專利名稱：超臨界CO₂萃余液中提取及純化大蒜多糖的方法及大蒜多糖在制備酸奶中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種超臨界CO2逆流萃取及純化大蒜多糖的方法及大蒜多糖在制備酸奶中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
大蒜為百合科蔥屬多年生草本植物生蒜Sativum L.)的地下鱗莖。它原產(chǎn)于歐洲南部和亞洲西部，最早在古埃及、古羅馬和古希臘等地中海沿岸國家栽培；公元前116年，由張騫從西域引入中國陜西漢中地區(qū)，以后遍及全國；9世紀(jì)初傳入日本；16世紀(jì)前葉擴(kuò)展到非洲和南美洲，18世紀(jì)后葉北美開始栽培，現(xiàn)在己遍及全世界，我國的各省區(qū)多有栽培。
由于大蒜的多種藥理作用，使之成為常用的中藥和重要的保健食品之一。從古至今，人類對其食用和藥用價值從認(rèn)識到研究，經(jīng)歷了一個漫長的過程，現(xiàn)如今已有了突破性的進(jìn)展，大蒜以無過敏反應(yīng)、無副作用、無毒性的獨特優(yōu)點，己跨入了醫(yī)藥領(lǐng)域。近年來國內(nèi)外學(xué)者專家對大蒜的生理作用、藥理作用和臨床應(yīng)用加強了研究，經(jīng)研究證實大蒜有以下幾方面的作用
1)研究認(rèn)為大蒜提取物中的皂角苷類物質(zhì)有降低膽固醇的作用，減少得心血管疾病的危險。另外，大蒜還有改變凝血時間的作用；
2)研究認(rèn)為大蒜中的甲基硒代胱氨酸和Y-谷氨酰-S-烷基硒代胱氨酸可能是大蒜中的抗癌物質(zhì)；大蒜還具有降低胃液中致癌物亞硝酸鹽、亞硝胺的作用和抗染色體畸變等作用；
3)大蒜中的二烯丙基二硫化物和阿霍烯能夠抑制HIV病毒的繁殖；
4)有研究人員發(fā)現(xiàn)大蒜有降低血糖的作用，其機理可能是大蒜促進(jìn)胰島素的合成，增加組織細(xì)胞對葡萄糖的吸收利用；
5)有資料表明大蒜浸提液對機體細(xì)胞免疫功能具有明顯的增強作用，試驗發(fā)現(xiàn)大蒜注射液對小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬機能有明垃促進(jìn)作用，淋巴母細(xì)胞轉(zhuǎn)化率和玫瑰花瓣狀反應(yīng)均顯著增高；
6)在小鼠膳食中添加5%的蒜粉可增加肝細(xì)胞膜的完整性、增加谷胱甘肽的含量和谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶的活性；
7)大蒜中的果膠質(zhì)類多糖有促進(jìn)有絲分裂、調(diào)節(jié)腸道免疫系統(tǒng)、抗?jié)兊淖饔茫?br> 8)大蒜的提取物可以作為過氧化物陰離子的清潔工，對黃曲霉毒素BI等真菌毒素的傷害有保護(hù)作用；飼喂或注射大蒜提取液可預(yù)防眼鏡蛇的蛇毒液對小鼠肝和胃組織的損害?，F(xiàn)在普遍認(rèn)為，大蒜所具有的醫(yī)療保健功能是與其富含的大蒜素、有機鍺、硒、超氧化歧化酶(SOD)等活性成分有關(guān)。鮮蒜中的碳水化合物含量可達(dá)26. 5%，其中少部分碳水化合物是以糖蛋白的形式存在，如大蒜的蒜氨酸酶分子含有5%木糖，洋蔥中蒜氨酸酶分子含有1%木糖，含有木糖的多聚糖增加了它所依附的蛋白的免疫原性，因此Frank認(rèn)為碳水化合物構(gòu)成的不同，決定了大蒜、洋蔥免疫學(xué)性質(zhì)上的差異。低聚果糖(FOS)是由蔗糖和f 3個果糖通過B. 1，2鍵與蔗糖中的果糖基結(jié)合而成的蔗果三糖、蔗果四糖和蔗果五糖及其混合物，它在人體腸道內(nèi)不被消化吸收，熱量值低，到達(dá)大腸內(nèi)可被雙歧桿菌利用，并能顯著抑制有害菌，是雙歧桿菌增殖因子。FOS存在于經(jīng)常食用的天然植物，例如香蕉、球蔥、大蒜、西紅柿、蘆筍和菊芋等植物中，F(xiàn)OS約占大蒜總糖質(zhì)的3. 9%。大蒜中發(fā)現(xiàn)的典型三糖是蔗果三糖和新蔗果三糖，蔗果三糖是大蒜中果聚糖的基礎(chǔ)，大蒜中低聚果糖和多聚果糖的總含量在12. 