瘺管型克羅恩病的治療的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及克羅恩病的領(lǐng)域，特別涉及使用抗IL-13抗體治療克羅恩病中的瘺管。所述抗體可以是IgG，且特別可以是抗IL-13抗體0195i/G12。
【專利說明】瘺管型克羅恩病的治療
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及克羅恩病的領(lǐng)域。特定地，本發(fā)明涉及使用抗IL-13抗體治療克羅恩病中的瘺管。所述抗體可以是IgG，特別可以是抗IL-13抗體01951/G12。
【背景技術(shù)】
[0002]克羅恩病(CD)是胃腸(GI)道的慢性、復(fù)發(fā)/緩和炎性疾病。最常受⑶影響的GI道區(qū)域是小腸和結(jié)腸，包括肛門直腸。⑶的炎癥和潰瘍能擴(kuò)展遍及小腸和大腸的所有腸壁層。CD的常見癥狀包括腹瀉、腹痛、直腸出血、體重減輕以及并發(fā)癥如腸道膿腫、瘺管、和腸梗阻。⑶能以許多不同方式稱為臨床上明顯的，包括纖維狹窄(狹窄)、或非穿透性、非狹窄(炎性)、或主要為穿孔型(瘺管型)疾病。瘺管型CD病患者往往有更具攻擊性的病程。瘺管可以是外部(腸外或肛周)或內(nèi)部的，如小腸-腸或小腸-囊。CD瘺管的累積發(fā)病率在診斷后10和20年分別為33%和50%。
[0003]病態(tài)在瘺管病患者中大幅增加，對患者生活質(zhì)量產(chǎn)生顯著負(fù)面影響。肛周瘺管能引起大便失禁、膿腫形成和肛管狹窄；其可進(jìn)一步與疼痛、膿腫和引流相關(guān)。瘺管治療取決于許多因素，包括位置、嚴(yán)重性和既往手術(shù)史。
[0004]總體上，⑶瘺管難以治療，很少自發(fā)治愈且經(jīng)常需要手術(shù)。引入生物制劑前，大部分瘺管需要手術(shù)干預(yù)，瘺管復(fù)發(fā)率估計(jì)為30-40%(1-3)。目前的治療標(biāo)準(zhǔn)是抗生素(甲硝噠唑/環(huán)丙沙星一一線)、免疫抑制劑(6-MP/咪唑硫嘌呤一二線)和生物制品(抗TNF α劑一三線，或‘自上而下(top-down) ’ 一線)。測試衣賴磷酸酶抑制劑。值得注意的是，一些瘺管型克羅恩病的標(biāo)準(zhǔn)療法(如`咪唑硫嘌呤和6-MP)是致畸的。
[0005]生物制品的出現(xiàn)拓展了治療處理的選擇并將醫(yī)師治療瘺管的目標(biāo)從減少瘺管引流變?yōu)榀浌荛]合。然而，約50%患者不響應(yīng)抗TNFa治療劑，因此,鑒于產(chǎn)生與激進(jìn)外科手術(shù)相關(guān)的失禁風(fēng)險(xiǎn)，就克羅恩病的瘺管治療而言仍然迫切需要新型和改善的療法。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]已發(fā)現(xiàn)IL-13介導(dǎo)的信號傳導(dǎo)可有助于克羅恩病患者的瘺管形成。因此，本發(fā)明提供用于治療或預(yù)防克羅恩病患者的瘺管的抑制或中和IL-13活性的抗IL-13抗體。還提供抑制或中和IL-13活性的抗IL-13抗體在制備用于治療或預(yù)防克羅恩病患者瘺管的藥物中的應(yīng)用，以及治療或預(yù)防克羅恩病患者瘺管形成的方法，所述方法包含將抑制或中和IL-13活性的抗IL-13抗體給予需要的對象。
[0007]本發(fā)明的抗體優(yōu)選包含一種或多種選自下表的⑶R: (a) SEQ ID N0:l、2、6或7所示的 Vh CDR1，(b)SEQ ID N0:3 或 8 所示的 Vh CDR2，(c) SEQ ID NO: 4、5、9 或 10 所示的 VhCDR3, (d)SEQ ID NO: 11、16、17 或 18所示的 Vl CDRl, (e) SEQ ID NO: 12 或 19所示的 Vl CDR2,(f) SEQ ID N0:13、14、15、20、21 或 22 所示的 Vl CDR3。
