本發(fā)明屬于生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，涉及一種對(duì)促紅細(xì)胞生成素結(jié)構(gòu)修飾獲得的促紅細(xì)胞生成素?cái)M肽。
背景技術(shù)：
：促紅細(xì)胞生成素是一種由腎臟合成并且分泌的活性糖蛋白，能夠結(jié)合紅細(xì)胞表面的促紅細(xì)胞生成素受體(EPOR)，刺激紅細(xì)胞的增生、分化和成熟，進(jìn)而增加貧血患者體內(nèi)的紅細(xì)胞數(shù)量，用以改善貧血狀況。分子量約34kD。血漿中存在的促紅細(xì)胞生成素由165個(gè)氨基酸組成，糖基化程度很高，糖的成分主要是唾液酸。根據(jù)碳水化合物含量不同,天然存在的促紅細(xì)胞生成素分為兩種類型即α型和β型，其中，α型含34％的碳水化合物，β型含26％的碳水化合物。兩種類型在生物學(xué)特性、抗原性及臨床應(yīng)用效果上均相同。人類促紅細(xì)胞生成素基因位于7號(hào)染色體長(zhǎng)22區(qū)。促紅細(xì)胞生成素(EPO)是腎臟產(chǎn)生的糖蛋白，主要作用于紅系祖細(xì)胞，促進(jìn)其增殖與成熟,在紅細(xì)胞生成的過(guò)程中EPO主要與其它生長(zhǎng)因子，如肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(SCF)、胰島素生長(zhǎng)因子(CIGF-1)共同協(xié)同作用于未成熟的紅系祖細(xì)胞。EPO主要作用于紅系祖細(xì)胞的增殖期與分化期，通過(guò)刺激其有絲分裂、激活紅系祖細(xì)胞特異基因，進(jìn)而使紅系祖細(xì)胞大量增殖與分化，EPO還能特性型阻斷紅系祖細(xì)胞從紅細(xì)胞集落形成單位細(xì)胞(CFU-E)到早幼紅細(xì)胞階段的正常細(xì)胞凋亡，促使紅系祖細(xì)胞的生長(zhǎng)與繁殖。EPO主要用于腎功能衰竭有關(guān)的貧血、腎小球間質(zhì)細(xì)胞功能下降造成的骨髓造血干細(xì)胞功能減弱。EPO及其受體激動(dòng)劑常用于伴有骨髓抑制的慢性腎炎或癌癥患者以及危重病人提高血紅蛋白水平和避免輸血。人EPOR的基因位于19號(hào)染色體上，裸肽分子質(zhì)量為55KDa，糖基化后為66KDa，由508個(gè)氨基酸殘基組成(包括24個(gè)氨基酸殘基的先導(dǎo)序列)。人的EPO受體位于紅系祖細(xì)胞的細(xì)胞膜表面，由膜外區(qū)跨膜區(qū)與胞內(nèi)區(qū)組成。胞質(zhì)部分缺少酪氨酸激酶的特征排列順序，所以不具備酪氨酸激酶活 性。在靠近跨膜區(qū)有BOX1和BOX2兩個(gè)同源盒，BOX1是EPOR與酪氨酸激酶相聯(lián)系的部位，跨膜區(qū)區(qū)域由24個(gè)疏水氨基酸構(gòu)成，細(xì)胞外部分由4個(gè)保守型半胱氨酸基組成的結(jié)構(gòu)區(qū)和WSXWS(Trp-Ser-X-Trp-Ser)構(gòu)型，與某些細(xì)胞白細(xì)胞介素同屬一個(gè)受體家族，在轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制上有一定的共性。目前已知能表達(dá)EPO受體的細(xì)胞主要為：紅系干細(xì)胞、巨核細(xì)胞干細(xì)胞。另外已經(jīng)發(fā)現(xiàn)EPO還可作用于中樞神經(jīng)細(xì)胞上的EPOR。近年來(lái)，已在非紅系血細(xì)胞和非造血干細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)了EPO的功能性受體，如髓系心肌細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞等。由于EPO能特異性的作用于EPOR從而發(fā)揮一定的生理活性，可見EPO在一些功能性疾病的治療中有很大的作用。