基烷基。“被取代的芳基”和“被取代的雜芳基”是指被1-6個(gè)取代基取代的芳基和雜芳基。這些取代基選自低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基、低級(jí)全鹵代烷基、鹵素、羥基、氰基和氨基。

術(shù)語(yǔ)“雜烷基”是指含有至少一個(gè)雜原子(諸如1-3個(gè)雜原子)的烷基。合適的雜原子包括氧、硫和氮。

術(shù)語(yǔ)“雜烷?；笔侵?c(o)-雜烷基。

術(shù)語(yǔ)“烷酰基”是指-c(o)-烷基。

術(shù)語(yǔ)“酰氧基”是指-oc(o)r，其中r是烷基或雜烷基。

術(shù)語(yǔ)“烷氧基”或“烷基氧基”是指or，其中r是烷基或雜烷基，其均任選地被取代。

術(shù)語(yǔ)“羧基”是指c(o)oh。

術(shù)語(yǔ)“氧代(基)”是指＝o基團(tuán)。

術(shù)語(yǔ)“氨基”是指nrr其中r和r各自獨(dú)立地選自氫、烷基、芳基、芳烷基和雜環(huán)烷基，除了氫之外其余基團(tuán)均任選地被取代；并且r和r可形成環(huán)系。

術(shù)語(yǔ)“?；被笔侵?nrc(o)r其中r和r各自獨(dú)立地選自h、烷基或雜烷基。

術(shù)語(yǔ)“鹵素”或“鹵代”是指f、cl、br和i。

術(shù)語(yǔ)“鹵代烷基”是指含有至少一個(gè)鹵素(在另一方面，1-3個(gè)鹵素原子)的烷基。合適的鹵素原子包括f、cl和br。

術(shù)語(yǔ)“鹵代?；笔侵?c(o)-鹵代烷基。

術(shù)語(yǔ)“烯基”是指具有2-12個(gè)原子并且含有至少一個(gè)碳碳雙鍵的不飽和基團(tuán)，并且其包括直鏈、支鏈和環(huán)狀基團(tuán)。烯基可任選地被取代。合適的烯基包括烯丙基。

術(shù)語(yǔ)“炔基”是指具有2-12個(gè)原子并且含有至少一個(gè)碳碳三鍵的不飽和基團(tuán)，并且其包括直鏈、支鏈和環(huán)狀基團(tuán)。炔基可任選地被取代。合適的炔基包括乙炔基。

術(shù)語(yǔ)“氨基烷基”是指基團(tuán)nr2-烷基，其中r選自h、烷基、芳基、芳烷基和雜環(huán)烷基。

術(shù)語(yǔ)“烷硫基”是指基團(tuán)烷基-s-。

術(shù)語(yǔ)“酰氨基”是指如在nr2c(o)-、rc(o)nr-、nr2s(＝o)2-和rs(＝o)2-nr-中的?；蚧酋；缘膎r2基團(tuán)，其中r包括h、烷基、芳基、芳烷基和雜環(huán)烷基。

術(shù)語(yǔ)“全鹵代”是指其中脂族基團(tuán)或芳基上的每個(gè)c-h鍵都被c-鹵代鍵代替的基團(tuán)。合適的全鹵代烷基包括cf3和cfcl2。

術(shù)語(yǔ)“芳基”是指芳族基團(tuán)，其中形成環(huán)的各個(gè)原子都是碳原子。芳基環(huán)可通過(guò)五、六、七、八、九或多于九個(gè)碳原子形成。芳基可任選地被取代。芳基的實(shí)例包括但不限于苯基、萘基、菲基、蒽基、四氫萘基、芴基、茚基和茚滿(mǎn)基。