[0008]本發(fā)明的抗體優(yōu)選包含具有SEQ ID NO:7的重鏈可變區(qū)CDRl ;具有SEQ ID NO:8的重鏈可變區(qū)CDR2 ;具有SEQ ID NO: 10的重鏈可變區(qū)CDR3 ;具有SEQ ID NO: 17的輕鏈可變區(qū)⑶Rl;具有SEQ ID NO: 19的輕鏈可變區(qū)⑶R2 ;和具有SEQ ID N0:21的輕鏈可變區(qū)CDR3。[0009]所提供的抗體優(yōu)選包含如SEQ ID NO: 31所示的重鏈可變區(qū)和如SEQ ID NO: 33所示的輕鏈可變區(qū)，更優(yōu)選所述抗體包含如SEQ ID NO:41所示的重鏈和如SEQ ID N0:39所示的輕鏈。
[0010]所提供的抗體優(yōu)選以I X IO-9M或更小的Kd結(jié)合IL-13。所提供的抗體優(yōu)選用藥學(xué)上可接受的載體配制。
[0011]在所提供的發(fā)明抗體、應(yīng)用或方法的優(yōu)選實(shí)施方式中，所述抗體與抗炎治療劑順序或同時(shí)共給予。
[0012]本發(fā)明還提供含有第一組成部分和第二組成部分的試劑盒，其中所述第一組成部分是抗IL-13抗體或含抗IL-13抗體的藥物組合物，且所述第二組成部分是說明書。
[0013]所提供的試劑盒還可包括含有以下一種或多種的第三組成部分:注射器或其他遞送裝置、佐劑、或藥學(xué)上可接受的配制溶液。
[0014]附圖簡要說明
[0015]圖1.TGFβ誘導(dǎo)IL-13從瘺管結(jié)腸固有層成纖維細(xì)胞(CLPF)分泌。獲自非瘺管(n=2)或瘺管型疾病(n=3)患者的CLPF用TGF β (50ng/ml)處理。柱狀圖顯示(A) SNAILl或(B) SLUG相對于各未處理對照的mRNA水平。(C)非瘺管(n=3)和瘺管(n=5) CLPF用TGF β處理。柱狀圖顯示以pg/ml計(jì)的細(xì)胞上清中的IL-13濃度。(D)瘺管CLPF用TGF0 (50ng/ml)或TNF(100ng/ml)處理且PTPN2和加樣對照β -肌動(dòng)蛋白的蛋白水平由代表性Western印跡(n=3)顯示。柱狀圖顯示上述Western印跡所示細(xì)胞的細(xì)胞上清中的IL-13濃度。(E)T84細(xì)胞用非特異性或PTPN2特異性siRNA構(gòu)建體轉(zhuǎn)染并用TNF(100ng/ml)處理。柱狀圖以各對照(n=4)的百分比顯示細(xì)胞上清中的IL-13濃度。(F)PTPN2和加樣對照β-肌動(dòng)蛋白在經(jīng)TGFP (50ng/ml)處理的HT29IEC中的蛋白水平由代表性Western印跡(n=3)顯示。星號表示未處理的非瘺管CLPF(C)或各對照(E)的顯著差異(*=p〈0.05)。#=p〈0.05相比24小時(shí)TNF處理對照siRNA細(xì)胞。
[0016]圖2.⑶患者的瘺管樣本中的IL-13和IL-URa1蛋白。對手術(shù)切除的瘺管進(jìn)行免疫組化染色(A) IL-13在覆蓋瘺管的細(xì)胞(灰色箭頭)以及瘺管毗鄰變形隱窩的IEC中清晰可見。具有正常表觀的隱窩的IEC幾乎沒有任何IL-13染色特征(白色箭頭)。(B)IL-1SRa1顯示與IL-13相似的染色模式。其在覆蓋瘺管的細(xì)胞以及瘺管毗鄰變形隱窩的IEC中清楚可檢測。對于各染色，顯示來自2個(gè)獨(dú)立患者的2個(gè)不同瘺管的圖像且可代表所有研究的瘺管(n=7)。右列的圖片顯示左列圖片(放大:5倍)的放大照片(放大:40倍)。