EPO作為促進(jìn)紅細(xì)胞生成，增加紅細(xì)胞容量的主要激素，已廣泛應(yīng)用于臨床，其中腎性貧血是其主要應(yīng)用。典型的腎性貧血是正細(xì)胞正色素性貧血，通常在GFE＜20ml/min時(shí)發(fā)生。腎性貧血的原因包括：1、紅細(xì)胞壽命縮短，與氮質(zhì)血癥、紅細(xì)胞本身對(duì)滲透壓氧化損傷機(jī)制刺激的抵抗力下降、以及脾功能亢進(jìn)有關(guān)；2、血液丟失：包括透析失血、取血化驗(yàn)、隱性胃腸道失血等；3、紅細(xì)胞生成受抑制：EPO相對(duì)缺乏是腎性貧血最主要的原因。EPO也可用于非腎性貧血的治療。其對(duì)腫瘤相關(guān)性貧血、人類免疫缺陷病毒(HIV)相關(guān)貧血、骨髓移植相關(guān)貧血等方面也有良好的療效。早在1989年，美國(guó)FDA就正式批準(zhǔn)重組人促紅素(EPOGEN)用于腎性貧血的治療，但直到1992年重組人促紅素藥物才在我國(guó)上市。我國(guó)慢性腎炎的年發(fā)病率約為0.25％，其中相當(dāng)一部分患者最終會(huì)轉(zhuǎn)為腎衰，每年的腎性貧血患者約50-60萬(wàn)。根據(jù)保守的用藥量估算，如果按當(dāng)前的價(jià)格30-40元/支，加上癌癥相關(guān)性貧血等患者的用藥，國(guó)內(nèi)市場(chǎng)容量約12-16億元甚至更大(病人平均體重按50Kg計(jì)算)。自20世紀(jì)90年代后期，促紅細(xì)胞生成素已進(jìn)入我國(guó)重點(diǎn)城市醫(yī)院暢銷藥品行列，2003年在全國(guó)重點(diǎn)城市樣本醫(yī)院用藥金額6213萬(wàn)元，排名第56位。2004年，全國(guó)重點(diǎn)城市樣本醫(yī)院購(gòu)藥金額增長(zhǎng)到8049萬(wàn)元，同比增長(zhǎng)了30％。目前能夠作用促紅細(xì)胞生成素受體的肽已經(jīng)被確定。特別是確定了一組含有主要肽段的肽，這些肽可以和促紅細(xì)胞生成素受體結(jié)合并能剌激促紅細(xì)胞生成素細(xì)胞的分化增殖。中國(guó)專利ZL94109128.7公開了一種高糖基化的重組紅細(xì)胞生成刺激蛋白，臨床研究表明，體內(nèi)半衰期相比于重組 人EPO顯著延長(zhǎng)，中國(guó)專利ZL00809895.6公開了一種促紅細(xì)胞生成素與聚乙二醇的偶聯(lián)物，平均每月注射1次即可相當(dāng)于每周注射1-3次重組人EPO的效力。然而，這一類機(jī)制的藥物在體內(nèi)均會(huì)與EPO抗體發(fā)生交叉反應(yīng)，降低這一類藥物的療效。并且現(xiàn)有的重組人EPO藥物能夠刺激紅細(xì)胞增殖分化的肽的EC50都很低，僅在20nM和250nM之間，嚴(yán)重限制了重組人EPO的臨床應(yīng)用。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明提供了一種分支的促紅細(xì)胞生成素模擬肽，本發(fā)明的多肽化合物與EPO受體結(jié)合，發(fā)揮受體激動(dòng)作用，藉此治療與血紅細(xì)胞產(chǎn)生不足、缺陷或者過(guò)度消耗相關(guān)的疾病，本發(fā)明所使用的氨基酸除了包括本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的二十種常見氨基酸外還包括部分非常見氨基酸，非常見氨基酸結(jié)構(gòu)及名稱見表1表1非常見氨基酸的名稱和結(jié)構(gòu)本發(fā)明提供了一種促紅細(xì)胞生成素模擬肽，所述模擬肽的氨基酸序列如SEQIDNO:1所示：SEQIDNO：1：GGLYACHMGPITX1HCQPLRX2K；其中，X1為3-(1-萘基)-L-丙氨酸(Nal)，X2為肌氨酸(Sar)，所述氨基酸序列的氨基端經(jīng)乙?；揎?。即本發(fā)明的模擬肽的氨基酸序列具體為：(Ac)GGLYACHMGPITNalHCQPLRSarK。