59Γ23. 5% (濕重)，大蒜增進(jìn)健康的作用與二 者密切相關(guān)。在大蒜腌制品的乳酸發(fā)酵過程中由于果聚糖的水解，可使產(chǎn)品風(fēng)味更佳。大蒜多糖的提取方法包括熱水提取法，酶法提取，酸堿提取等，然而，現(xiàn)有技術(shù)中，大蒜多糖的提取純度一般不高，而且步驟繁瑣，也沒有較好的開發(fā)大蒜多糖在飲食中的飲用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種超臨界CO2逆流萃取及純化大蒜多糖的方法及大蒜多糖在制備酸奶中的應(yīng)用。本發(fā)明所采取的技術(shù)方案是
超臨界CO2萃余液中提取及純化大蒜多糖的方法，包括以下步驟
1)鮮蒜切碎后與水混合，向其中加入果膠酶進(jìn)行充分酶解；
2)超臨界C02逆流萃取上步充分酶解后的產(chǎn)物，得到大蒜多糖的水溶液；
3)將含有大蒜多糖的水溶液進(jìn)行初除蛋白，除果膠，Sevag法復(fù)除蛋白，乙醇分級醇析，制粗多糖溶液；
4)將上步得到的粗多糖溶液充分靜置沉淀，將沉淀干燥粉碎即可。鮮蒜與水的質(zhì)量比為I: (I. 5-2)。果膠酶的用量為鮮蒜質(zhì)量的O. 4-0. 6%ο酶解的溫度為45_47°C。所述的酶解為半密封有氧酶解。大蒜多糖在制備酸奶中的應(yīng)用，將提取及純化得到的大蒜多糖、雙歧桿菌、當(dāng)歸精油、純牛奶混合，進(jìn)行發(fā)酵至得到酸奶即可。大蒜多糖、雙歧桿菌、當(dāng)歸精油、純牛奶的用量比為(l-5g) (O. 2-0. 5g)(O.05-0. 15ml) :330ml。本發(fā)明的有益效果是本發(fā)明提取純化大蒜多糖的方法簡單，產(chǎn)率較高，將大蒜多糖應(yīng)用于制備酸奶中，獲得了營養(yǎng)價值較高的食品。


圖I為大蒜多糖的紅外圖譜。
具體實施例方式下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明做進(jìn)一步的說明
實施例I:
一種提取及純化大蒜多糖的方法，包括以下步驟
1)原料的前處理鮮蒜切碎后用與水混合，其中，鮮蒜水=1:1.5 (質(zhì)量比)，再加入果膠酶(液體果膠酶，Novozymes公司，酶活5000FDU/ml)進(jìn)行酶解3_4h，其中果膠酶的用量為鮮蒜質(zhì)量的0.4%，采用的儀器為恒溫振蕩器，酶解條件為溫度45°C，時間150Min，振速為120rpm,半密封有氧酶解；
將酶解后的產(chǎn)物置入萃取釜中，通入二氧化碳，通過高壓泵將壓力升高至1(T35 MPa,溫度設(shè)定為32 50°C，靜態(tài)萃取；
2)開動高壓泵動態(tài)萃取，萃取壓1(T35MPa ;萃取溫度32 5(TC;再通過一級分離釜和·二級分離釜進(jìn)行分離；
3)萃取完畢后，從二級分離釜中放出大蒜油；
4)從萃取釜的放液口放出含有大蒜多糖的萃余液；
5)向脫脂粗多糖液中加入冰醋酸調(diào)pH至4.5,然后離心(1000 r/min, 10 min,共兩次)，得除去部分蛋白質(zhì)的上清液；
6)將初除蛋白的汁液用氨水調(diào)至pH=8.5，然后再加入5wt%的CaCl2溶液至Ca2+濃度為O. I mol/L,離心(1000 r/min, 10 min),得除去果膠的粗多糖液；
7)取氯仿-正丁醇(預(yù)先配制成體積比為41混合液)溶液加入到上述粗多糖液中，加入量為粗多糖液體積的1/3，充分?jǐn)嚢?0 min后離心(4000 r/min, 5 min)，將所得上清液重復(fù)此步操作數(shù)次，直至除盡蛋白質(zhì)，即得到除去蛋白質(zhì)的多糖液；
8)用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀除去60-80vol%的水，向裝有上述已知體積多糖液的燒杯中分5次等量添加無水乙醇，當(dāng)燒杯中乙醇濃度達(dá)到50%(v/v)時，停止滴加乙醇，將混合液放入冰箱中靜置24h，收集沉淀出的多糖，真空干燥粉碎即為醇析多糖粉；