[0017]圖3.1L-13誘導(dǎo)HT29IEC中SLUG和b6_整合素的mRNA水平。HT29細(xì)胞分別用IL-13(100ng/ml)處理30分鐘或24小時(shí)。柱狀圖顯示(A) SLUG (n=3)、(B) β 6-整合素(η=3)、(C) SNAILl (η=3)、(D) TGF β (η=3)和(E) ΡΤΡΝ2 相對于各對照的 mRNA 水平。(F) HT29細(xì)胞用非特異性或SLUG特異性siRNA構(gòu)建體轉(zhuǎn)染并用IL-13 (100ng/ml)處理24小時(shí)。柱狀圖顯示β 6-整合素相對于各對照的mRNA水平。星號指示相較各對照的顯著差異(*=p〈0.05，**=ρ〈0.01，林氺=ρ〈0.001)。#=ρ<0.05 相比 24 小時(shí)處理對照 siRNA 細(xì)胞。
[0018]圖4.1L-13誘導(dǎo)HT29細(xì)胞中STAT6和ERK1/2的磷酸化以及緊密連接蛋白_2的表達(dá)。細(xì)胞分別用IL-13(100ng/ml)處理30分鐘或24小時(shí)。(A)代表性Western印跡顯示磷酸化(Tyr641)和總STAT6以及磷酸化(Thr2°2/Tyr2°4)和總ERKl/2(n=3)的水平。(B)代表性Western印跡顯示β-連環(huán)蛋白和加樣對照肌動(dòng)蛋白的蛋白水平。柱狀圖顯示3個(gè)相似實(shí)驗(yàn)的光密度分析。(C)緊密連接蛋白-2和加樣對照β-肌動(dòng)蛋白的蛋白水平由代表性Western印跡顯示。3個(gè)相似實(shí)驗(yàn)的光密度分析由下述柱狀圖表示。(D)代表性Western印跡顯示E-1丐粘蛋白、閉合蛋白和加樣對照β-肌動(dòng)蛋白(η=3)的蛋白水平。星號指示相比各對照有顯著差異(**=ρ〈0.01)。
[0019]圖5.長期給予TGF β而不是IL-13會(huì)誘導(dǎo)HT29IEC球體模型中的EMT。ΗΤ29細(xì)胞作為“懸滴”接種7天。然后，細(xì)胞不予處理、用TGFP (20ng/ml)處理或用IL_13(100ng/ml)再處理7天。未處理的球體不顯示任何細(xì)胞形成改變。TGF^處理的球體在7天后幾乎完全解體，指示這些細(xì)胞中發(fā)生EMT。相反，IL-13處理不引起明顯的細(xì)胞解體，提示IL-13不誘導(dǎo)此細(xì)胞模型中的EMT。各圖像代表每種條件的3個(gè)`相似實(shí)驗(yàn)。第2和4列的圖片顯示第I和3列(放大:20倍)的放大照片(放大:40倍)。
[0020]圖6.TGFP誘導(dǎo)HT29球體中IL-13和SNAILl的mRNA水平。HT29球體用TGF^ (20ng/ml)處理多至 7 天。柱狀圖顯示(A)IL_13、(B) SNAILl、(C) β 6-整合素和(D)SLUG相對于各對照(各為η=3)的mRNA水平。星號指示相較各對照有顯著差異(*=p<0.05, **=p<0.01)。
[0021 ] 圖7.1L-13誘導(dǎo)HT29球體中SLUG和β 6_整合素的mRNA水平。HT29球體用TGF β (20ng/ml)處理多至7天。柱狀圖顯示(A)IL_13、(B) β 6-整合素和(C) SNAILl (各為η=3)的mRNA水平。⑶代表性Western印跡顯示球體中E_|丐粘蛋白、緊密連接蛋白-2和加樣對照β -肌動(dòng)蛋白的蛋白水平，所述球體不予處理或用IL-13(100ng/ml)或TGFP (20ng/ml)處理。各n=3。星號指示相較各對照有顯著差異(*=ρ〈0.05，***=ρ〈0.001)。
[0022]圖8.SLUG、β 6_整合素和ΜΜΡ-13的基礎(chǔ)水平在瘺管CLPF中提高。柱狀圖顯示分別獲自非瘺管(η=3)或瘺管型(η=3)⑶患者的CLPF中(A) SLUG和(B) p6_整合素的mRNA水平。然后，這些CLPF分別用IL-13(100ng/ml)處理30分鐘或24小時(shí)。(C)代表性Western印跡顯示CLPF中磷酸化(Tyr641)和總STAT6以及磷酸化(Thr2°2/Tyr2°4)和總ERKl/2(n=3)的水平，所述CLPF分別獲自非瘺管(n=3)或瘺管型(n=3)⑶患者。(D)代表性Western印跡顯示CLPF中全長和經(jīng)切割(活化)MMP_13以及加樣對照β -肌動(dòng)蛋白的蛋白水平，所述CLPF分別獲自非瘺管(η=3)或瘺管型(η=3)⑶患者。