所述乙?；梢酝ㄟ^(guò)乙酸酐實(shí)現(xiàn)，乙酸酐的結(jié)構(gòu)如下本發(fā)明還提供了一種促紅細(xì)胞生成素模擬肽的復(fù)合物，所述復(fù)合物包括所述的模擬肽和鋅離子。在根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，所述復(fù)合物中每毫克所述模擬肽含有鋅離子0.0001mM～100mM；優(yōu)選地，每毫克所述模擬肽含有鋅離子0.001～0.1mM。另一方面本發(fā)明還提供了一種用于治療血紅細(xì)胞產(chǎn)生不足或缺陷相關(guān)的疾病的藥物組合物，所述藥物組合物包含一種或多種藥學(xué)上可接受的輔料以及所述模擬肽或復(fù)合物。在根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，所述藥物組合物的輔料選自水溶性填充劑、pH調(diào)節(jié)劑、穩(wěn)定劑、注射用水和滲透壓調(diào)節(jié)劑中的一種或多種。在根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，所述水溶性填充劑選自甘露醇、低分子右旋糖苷、山梨醇、聚乙二醇、葡萄糖、乳糖和半乳糖中的一種或多種。在根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，所述pH調(diào)節(jié)劑選自枸櫞酸、磷酸、乳酸、酒石酸、鹽酸等非揮發(fā)性的酸，以及氫氧化鉀、氫氧化鈉或氫氧化銨、碳酸鈉、碳酸鉀、碳酸銨鹽、碳酸氫鈉、碳酸氫鉀和碳酸氫銨鹽中的一種或多種。在根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，所述穩(wěn)定劑選自EDTA-2Na、硫代硫酸鈉、焦亞硫酸鈉、亞硫酸鈉、磷酸氫二鉀、碳酸氫鈉、碳酸鈉、精氨酸、谷氨酸、聚乙二醇6000、聚乙二醇4000、十二烷基硫酸鈉和三羥甲基氨基甲烷；優(yōu)選地選自以下的一種或多種：焦亞硫酸鈉、磷酸氫二鉀、精氨酸、聚乙二醇6000和三羥甲基氨基甲烷；所述滲透壓調(diào)節(jié)劑為氯化鈉和/或氯化鉀。再一方面，本發(fā)明還提供了所述的模擬肽復(fù)合物在制備用于治療與血紅細(xì)胞產(chǎn)生不足、血紅細(xì)胞缺陷或者血紅細(xì)胞過(guò)度消耗相關(guān)的疾病的藥物中的應(yīng)用；優(yōu)選地，所述與血紅細(xì)胞產(chǎn)生不足、血紅細(xì)胞缺陷或者血紅細(xì)胞過(guò)度消耗相關(guān)的疾病為以缺乏紅細(xì)胞生成素或紅細(xì)胞群缺少或缺陷為特征的疾病。優(yōu)選地，所述以缺乏紅細(xì)胞生成素或紅細(xì)胞群缺少或缺陷為特征的疾 病選自末期腎功能衰竭或透析、AIDS相關(guān)性貧血、自身免疫性疾病、惡性腫瘤、囊性纖維變性、早期早熟性貧血、與慢性炎性疾病相關(guān)的貧血、脊髓損傷、急性失血、衰老和伴有異常紅細(xì)胞產(chǎn)生的腫瘤疾病中的一種或多種。本發(fā)明的藥物組合物可以通過(guò)肌肉、靜脈內(nèi)、皮下注射途經(jīng)進(jìn)行給藥，優(yōu)選的劑型為凍干粉或溶液注射劑。冷凍干燥注射劑的制備方法：取促紅細(xì)胞生成素模擬肽或復(fù)合物溶液適量，加入水溶性填充劑、穩(wěn)定劑、滲透壓調(diào)節(jié)劑等，加入注射用水適量，調(diào)節(jié)pH值至4-8使其溶解，加水稀釋至適當(dāng)濃度，加入0.1-0.5％活性炭，在0-10℃下攪拌10-20分鐘，脫碳，采用微孔濾膜過(guò)濾除菌，濾液進(jìn)行分裝，采用冷凍干燥法，制得白色疏松塊狀物，封口即得，每個(gè)規(guī)格分別含有的促紅細(xì)胞生成素模擬肽或復(fù)合物5μg，100μg以及1mg。