經(jīng)過計算，最后的產(chǎn)率為25%。如圖I為大蒜多糖的紅外圖譜。實施例2:
大蒜多糖在制備酸奶中的應(yīng)用，將實施例I得到的大蒜多糖、雙歧桿菌、當(dāng)歸精油、純牛奶混合，進(jìn)行發(fā)酵至得到酸奶即可；大蒜多糖、雙歧桿菌、當(dāng)歸精油、純牛奶的用量比為(l-5g)(0.2-0. 5g) (0. 05-0. 15ml):330ml。具體的制作步驟如下
O首先將需要用到的玻璃儀器，藥勺置于高壓殺菌鍋內(nèi)殺菌消毒；
2)按配方向殺菌消毒后的錐形瓶中倒入牛奶并加入菌種，用報紙和棉花密封；
3)最后發(fā)酵貯存將裝有接了菌種的牛奶的錐形瓶放入恒溫水浴鍋中，調(diào)至38°C，發(fā)酵6 8小時即可。經(jīng)過10名志愿者服用，結(jié)果表明志愿者都認(rèn)為加了大蒜多糖后，酸奶口感變得溫和滑膩；而當(dāng)歸精油，散發(fā)濃烈當(dāng)歸香氣，掩蓋了酸奶以及大蒜多糖的原本風(fēng)味。
權(quán)利要求
1.超臨界CO2萃余液中提取及純化大蒜多糖的方法，其特征在于包括以下步驟 1)鮮蒜切碎后與水混合，向其中加入果膠酶進(jìn)行充分酶解； 2)超臨界CO2逆流萃取上步充分酶解后的產(chǎn)物，得到大蒜多糖的水溶液； 3)將含有大蒜多糖的水溶液進(jìn)行初除蛋白，除果膠，Sevag法復(fù)除蛋白，乙醇分級醇析，制粗多糖溶液； 4)將上步得到的粗多糖溶液充分靜置沉淀，將沉淀干燥粉碎即可。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種超臨界CO2萃余液中提取及純化大蒜多糖的方法，其特征在于鮮蒜與水的質(zhì)量比為I: (I. 5-2)。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種超臨界CO2萃余液中提取及純化大蒜多糖的方法，其特征在于果膠酶的用量為鮮蒜質(zhì)量的O. 4-0. 6%。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種超臨界CO2萃余液中提取及純化大蒜多糖的方法，其特征在于酶解的溫度為45-47°C。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種超臨界CO2萃余液中提取及純化大蒜多糖的方法，其特征在于所述的酶解為半密封有氧酶解。
6.大蒜多糖在制備酸奶中的應(yīng)用，其特征在于將按照權(quán)利要求I的方法提取及純化得到的大蒜多糖、雙歧桿菌、當(dāng)歸精油、純牛奶混合，進(jìn)行發(fā)酵至得到酸奶即可。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種大蒜多糖在制備酸奶中的應(yīng)用，其特征在于大蒜多糖、雙歧桿菌、當(dāng)歸精油、純牛奶的用量比為(l_5g) :(0. 2-0. 5g) (0. 05-0. 15ml) :330ml。
全文摘要
本發(fā)明公開了超臨界CO2逆流萃取及純化大蒜多糖的方法，包括以下步驟1)鮮蒜切碎后與水混合，向其中加入果膠酶進(jìn)行充分酶解；2)超臨界CO2逆流萃取上步充分酶解后的產(chǎn)物，得到大蒜多糖的水溶液；3)將含有大蒜多糖的水溶液進(jìn)行初除蛋白，除果膠，Sevag法復(fù)除蛋白，乙醇分級醇析，制粗多糖溶液；4)將上步得到的粗多糖溶液充分靜置沉淀，將沉淀干燥粉碎即可。大蒜多糖在制備酸奶中的應(yīng)用，將按萃取及純化得到的大蒜多糖、雙歧桿菌、當(dāng)歸精油、純牛奶混合，進(jìn)行發(fā)酵至得到酸奶即可。本發(fā)明提取純化大蒜多糖的方法簡單，產(chǎn)率較高，將大蒜多糖應(yīng)用于制備酸奶中，獲得了營養(yǎng)價值較高的食品。
文檔編號C08B37/00GK102911277SQ20121034012
公開日2013年2月6日 申請日期2012年9月14日 優(yōu)先權(quán)日2012年9月14日
發(fā)明者劉特彬 申請人:廣州市衛(wèi)斯理日化實業(yè)有限公司