[0023]發(fā)明描述
[0024]從病理生理上，以⑶為特征的穿壁性炎癥使得患者易形成瘺管，受損的傷口愈合看來參與其中。盡管沒有臨床前動(dòng)物模型可用于進(jìn)一步研究此適應(yīng)癥，瘺管型CD可能涉及慢性穿壁性炎癥環(huán)境下出現(xiàn)的失調(diào)組織重塑過程:組織修復(fù)和連續(xù)纖維化由過度胞外基質(zhì)(ECM)合成引起，所述合成歸因于成肌纖維細(xì)胞活性提高以及蛋白裂解/ECM降解酶活性降低，而另一方面，炎癥誘導(dǎo)的潰瘍形成即組織破壞由氧代謝物、活化免疫細(xì)胞、和上調(diào)的ECM降解酶如基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)和絲氨酸蛋白酶來驅(qū)動(dòng)。
[0025]根據(jù)目前對⑶(35)環(huán)境下IL-13作用的理解，IL-13可具有抗炎特性。因此，抗IL-13處理能導(dǎo)致⑶患者中的炎性活性劇增。⑶的抗IL-13療法因而通常不視作一個(gè)選擇。
[0026]近期證明上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)相關(guān)事件在⑶相關(guān)瘺管中及周圍存在(6)。EMT代表從分化的、極性上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)化成具有成肌纖維細(xì)胞表型特征的間充質(zhì)樣細(xì)胞。作為一種特定特征，這些EMT細(xì)胞下調(diào)其細(xì)胞間連接且展示上皮標(biāo)記如E-1丐粘蛋白或細(xì)胞角蛋白8和20以及間充質(zhì)標(biāo)記如波形蛋白或a-SMA(7-8)。在功能水平上，EMT對于胚胎發(fā)生、器官發(fā)育和傷口修復(fù)是必要的，但也與組織纖維化以及腫瘤生長和轉(zhuǎn)移相關(guān)聯(lián)(7-9)。
[0027]約三分之二的⑶相關(guān)瘺管是非上皮瘺管且由成肌纖維細(xì)胞樣“移行細(xì)胞”(TC)覆蓋(6)。在CD相關(guān)瘺管中或周圍，我們檢測到轉(zhuǎn)錄因子SNAILl和SLUG的核定位(指示其活化)，以及提高水平的β 6-整合素、TGFβ和TNF。相反，我們觀察到上皮標(biāo)記如細(xì)胞粘附分子E-鈣粘蛋白的蛋白表達(dá)減少(6)。TGF β是熟知的EMT關(guān)鍵調(diào)節(jié)物，誘導(dǎo)SNAILl表達(dá)且與TNF相似，能體外誘導(dǎo)EMT (10-14)。值得注意的是，β 6-整合素和SLUG與腫瘤細(xì)胞的侵襲潛能和EMT程度正相關(guān)(15-17)。
[0028]細(xì)胞因子IL-13主要由免疫細(xì)胞特別是Th2細(xì)胞分泌(18)。其能結(jié)合2種不同受體即IL-13受體a l(IL_13Ra J和IL_13Ra2，其中IL-13Ra:主要視作信號轉(zhuǎn)導(dǎo)受體且IL-13Ra2視作誘騙受體(19)。IL-13涉及以超敏免疫系統(tǒng)為特征的疾病發(fā)病機(jī)理，所述疾病如氣道高反應(yīng)性、過敏性炎癥或肥大細(xì)胞增多癥(18)。有趣的是，IL-13還涉及器官系統(tǒng)的組織纖維化發(fā)病機(jī)理，所述器官如肺或肝(20-21)。此情況下，IL-13引起對膠原合成重要的脯氨酸生成，或可直接作用于成纖維細(xì)胞，引起促纖維化效果(18)。IL-13的另一纖維化誘導(dǎo)途徑涉及TGFii的分泌和活化，表明所述生長因子可能是該細(xì)胞因子的下游調(diào)節(jié)物
(22)。相反，關(guān)于IL-13在腫瘤生長和侵襲中作用的數(shù)據(jù)相互矛盾，因?yàn)榻陲@示IL-13與卵巢和胰腺癌中的侵襲及轉(zhuǎn)移增加相關(guān)(23-26)，但也能明顯抑制腫瘤生長，例如乳腺或腎細(xì)胞癌的生長(27-28)。