術(shù)語(yǔ)“雜芳基”是指芳族基團(tuán)，其中至少一個(gè)形成芳族環(huán)的原子是雜原子。雜芳基環(huán)可通過(guò)三、四、五、六、七、八、九或多于九個(gè)原子形成。雜芳基可任選地被取代。雜芳基的實(shí)例包括但不限于包含一個(gè)氧或硫原子或至多四個(gè)氮原子，或者一個(gè)氧或硫原子和至多兩個(gè)氮原子的組合的芳族c3-8雜環(huán)基，以及它們的被取代的衍生物以及苯并和吡啶并稠合(例如通過(guò)成環(huán)碳原子之一連接)衍生物。在一些實(shí)施方案中，雜芳基任選地被一個(gè)或多個(gè)取代基取代，所述取代基獨(dú)立地選自鹵代、羥基、氨基、氰基、硝基、烷基酰氨基、?；?、c1-6-烷氧基、c1-6-烷基、c1-6-羥基烷基、c1-6-氨基烷基、c1-6-烷基氨基、烷基次磺?；?sulfenyl)、烷基亞磺?；?、烷基磺?；?、氨磺酰基或三氟甲基。雜芳基的實(shí)例包括但不限于呋喃、苯并呋喃、噻吩、苯并噻吩、吡咯、吡啶、吲哚、噁唑、苯并噁唑、異噁唑、苯并異噁唑、噻唑、苯并噻唑、異噻唑、咪唑、苯并咪唑、吡唑、吲唑、四唑、喹啉、異喹啉、噠嗪、嘧啶、嘌呤和吡嗪、呋咱(furazan)、1,2,3-噁二唑、1,2,3-噻二唑、1,2,4-噻二唑、三唑、苯并三唑、蝶啶、酚噁唑、噁二唑、苯并吡唑、喹嗪、噌啉、酞嗪、喹唑啉和喹噁啉的未取代和單取代或雙取代衍生物。在一些實(shí)施方案中，所述取代基是鹵素、羥基、氰基、o-c1-6-烷基、c1-6-烷基、羥基-c1-6-烷基和氨基-c1-6-烷基。

術(shù)語(yǔ)“芳?；笔侵?c(o)-芳基。

術(shù)語(yǔ)“雜芳?；笔侵?c(o)-雜芳基。

短語(yǔ)“治療有效量”意指部分或完全改善、減弱或消除特定疾病或病況的一種或多種癥狀，或者防止、改變或延遲特定疾病或病況的一種或多種癥狀的發(fā)作的化合物或化合物的組合的量。這樣的量可以單劑量的形式給藥，或者可按照給藥方案給藥，由此其是有效的。可能需要重復(fù)給藥以實(shí)現(xiàn)期望的結(jié)果(例如疾病和/或病況的治療)。

術(shù)語(yǔ)“藥學(xué)上可接受的鹽”包括式i的化合物和從本發(fā)明的實(shí)施方案的化合物與有機(jī)或無(wú)機(jī)酸或堿的結(jié)合衍生出的它們的前藥的鹽。適合的酸包括乙酸、己二酸、苯磺酸、(+)-7,7-二甲基-2-氧代雙環(huán)[2.2.1]庚烷-1-甲磺酸、檸檬酸、1,2-乙二磺酸、十二烷基磺酸、富馬酸、葡庚糖酸、葡糖酸、葡糖醛酸、馬尿酸、鹽酸、半乙醇酸(hemiethanolicacid)、hbr、hcl、hi、2-羥基乙磺酸、乳酸、乳糖酸、馬來(lái)酸、甲磺酸、甲基溴酸(methylbromideacid)、甲基硫酸、2-萘磺酸、硝酸、油酸、4,4’-亞甲基雙-[3-羥基-2-萘甲酸]、磷酸、聚半乳糖醛酸、硬脂酸、琥珀酸、硫酸、磺基水楊酸、鞣酸、酒石酸、對(duì)苯二甲酸(terphthalicacid)和對(duì)甲苯磺酸。

在任何給定的取代基的數(shù)目未指明時(shí)(例如“鹵代烷基”)，可存在一個(gè)或多個(gè)取代基。例如，“鹵代烷基”可包含一個(gè)或多個(gè)相同或不同的鹵素。例如，“鹵代烷基”包括取代基cf3、chf2和ch2f中的每一個(gè)。

術(shù)語(yǔ)“患者”是指被治療的動(dòng)物，其包括哺乳動(dòng)物，諸如犬、貓、母牛、馬、羊和人。在一些實(shí)施方案中，所述患者是雄性或雌性哺乳動(dòng)物。在一些實(shí)施方案中，所述患者是男人或女人。