注射液的制備方法：取促紅細(xì)胞生成素模擬肽或復(fù)合物的溶液或凍干粉適量，加入水溶性填充劑、穩(wěn)定劑、滲透壓調(diào)節(jié)劑等，加入注射用水適量，調(diào)節(jié)pH值至4-8使其溶解，加水稀釋至適當(dāng)濃度，加入0.1-0.5％活性炭，在0-10℃下攪拌10-20分鐘，脫碳，采用微孔濾膜過(guò)濾除菌，濾液進(jìn)行分裝，封口即得，每個(gè)規(guī)格分別含有的促紅細(xì)胞生成素模擬肽或復(fù)合物5μg，100μg以及1mg。本發(fā)明的藥物組合物可以通過(guò)肌肉、靜脈內(nèi)、皮下注射途經(jīng)進(jìn)行給藥，優(yōu)選的劑型為凍干粉或溶液注射劑。雖然劑量依治療對(duì)象、給藥方式、癥狀及其它因素而改變，本發(fā)明的組合物在相當(dāng)寬的劑量范圍內(nèi)是有效的。在成人的治療中，劑量范圍在50μg/人-10mg/人，每日一次或每幾日一次給藥。實(shí)際劑量應(yīng)該由醫(yī)生根據(jù)有關(guān)的情況來(lái)決定，這些情況包括被治療者的身體狀態(tài)、給藥途徑、年齡、體重、患者對(duì)藥物的個(gè)體反應(yīng)，患者癥狀的嚴(yán)重程度等等，因此上述劑量范圍并不是以任何方式限制本發(fā)明的范圍。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本專利涉及的促紅細(xì)胞生成素模擬肽及其復(fù)合物能夠明顯刺激小鼠外周血網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的升高，說(shuō)明它們刺激紅細(xì)胞生成，同時(shí)還能夠大大延長(zhǎng)藥物在體內(nèi)的半衰期。促紅細(xì)胞生成素模擬肽和促紅細(xì)胞生成素蛋白對(duì)成熟的紅細(xì)胞、血細(xì)胞壓積、血紅蛋白含量沒(méi)有明顯的影響，對(duì)外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)液沒(méi)有明顯影響。具體實(shí)施方式下面結(jié)合具體實(shí)施方式對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步的詳細(xì)描述，給出的實(shí)施例僅為了闡明本發(fā)明，而不是為了限制本發(fā)明的范圍。在以下的實(shí)施例中，未詳細(xì)描述的各種過(guò)程和方法是本領(lǐng)域中公知的常規(guī)方法。本發(fā)明的復(fù)合物的制備方法：按照摩爾濃度稱取適量的促紅細(xì)胞生成素模擬肽溶于適量的生理鹽水、純水或PBS緩沖液中，稱取適量的鋅鹽，溶于適量的生理鹽水(或PBS、水)中，在0-5℃溫度下，超聲混合1-15分鐘，或者攪拌1-3小時(shí)，或者放置過(guò)夜。按照這種方法處理后鋅離子濃度為每毫克多肽含有鋅離子0.0001、0.001、0.01、0.1、1、10、100mM，所制備得到的溶液可以直接加輔料做成制劑，也可以冷凍干燥后再與其他輔料一起制成制劑。注：PBS為磷酸鹽。實(shí)施例1SEQIDNO:1的合成固相合成的方向?yàn)镃末端到N末端，以SEQIDNO：1所示肽段的C端賴氨酸起始，延長(zhǎng)序列的第一個(gè)氨基酸(甘氨酸或者乙?；母拾彼?，然后同時(shí)或先后脫除該連接體賴氨酸的ε-氨基保護(hù)基，進(jìn)行第二個(gè)支鏈的繼續(xù)合成。步驟如下：浸泡樹脂，脫除樹脂的氨基保護(hù)基，洗滌并監(jiān)測(cè)α-氨基保護(hù)基和樹脂氨基保護(hù)基Fmoc的脫除選用哌啶(PIP)，濃度20-25％(PIP：DMF)，時(shí)間為20-50min，合成過(guò)程中所用溶劑選自二甲基甲酰胺(DMF)或二氯甲烷(DCM)，偶聯(lián)試劑選自碳二亞胺型試劑或苯并三氮唑鎓鹽型試劑中的一種，與1-羥基苯并三唑(HOBt)或N,N-二異丙基乙胺(DIEA)中的一種的組合。其中，碳二亞胺型試劑包括二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)、二異丙基碳二亞胺(DIC)及N-二氨基丙基-N-乙基碳二亞胺(EDC)。