[0029]在此，我們證明TGF0在獲自⑶患者的原代人結(jié)腸固有層成纖維細(xì)胞(CLPF)中誘導(dǎo)SNAILl以及IL-13mRNA表達(dá)。在覆蓋⑶相關(guān)瘺管的TC中檢測到高水平的IL-13和IL-13Ra 10 EMT的腸上皮細(xì)胞(IEC)模型中，IL-13誘導(dǎo)SLUG和β 6-整合素水平，而長期給予TGFii引起SNAILl和IL-13mRNA表達(dá)共同提高。然而，所述調(diào)節(jié)物以相反動(dòng)力學(xué)施加其影響。我們的數(shù)據(jù)顯示IL-13在CD相關(guān)瘺管中存在并誘導(dǎo)與侵襲性細(xì)胞生長關(guān)聯(lián)的基因表達(dá)，提示在所述瘺管發(fā)病機(jī)理中該細(xì)胞因子的重要作用。
[0030]我們已解釋了這些發(fā)現(xiàn)，指出IL-13參與驅(qū)動(dòng)伴隨⑶中瘺管形成的組織重塑，從而抗IL-13療法就此患者組而言會(huì)是有用的治療。
[0031]1L-13多肽具有以下序列。N末端34個(gè)氨基酸殘基(斜體)是信號肽。因此，所述成熟細(xì)胞因子具有112個(gè)氨基酸殘基?？笽L-13抗體會(huì)結(jié)合所述成熟多肽上的表位。
[0032]白介素13氨基酸序列:
[0033]1MHPLLNPLLL ALGLMALLLT TVIALTCLGG FASPGPVPPS TALRELIEEL
[0034]VNITQNQKAP
[0035]6ILCNGSMVffSI NLTAGMYCAA LESLINVSGC SAIEKTQRML SGFCPHKVSA
[0036]GQFSSLHVRD
[0037]121TKIEVAQFVK DLLLHLKKLF REGRFN(SEQ ID N0.43)
[0038]用于本發(fā)明的抗體
[0039]原則上，任何抑制或中和IL-13活性的抗IL-13抗體可用于本發(fā)明。這類抗體在本領(lǐng)域已知，參見例如 W02005/007699、US6468528、W003007685、W003034984、US20030143199、US2004028650, US20040242841, US2004023337、US20040248260, US20050054055,US20050065327, W02006/124451, W02006/003407, W02005/062967, W02006/085938,W02006/055638, W02007/036745, W02007/080174 或 W02007/085815。
[0040]在優(yōu)選實(shí)施方式中，所述抗體是01951/G12(SEQ ID N0.31和33)，進(jìn)一步描述于W02007/045477。
[0041 ] 在一個(gè)實(shí)施方式中，用于本發(fā)明的抗體在低PM范圍內(nèi)對IL-13有親和性并以約IOnM的IC50抑制IL-13誘導(dǎo)的信號傳導(dǎo)。低pM范圍指IOOpM或更小，優(yōu)選50pM或更小，優(yōu)選IOpM或更小,更優(yōu)選IpM或更小。
[0042]抑制或中和IL-13活性能通過測量對炎性介質(zhì)釋放的抑制來評價(jià)，例如使用如W02007/045477公開的人肺成纖維細(xì)胞的嗜酸細(xì)胞活化趨化因子釋放。在優(yōu)選的實(shí)施方式中，本發(fā)明的抗IL-13抗體抑制IL-13誘導(dǎo)的人肺成纖維細(xì)胞中嗜酸細(xì)胞活化趨化因子釋放的 IC5tl 低于 10nM、5nM、2.5nM、l.0nM,0.5nM、或更小。
[0043]在優(yōu)選實(shí)施方式中，用于本發(fā)明的抗體包含一種或多種下列CDR。表3a和4a所列的 CDR根據(jù)Kabat 定義確定(E.Kabat 等，1991，Sequences of Proteins of immunologicalInterest (《免疫學(xué)上感興趣的蛋白序列》)，第5版，公共衛(wèi)生署，HIH，馬里蘭州貝塞斯達(dá)):