如本文使用的術(shù)語(yǔ)“前藥”是指當(dāng)向生物系統(tǒng)給藥時(shí)，由自發(fā)的化學(xué)反應(yīng)、酶催化的化學(xué)反應(yīng)和/或代謝化學(xué)反應(yīng)或者其各自的組合而產(chǎn)生生物活性化合物的任何化合物。使用在體內(nèi)裂解的、與例如ho-、hs-、hooc-、hoopr2-的官能團(tuán)(其與藥物相關(guān))連接的基團(tuán)來(lái)形成標(biāo)準(zhǔn)前藥。標(biāo)準(zhǔn)前藥包括但不限于羧酸酯，其中所述基團(tuán)是烷基、芳基、芳烷基、酰氧基烷基、烷氧基羰氧基烷基，以及羥基、硫基和胺的酯，其中連接的基團(tuán)是酰基、烷氧基羰基、氨基羰基、磷酸酯或硫酸酯。所說(shuō)明的基團(tuán)是示例性的而不是窮舉，并且本領(lǐng)域技術(shù)人員可制備其它已知的多種前藥。式i的化合物的這樣的前藥在本發(fā)明范圍之內(nèi)。前藥必須經(jīng)歷一些形式的化學(xué)轉(zhuǎn)化以生成具有生物活性的化合物或者作為生物活性化合物的前體的化合物。在一些情況中，所述前藥是生物活性的，其活性通常低于藥物本身，并且用于通過(guò)改善口服生物利用度、藥效半衰期等來(lái)改善藥效或安全性?；衔锏那八幮问娇捎糜诶绺纳粕锢枚取⒅T如通過(guò)掩蔽或減小不良性質(zhì)(如苦味或胃腸道刺激性)來(lái)改善個(gè)體的可接受性、改變?nèi)缬糜陟o脈內(nèi)使用的溶解度、提供延長(zhǎng)或持續(xù)釋放或遞送、改善配制的便利性或提供化合物的定位遞送。

術(shù)語(yǔ)“立體異構(gòu)體”是指r⁸基團(tuán)和通過(guò)單鍵連接至磷原子的核苷的相對(duì)或絕對(duì)空間關(guān)系，并且是指單個(gè)異構(gòu)體或者單個(gè)異構(gòu)體的任意組合，諸如外消旋混合物和非對(duì)映異構(gòu)混合物。例如，以下結(jié)構(gòu)a、b、c和d顯示四種可能的單個(gè)異構(gòu)體。結(jié)構(gòu)a和d(或者b和c)是一對(duì)兩個(gè)對(duì)映異構(gòu)體(或者稱(chēng)作旋光異構(gòu)體)。

術(shù)語(yǔ)“互變異構(gòu)體”是指雙鍵可以多于一種構(gòu)型存在的異構(gòu)體。例如，式i的化合物的堿基團(tuán)可以以下互變異構(gòu)體形式存在。

術(shù)語(yǔ)“治療”疾病包括抑制疾病(延緩或阻滯或部分阻滯其進(jìn)展)、提供疾病的癥狀或副作用的緩解(包括姑息治療)和/或緩解疾病(引起疾病消退)。

術(shù)語(yǔ)“生物藥劑”是指具有生物活性的化合物，或者具有可用于診斷目的的分子性質(zhì)的化合物(如帶有放射性同位素或重原子的化合物)。

制劑

所公開(kāi)的化合物可單獨(dú)使用，或與其它治療聯(lián)合使用。當(dāng)與其它藥劑聯(lián)合使用時(shí)，可將這些化合物以每日劑量或每日劑量的適當(dāng)部分給藥(例如，每天2次)。在治療計(jì)劃中，可將所述化合物在另一藥劑的療程之后、在另一藥劑的療法的療程期間給藥，作為治療方案的一部分給藥，或者可在用另一藥劑的療法之前給藥。

藥學(xué)上可接受的鹽的實(shí)例包括醋酸鹽、己二酸鹽、苯磺酸鹽、溴化物、樟腦磺酸鹽、氯化物、檸檬酸鹽、乙二磺酸鹽、丙酸酯十二烷基硫酸鹽、富馬酸鹽、葡庚糖酸鹽、葡糖酸鹽、葡糖醛酸鹽、馬尿酸鹽、?？怂猁}、氫溴酸鹽、鹽酸鹽、碘化物、羥乙基磺酸鹽、乳酸鹽、乳糖酸鹽、馬來(lái)酸鹽、甲磺酸鹽、甲基溴化物、甲基硫酸鹽、萘磺酸鹽、硝酸鹽、油酸鹽、棕櫚酸鹽、磷酸鹽、聚半乳糖醛酸鹽、硬脂酸鹽、琥珀酸鹽、硫酸鹽、磺基水楊酸鹽、鞣酸鹽、酒石酸鹽、對(duì)苯二甲酸鹽、甲苯磺酸鹽和三乙基碘。

含有活性成分的組合物可以是適合用于預(yù)定的給藥方法的任何形式。在一些實(shí)施方案中，本文中所述的方法和/或組合物中的化合物可通過(guò)口服給藥、直腸給藥、經(jīng)粘膜給藥、腸道給藥、腸內(nèi)給藥、局部給藥、透皮給藥、鞘內(nèi)給藥、靜脈內(nèi)給藥、肌內(nèi)給藥、心室內(nèi)給藥、腹膜內(nèi)給藥、鼻內(nèi)給藥、眼內(nèi)給藥和/或腸胃外給藥來(lái)提供。