苯并三氮唑鎓鹽型試劑包括2-(1H-苯并三偶氮L-1-基)-1，1，3，3-四甲基脲四氟硼酸酯(TBTU)、O-苯并三唑-N,N,N′，N′-四甲基脲六氟磷酸鹽(HBTU)、六氟磷酸苯并三唑-1-氧基三(二甲氨基)磷(BOP)、六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷(PyBOP)等。乙酰化試劑可選擇使用乙酸、乙酸酐或者其鹵化衍生物(如α-氯乙酸等)，同時(shí)選用吡啶或DIEA等形成堿性反應(yīng)環(huán)境。本發(fā)明優(yōu)選為乙酸酐和DIEA。監(jiān)測(cè)方法選用茚三酮檢測(cè)法為主，TNBS檢測(cè)法作為輔助監(jiān)測(cè)方法。乙?；Y(jié)束后，真空干 燥樹脂，稱重。按1g樹脂10mL裂解試劑的比例加入裂解試劑(試劑配比：TFA：茴香硫醚：三異丙基硅烷：苯酚：水：TIS＝85：5：5：4：1)，室溫?cái)嚢璺磻?yīng)3小時(shí)，抽濾。向裂解抽濾液中加入冰乙醚，沉淀多肽，離心，棄上清，真空干燥，稱重得到粗肽。用制備型HPLC，采用反相色譜法，純化上述粗肽獲得本發(fā)明的促紅細(xì)胞生成素模擬肽。實(shí)施例2提高體外外內(nèi)源性紅細(xì)胞生成素的產(chǎn)生本發(fā)明所選擇的序列為：SEQIDNO：1，鋅離子濃度為0.0001、0.01、0.1、1、10、100mM。將衍生源自肝癌(Hep3B)的人細(xì)胞接種到35mm培養(yǎng)皿中，使其在37℃、20％O2、5％CO2條件下在極限必需培養(yǎng)基(MEM)、Earle平衡鹽溶液(MediatechInc.，HerndonVA)、2mML-谷氨酰胺、0.1mM非必需氨基酸、1mM丙酮酸鈉和1％FBS中生長(zhǎng)。當(dāng)細(xì)胞層鋪滿時(shí)，用OPTI-MEM培養(yǎng)基(InvitrogenLifeTechnologies，CarlsbadCA)替換原先的培養(yǎng)基，然后在37℃、20％O2、5％CO2的條件下培養(yǎng)細(xì)胞層約24小時(shí)。然后，將本發(fā)明的化合物與不同濃度的鋅離子混合而成的溶液或不同濃度的鋅離子(陰性對(duì)照)加到現(xiàn)在的培養(yǎng)基中，繼續(xù)培養(yǎng)過(guò)夜。在培養(yǎng)后，從細(xì)胞培養(yǎng)物中收集條件培養(yǎng)基，免疫試驗(yàn)(R&DSystems，Inc.，MinneapolisMN)分析紅細(xì)胞生成素的表達(dá)。用本發(fā)明的化合物處理的肝衍生的細(xì)胞(Hep3B)的紅細(xì)胞生成素表達(dá)明顯提高。因此，本發(fā)明化合物能提高動(dòng)物中通常產(chǎn)生紅細(xì)胞生成素的組織衍生的細(xì)胞體外表達(dá)紅細(xì)胞生成素。實(shí)施例3促紅細(xì)胞生成素模擬肽對(duì)小鼠的作用采用小鼠評(píng)價(jià)并比較在不同鋅離子濃度下的促紅細(xì)胞生成素模擬肽及促紅細(xì)胞生成素蛋白對(duì)小鼠紅細(xì)胞生成的影響。本發(fā)明所選擇的序列為：SEQIDNO:1，鋅離子濃度為每毫克多肽含有鋅離子0.0001、0.001、0.01、0.1、1、10、100mM。其中，EPO藥品購(gòu)自沈陽(yáng)三生制藥有限責(zé)任公司；昆明種小鼠，購(gòu)自中科院上海實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，體重20～30g，均為雄性小鼠，試驗(yàn)中各組動(dòng)物數(shù)：10只，分為10組。