[0044]表3
[0045]
【權(quán)利要求】
1.用于治療或預(yù)防克羅恩病患者的瘺管的抑制或中和IL-13活性的抗IL-13抗體。
2.抑制或中和IL-13活性的抗IL-13抗體在制備用于治療或預(yù)防克羅恩病患者瘺管的藥物中的應(yīng)用。
3.一種治療或預(yù)防克羅恩病患者瘺管形成的方法，所述方法包含將抑制或中和IL-13活性的抗IL-13抗體給予需要的對象。
4.如權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的抗體、應(yīng)用或方法，其特征在于，所述抗體包含一種或多種選自下表的CDR: (a) SEQ ID NO: 1、2、6或7所示的Vh CDRl, (b) SEQ ID N0:3或8所示的 Vh CDR2，(c)SEQ ID NO: 4、5、9 或 10 所示的 Vh CDR3, (d) SEQ ID NO: 11、16、17 或 18 所示的 Vl CDRl, (e)SEQ ID NO: 12 或 19 所示的 Vl CDR2, (f) SEQ ID NO: 13、14、15、20、21 或22所示的\ CDR3。
5.如權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的抗體、應(yīng)用或方法，其特征在于，所述抗體包含具有SEQ ID NO:7的重鏈可變區(qū)⑶Rl ;具有SEQ ID NO:8的重鏈可變區(qū)⑶R2 ;具有SEQ ID NO: 10的重鏈可變區(qū)CDR3 ;具有SEQ ID NO: 17的輕鏈可變區(qū)CDRl ;具有SEQ ID NO: 19的輕鏈可變區(qū)CDR2 ;和具有SEQ ID NO:21的輕鏈可變區(qū)CDR3。
6.如權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的抗體、應(yīng)用或方法，其特征在于，所述抗體包含如SEQ ID NO:31所示的重鏈可變區(qū)和如SEQ ID NO:33所示的輕鏈可變區(qū)。
7.如權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的抗體、應(yīng)用或方法，其特征在于，所述抗體包含如SEQ ID NO:41所示的重鏈和如SEQ ID NO:39所示的輕鏈。
8.如權(quán)利要求1-7中任一項(xiàng)所述的抗體、應(yīng)用或方法，其特征在于，所述抗體以1X10_9M或更小的Kd結(jié)合IL-13。
9.如權(quán)利要求1-7中任 一項(xiàng)所述的抗體、應(yīng)用或方法，其特征在于，所述抗體與藥學(xué)上可接受的載體配制。
10.如權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)所述的抗體、應(yīng)用或方法，其特征在于，所述抗體與抗炎治療劑順序或同時(shí)共給予。
11.一種含有第一組成部分和第二組成部分的試劑盒，其中所述第一組成部分是抗IL-13抗體或包含抗IL-13抗體的藥物組合物且所述第二組成部分是說明書。
12.如權(quán)利要求11所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括含有以下一種或多種的第三組成部分:注射器或其他遞送裝置、佐劑、或藥學(xué)上可接受的配制溶液。
【文檔編號】C07K16/24GK103458927SQ201280009553
【公開日】2013年12月18日 申請日期:2012年2月15日 優(yōu)先權(quán)日:2011年2月17日
【發(fā)明者】A·魯爾, G·羅格勒, M·沙爾 申請人:諾華股份有限公司, 蘇黎世大學(xué)