當(dāng)將所述化合物通過(guò)口服給藥進(jìn)行給藥時(shí)，可制備例如片劑、糖錠劑(troch)、錠劑(lozenge)、水性或油性混懸劑、可分散性粉末或顆粒劑、乳劑、硬或軟膠囊劑、糖漿劑或酏劑。用于口服使用的組合物可根據(jù)本領(lǐng)域已知用于制備藥物組合物的任何方法制備，并且這樣的組合物可含有一種或多種物質(zhì)，包括甜味劑、調(diào)味劑、著色劑和防腐劑，以提供適口的制劑。含有與非毒性藥學(xué)上可接受的賦形劑(其適合用于制備片劑)混合的活性成分的片劑是可接受的。這些賦形劑可以是例如惰性稀釋劑，如碳酸鈣或碳酸鈉、乳糖、磷酸鈣或磷酸鈉；造粒劑和崩解劑，如玉米淀粉或藻酸；粘合劑，如淀粉、明膠或阿拉伯膠；以及潤(rùn)滑劑，如硬脂酸鎂、硬脂酸或滑石。片劑可以是未包衣的，或者可將其通過(guò)已知技術(shù)(包括微囊化)包衣以延遲胃腸道中的崩解和吸收，并由此提供較長(zhǎng)時(shí)間的持續(xù)作用。例如，可使用延遲材料，如單獨(dú)或與蠟一起的單硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯。

用于口服使用的制劑還可以硬明膠膠囊劑的形式存在，其中可將活性成分與惰性固體稀釋劑(如磷酸鈣或高嶺土)混合；或以軟明膠膠囊劑的形式存在，其中可將活性成分與水或油介質(zhì)(如花生油、液狀石蠟或橄欖油)混合。

適用于腸胃外給藥的制劑包括水性和非水性等滲無(wú)菌注射溶液劑，其可包含例如抗氧化劑、緩沖液、抑菌劑和使得制劑與預(yù)期受者的血液等滲的溶質(zhì)；以及水性和非水性無(wú)菌混懸劑，其可包含助懸劑和增稠劑。所述制劑可在單位劑量或多劑量的密封容器(例如安瓿和小瓶)中提供，并可以在冷凍干燥(凍干)條件下儲(chǔ)存(其僅需使用前即刻加入無(wú)菌液體載體(例如注射用水))。注射溶液劑和混懸劑可由之前描述種類(lèi)的無(wú)菌粉末、顆粒劑和片劑制備。

在一些實(shí)施方案中，單位劑量制劑含有每日劑量或單位、每日亞劑量或者其適宜部分的藥物。然而會(huì)理解，如本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知，任何特定患者的具體劑量水平會(huì)取決于多種因素，其包括所用具體化合物的活性；被治療個(gè)體的年齡、體重、一般健康狀況、性別和飲食；給藥時(shí)間和給藥途徑；排泄速率；之前已給藥的其它藥物；以及進(jìn)行治療的特定疾病的嚴(yán)重性。

化合物的合成

以下用于制備化合物的操作說(shuō)明用于制備所述化合物的一般操作。例如通過(guò)將非對(duì)映異構(gòu)體通過(guò)柱色譜法和/或結(jié)晶的組合分離，或者通過(guò)手性活化的磷酸酯中間體的對(duì)映選擇性合成，可制備包含磷中心處的單個(gè)異構(gòu)體的光學(xué)純前藥。

路線(xiàn)i描述衍生式i的化合物的3-羥基的一般策略。第一策略從用標(biāo)準(zhǔn)保護(hù)基(諸如烷基甲硅烷基或?；?保護(hù)結(jié)構(gòu)1的化合物的伯羥基開(kāi)始，以得到結(jié)構(gòu)2的化合物。烷基化或?；竺摫Ｗo(hù)得到結(jié)構(gòu)3的核苷產(chǎn)物。

路線(xiàn)i：

路線(xiàn)ii描述衍生式i的化合物的4'-氨基的一般策略。用標(biāo)準(zhǔn)保護(hù)基(諸如烷基甲硅烷基或?；?保護(hù)結(jié)構(gòu)4的化合物的二羥基得到結(jié)構(gòu)5的化合物。用標(biāo)準(zhǔn)酰化劑(諸如酰氯、酸酐或脲)酰化氨基后脫保護(hù)產(chǎn)生結(jié)構(gòu)6的化合物。

路線(xiàn)ii

路線(xiàn)iii描述式i的氨基磷酸酯衍生物的一般合成操作。將結(jié)構(gòu)7的核苷衍生物用結(jié)構(gòu)8的氯化磷處理，以得到結(jié)構(gòu)9的終產(chǎn)物。