其中，陽(yáng)性對(duì)照組小鼠注射促紅細(xì)胞生成素蛋白，陰性對(duì)照組小鼠為空白對(duì)照，注射含有0.0001、0.001、0.01、0.1、1、10、100mM鋅離子的生理 鹽水，實(shí)驗(yàn)組1～8分別為小鼠分別皮下注射促紅細(xì)胞生成素模擬肽與0、0.0001、0.0001、0.001、0.01、0.1、1、10、100mM鋅離子的生理鹽水溶液，劑量均為4.5mg/kg，連續(xù)三天，然后處死小鼠，取全血進(jìn)行外周血細(xì)胞及網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)，血細(xì)胞計(jì)數(shù)用全自動(dòng)血球計(jì)數(shù)儀計(jì)數(shù)。結(jié)果如表2所示，發(fā)現(xiàn)促紅細(xì)胞生成素模擬肽與不同濃度鋅離子形成的復(fù)合物及促紅細(xì)胞生成素蛋白均能明顯刺激小鼠外周血網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的升高，而本發(fā)明的模擬肽的復(fù)合物更能顯著剌激紅細(xì)胞生成(見表2)。表2、促紅細(xì)胞生成素模擬肽對(duì)小鼠網(wǎng)織紅細(xì)胞生成的影響名稱含鋅離子的生理鹽水劑量網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù)目空白4.5mg/kg110.05±1.94實(shí)驗(yàn)組14.5mg/kg526.33±2.07實(shí)驗(yàn)組24.5mg/kg538.57±2.04實(shí)驗(yàn)組34.5mg/kg584.57±2.73實(shí)驗(yàn)組44.5mg/kg632.22±2.38實(shí)驗(yàn)組54.5mg/kg644.36±3.05實(shí)驗(yàn)組64.5mg/kg576.92±2.61實(shí)驗(yàn)組74.5mg/kg563.49±2.53實(shí)驗(yàn)組84.5mg/kg550.64±2.54EPO4.5mg/kg509.32±1.98實(shí)施例4促紅細(xì)胞生成素模擬肽對(duì)大鼠的作用采用大鼠評(píng)價(jià)并比較促紅細(xì)胞生成素模擬肽及促紅細(xì)胞生成素蛋白對(duì)大鼠紅細(xì)胞生成的影響。其中，EPO藥品購(gòu)自沈陽(yáng)三生制藥有限責(zé)任公司；SD大鼠，購(gòu)自中科院上海實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，體重250g～300g，均為雄性大鼠，試驗(yàn)中各組動(dòng)物數(shù)：10只，分為3組。其中，實(shí)驗(yàn)組1為：每毫克含0.01mM鋅離子的促紅細(xì)胞生成素模擬肽；實(shí)驗(yàn)組2為：每毫克含0.1mM鋅離子的促紅細(xì)胞生成素模擬肽；對(duì)照組大鼠注射不加鋅離子的促紅細(xì)胞生成素模擬肽；另設(shè)一組大鼠為空白對(duì)照，含鋅離子的生理鹽水，劑量均為4.5mg/kg，單次給藥后，連續(xù)三天取血進(jìn)行外周血細(xì)胞及網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)，血細(xì)胞計(jì)數(shù)用全自動(dòng)血球計(jì)數(shù)儀計(jì)數(shù)，并計(jì)算模擬肽的長(zhǎng)效性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)含0.01、0.1mM每毫克鋅離子的促紅細(xì)胞生成 素模擬肽的復(fù)合物在單次給藥后2周內(nèi)依然具有刺激紅細(xì)胞生成作用，結(jié)果見表3。表3促紅細(xì)胞生成素模擬肽及促紅細(xì)胞生成素蛋白對(duì)大鼠紅細(xì)胞生成的影響盡管本發(fā)明已進(jìn)行了一定程度的描述，明顯地，在不脫離本發(fā)明的精神和范圍的條件下，可進(jìn)行各個(gè)條件的適當(dāng)變化?？梢岳斫?，本發(fā)明不限于所述實(shí)施方案，而歸于權(quán)利要求的范圍，其包括所述每個(gè)因素的等同替換。當(dāng)前第1頁(yè)1 2 3