路線(xiàn)iii

實(shí)施例

如下文所述制備一些式i的生物活性化合物。

實(shí)施例1

(2s)-2-(((((2r,3r,5r)-5-(4-苯甲酰氨基-5-氟-2-氧代嘧啶-1(2h)-基)-4,4-二氟-3-羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基)氧基)丙酸異丙酯(化合物101)

根據(jù)路線(xiàn)i-iii的合成策略，由5'-氟-吉西他濱制備兩個(gè)非對(duì)映異構(gòu)體的混合物的形式的化合物101。[m+h]⁺c28h29f3n3o10p計(jì)算值：655.15。

實(shí)施例2

(2s)-2-(((((2r,3r,5r)-4,4-二氟-5-(5-氟-2-氧代-4-(2-丙基戊酰氨基)嘧啶-1(2h)-基)-3-羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷?；?氧基)丙酸異丙酯

根據(jù)路線(xiàn)i-iii的合成策略，由5'-氟-吉西他濱制備兩個(gè)非對(duì)映異構(gòu)體的混合物的形式的化合物102。[m+h]⁺c29h39f3n3o10p計(jì)算值：677.23。

生物學(xué)實(shí)施例

使用方法的實(shí)施例包括以下。應(yīng)理解，以下是實(shí)施例，并且所述方法不僅限于這些實(shí)施例。

實(shí)施例a：體外抗病毒活性試驗(yàn)

在標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)中測(cè)試三磷酸酯形式的新的核苷對(duì)純化的病毒聚合酶(諸如hcv或hbv)的抗病毒活性。

方法：

通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)的核苷酸合成從相應(yīng)的核苷制備測(cè)試核苷三磷酸酯。

實(shí)施例b：體外抗增殖活性試驗(yàn)

在各種癌癥細(xì)胞系中測(cè)試新的化合物相對(duì)參比化合物吉西他濱的抗腫瘤活性。

實(shí)施例c：口服給藥活性化合物及其前藥后的組織分布

在大鼠中測(cè)定口服給藥后特定組織中產(chǎn)生三磷酸核苷的效率。

方法：

將核苷類(lèi)似物和它們的前藥以5-20mg/kg通過(guò)口服強(qiáng)飼向禁食的大鼠給藥。通過(guò)hplc-uv測(cè)定活性劑和前藥在血漿和門(mén)靜脈中的濃度，并且通過(guò)lc-ms使用標(biāo)準(zhǔn)色譜法測(cè)量肝、骨骼肌、心臟、腎、小腸和其它器官中的濃度。結(jié)果證明了前藥化合物的肝靶向性，并提供了前藥相對(duì)于活性劑改善的安全性的證據(jù)。

在本說(shuō)明書(shū)中使用的表示成分的量、反應(yīng)條件等的全部數(shù)值在所有情況下理解為通過(guò)術(shù)語(yǔ)“約”修飾。因此，除非有相反說(shuō)明，本文中示出的數(shù)值參數(shù)是近似值，其可根據(jù)尋求獲得的期望性質(zhì)而改變。至少，并且不試圖將等同理論的應(yīng)用限制到要求本申請(qǐng)優(yōu)先權(quán)的任何申請(qǐng)中的任何權(quán)利要求的范圍，應(yīng)根據(jù)有效數(shù)字的數(shù)值和普通的約數(shù)方法對(duì)各個(gè)數(shù)字參數(shù)進(jìn)行解釋。

以上說(shuō)明書(shū)公開(kāi)數(shù)種方法和材料?？蓪?duì)本發(fā)明的方法和材料進(jìn)行修改，也可對(duì)制備方法和設(shè)備進(jìn)行修改。根據(jù)對(duì)本文中公開(kāi)的本發(fā)明的公開(kāi)內(nèi)容或?qū)嵺`的考慮，這樣的修改對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員會(huì)是明顯的。因此，不意圖將本發(fā)明局限于本文中公開(kāi)的具體實(shí)施方案內(nèi)，相反，本發(fā)明涵蓋來(lái)自本發(fā)明實(shí)際范圍和精神內(nèi)的所有修改和替換。

將本文中所有引用的參考文獻(xiàn)(包括但不限于公布和未公布的申請(qǐng)、專(zhuān)利和參考文獻(xiàn))以其整體援引加入本文，并因此為本說(shuō)明書(shū)的一部分。如果援引加入的出版物和專(zhuān)利或?qū)＠暾?qǐng)與本說(shuō)明書(shū)中包含的公開(kāi)內(nèi)容相矛盾，本說(shuō)明書(shū)意圖替代和/或優(yōu)先于任何這樣相矛盾的材料。